药性培养基、具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液及制备方法、应用

技术领域

本申请涉及护肤品技术领域，尤其涉及药性培养基、具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液及制备方法、应用。

背景技术

双向发酵技术是指用真菌为发酵菌种，利用药材或药渣作为药性基质共同构成发酵组合进行发酵的方式，利用微生物在发酵过程中自身强力的生物转化能力，并能产生丰富的代谢产物，相比于一般的中药炮制手段，具有增强药效，扩大用途等多个方面的效果提升，为现有中药研究的热点之一。双向发酵技术展示了药用真菌(含其它真菌)与中药材的有机结合，很好的拓展了野生药用植物利用的方向。

灵芝(Ganoderma lucidum)被称为“扶正固本，滋补强壮”的珍贵中药材，属多孔菌科药用真菌，又称“瑞芝“、”仙草“，一直被用作治疗肝病、高胆固醇、高血脂等疾病。经药理研究表明，灵芝中活性物质复杂，主要为多糖类、三萜类、氨基酸类、维生素类、生物碱类、核苷类、甾醇类、脂肪酸类及微量元素等，其中主要活性成分被认为是灵芝三萜与灵芝多糖。灵芝多糖具有抗氧化、延缓衰老、抑癌、增强免疫等广泛的药理作用；灵芝三萜种类与结构的多样性使其同样具有广泛的药理作用，包括抗氧化、抗肿瘤、抑菌、增强免疫、降低血糖血脂等，在医药及化妆品中应用价值极高。

五味子为多年生落叶木质藤本植物的干燥成熟果实，分为南五味子(SchisandraSphenanthera)和北五味子(Schisandra Chinensis)，且普遍认为北五味子的品质比南五味子优良。五味子的种子含有丰富的脂肪酸和挥发油，果实则富含有机酸和木脂素类化合物。五味子果实中含有17种氨基酸，其中人体所必需的氨基酸占17.7％，并且含有多种微量元素。不仅如此，它还含有丰富的抗氧化活性成分，能降低血清胆固醇含量，增加脑和肝中蛋白质含量。目前五味子的研究与应用主要在医学领域，研究其药理作用及其在中药配方中的作用，五味子也可泡茶饮用，但在精加工食品、化妆品等方向应用还有待开拓。

目前尚未发现灵芝与五味子的双向发酵物应用于化妆品行业，本发明旨在通过灵芝与五味子双向发酵技术来得到一种化妆品功效原料，开拓其在化妆品领域的应用。

发明内容

本申请的目的在于提供一种药性培养基、具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液及制备方法，旨在利用灵芝与五味子进行双向发酵得到具有酪氨酸酶抑制功效的发酵液，做为化妆品原料。

为实现以上目的，本申请提供一种药性培养基，包括：

优选地，所述碳源包括：葡萄糖。

优选地，所述氮源包括酵母粉和蛋白胨中的至少一种。

优选地，所述五味子粉末的目数为20-150目。

本申请还提供一种具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液制备方法，包括：

将灵芝菌液接种于上述的药性培养基进行发酵，得到所述具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液。

优选地，所述灵芝菌液为中华红芝菌液。

优选地，所述中华红芝菌液的制备方法包括：取中华红芝菌丝体接种于种子培养基中，在温度25-32℃、转速150-200rpm的条件下培养2-10天，得到所述中华红芝菌液。

优选地，所述灵芝菌液在所述药性培养基的接种量体积比为2％-10％。

优选地，所述发酵条件为：发酵温度为25-32℃，发酵时间为2-10天，搅拌转速为150-200rpm。

本申请还提供一种具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液，由上述的具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液制备方法制备得到。

本申请还提供上述的具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液在制备化妆品的应用。

与现有技术相比，本申请的有益效果包括：

本申请提供的药性培养基包括五味子粉末、碳源、麦芽浸粉和氮源，通过使用该药性培养基接种灵芝菌液进行双向发酵，得到的双向发酵液的酪氨酸酶抑制率高达99.5％，显著高于单一灵芝发酵液的酪氨酸酶抑制率4.9％与仅添加五味子未接种灵芝的发酵液未检出酪氨酸酶抑制率，与对照组相比，本申请的灵芝-五味子双向发酵液酪氨酸酶抑制效果尤其突出，可以有效抑制黑色素生成，是一种极具潜力的新型化妆品原料。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对本申请范围的限定。

