用于增强皮肤的屏障功能的水飞蓟油

技术领域

本发明涉及来源于水飞蓟(Silybum marianum(L.)Gaertn.)的瘦果(d’akènes)的油的用途，和/或包含这种油的化妆品组合物的用途，以及一种用于防止表皮的屏障功能降低和/或增强表皮的屏障功能的美容方法。

背景技术

学名水飞蓟是指属于菊科(Asteraceae)的一种植物，其为一年生或二年生，茎粗壮，高度可达到一米以上。它的大而有光泽的互生叶没有托叶，带有白色大理石纹，边缘有坚硬的尖刺。花聚集在顶生的头上，通常是单生的。它们被末端非常锋利的大刺苞片包围。花呈管状，有五个裂片，颜色为紫红色。果实为有光泽的瘦果，呈黑色或带有黄色大理石纹，上面覆盖着具刚毛的冠毛，基部呈齿环状。这种植物的主要白话名称为奶蓟(Chardon-Marie)。这种植物特别喜欢干燥和阳光充足的地方，通常位于酸性、干燥和多石的土壤中。它的地理分布集中在地中海周围，但在欧洲、西亚以及北美和澳大利亚甚至新西兰也有分布。它生长在花园中，但在未开垦的田地、牧场、道路边缘和瓦砾中最为常见。

水飞蓟的瘦果(在文献中经常被错误地称为种子)及其制剂通常口服使用，用于对症治疗由肝源性引起的功能性消化障碍。

水飞蓟的瘦果的主要活性成分为水飞蓟素，其为数种黄酮木脂素的混合物。水飞蓟素主要含有(至少以重量计95％)以下四种黄酮木脂素的混合物：水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟亭和水飞蓟宁(Kuki等人,Chromatographia 2012,75,175-180)。瘦果含有高达以重量计3％的水飞蓟素。它们还包含油(以重量计15至30％)、粘液和蛋白质。

水飞蓟素已成为众多(体外、体内和临床)研究的主题，已证明其抗氧化、保肝、消化甚至抗炎性质。目前，以水飞蓟素滴定的水飞蓟的瘦果的提取物存在于数种旨在治疗各种肝胆疾病的药物制剂中，如

在来源于肝癌的HepG2细胞模型中研究了水飞蓟宾的抗增殖作用。水飞蓟宾已被证明诱导某些神经酰胺的合成的显著增加，所述神经酰胺可以在不同的细胞凋亡过程中充当第二信使(Zappavigna等人,Int.J.Mol.Sciences 2019,20,2190)。在同一细胞模型中，也证实了水飞蓟宾A和B以及合成的衍生物3-O-没食子酰水飞蓟宾A和3-O-没食子酰水飞蓟宾B导致的神经酰胺合成的增加(Boojar等人,Iranian J.Pharmaceutical Res.2016,15(3),421-433)。

水飞蓟的瘦果通常含有15至30％的油。从瘦果中去除油(脱油)是提取水飞蓟素的初步步骤。水飞蓟油本身就是水飞蓟素生产的副产品(Zhu等人,Biochemidice andPharmacotherapy 2018,100,191-197)。因此，水飞蓟油不含水飞蓟素，或含有检测不到的微量水飞蓟素。对奶蓟油的多酚级分的分析证实了这一点，该分析确实没有显示任何水飞蓟素成分的存在(Meddeb等人,Antioxidants,2018,7,95；Zarrouk等人,CurrentPharmaceutical Design,2019,25,1791-1805)。

未精制的水飞蓟油主要由不饱和脂肪酸的甘油三酯构成，其中大部分为亚油酸(30至60％)和油酸(15至30％)。其不饱和脂肪酸含量高，可以用于抗胆固醇饮食，用于预防心血管疾病(El-Mallah等人,Grasas y Aceites 2003,54(4),397-402)。油还含有饱和脂肪酸：棕榈酸(5至15％)、硬脂酸(3至8％)、花生酸(1至4％)和山萮酸(1至4％)。通过冷压榨获得的粗油还含有植物甾醇(特别是β-谷甾醇)和生育酚(特别是α-生育酚和γ-生育酚)(Dabbour等人,Pakistan Journal of Nutrition 2014,13(2),67-78)。

水飞蓟油主要用于烹饪领域。

此外，在大鼠或小鼠体内进行了口服施用的水飞蓟油的抗氧化和保肝性质研究(Hermenean等人,Open Life Sci.2015,10-225-236；Zhu等人,Pharmacogn Mag2014,10(Sup 1),S92-S99)。

数个试管内或体外研究强调了通过冷压榨或溶剂萃取获得的水飞蓟油的抗氧化和细胞保护性质(Dabbour等人,2014；Harrabi等人,Lipids in Health and Disease2018,17,82；Meddeb等人,Antioxidants 2018 7,95)。

