一种美白组合物及其应用

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，尤其涉及一种美白组合物及其应用。

背景技术

皮肤中黑色素的含量和分布状况决定了人体皮肤的颜色，黑色素的产生离不开酪氨酸、酪氨酸酶、氧及黑色素体，其形成过程如下：酪氨酸被酪氨酸酶氧化成多巴，多巴被氧化成多巴醌，多巴醌进一步被氧化成二羟基吲哚和吲哚醌，进而聚合成黑色素，黑色素被转移到皮肤表皮的基底层细胞中，并随着细胞的新陈代谢被带到角质层中，最后随角质化细胞脱落。若皮肤黑色素过速增长和分布不均时，就会造成局部皮肤过黑及色素沉着，出现皮肤黑色素。

黑色素的形成过程复杂，单一美白剂较难有效地防止和改善黑色素在皮肤表皮层内过量沉积，通过不同美白剂的多种美白机制的相互作用有望实现良好的美白效果。然而，现有的美白化妆品往往存在以下不足：1)皮肤美白剂成分多，但彼此间相互作用不强，美白效果有限；2)副作用大，存在安全隐患。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明目的在于提供一种美白组合物及其应用，该组合物美白效果优异，且副作用小、安全性高。

为实现上述目的，本发明的第一方面提供一种美白组合物，包括唾液酸和传明酸。

需要说明的是，本发明所述的唾液酸不仅包括唾液酸，即N-乙酰神经氨酸，还包括药学或食品领域可接受的唾液酸金属盐，如唾液酸钠、唾液酸钾、唾液酸钙、唾液酸镁等。

本发明发现将唾液酸和传明酸复配使用，能够有效抑制黑色素在皮肤表面沉积，达到美白效果。

本发明进一步对唾液酸和传明酸的含量进行优化以增强美白效果。在一些优选的实施例中，所述唾液酸和传明酸的重量比为1： (0.5-10)。

更进一步地，所述唾液酸和传明酸的重量比为1：(1-4)。

在本发明的研究过程中，传明酸用于口服存在一定的副作用，作用于外用皮肤能够保证其安全性，但传明酸存在皮肤渗透性差的问题，严重影响其功效发挥，为此需要增强其皮肤渗透性。传明酸与唾液酸复配之后，同样需要增强体系的皮肤渗透性。为此，发明人进行研究后发现在上述包含唾液酸和传明酸的组合物中添加卵磷脂能够有效改善唾液酸和传明酸的透皮渗透性，从而更好地发挥组合物的美白和抗糖化作用。

本发明进一步对卵磷脂的含量进行优化以增强对唾液酸和传明酸的皮肤渗透性。在一些优选的实施例中，所述唾液酸和传明酸总重量与卵磷脂的重量比为0.5-4。

本发明进一步对唾液酸、传明酸和卵磷脂重量配比进行优化，发现所述唾液酸和传明酸总重量与卵磷脂的重量比为1-2.5时，不仅能够保证唾液酸和传明酸具有优异的皮肤渗透性能，同时进一步提高组合物的美白效果。

本发明的第二方面提供上述的美白组合物在制备化美容、护肤产品中的应用。

所述的美容、护肤产品可包括外用护肤品如乳液、精华液等或皮下注射护肤品如美白针，在某些具体的护肤品案例中，以传明酸计，传明酸添加量占总质量的0.5-3％；

并且由于传明酸和唾液酸皆可口服，所述美容、护肤品还包括可服用的口服液、片剂等。

本发明的第三方面提供一种美白抗糖化化妆品，包括上述的美白组合物、和/或化妆品中可接受的辅料。

进一步地，所述化妆品中可接受的辅料包括溶剂、促渗剂、乳化剂、保湿剂、增稠剂、防腐剂、油脂润肤剂、酸碱调节剂。

进一步地，所述的美白抗糖化化妆品包括乳剂、霜剂、膜剂、溶液剂或凝胶剂。

本发明具有以下有益效果：

本发明的美白组合物具有协同美白功效，且副作用小、安全性高。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。