图1为不同五味子添加量菌丝体干重结果图。

具体实施方式

如本文所用之术语：

“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。

连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。

当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。

在这些实施例中，除非另有指明，所述的份和百分比均按质量计。

“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位，1份可表示任意的单位质量，如可以表示为1g，也可表示2.689g等。假如我们说A组分的质量份为a份，B组分的质量份为b份，则表示A组分的质量和B组分的质量之比a：b。或者，表示A组分的质量为aK，B组分的质量为bK(K为任意数，表示倍数因子)。不可误解的是，与质量份数不同的是，所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。

“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)。

本申请提供一种药性培养基，用于双向发酵技术接种菌液，该药性培养基以五味子和普通培养基为原料，包括：2-18g/L五味子粉末、10-30g/L碳源、10-30g/L麦芽浸粉和1-3g/L氮源。

其中，五味子粉末是由中药材五味子粉碎得到，五味子的种子含有丰富的脂肪酸和挥发油，果实则富含有机酸和木脂素类化合物。五味子果实中含有17种氨基酸，其中人体所必需的氨基酸占17.7％，并且含有多种微量元素，不仅如此，它还含有丰富的抗氧化活性成分。五味子粉末的用量例如可以为2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18g/L，或2-18g/L之间的任一值。

优选地，五味子粉末的目数为20-150目，例如可以为20-50目，或50-100目，或100-150目，更具体的例如可以为20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140或150目。

其中，含有碳元素且能被微生物生长繁殖所利用的一类营养物质统称为碳源。常用的碳源有糖类、油脂、有机酸及有机酸酯和小分子醇。根据微生物所能产生的酶系不同，不同的微生物可利用不同的碳源。碳源对微生物生长代谢的作用主要为提供细胞的碳架，提供细胞生命活动所需的能量，提供合成产物的碳架。碳源在制作微生物培养基或细胞培养基时有重要的作用，为微生物或细胞的正常生长，分裂提供物质基础。碳源的用量例如可以为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30g/L，或10-30g/L之间的任一值。

优选地，所述碳源包括：葡萄糖。

其中，麦芽浸粉为麦芽提取物，富含多种碳水化合物及蛋白质类、肽类、氨基酸类、嘌呤和嘧啶类、维生素等物质。麦芽浸粉的用量例如可以为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30g/L，或10-30g/L之间的任一值。

其中，微生物生长和产物合成需要氮源。氮源主要用于菌体细胞物质(氨基酸、蛋白质、核酸等)和含氮代谢物的合成。培养基中使用的氮源可分为两大类:有机氮源和无机氮源。常用的无机氮源包括各种铵盐、硝酸盐和氨水等。常用的有机氮源有花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、蛋白胨、麸皮、废菌丝体等。氮源的用量例如可以为1、1.5、2.0、2.5或3g/L，或1-3g/L之间的任一值。

优选地，所述氮源包括酵母粉和蛋白胨中的至少一种。

本申请还提供一种具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液制备方法，包括：

将灵芝菌液接种于上述的药性培养基进行发酵，得到所述具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液。

优选地，所述灵芝菌液为中华红芝菌液。

其中，所述中华红芝菌液的制备方法包括：取中华红芝菌丝体接种于种子培养基中，在温度25-32℃、转速150-200rpm的条件下培养2-10天，得到所述中华红芝菌液。

其中，种子培养基包括：葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、麦芽浸粉。

在一优选实施例中，所述灵芝菌液在所述药性培养基的接种量体积比为2％-10％，例如可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％，或2％-10％之间的任一值。

优选地，所述发酵条件为：发酵温度为25-32℃，发酵时间为2-10天，搅拌转速为150-200rpm。发酵温度例如可以为(25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃或32℃；发酵时间例如可以为2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天；搅拌转速例如可以为(150、160、170、180、190或200)rpm。