一项临床研究强调了通过重复局部应用2种含有1％水飞蓟油的化妆品制剂对老化皮肤的抗老化作用。每天应用两次，连续应用2周后，观察到面部皱纹、真皮密度、弹性和肤色的改善。然而，这些制剂含有数种活性成分，如棕榈酰肽、维生素E、荷荷巴油、鳄梨油、鞘糖脂和透明质酸钠(Hahn等人,Experimental and Therapeutic Medicine 2016,12,1171-1176)。

还考虑将水飞蓟油用作生物燃料(Takase等人,Ultrasonics Sonochemistry2014,21,1752-1762)。

皮肤由不同的组织构成，形成了身体对抗外部环境的重要屏障。该屏障保护身体免受外部侵害，特别是化学、机械或感染性侵害，因此在其水平上会发生一定数量的针对环境因素和/或异型生物质的防御反应。

皮肤由三个主要部分构成，即，浅表的表皮、内部的真皮和更深层的皮下组织，它们相互作用。

人的表皮由四到五个不同的层(取决于解剖部位)和四种类型的细胞构成，所述细胞为角质形成细胞(其为非常主要的)、黑素细胞、朗格汉斯细胞和默克尔细胞。这些细胞类型中的每一种都通过其自身的功能对皮肤在生物体中发挥的重要作用做出贡献，特别是保护生物体免受外部侵害的作用。这种性质称为屏障功能。

表皮细胞在其最深层(基底层)增殖，并在向上层迁移期间分化，依次形成由位于生发层上的数层多面体细胞构成的多刺层、由含有不同细胞质内含物的扁平细胞构成的颗粒层、透明角质颗粒和最后的角质层(或角化层，为表皮的最表层)。角质层由20至30层处于分化末期的角质形成细胞构成，所述细胞称为角质层细胞。角质层细胞为角质层的构成要素，为死的扁平细胞，含有水和角蛋白。角化层的结构通常被比作一堵砖墙。砖块代表角质层细胞。角质层细胞被由脂质构成的亲脂性“胶结物”包围。屏障功能主要由角化层的结构和组成来保证。在角质形成细胞的分化期间，磷脂的作用是形成表皮活层细胞膜的流体结构，所述磷脂逐渐被主要由脂肪酸、胆固醇和鞘脂(神经酰胺)构成的混合物所替代。这些脂质组织成层状双层，形成角化层的细胞内胶结物。角质层细胞间脂质的超分子结构在建立角化层的物理化学性质方面发挥关键作用，因此在维持生理水分梯度方面也发挥关键作用。这些脂质双层的结构具有特殊的组装性质，可以是六角形(胶凝状态)或正交形(晶胞为矩形平行六面体的晶体系统)，后者占大多数(Bouwstra等人,Int.J.Cosmet.Sci.,2008,30,388)。正交状态代表最致密的构象，这两种状态之间的平衡对于最佳的屏障性质是必要的。三个角化层脂质家族的比例的破坏导致正交状态和六角状态的改变，从而导致屏障功能的改变。层状双层中的这种结构交替出现亲水区和亲油区，其调节屏障功能、生物体与外部环境之间的水交换以及角化层的水合。

长期以来，后者一直被认为是没有实际功能的简单死细胞层。事实上，它具有代谢活性，在很大程度上提供了表皮的屏障功能。

表皮没有任何血管灌溉，仅通过真皮的扩散来供应。

真皮为表皮提供坚实的支撑。真皮是由不同细胞类型构成的结缔组织，包括成纤维细胞、淋巴细胞和巨噬细胞。与这些细胞相关的是胶原纤维和弹性蛋白，它们包含在称为“基质”的凝胶中。胶原蛋白和弹性蛋白由成纤维细胞合成。还有白细胞、肥大细胞或组织巨噬细胞。最后，真皮被血管和神经纤维穿过，特别是游离或连接到感受器的感觉纤维。

真皮-表皮连接确保了表皮和真皮之间的结合。皮肤屏障和粘膜的平衡取决于复杂的生物学机制，涉及表皮和真皮内的众多生长因子、激素、酶和介质。

最后，皮下组织是皮肤中最深最厚的一层。它是真皮连续性的一部分，两个组织之间没有任何真正的分离。皮下组织形成一个垫子，作为对下面结构的机械保护。该脂肪层还使身体免受热变化的影响。如果真皮可以被认为是水库，则皮下组织的脂肪细胞中储存的脂肪构成了能量库。

