一种杀青干附片及其制备方法和黑顺片及其制备方法

技术领域

本发明属于中药炮制技术领域，具体涉及一种杀青干附片及其制备方法和黑顺片及其制备方法。

背景技术

产地初加工是在产地快速将药用植物药用部位分离并形成药材而进行的初步处理和干燥的过程，是药材生产与品质形成的重要环节。通过产地加工能使药材便于储藏管理，保留有效成分含量。产地初加工主要工艺包括净制、蒸煮烫、“发汗”、熏蒸、阴干晒干、去皮去芯或浸渍等。

目前附子产地初加工工艺就是净制后浸入胆巴溶液中制为胆附子和盐渍制为盐附子。由于胆附子和盐附子在后续炮制中存在水漂去胆去盐的环节，生物碱流失严重，造成药效下降并伴有去胆去盐不彻底的风险，影响附子饮片的药效和安全性。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的目的提供一种杀青干附片的制备方法，能够解决附子中胆巴残留和生物碱含量低的问题。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种杀青干附片的制备方法，包括以下步骤：

将附子煮制，得到杀青附子；

将所述杀青附子进行切片，得到切片附子；

将所述切片附子进行干燥，得到杀青干附片。

优选的，所述煮制的时间为20～40min。

优选的，所述切片厚度为3～7mm。

优选的，所述干燥的温度为50℃～90℃。

本发明提供了一种上述技术方案所述制备方法制备得到的杀青干附片，所述杀青干附片总生物碱含量为2679.04±105.76μg/g。

本发明提供了一种黑顺片的制备方法，包括以下步骤：

将上述技术方案所述杀青干附片复水后进行蒸制，得到蒸制附片；

将所述蒸制附片进行干燥，得到黑顺片。

优选的，所述蒸制的时间为0～4h。

优选的，所述干燥的温度为50℃～90℃。

优选的，所述复水的方法包括浸泡；所述浸泡的时间为6～8h。

本发明还提供了一种上述技术方案所述制备方法制备得到的黑顺片，所述黑顺片中总生物碱含量为2243.00～3773.73μg/g。

本发明的有益效果：

本发明提供了一种杀青干附片的制备方法，包括以下步骤：将附子煮制，得到杀青附子；将所述杀青附子进行切片，得到切片附子；将所述切片附子进行干燥，得到杀青干附片。本发明提供的杀青干附片的制备方法解决了现有技术中胆巴残留，生物碱含量低的技术问题，同时制备得到的杀青干附片表观性状良好且耐储存等，可有望成为无胆附子新工艺。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为单酯型生物碱和双酯型生物碱各成分UPLC图；