本申请还提供一种具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液，由上述的具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液制备方法制备得到。

本申请还提供上述的具有酪氨酸酶抑制功效的双向发酵液在制备化妆品的应用。

本申请提供的药性培养基包括五味子粉末、碳源、麦芽浸粉和氮源，通过使用该药性培养基接种灵芝菌液进行双向发酵，得到的双向发酵液的酪氨酸酶抑制率高达99.5％，显著高于单一灵芝发酵液的酪氨酸酶抑制率4.9％与仅添加五味子未接种灵芝的发酵液未检出酪氨酸酶抑制率，与对照组相比，本申请的灵芝-五味子双向发酵液酪氨酸酶抑制效果尤其突出，可以有效抑制黑色素生成，是一种极具潜力的新型化妆品原料。

下面将结合具体实施例对本申请的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本申请，而不应视为限制本申请的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1

实施例1提供一种中华红芝-五味子双向发酵液，所述双向发酵液由中华红芝菌液与五味子药性培养基通过双向发酵制得。

其中，药性培养基包括下述原料：五味子粉末2g/L、葡萄糖20g/L、麦芽浸粉20g/L、酵母粉1g/L、蛋白胨1g/L、自然pH。

中华红芝菌液在药性培养基中的接种量体积比为5％。

实施例1的中华红芝-五味子双向发酵液的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备五味子粉末：中药粉碎机粉碎五味子，过60目筛处理；

(2)制备中华红芝菌液：取中华红芝菌丝体接种于已灭菌的种子培养基中，在30℃、180rpm的条件下培养4天，得中华红芝菌液；种子培养基包括：葡萄糖20g/L、蛋白胨1g/L、酵母粉1g/L、麦芽浸粉20g/L；

(3)配制双向发酵药性培养基：将五味子粉末及各类营养成分混合搅拌均匀，灭菌备用；

(4)双向发酵：将中华红芝菌液接种入上述双向发酵药性培养基以180rpm的搅拌速度，在发酵温度为30℃、自然pH的条件下进行发酵，发酵天数为4天，待发酵完毕，在温度121℃、压力为0.11MPa的高温高压条件下，灭菌20min，冷却，采用20℃，8500rpm离心收集上清发酵液，得到实施例1的中华红芝-五味子双向发酵液。

实施例2

与实施例1的区别在于：实施例2的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为4g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同，在此不再赘述。

实施例3

与实施例1的区别在于：实施例3的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为6g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同，在此不再赘述。

实施例4

与实施例1的区别在于：实施例4的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为8g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同，在此不再赘述。

实施例5

与实施例1的区别在于：实施例5的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为10g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同，在此不再赘述。

实施例6

与实施例1的区别在于：实施例6的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为12g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同，在此不再赘述。

实施例7

与实施例1的区别在于：实施例7的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为14g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例8

与实施例1的区别在于：实施例8的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为16g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例9

与实施例1的区别在于：实施例9的中华红芝-五味子双向发酵液使用的药性培养基中五味子粉末添加量为18g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例1

与实施例1的区别在于：对比例1的中华红芝发酵液使用的培养基中五味子粉末添加量为0g/L，其余均与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例2

与实施例1的区别在于：对比例2的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例1所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例3

与实施例2的区别在于：对比例3的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例2所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例4

与实施例3的区别在于：对比例4的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例3所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例5

与实施例4的区别在于：对比例5的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例4所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例6

与实施例5的区别在于：对比例6的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例5所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例7

与实施例6的区别在于：对比例7的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例6所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例8

与实施例7的区别在于：对比例8的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例7所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例9

与实施例8的区别在于：对比例9的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例8所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例10

与实施例9的区别在于：对比例10的发酵液中仅使用药性培养基进行发酵，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例9所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例1-9的中华红芝-五味子双向发酵液与对比例1-10的发酵液的发酵条件如表1所示。