很明显，皮肤屏障和粘膜的质量取决于复杂的内源性生物学机制，涉及许多生长和分化因子、粘附分子、激素和脂质代谢酶。

因此，皮肤屏障的改变和/或皮肤表面连续性的破坏可能发生在存在外部侵害的情况下，如刺激剂(清洁剂、酸、碱、氧化剂、还原剂、浓缩溶剂、气体或有毒烟雾)、机械应力(摩擦、冲击、磨损、表面撕裂、灰尘喷射、颗粒、剃须或脱毛)、热或气候失衡(寒冷、干燥、辐射)，或异生物质(不良微生物、过敏原)或内部侵害，如心理压力。这些侵害导致脂质缺乏，特别是神经酰胺。脂质比例的这些变化将改变脂质胶结物的组织，并导致屏障功能的改变，增加经表皮水分流失和天然水合因子的改变。这些变化会导致皮肤脱水和皮肤干燥，还可能加重特应性皮炎、敏感或反应性皮肤感觉的情况。

皮肤屏障的这种改变可以特别地导致皮肤不适、感觉现象，特别是不愉快的现象。这种皮肤不适的感觉可以特别地表现为刺痛、紧绷、发热、瘙痒。这些皮肤不适的感觉在身体最暴露的部位更常见，即，手、脚、面部和头皮。它们可以特别地发生在接受某些日常或经常更新的卫生姿势的区域，如剃须、脱毛、用洗漱用品或家用产品清洁、绷带或贴剂的粘合剂的应用、假肢的固定或在运动的情况下、专业姿势或仅与生活方式有关，和使用衣服、工具或设备产生局部摩擦。它们也可以被心理压力放大。

皮肤屏障的改变也会促进微龟裂或微裂纹的出现，特别是在手、脚和嘴唇处。

这些皮肤不适感涉及所有人，特别是那些具有敏感性甚至不耐受性皮肤的人。敏感性皮肤的概念反映了每个人皮肤的敏感程度。虽然在任何年龄段都可能出现敏感性皮肤，但其在婴儿和老年人中极为常见。婴儿的皮肤厚度大约是成人皮肤厚度的五分之一。因此，它对化学、物理和微生物侵害以及紫外线极为敏感。另一方面，随着年龄的增长和代谢过程的减慢，成人皮肤的屏障功能会逐渐减弱。皮肤的老化逐渐导致脂质不足，这使得皮肤更容易受到碱性物质如肥皂的刺激。

当皮肤的敏感阈值非常低，也就是说对最轻微的外界侵害反应过度时，就将其称为不耐受性皮肤，或甚至是反应性不耐受性皮肤。不耐受性皮肤更容易受到外部侵害，其特征在于日常不适和强烈的过敏性。某些或多或少有标记的体征能够识别它们。面部的不耐受性皮肤具有例如发红和刺痛，它会紧绷、发热或发痒，还可以引起灼烧感。不耐受性皮肤通常具有过敏背景，因此对化妆品护理组分特别敏感。

事实上，敏感性皮肤为容易出现刺痛、发热、蚁痛和瘙痒的皮肤，有时还伴有发红。这些不适的感觉是对刺激的过度反应，所述刺激不会对称为正常皮肤的皮肤造成刺激。皮肤的这种超敏感性是由于其耐受阈值降低所致。皮肤越敏感，其耐受阈值越低，当耐受阈值处于最低值时，将被称为不耐受性皮肤。这种超敏感性可以用不同的因素来解释，但最重要的是表皮的屏障功能的改变。然后，这种现象促进皮肤脱水，尤其是潜在刺激剂的渗透。

皮肤被保护膜覆盖，称为水脂膜。它是最外层的屏障，也是最脆弱的，也是最容易被扰乱的。它主要包含皮脂腺排出的脂肪物质和角质细胞角质化期间细胞降解产生的脂质(角鲨烯、蜡质、甘油三酯、游离脂肪酸、胆固醇酯)，以及亲水性化合物，如来自汗液的水、甘油、尿素、天然皮肤保湿因子、盐类、皮肤菌群的代谢物。这种表面膜非常暴露，对环境压力、卫生习惯、皮肤状况以及紫外线辐射暴露非常敏感。微生物群可以显著改变皮脂的组成，降解甘油三酯，并改变游离脂肪酸的比例，特别是在压力或疾病期间。因此，保持甚至改善这种皮肤屏障功能是非常重要的，尤其是对于最敏感的皮肤。

仍然需要防止皮肤的屏障功能降低和/或增强皮肤的屏障功能的药剂。

发明内容

令人惊讶且出乎意料地，发明人已经证明，来源于水飞蓟的瘦果的油诱导脂质的皮肤合成，特别是神经酰胺的内源性合成，所述合成除了对皮肤有滋养和/或保湿作用外，还能够增强表皮屏障功能或防止这种表皮屏障功能的降低，还增强皮肤对水分流失和/或外部侵害的保护。

根据第一方面，本发明涉及来源于水飞蓟的瘦果的油用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的美容用途。

