一种碘海醇注射液及其制备方法

发明领域：

本申请属于CT成像领域和药剂领域，具体地，本申请提供了一种碘海醇注射液及其制备方法。

背景技术：

碘海醇(Iohexol)是80年代末期出现的非离子水溶性CT造影剂，相比离子型造影剂，其具有更好的水溶性、年度、渗透压、造影密度等特征，目前已经广泛用于各种造影。

但目前的碘海醇制剂有不良反应较多的缺陷，包括头痛、恶性、荨麻疹、支气管痉挛等，此外，其造影效果也有进一步提高的空间。

本领域技术人员已经尝试了包括稳定剂、螯合剂、脂质体等方法解决这些问题，其中脂质体可以通过吸附、融合、内吞等方式提供一定的被动靶向作用，是提高造影效果的有效途径，但由于脂质体结构和化合物稳定性两方面的原因，距离实用尚有差距。

发明内容

针对以上问题，申请人尝试了使用不同脂质和制备方法构建碘海醇脂质体，成功制备了稳定且能明显提供造影效果的碘海醇脂质体，为进一步实用成药提供了良好的基础。

一方面，本申请提供了一种碘海醇注射液，所述碘海醇注射液包含碘海醇脂质体，所述碘海醇脂质体包含碘海醇以及选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、DC胆固醇的脂质。。

进一步地，所述碘海醇脂质体包含质量比7:1:3的大豆卵磷脂、胆固醇、碘海醇；或者质量比7:1:3的蛋黄卵磷脂、胆固醇、碘海醇；或者质量比4:1:4:3的大豆卵磷脂、胆固醇、氢化大豆卵磷脂、碘海醇；或者质量比4:1:4:3的蛋黄卵磷脂、胆固醇、氢化大豆卵磷脂、碘海醇。

进一步地，所述碘海醇脂质体包含质量比15:2:1:5的大豆卵磷脂、胆固醇、DC胆固醇、碘海醇

进一步地，所述碘海醇脂质体使用逆向蒸发法制备。

进一步地，所述逆向蒸发法包括将处方量的脂质完全溶于乙醚作为油相；加入含处方量碘海醇的碘海醇水溶液作为水相；超声形成乳状溶液；旋蒸除去有机溶剂；超声；过滤。

进一步地，所述逆向蒸发法中油相和水相的体积比为7:1。

另一方面，本申请提供了制备前述注射液的方法，包括将处方量的脂质完全溶于乙醚作为油相；加入含处方量碘海醇的碘海醇水溶液作为水相；超声形成乳状溶液；旋蒸除去有机溶剂；超声；过滤。

进一步地，所述方法中油相和水相的体积比为7:1。

进一步地，所述方法包括将处方量的脂质完全溶于乙醚作为油相；随搅拌分多次加入含处方量碘海醇的200mg/mL的碘海醇水溶液作为水相；超声15min形成乳状溶液；40摄氏度下旋蒸除去有机溶剂；超声20s；0.22微米滤膜过滤得脂质体溶液。

另一方面，本申请提供了上述碘海醇注射液在制备CT造影试剂，特别是肝脏用CT造影试剂中的应用。

除上述成分外，本申请的碘海醇注射液中还可以包括其他药剂学可接受的辅料成分，这些成分包括但不限于螯合剂、稳定剂、缓冲剂等。

除碘海醇外，本申请的碘海醇注射液中还可以包含其他造影剂或者辅助造影剂。

附图说明

此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分，示出了符合本发明的实施例，并与说明书一起用于解释本发明的原理。

图1：处方1的脂质体与欧乃派克早光照下碘离子浓度的变化；

图2：改进的处方1的脂质体与欧乃派克早光照下碘离子浓度的变化。

具体实施方式

实施例1主要试剂、仪器和方法

碘海醇：购自湖北帝柏化工；

多种磷脂和胆固醇：基本购自艾伟拓(上海医药科技有限公司)/AVT；

其他试剂为常规国产种类；

粒度和电位分析仪器：Zetasizer Zs，操作基本按照说明进行；

紫外分光光度计：UV-2102C，检测波长245nm；

包封率检测：G50凝胶分离碘海醇脂质体；紫外分光光度计测定245nm光吸收进而对照标准曲线计算游离药物量；以包封的碘海醇量与加入碘海醇量的比率作为包封率；

16排螺旋CT：通用电气医疗，GE Revolution ACT。

逆向蒸发法制备脂质体的基本过程：

为水溶性药物碘海醇选用逆向蒸发法制备脂质体，基本过程包括：将处方量的各种磷脂、胆固醇或其他脂质完全溶于乙醚作为油相；随搅拌分多次加入含处方量碘海醇的200mg/mL的碘海醇水溶液作为水相；超声15min形成乳状溶液；40摄氏度下旋蒸除去有机溶剂；超声20s；0.22微米滤膜过滤得脂质体溶液。