表1不同五味子粉末添加量对中华红芝-五味子双向发酵液的影响

通过对实施例1-9、对比例1-10菌丝体生长情况观察可知，添加五味子粉末，中华红芝菌丝球呈现出更好的生长状态，且相对于不添加五味子的组别来看菌球更小更密集，当添加量超过一定量时，五味子粉末对中华红芝菌球的促进效果差异不显著。

对实施例1-9、对比例1-10菌丝体干重进行称重，得到如图1所示的统计结果，由图1可知，相较于不添加五味子粉末，添加了五味子粉末的组别菌丝体生长效果均优于未添加组，且随着五味子粉末添加量的上升，菌丝体干重呈现一个先升高后降低的趋势，说明在一定添加量范围内，五味子粉末能有效的促进中华红芝菌丝体的生长，而当添加量过高时，可能由于五味子本身的某些抑菌物质含量增多，影响中华红芝菌丝体的生长。

实施例10

实施例10提供一种中华红芝-五味子双向发酵液，所述双向发酵液由中华红芝菌液与五味子药性培养基通过双向发酵制得。

其中，药性培养基包括下述原料：五味子粉末10g/L、葡萄糖20g/L、麦芽浸粉20g/L、酵母粉1g/L、蛋白胨1g/L、自然pH。

中华红芝菌液在药性培养基中的接种量体积比为5％。

实施例10的中华红芝-五味子双向发酵液的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备五味子粉末：中药粉碎机粉碎五味子，过60目筛处理；

(2)制备中华红芝菌液：取中华红芝菌丝体接种于已灭菌的种子培养基中，在30℃、180rpm的条件下培养4天，得中华红芝菌液，种子培养基包括：葡萄糖20g/L、蛋白胨1g/L、酵母粉1g/L、麦芽浸粉20g/L；

(3)配制双向发酵药性培养基：将五味子粉末及各类营养成分混合搅拌均匀，灭菌备用；

(4)双向发酵：将中华红芝菌液接种入上述双向发酵药性培养基，以180rpm的搅拌速度，在发酵温度为30℃、自然pH的条件下进行发酵，发酵天数为2天，待发酵完毕，在温度121℃、压力为0.11MPa得高温高压条件下，灭菌20min，冷却，采用20℃，8500rpm离心收集上清发酵液，得到实施例10的中华红芝-五味子双向发酵液。

实施例11

与实施例10的区别在于：实施例11的中华红芝-五味子双向发酵液，在双向发酵过程中，发酵天数为3天，其余均与实施例10所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例12

与实施例10的区别在于：实施例12的中华红芝-五味子双向发酵液，在双向发酵过程中，发酵天数为4天，其余均与实施例10所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例13

与实施例10的区别在于：实施例13的中华红芝-五味子双向发酵液，在双向发酵过程中，发酵天数为6天，其余均与实施例10所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例14

与实施例10的区别在于：实施例14的中华红芝-五味子双向发酵液，在双向发酵过程中，发酵天数为8天，其余均与实施例10所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例15

与实施例10的区别在于：实施例15的中华红芝-五味子双向发酵液，在双向发酵过程中，发酵天数为10天，其余均与实施例10所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例11

与实施例10的区别在于：对比例11的中华红芝菌液，在发酵过程中，药性培养基中五味子粉末添加量为0g/L，其余均与实施例10所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例12

与实施例11的区别在于：对比例12的中华红芝菌液，在发酵过程中，药性培养基中五味子粉末添加量为0g/L，其余均与实施例11所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例13

与实施例12的区别在于：对比例13的中华红芝菌液，在发酵过程中，药性培养基中五味子粉末添加量为0g/L，其余均与实施例12所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例14

与实施例13的区别在于：对比例14的中华红芝菌液，在发酵过程中，药性培养基中五味子粉末添加量为0g/L，其余均与实施例13所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例15

与实施例14的区别在于：对比例15的中华红芝菌液，在发酵过程中，药性培养基中五味子粉末添加量为0g/L，其余均与实施例14所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例16