本发明还涉及一种来源于水飞蓟的瘦果的油，其用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的用途。

本发明还涉及来源于水飞蓟的瘦果的油在制备用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的化妆品组合物中的用途。

根据第二方面，本发明涉及包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的美容用途。

本发明还涉及一种包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物，其用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的用途。

根据第三方面，本发明涉及一种用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的美容方法，其包括向有需要的人施用有效量的来源于水飞蓟的瘦果的油或包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物。

定义

在本发明中，植物水飞蓟(Silybum marianum(L.)Gaertn.)可以简称为术语水飞蓟(Silybum marianum)。

在本发明的含义内，“与来源于水飞蓟的瘦果的油不混溶的有机溶剂”是指不能与来源于水飞蓟的瘦果的油混合或仅部分地混合的有机溶剂，由此，所述有机溶剂和来源于水飞蓟的瘦果的油的混合物会产生异质混合物，其中可以观察到至少两个不同的相。

在本发明的含义内，“非极性溶剂”应理解为选自例如庚烷、己烷、柠檬烯、卤代烃(例如C

在本发明的含义内，“精制”是指水飞蓟油的脱臭和/或漂白和/或脱溶剂的步骤。事实上，粗油含有一定数量的成分，这些成分会带来味道和难闻的气味，并且它们的保存性差，因此可能需要将其去除。

在本发明的含义内，“脱臭”是指旨在去除植物油的气味或味道的处理。可以通过在高温(例如150至300℃，特别是150至250℃或150至200℃)、在真空下加热油并注入蒸汽水来进行脱臭。

在本发明的含义内，“漂白”是指旨在减少植物油的颜色的处理。可以根据加德纳(Gardner)测量进行颜色测量。加德纳色标是澄清透明液体的颜色的视觉比较标尺。可以通过将油与漂白土(其会吸收带来颜色的色素(例如胡萝卜素、叶绿素等))接触并加热(例如在60至100℃，可以在真空下进行)来进行漂白。有利地，随后的过滤步骤将能够分离油和用过的漂白土。

在本发明的含义内，“脱溶剂”是指能够去除油中存在的溶剂的处理。可以通过在真空下加热混合物的蒸馏和/或通过在真空下的蒸汽蒸馏来进行脱溶剂。

在本发明的含义内，“C

在本发明的含义内，“环境温度”是指15至40℃，优选20至30℃，特别是约25℃的温度。

“约”在本说明书中是指所涉及的值可能比指示值低或高10％，特别是5％，特别是2％，更特别是1％。

在本发明的含义内，“局部应用”是指对皮肤(包括头皮)和粘膜的应用。

在本发明的含义内，“表皮屏障”是指表皮的细胞结构，特别是由角质层细胞和细胞间脂质胶结物形成的组织屏障。

在本发明的含义内，“表皮屏障功能”是指表皮的保护功能，特别是针对外部侵害的保护功能，以及水和离子的经表皮流失的调节。

在本发明的含义内，“化妆品上可接受的”是指可用于制备化妆品组合物的物质，其通常是安全的、无毒的并且在生物学上或其他方面都不是不期望的，并且对于美容用途是可接受的，特别是通过局部应用于皮肤。

具体实施方式

根据第一方面，本发明涉及来源于水飞蓟的瘦果的油用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的美容用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及来源于水飞蓟的瘦果的油用于加强皮肤对水分流失和/或外部侵害的保护的美容用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油用于滋养和/或滋润皮肤(包括头皮)和/或粘膜的美容用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油用于通过增强或恢复屏障功能来改善皮肤修复的美容用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油用于防止和/或减少皮肤的刺痛、瘙痒、紧绷、发红、刺激的美容用途。

来源于水飞蓟的瘦果的油将更特别地局部使用，特别是通过应用于皮肤而局部使用。

在本发明的上下文中，来源于水飞蓟的瘦果的油是从果实(瘦果)中获得的，所述瘦果可以是完整的或碎片。

在本发明的上下文中，可以通过压榨瘦果或通过用非极性溶剂提取瘦果来获得来源于水飞蓟的瘦果的油。

在本发明的一个实施方案中，可以通过压榨水飞蓟的瘦果，特别是通过冷压，也就是说在环境温度不加热，然后进行过滤步骤来获得来源于水飞蓟的瘦果的油。

在本发明的一个特别的实施方案中，通过压榨水飞蓟的瘦果，随后进行过滤步骤然后进行精制步骤来获得来源于水飞蓟的瘦果的油。

在本发明的一个特别的实施方案中，通过压榨水飞蓟的瘦果，然后进行过滤步骤，然后进行用极性至中等极性的提取溶剂的提取步骤以从油中去除极性化合物，然后任选地进行脱溶剂步骤来获得来源于水飞蓟的瘦果的油，所述极性至中等极性的提取溶剂包含向水性水溶液、亚临界水或与任选地与水混合的来源于水飞蓟的瘦果的油不混溶的有机溶剂，特别地由向水性水溶液、亚临界水或与任选地与水混合的来源于水飞蓟的瘦果的油不混溶的有机溶剂组成。