实施例1碘海醇脂质体处方的确定

成膜介质方面：尝试了多种磷脂和胆固醇等中性、负电荷脂质材料(蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酸等)。碘海醇和总脂质比例方面：尝试了1：10-1:70之间的多种比例；油相和水相体积比方面：尝试了1:1-10:1的多种比例。

以包封率主要考量指标筛选出4种较为理想的碘海醇脂质体处方，其均有一定的稳定性，其均为中性脂质材料的组合，加入负电荷脂质对稳定性有利，但对包封率有明显的不利影响(仅展示部分代表性处方，大量正交实验结果未全部显示，以下脂质和药物比例均为质量比，各处方中油相和水相的体积比均取7:1)：

处方1：大豆卵磷脂：胆固醇：碘海醇＝7:1:3；

处方2：蛋黄卵磷脂：胆固醇：碘海醇＝7:1:3；

处方3：大豆卵磷脂：胆固醇：氢化大豆卵磷脂：碘海醇＝4:1:4:3；

处方4：蛋黄卵磷脂：胆固醇：氢化大豆卵磷脂：碘海醇＝4:1:4:3；

对照处方1：氢化大豆卵磷脂：胆固醇：碘海醇＝7:1:3；

对照处方2：大豆卵磷脂：胆固醇：二硬脂酰磷脂酰胆碱：碘海醇＝4:1:4:3；

对照处方3：大豆卵磷脂：胆固醇：二肉豆蔻酰磷脂酰甘油：碘海醇＝5:1:3:3

表1不同处方脂质体的基本性质

实施例2碘海醇脂质体的造影效果

向体重2kg±0.2kg的家兔中静脉推注调整浓度的，300mg碘海醇/mL的碘海醇脂质体液3mL(每个实验处方3次重复)，作为对照注射通用电气药业的欧乃派克(含碘海醇300mg/mL)3mL。根据动物实验和临床经验，选择检测推注后15min的脑和肝组织的CT值。

表2碘海醇脂质体和碘海醇注射液的效果比较

结果表明，脂质体碘海醇的显影效果明显优于现有碘海醇注射液溶液剂。

实施例3以提高稳定性为目的对碘海醇脂质体处方做进一步改进

经过验证，在4摄氏度冷藏下，脂质体可以保持稳定3个月以上。

但在碘离子浓度检测中是我们发现，在较强的光照条件下，相比欧乃派克，处方1-4的脂质体制剂中碘离子含量上升很快(以下仅展示处方1的效果，处方2-4结果类似)，即使在4摄氏度下也难以消除，7日时即达到0.143mg/mL，虽然仍未超过药典标准，但对于脂质体这样一种本身稳定性不足的剂型来说，包封中碘海醇的环合反应(机理不明，可能与脂质体导致的溶液环境或者光环境有关)加剧造成碘离子浓度上升过快显然对进一步成药不利。

具体结果见图1，图1条件为4摄氏度，1000LX光照，300mg碘海醇/mL的碘海醇脂质体液，碘离子使用硝酸银滴定法检测。

针对这一问题我们进一步尝试了更多的不同脂质，我们意外的发现加入少量弱的阳性脂质DC胆固醇(改进的处方1：大豆卵磷脂：胆固醇：DC胆固醇：碘海醇＝15:2:1:5,有机相和水相的体积比均取7:1)有效地改善了光稳定性(见图2)。同时，包封率和Zeta电位/储存稳定性基本维持了原有的水平。

表3改进的处方1的基本性质

本申请的碘海醇脂质体，特别是改进处方1的脂质体，为碘海醇脂质体成药、进一步提高造影能力提供了良好的基础。