以下实施例和对比例中，若无特殊说明，“份”均指“重量份数”。唾液酸均指N-乙酰神经氨酸。

实施例1

本实施例提供的美白组合物由唾液酸1份和传明酸1份混合制成。

实施例2

本实施例提供的美白组合物由唾液酸2份和传明酸1份混合制成。

实施例3

本实施例提供的美白组合物由唾液酸4份和传明酸1份混合制成。

实施例4

本实施例提供的美白组合物由唾液酸1份和传明酸6份混合制成。

实施例5

本实施例提供的美白组合物由唾液酸1份和传明酸4份混合制成。

实施例6

本实施例提供的美白组合物由唾液酸1份、传明酸1份和卵磷脂 4份混合制成。

实施例7

本实施例提供的美白组合物由唾液酸1份、传明酸1份和卵磷脂 0.8份混合制成。

实施例8

本实施例提供的美白组合物由唾液酸1份、传明酸1份和卵磷脂 0.5份混合制成。

实施例9

将实施例7中的卵磷脂替换成等量的丁二醇，即本实施例提供的美白组合物由唾液酸1份、传明酸1份和丁二醇0.8份混合制成。

对比例1

本对比例提供单组分传明酸。

对比例2

本对比例提供单组分唾液酸。

测试例1

酪氨酸酶的抑制活性测定

1实验原理

人的肤色与皮肤上的斑纹与皮肤细胞的沉淀色素相关。这其中黑素细胞内的黑色体合成黑素又是主因。黑素的合成主要靠酪氨酸酶催化，该酶为结合型糖蛋白，有酪氨酸羟基酶和多巴羟基酶两方面的活性，前者将酪氨酸转变成多巴，后者将多巴转变成多巴醌，故可通过测定化妆品对酶活性的影响来评价化妆品的增白功能。

2实验方法

分别配制pH＝6.8的PBS(磷酸盐缓冲液)、1.0mg/mL的L-酪氨酸溶液和70μg/mL的酪氨酸酶溶液。按照以下配比加样。

测试样1：2.0mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液+0.5mL L-酪氨酸溶液；

测试样2：2.5mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液；

测试样3：0.5mL样品溶液+1.5mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液 +0.5mL L-酪氨酸溶液，样品溶液超声分散溶解；

测试样4：0.5mL样品溶液+2.0mL PBS+0.5mL酪氨酸酶溶液。

将各测试样混匀，将每个样品的1-4种测试样混匀，置37℃水浴中30min，立即取出在475nm处测吸光度(T1、T2、T3、T4)。按下式计算酪氨酸酶抑制率：

3实验结果

将唾液酸、实施例1及实施例6的组合物配制成不同浓度，各样品组对酪氨酸酶的抑制作用见表1。

表1

结果显示，单组分唾液酸的抑制酪氨酸酶活性显著优于含有唾液酸的组合物。

测试例2

黑色素细胞实验

1实验原理

利用角质细胞与黑素细胞共培养体系对其美白功效进行评估，通过将角质细胞和黑色素细胞模拟正常皮肤中两种细胞的比例共同培养，如果待测物能够减少黑色素总量的生成，可认为其具有皮肤美白的功效。

2实验方法

2.1样品处理及细胞培养

将实施例1-9、对比例1-2的组合物分别用PBS培养液配制成 0.2mg/mL、0.5mg/mL、0.9mg/mL的样品溶液，超声分散溶解， 0.5mg/mL的曲酸作为阳性对照。

将制备好的角质细胞(Hacat细胞)及黑素细胞(B16细胞)以22:1 的比例接种于6孔细胞板内(设置空白孔，空白孔中仅加入相应浓度的Hacat细胞)。UVA辐射下，48小时后，孔内出现明显变色，关闭辐照源，再将阴性对照组每孔加入2ml新鲜的PBS培养液，样品组每孔加入1ml样品溶液(PBS培养液配制)。

每组设3个复孔，置CO

2.2黑色素含量检测：收集到的细胞中加入200μl的黑色素提取液(1mol/L，NaOH+10％DMSO)，吹打均匀，95℃水浴1小时。待冷却，适度离心下管壁液滴，吹打均匀，吸取各离心管中的150μl溶液，移入96孔板中，酶标仪检测各孔Abs405值。