有利地，极性至中等极性的提取溶剂包含与任选地与水混合的来源于水飞蓟的瘦果的油不混溶的有机溶剂，特别地由与任选地与水混合的来源于水飞蓟的瘦果的油不混溶的有机溶剂组成。

与来源于水飞蓟的瘦果的油不混溶的有机溶剂可以特别地为C

极性至中等极性的提取溶剂可以特别地为任选地与水混合的C

与来源于水飞蓟的瘦果的油不混溶的有机溶剂(特别是C

极性至中等极性的提取溶剂可以特别地选自甲醇、甲醇/水混合物、乙醇、乙醇/水混合物、异丙醇和异丙醇/水混合物。

根据一个优选的实施方案，极性至中等极性的提取溶剂将为甲醇、体积比为约90/10的乙醇/水混合物或体积比为约90/10的异丙醇/水混合物，优选体积比为约90/10的异丙醇/水混合物。

将特别地通过将来源于水飞蓟的瘦果的油与极性至中等极性的提取溶剂混合1至12小时，特别是在15至25℃的温度，特别是在约20℃，来进行使用极性至中等极性的提取溶剂提取来源于水飞蓟的瘦果的油的步骤。用于进行该提取的极性至中等极性的提取溶剂的量将有利地为每1g来源于水飞蓟的瘦果的油0.5至3g，特别是1至3g。

然后，将在该提取结束时获得提取相和脂质相(没有极性化合物的残余油，也称为耗尽的残余油)。脂质相将有利地与提取相分离并回收。然后，可以将其脱溶剂，特别是在真空下脱溶剂，以去除残留的极性至中等极性的提取溶剂，并获得不含极性成分(游离脂肪酸、植物甾醇、生育酚)的来源于水飞蓟的瘦果的油。

在本发明的一个特别的实施方案中，通过压榨水飞蓟的瘦果，然后如上所述使用极性至中等极性的提取溶剂提取以从油中除去极性化合物，再如前所述脱溶剂，随后除臭，来获得来源于水飞蓟的瘦果的油。

在本发明的一个特别的实施方案中，通过压榨水飞蓟的瘦果，然后如上所述使用极性至中等极性的提取溶剂提取以从油中除去极性化合物，再如前所述脱溶剂，随后漂白，来获得来源于水飞蓟的瘦果的油。

在本发明的一个特别的实施方案中，通过压榨水飞蓟的瘦果，然后如上所述使用极性至中等极性的提取溶剂提取以从油中除去极性化合物，再如前所述脱溶剂，随后除臭和/或漂白，来获得来源于水飞蓟的瘦果的油。

根据第二方面，本发明涉及包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物用于加强皮肤对水分流失和/或外部侵害的保护的用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物用于滋养和/或滋润皮肤(包括头皮)和/或粘膜的用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物用于通过增强或恢复屏障功能来改善皮肤修复的用途。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物用于防止和/或减少皮肤的刺痛、瘙痒、紧绷、发红、刺激的用途。

有利地，如前所述制备包含在化妆品组合物中的来源于水飞蓟的瘦果的油。

在一个特别的实施方案中，根据本发明的化妆品组合物包含相对于组合物的总重量以重量计0.01至40％，相对于组合物的总重量特别地以重量计0.1至20％，特别地以重量计0.1至10％，更特别地以重量计0.1至5％，甚至更特别地以重量计0.1至2％，甚至更特别地以重量计0.5至1％的来源于水飞蓟的瘦果的油。

优选地，来源于水飞蓟的瘦果的油以相对于组合物的总重量以重量计约1％的含量存在于化妆品组合物中。

根据一个特别的实施方案，根据本发明的化妆品组合物不包含根据INCI命名法命名的以下成分：扁浒苔提取物(Enteromorpha compressa extract)和/或圣罗勒叶提取物(Ocimum sanctum leaf extract)。因此，根据一个特别的实施方案，根据本发明的化妆品组合物不包含绿藻提取物和/或圣罗勒(basilic sacré)提取物。

根据一个特别的实施方案，根据本发明的化妆品组合物不包含罗汉果(Momordicagrosvenori)果实提取物和/或柳珊瑚(Pseudopterogorgia elisabethae)提取物。

根据一个特别的实施方案，根据本发明的化妆品组合物不包含

根据一个特别的实施方案，根据本发明的化妆品组合物不包含绿藻提取物、圣罗勒提取物、罗汉果果实提取物、柳珊瑚提取物、车前叶蓝蓟种子油、向日葵油的不皂化级分和/或倒地铃的提取物(特别是花/叶/茎的提取物)。