图2为实施例2～10不同蒸制时间对单酯型生物碱含量的影响图；

图3为实施例2～10不同蒸制时间对双酯型生物碱含量的影响图；

图4为实施例2～10不同蒸制时间对总生物碱含量的影响图；

图5为实施例2～10黑顺片的外观形态图；

图6为对比例3制备得到的黑顺片的外观形态图；

图7为对比例3中的黑顺片生物碱含量检测结果图；

图8为对比例4制备得到的黑顺片的外观形态图；

图9为对比例4制备得到的黑顺片生物碱含量检测结果图；

图10为对比例4制备得到的黑顺片的水分、灰分、酸不溶性灰分含量检测结果图；

图11为对比例5制备得到的黑顺片外观形态图；

图12为对比例5制备得到的黑顺片单酯型生物碱含量随蒸制时间的变化图；

图13为对比例5制备得到的黑顺片双酯型生物碱含量随蒸制时间的变化图；

图14为对比例5制备得到的黑顺片总生物碱含量随蒸制时间的变化图；

图15为对比例6制备得到的黑顺片外观形态图；

图16为对比例6制备得到的黑顺片单酯型生物碱含量随蒸制时间的变化图；

图17为对比例6制备得到的黑顺片双酯型生物碱含量随蒸制时间的变化图；

图18为对比例6制备得到的黑顺片总生物碱含量随蒸制时间的变化图。

具体实施方式

本发明提供了一种杀青干附片的制备方法，包括以下步骤：

将附子煮制，得到杀青附子；

将所述杀青附子进行切片，得到切片附子；

将所述切片附子进行干燥，得到杀青干附片。

本发明将附子煮制，得到杀青附子。在本发明中，所述附子优选为新鲜采摘的附子。本发明实施例中所述附子为泥附子，采集于陕西城固县附子基地，经陕西师范大学崔浪军教授鉴定为毛茛科植物乌头Aconitum camichaeli Debx.的子根。本发明对所述煮制的方法没有特殊限定，采用本领域常规煮制方法均可。本发明所述煮制的时间优选为0～40min，进一步优选为20～40min，更优选为40min。本发明所述煮制时间为0时，不进行煮制。本发明对附子进行煮制时，煮制时间为20min时，所述煮制的附子呈半透心状态；煮制40min时，所述煮制的附子呈完全透心状态。本发明优选将附子煮制至完全透心状态。本发明将附子进行煮制能使后续炮制过程中的生物碱保留量更高，表观更好。

得到杀青附子后，本发明优选将杀青附子冷却后进行切片，得到切片附子。本发明所述冷却的方法优选包括过冷水冷却。本发明所述切片厚度优选为3～7mm，更优选为5mm。本发明对所述切片的方法没有特殊限定，采用本领域常规切片方法均可。

得到切片附子后，本发明将所述切片附子进行干燥，得到杀青干附片。本发明所述干燥的方式优选为烘干；所述干燥的温度优选为50℃～90℃,进一步优选为50℃～70℃，更优选为70℃。干燥完成后，本发明得到杀青干附片。本发明通过上述技术方案制备得到的杀青干附片生物碱保留量更高，表观更好。

本发明提供了一种上述技术方案所述制备方法制备得到的杀青干附片。在本发明中，所述杀青干附片总生物碱含量为2679.04±105.76μg/g。

本发明提供了一种黑顺片的制备方法，包括以下步骤：

将上述技术方案所述杀青干附片复水后进行蒸制，得到蒸制附片；

将所述蒸制附片进行干燥，得到黑顺片。

本发明将上述技术方案所述杀青干附片复水后进行蒸制，得到蒸制附片。

本发明将上述技术方案所述杀青干附片进行复水。本发明所述复水的方式优选包括浸泡。在本发明中，所述浸泡的时间优选为6～8h，更优选为7h。本发明进行浸泡时优选以水刚淹没杀青干附片为止。本发明所述浸泡优选浸泡至附片没有硬芯白芯。浸泡完成后，本发明得到复水附片。本发明对附片进行复水有利于后续蒸制中加速附片中双酯型生物碱转化为单酯型生物碱。得到复水附片后，本发明对所述复水附片进行蒸制。本发明所述蒸制优选在常温常压下进行。本发明所述蒸制的时间优选为0～4h，进一步优选为2～4h，更优选为3h。本发明所述蒸制时间为0时，即不进行蒸制。本发明对附片进行蒸制主要是使双酯型生物碱转化为单酯型生物碱。蒸制完成后，本发明得到蒸制附片。

得到蒸制附片后，本发明将所述蒸制附片进行干燥，得到黑顺片。

本发明所述干燥的温度优选为50℃～90℃，进一步优选为50℃～70℃，更优选为50℃。本发明对干燥的方式没有特殊限定，采用本领域常规干燥方法均可。在本发明中，所述干燥的方式优选为烘干。干燥完成后，本发明得到黑顺片。

本发明还提供了一种上述技术方案所述制备方法制备得到的黑顺片。在本发明中，所述黑顺片表观形态好，生物碱含量高。

在本发明中，所述黑顺片中单酯型生物碱含量为1472.00～3683.35μg/g；所述黑顺片中双酯型生物碱含量为60.00～770.92μg/g；所述黑顺片中总生物碱含量为2243.00～3773.73μg/g。在本发明中，所述黑顺片半透明，均为角质样，可以看到白色维管束，质地均匀。在本发明中，所述黑顺片中单酯型生物碱含量最大达到了3628.25μg/g；双酯型生物碱含量为60.44μg/g；总生物碱含量最高达到了3773.73μg/g；水分、灰分及酸不溶性灰分含量低于药典标准。