与实施例15的区别在于：对比例16的中华红芝菌液，在发酵过程中，药性培养基中五味子粉末添加量为0g/L，其余均与实施例15所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例17

与实施例10的区别在于：对比例17的发酵液，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例10所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例18

与实施例11的区别在于：对比例18的发酵液，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例11所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例19

与实施例12的区别在于：对比例19的发酵液，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例12所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例20

与实施例13的区别在于：对比例20的发酵液，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例13所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例21

与实施例14的区别在于：对比例21的发酵液，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例14所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

对比例22

与实施例15的区别在于：对比例22的发酵液，药性培养基中未接种5％中华红芝菌液，其余与实施例15所述双向发酵液的制备原料及制备工艺相同。

实施例10-15的中华红芝-五味子双向发酵液与对比例11-22的发酵液的发酵条件如表2所示。

表2不同发酵天数对中华红芝-五味子双向发酵液的影响

试验例

1、本发明的中华红芝-五味子双向发酵液对酪氨酸酶抑制率的测定

1.1试剂配制

(1)配制pH6.8的PBS缓冲溶液，称取6.8g磷酸二氢钾，称取0.94g氢氧化钠，加入蒸馏水溶解并定容于1000mL容量瓶中。

(2)L-酪氨酸溶液(现配现用)，精确称取0.0272g L-酪氨酸，加入pH6.8的PBS溶液溶解并定容于100mL容量瓶中。

(3)200U酶活力酪氨酸酶溶液(现配现用)，25KU的索莱宝酪氨酸酶，加入12.5mLpH6.8的PBS溶液充分溶解得到2KU的酪氨酸酶溶液，-20℃保存；使用时取出适量2KU酪氨酸酶溶液，使用pH6.8的PBS溶液稀释10倍使用。

1.2实验过程

(1)用移液枪分别按表3剂量准确吸取A、B、C溶液，其中，B液为各实施例和对比例的发酵液，加入至96孔板中，最后加入D溶液，充分混合均匀，37℃温育反应10min，测定反应液在475nm处的吸光度A，并计算其对酪氨酸酶的抑制率，计算公式：

酪氨酸酶抑制率＝[1-(A样-A空白)/(A0-A1)]×100％。

表3反应液组成

1.3实验结果

实施例1-9的中华红芝-五味子双向发酵液以及对比例1-10的发酵液的酪氨酸酶抑制率结果如表4所示。

表4实施例1-9及对比例1-10的发酵液的酪氨酸酶抑制率结果

注：ND表示酪氨酸酶抑制率未检出(计算后酪氨酸酶抑制率为负数百分比)。

实施例10-15的中华红芝-五味子双向发酵液以及对比例11-22的发酵液的酪氨酸酶抑制率结果如表5所示。

表5实施例10-15及对比例11-22的发酵液的酪氨酸酶抑制率结果

注：ND表示酪氨酸酶抑制率未检出(计算后酪氨酸酶抑制率为负数百分比)。

由表4和表5可知，实施例1-9及对比例1-10的发酵液为一批次的实验，实施例10-15及对比例11-22的发酵液为另一批次的实验，虽然两批次实验数据之间存在误差，但是不同实验批次的中华红芝-五味子双向发酵液均具有极强的酪氨酸酶抑制能力，并且都在五味子粉末添加量为10g/L、发酵天数为4天时，得到的发酵液的酪氨酸酶抑制能力效果最好。与对照组相比，中华红芝-五味子双向发酵液酪氨酸酶抑制效果尤其突出，理论上可以有效抑制黑色素生成，是一种极具潜力的新型化妆品原料。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本申请的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本申请进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本申请各实施例技术方案的范围。

此外，本领域的技术人员能够理解，尽管在此的一些实施例包括其它实施例中所包括的某些特征而不是其它特征，但是不同实施例的特征的组合意味着处于本申请的范围之内并且形成不同的实施例。例如，在上面的权利要求书中，所要求保护的实施例的任意之一都可以以任意的组合方式来使用。公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在加深对本申请的总体背景技术的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域技术人员所公知的现有技术。