根据本发明的另一个实施方案，根据本发明的化妆品组合物包含来源于水飞蓟的瘦果的油作为唯一的活性成分，所述油用于滋养和/或滋润皮肤，更特别地用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能。

根据本发明的化妆品组合物有利地旨在用于局部应用，特别是通过应用到皮肤。

因此，根据本发明的化妆品组合物可以是通常已知用于局部施用的形式，也就是说特别是洗剂、乳液、乳剂、精华素、香膏、面膜、霜剂、分散剂、凝胶、泡沫或喷雾。

有利地，其将为香膏和/或乳液。

因此，本发明涉及根据本发明的一个实施方案的化妆品组合物，其特征在于其为适合局部应用的形式。

除了来源于水飞蓟的瘦果的油和生理学上可接受的介质之外，根据本发明的化妆品组合物还可以包含表面活性剂、络合剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、增稠剂、胶凝剂、保湿剂、润肤剂、微量元素、精油、香水、染料、消光剂、化学或矿物过滤剂、保湿剂、温泉水等。

根据第三方面，本发明涉及一种用于防止表皮屏障功能的降低和/或增强表皮屏障功能的美容方法，包括向有需要的人施用，特别是局部施用，例如通过应用于皮肤施用有效量的来源于水飞蓟的瘦果的油或包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及一种用于加强皮肤对水分流失和/或外部侵害的保护的美容方法，包括向有需要的人施用，特别是局部施用，例如通过应用于皮肤施用有效量的来源于水飞蓟的瘦果的油或包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及一种用于滋养和/或滋润皮肤(包括头皮)和/或粘膜的美容方法，包括向有需要的人施用，特别是局部施用，例如通过应用于皮肤施用有效量的来源于水飞蓟的瘦果的油或包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及一种用于通过增强或恢复屏障功能来改善皮肤修复的美容方法，包括向有需要的人施用，特别是通过应用于皮肤局部施用有效量的来源于水飞蓟的瘦果的油或包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物。

根据一个特别的实施方案，本发明涉及一种用于防止和/或减少皮肤的刺痛、瘙痒、紧绷、发红、刺激的美容方法，包括向有需要的人施用，特别是通过应用于皮肤局部施用有效量的来源于水飞蓟的瘦果的油或包含至少一种来源于水飞蓟的瘦果的油和至少一种化妆品上可接受的赋形剂的化妆品组合物。

有利地，如上所述制备来源于水飞蓟的瘦果的油，化妆品组合物如上所述。

以下实施例阐明本发明而不限制其范围。

实施例

实施例1：通过冷压榨获得的来源于水飞蓟的瘦果的油的制备

将水飞蓟的瘦果冷压榨，然后在压滤机上过滤，获得来源于水飞蓟的瘦果的第一压榨粗油。

实施例2：不含极性化合物的来源于水飞蓟的瘦果的精制油的制备

此方法分8个步骤完成：

-将水飞蓟的瘦果冷压榨，然后在压滤机上过滤，获得来源于水飞蓟的瘦果的第一压榨粗油

-在20℃用异丙醇/水混合物(90/10v/v)以1重量的异丙醇/水混合物对应1重量的油提取来源于水飞蓟的瘦果的第一压榨粗油持续10小时

-脂质相(耗尽的残余油)的回收

-耗尽的残余油的脱溶剂：通过真空蒸发(蒸馏)去除溶剂，然后在以下条件下蒸汽汽提：

步骤1

蒸馏温度：90℃

蒸馏持续时间：2小时

真空：2mbar渐进式

步骤2

蒸汽：约7kg/h

汽提温度：90℃

汽提持续时间：1小时

真空：2-20mbar

-将耗尽的且脱溶剂的残余油在以下条件下漂白：

漂白天然土：

漂白温度：80℃

漂白持续时间：45分钟

真空：10-20mbar

-在压滤机上过滤

-在以下条件下脱臭：

脱臭温度：180℃

脱臭持续时间：2小时

汽提：蒸汽(约7kg/h)

真空：2-20mbar

-在筒式过滤器上过滤。

实施例3：来源于水飞蓟的瘦果的油对重建表皮模型中总脂质和神经酰胺的合成

表皮的主要功能是通过形成重要的保护屏障来保护身体免受外部侵害和脱水风险。角质层是皮肤的最外层，主要负责屏障功能。该角质层由嵌入脂质基质中的角质层细胞构成，其非常具体的组织取决于脂质成分。后者由游离脂肪酸、胆固醇和神经酰胺构成。脂质形成多层相互叠加。体外实验已经证明，角质层的特定脂质成分单独实现脂质在层状双层中的这种特殊排列(De Jager等人,J.Lipid res.2005,46,2649-2656)。这些脂质在皮肤的屏障功能中发挥关键作用。