为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

本发明所使用的附子为：泥附子也称为鲜附子：采集于陕西城固县附子基地，经陕西师范大学崔浪军教授鉴定为毛茛科植物乌头Aconitum camichaeli Debx.的子根。

进行烘干时，烘干的标准为：每1kg附片在干燥中过程中连续3次进行称重，每次称重间隔2h，称量质量相差不超过5g即取出晾凉，即为干燥完成。

进行晒干时，晒干的标准为：每1kg附片在干燥中过程中连续3次进行称重，每次称重间隔6h，称量质量相差不超过5g，即为干燥完成。

黑顺片药典标准：双酯型生物碱不超过0.02％，即每克附子中含有不超过200微克双酯型生物碱；单酯型生物碱不少于0.01％，即每克附子中含有不少于100微克单酯型生物碱。水分不超过15％、总灰分不超过6％、酸不溶性灰分不超过1％。

实施例1

一种杀青干附片，其制备方法如下：

选择单个重量20g左右的鲜附子适量，洗净后煮至40min至透心后切为5mm薄片后70℃烘干，得到杀青干附片。

对比例1

将与实施例1同批次的附子直接进行阴干，阴干的标准同晒干，得到附子。

对比例2(药典产地初加工方法)

将与实施例1同批次的附子参照《中国药典》2020年版浸入胆巴溶液中浸泡25日，得到胆附子。将胆附子洗净后煮至40min至透心后切为5mm薄片后去胆一天，50℃烘干，得到胆附片。

应用例1

对实施例1的杀青干附片，对比例1中的附子和对比例2中胆附子的生物碱含量进行检测。

其中，单酯型生物碱为乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的总和；双酯型生物碱为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱总和；总生物碱为单酯型生物碱和双酯型生物碱总和。

1、溶液制备

阴性对照溶液：0.05mol·L

对照品溶液：取乌头碱，次乌头碱，新乌头碱，苯甲酰乌头原碱，苯甲酰次乌头原碱，苯甲酰新乌头原碱对照品适量，用阴性对照溶液溶解，而后制成每1mL含次乌头碱0.16mg，次乌头碱0.16mg，苯甲酰次乌头原碱0.11mg，苯甲酰乌头原碱0.12mg，苯甲酰新乌头原碱0.14mg，新乌头碱0.15mg的混合对照品溶液，存于4℃冰箱，备用。

供试品溶液：称取1.0g左右附子粉末，加入5mL0.05mol·L

色谱条件

采用Ultimate UHPLC PolarRP(1.8μm,2.1×100mm,W-Port)色谱柱分离测定。测定条件为：柱温35℃，流动相A：2mmol·L

表1各类乌头碱标准曲线

对实施例1干附片，对比例1的干附子和对比例2的胆附子进行检测，单酯型生物碱、双酯型生物碱和总生物碱检测结果如表2。

表2实施例1干附片，对比例1的干附子和对比例2的胆附子单酯型生物碱、双酯型生物碱和总生物碱检测结果(单位μg/g) (均值)

由表2可得，经过杀青，干附片的单酯型生物碱含量均有所增加，分别增加到对照组附子的4064.58％，252.87％和221.00％，总体增加了1276.53％。双酯型生物碱含量部分有所降低，分别降低/升高到对照组附子的26.60％，156.87％和53.67％，总体减少到对照组附子的33.26％。总生物碱总体降低到了对照组附子的70.14％。杀青干附片与胆附片相比，单酯型生物碱含量分别是其1432.29％，1035.25％和204.63％，总体为1314.59％，双酯型生物碱分别是其364.11％，207.28％和174.36％，总体为292.68％。总生物碱是其504.34％。本发明与药典附子产地初加工方法相比，生物碱保留量大大增加。

实施例2

一种黑顺片，其制备方法具体如下：

将实施例1制备得到的杀青干附片，置于池中进行复水，水以刚淹没杀青干附片为止，复水的时间为6～8h，至杀青干附片完全软化，无硬芯白芯，而后捞出，50℃烘干后，得到黑顺片。即蒸制时间为0。

实施例3

一种黑顺片，其制备方法具体如下：

将实施例1制备得到的杀青干附片，置于池中进行复水，水以刚淹没杀青干附片为止，复水的时间为6～8h，至杀青干附片完全软化，无硬芯白芯，而后捞出，进行蒸制，蒸制0.5h，蒸制完成后50℃烘干后，得到黑顺片。