计算对黑色素生成的抑制率：

式中：T为样品孔Abs；C为阴性对照孔Abs；C

在黑素检测实验中，样品组OD值小于阴性对照组，且相对于阴性对照组有显著性差异则表明样品有抑制黑素生成的效果。

3实验结果

实施例1-9、对比例1-2的组合物对黑色素合成抑制作用、以及安全性的测试结果见表2。

表2

结果显示，本发明的组合物对细胞活力无影响，同时与单组分传明酸、唾液酸相比较，本发明的组合物对细胞内黑色素的清除以及抑制方面具有更优的效果。

综合测试例1,2显示，虽然组合物对于酪氨酸酶的抑制作用效果有限，但是对于黑色素的去除和抑制方面依然出现了协同效果，说明传明酸和唾液酸通过不同机制协同发挥美白功效。

测试例3

抗糖化功效测试

1试验材料/设备

1.1试验材料

牛血清白蛋白(BSA)、果糖、十二水合磷酸氢二钠 (Na

1.2试验设备

酶标仪、分析天平、移液枪、漩涡混合器。

2试验方法

2.1试剂配制

(1)0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PBS，pH＝7.3-7.4)：称取7.16g Na

(2)牛血清白蛋白溶液(BSA溶液)：称取一定量BSA，加 PBS定容至25mL，0.45μm水系滤膜过滤；

(3)果糖溶液：称取一定量果糖，用PBS定容至25mL；

(4)BSA-果糖反应液：20mL BSA溶液与20mL果糖溶液混匀。

2.2样品处理

样品用去离子水稀释至10％，而后稀释至相应的浓度检测。

2.3对照组及制备

(1)阴性对照

选用PBS代替受试物，与反应液混合，即为阴性对照组。阴性对照组反映了体系中对非酶糖基化反应无抑制作用的情况。

(2)阳性对照

每次试验都设置一个已知可以抑制非酶糖基化反应的阳性对照组(1％Vc乙基醚)。

(3)空白对照

受试物和阳性对照自身可以发出一定荧光，所以设置空白对照组，即受试物(或阳性对照)与PBS混合，不添加反应液。

2.4样品测试

(1)按表3给出的配比配置不同试验组，于37℃恒温培养箱避光孵育；

(2)第5天测定荧光强度(激发波长370nm，发射波长为440nm)。

表3反应体系(mL)

注：表3中“+”代表“添加”，“-”代表“未添加”。

3试验结果

抑制率(IR)的计算公式为：

IR(％)＝[1-(RFU

RFU即Relative Fluorescence Unit

实施例1、实施例7、对比例1和对比例2的组合物的非酶糖基化抑制结果如表4所示。

表4

结果显示，本发明的组合物具有与单纯唾液酸相当的抗糖化能力。

测试例4

经皮渗透特性实验

向本发明组合物中加生理盐水配制成1mg/mL作为透皮母液。将一定量的化妆品涂布在洗净的猪的皮肤表面，放置在恒温室(温度： 37℃、湿度：饱和)中。经过一定时间后，清洗回收残存于皮肤表面的未渗透成分，利用HPLC测定回收液中传明酸和唾液酸的含量得到，透皮吸收量，透皮吸收量用每单位面积的值(μg/cm

1猪皮的制备

购买猪皮用生理盐水洗净后将其浸于生理盐水中保存备用，裁剪成5×5cm大小。

2试验方法

向本发明组合物中加生理盐水超声分散溶解配制成1mg/mL作为透皮母液。吸取0.8mL涂布在洗净的猪的皮肤表面，放置在恒温室 (温度：37℃、湿度：饱和)中。经过18h时间后，用3ml去离子水分两次淋洗去残存于皮肤表面的未渗透成分，提取回收渗透成分，利用 HPLC测定传明酸和唾液酸在回收液中的含量得到透皮吸收量。透皮吸收量用每单位面积的值(μg/cm2)表示。实施例1、实施例7的组合物的经皮吸收量测试结果如表5所示。

表5

结果显示，向含有唾液酸和传明酸的组合物中添加卵磷脂能够有效提高传明酸和和唾液酸的透皮渗透性。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。