神经酰胺构成了一个具有重要生物学意义的脂质家族，因为它们能够使角质层凝聚，从而形成皮肤屏障。在生物化学上，它们是由鞘氨醇与脂肪酸的酰胺化产生的鞘脂。它们可以是游离的，或与角质层中的蛋白质共价结合。目前，已鉴定出14类神经酰胺，并根据其化学结构命名：神经酰胺可以具有鞘氨醇(S)、二氢鞘氨醇(dS)、植物鞘氨醇(P)或6-羟基鞘氨醇(H)基础，其上结合有具有可变长度的烷基链的ω-羟基(EO或O)、α-羟基(A)或非羟基(N)脂肪酸。EO神经酰胺具有独特的结构，因为它们具有一个非常长的ω-羟基-酸链(超过34个碳原子与亚油酸键合)，并且在角质层的层状双层的组织中以及因此在屏障功能中具有优势作用。

神经酰胺的量化表明了屏障功能的完整性与否，并提供皮肤-化妆品产品的增强。

多种神经酰胺进入角质层的脂质组成。它们单独代表约一半的角质层细胞间脂质。神经酰胺将在层状双层的组织中发挥关键作用，特别是超长链酯化神经酰胺，如EOS、EOP、EOH神经酰胺(Bouwstra等人,Biochim Biophys Acta 1996,1300(3),177-186)。由于非常长的碳链，酯化神经酰胺的重要性已在层状重复距离和链的排列中得到证明(Kessner等人,Chem Phys Lipids,2010,163(1),42-50)。此外，神经酰胺携带的极性头，特别是CEREOS和CER EOP，对功能性脂质基质所需的这些结构性质产生相当大的影响。

非酯化神经酰胺占大多数，其对屏障功能也很重要，对皮肤的水合和营养也很重要。研究表明，在冬季，皮肤干燥的状态与总神经酰胺水平的降低相关，更特别地与NP和NH神经酰胺水平的降低相关(Ishikawa等人,J.Cosmet Dermatol2013,12(1),3-11)。在特应性皮炎患者中，也有报道称总神经酰胺水平显著降低，更特别是NP、NS和NH神经酰胺水平显著降低，并且与经表皮水分流失测量呈负相关，表明了屏障功能的改变(Ishikawa等人,JInvest Dermatol,2010,130(10),2511-2514)。

超长链酯化神经酰胺的减少以及游离脂肪酸和神经酰胺链长的缩短通常导致脂质组织向密度较低的状态改变(Kessner等人,Skin Pharmacol Physiol 2008,21(2),58-74)。这在角质层细胞之间的脂质排列中产生间隙，导致皮肤屏障功能降低和皮肤通透性增加。因此，这些特定脂质的增加诱导皮肤屏障功能的改善。

本研究的目的在于评估来源于水飞蓟的瘦果的油对皮肤脂质合成的影响，特别是从脂质的角度对角质层主要成分神经酰胺的合成的影响，和评价处理的营养作用和屏障功能的改善。通过高效薄层色谱法(或“HPTLC”)分析角质层的神经酰胺、游离脂肪酸和胆固醇。这种快速技术广泛用于分离复杂的混合物，如脂质(Fuchs等人,J.Chromatography A2011,1218(19),2754-2774)，使用的方法已成为科学出版物的主题(Jamin等人,Eur JMass Spectrum,2019,25(3),278-290)。在3批次的重建表皮中评价油作用，每个实验条件和每批次n＝3(一式三份)。在用来源于水飞蓟的瘦果的油处理后，通过HPTLC量化角质层的脂质，以评价该处理对皮肤脂质合成的影响。

方法

在本研究中使用的模型是根据Frankart等人描述的方法(Frankart等人,Exp.Dermatol.2012,21(11),871-875)从整容手术的皮肤切除物得到的重建表皮模型。

将细胞(角质形成细胞)从皮肤切除物中分离出来，然后置于培养物中，然后接种到浸入培养介质中的培养插入物上，然后将培养插入物放置在培养箱(37℃，具有5％ CO

经过14天形成0.6cm

每个条件使用三个重建表皮(对照、通过冷压榨获得的来源于水飞蓟的瘦果的油和阳性对照)。

对照：磷酸盐缓冲液pH 7.4(PBS)中的0.01％

来源于水飞蓟的瘦果的油：

-第一系列实验：根据实施例1获得的油，在磷酸盐缓冲液pH 7.4(PBS)中的0.01％

-第二系列实验：根据实施例2获得的油，在磷酸盐缓冲液pH 7.4(PBS)中的0.01％

阳性对照：

在方案的第9天，首次将测试化合物应用于重建表皮(2mg的

在第10天进行第二次应用(相同条件)，孵育48小时。

在第13天进行第三次应用(相同条件)，孵育24小时。

最后，在第14天(完全重建上皮细胞)进行第四次应用(相同条件)，孵育24小时。

在第15天，从培养插入物中取出重建表皮，使用胰蛋白酶从表皮的其余部分分离角质层。然后，使用有机溶剂(氯仿和甲醇的混合物)提取角质层，以收集构成它的脂质。然后，将这些脂质在液氮下浓缩，再进行HPLC分析。

通过HPTLC分析角质层的神经酰胺、游离脂肪酸和胆固醇。分析条件详述如下，特别是在表1中。

板：

沉积：6mm宽，在氮气流下干燥

展开：梯度：参见表1

后衍生化(Post-dérivatisation)：硫酸铜水溶液(10％ CuSO

检测：λ扫描仪：450nm。

[表1]

结果

霜剂已知增加脂质合成。因此，选择/>

通过HPTLC分析了几类脂质(游离脂肪酸、胆固醇衍生物(油酸胆固醇和硫酸胆固醇)和神经酰胺)。

第一系列实验

在该第一系列实验中，正如所预期的那样，阳性对照(

根据实施例1的来源于水飞蓟的瘦果的油对游离脂肪酸的合成没有作用，导致总胆固醇略有下降(-4.3％)，但这种下降没有达到显著性阈值。另一方面，根据实施例1的来源于水飞蓟的瘦果的油显著增加总神经酰胺的合成(+36.1％)。该结果得出的结论是，这种来源于水飞蓟的瘦果的油显示出重要的对皮肤的滋养作用。

神经酰胺作为角质层中的主要脂质存在，在屏障功能中发挥至关重要的作用，从而限制脱水和保水。基于神经酰胺的重要特性，重点放在了通过应用水飞蓟油产生的神经酰胺的不同亚类。事实上，这些神经酰胺不存在于制剂中，因此在角质层中发现的神经酰胺仅对应于皮肤产生的神经酰胺。

下表2显示与对照相比，在应用根据实施例1的来源于水飞蓟的瘦果的油后产生的神经酰胺的诱导百分比。

[表2]

因此，与未处理的重建表皮(对照)相比，来源于水飞蓟的瘦果的油在该重建表皮模型中诱导了所有神经酰胺的统计上显著的合成。令人关注的是，神经酰胺CER EOS的合成增加超过30％，这种神经酰胺在湿疹和特应性皮炎的情况下含量减少，并在屏障功能，特别是层状双层的组织中发挥重要作用。此外，参与角质层中脂质的层状组织的神经酰胺(即具有超长链的酯化神经酰胺，如EOS、EOH和EOP神经酰胺)显著增加至最低的30％以上。非酯化神经酰胺也增加，如NP和NS神经酰胺，其为角质层中的主要神经酰胺。神经酰胺NP是主要的神经酰胺，占总神经酰胺的8至13％(Van Smeden等人,J Lipid Res 2011,52(6),1211-1221)。这种神经酰胺在具有超长链酯化神经酰胺和AdS神经酰胺的层状双层的形成中发挥重要作用，这也是由来源于水飞蓟的瘦果的油的局部应用所诱导的(Bouwstra等人,Biochim Biophys Acta 1996,1300(3),177-186)。当神经酰胺NH和神经酰胺NP的量减少时，这些神经酰胺也与皮肤干燥有关(Ishikawa等人,J Cosmet Dermatol 2013,12(1),3-11)。通过应用来源于水飞蓟的瘦果的油引起的总神经酰胺，特别是在屏障功能中发挥主要作用的神经酰胺，如EOS、NP和NS神经酰胺的水平的增加非常有利于表皮屏障功能的增强作用。

第二系列实验

在该第二系列实验中，正如所预期的那样，阳性对照(

在这些条件下，相对于未处理的重建表皮，根据实施例2的来源于水飞蓟的瘦果的油使总神经酰胺的合成增加约13.6％。因此，这些结果证明了这种油的滋养作用。

与第一系列实验一样，该研究聚焦于不同类别的神经酰胺，所述神经酰胺必然由产品经皮肤的应用诱导，因为制剂中不含神经酰胺。通过应用根据实施例2的来源于水飞蓟的瘦果的油获得的结果总结在表3中。

下表3显示通过应用根据实施例2的来源于水飞蓟的瘦果的油产生的神经酰胺的诱导百分比。

[表3]

根据实施例2的来源于水飞蓟的瘦果的油诱导几乎所有神经酰胺的统计上显著的产生，特别是在屏障功能中发挥主要作用的神经酰胺的统计上显著的产生。

所有这些结果表明，来源于水飞蓟的瘦果的油具有滋养作用，但也能够诱导神经酰胺的内源性合成，从而改善表皮屏障功能。