实施例4

一种黑顺片，制备方法同实施例3，区别在于，蒸制时间为1h。

实施例5

一种黑顺片，制备方法同实施例3，区别在于，蒸制时间为1.5h。

实施例6

一种黑顺片，制备方法同实施例3，区别在于，蒸制时间为2h。

实施例7

一种黑顺片，制备方法同实施例3，区别在于，蒸制时间为2.5h。

实施例8

一种黑顺片，制备方法同实施例3，区别在于，蒸制时间为3h。

实施例9

一种黑顺片，制备方法同实施例3，区别在于，蒸制时间为3.5h。

实施例10

一种黑顺片，制备方法同实施例3，区别在于，蒸制时间为4h。

应用例2

1.对实施例2～10的黑顺片的生物碱含量进行检测。检测方法同应用例1。

实施例2～10的黑顺片的生物碱含量检测结果如表3和图2～图4所示。

表3实施例2～10的黑顺片的生物碱含量检测结果(单位μg/g) (均值)

由表3和图2～图4可得，单酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐增加，直至基本不再变化；双酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐减少，直至不再变化。蒸制时间为2.5h，继续蒸制单酯型生物碱含量，双酯型生物碱含量和总生物碱含量虽继续变化，但基本趋于平稳。单酯型生物碱含量最大达到了3683.35μg/g；双酯型生物碱含量逐渐降为60.44μg/g；总生物碱含量最高达到了3773.73μg/g。

2.对实施例2～10的黑顺片的水分、灰分及酸不溶性灰分的含量进行检测。水分、灰分及酸不溶性灰分检测依据《中国药典》2020版中通则(2302)方法进行测定。

本组实验样品的水分在4％～6％之间，灰分不超过4％，酸不溶性灰分在0.5％以下，全部符合药典要求。

3.实施例2～10制备得到的黑顺片的表观分析。

实施例2～10黑顺片的外观形态如图5所示。图5中的1～9号样品分别对应蒸的时间为0h、0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h和4h。

由图5可得，本发明制备得到的黑顺片形状呈上窄下宽的锥形片，部分旁边伸出角状凸起，长和宽分别为2～4cm和1.5～3cm，厚度为0.5～0.7mm。其中未经蒸制的1号样品呈黄色状，质硬，半透明，表面有粉性，有不透明的白色斑区。2～9号样品随着蒸制时间的增加，颜色逐渐加深，由黄褐色变为红褐色和红黑色，质由硬变为脆，半透明，均为角质样，可以看到白色维管束，质地均匀。

对比例3

一种黑顺片的制备方法，具体步骤为：

由新鲜附子直接加工而成的黑顺片样品的制备与采集。

选择单个重量20g左右的泥附子若干，清洗干净后置于阴凉处自然脱水，每日取一部分纵切成5mm薄片，蒸制4h，其中每半小时取一次样。50℃烘干后备用，得到黑顺片。

应用例3

1.对对比例3制备得到的黑顺片进行外观形态观察

对比例3制备得到的黑顺片的外观形态观察结果如图6所示。图6中的1～9号为脱水1天，蒸制时间分别为0h、0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h的黑顺片样品；图6中的10～18号样品为脱水3天、蒸制时间分别为0h、0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h的黑顺片样品。

由图6可得，黑顺片A性状呈上窄下宽的锥形片，部分周围有角状凸起，长和宽分别为2～4cm和1.5～3cm，厚度约为5～7mm，1号和10号厚度均匀，其余样品中间薄周围厚，部分皮向中间有弯曲。其中1号和10号样品没有进行蒸制，样品呈白色粉质样，质略微松软酥脆，不透明，表面有粉性。2～6号样品蒸制时间从0.5h～2.5h，颜色逐渐由黄白色到黄色，颜色逐渐加深，质逐渐由质硬到质脆，粉质样减少，角质样增多，从不透明到逐渐半透明，内部的不同程度的白色不透明斑区逐渐减少。7～9号样品蒸制时间为3～4h，颜色变为红褐色或红黑色，颜色进一步加深，质硬且脆，角质样，半透明，部分表面有光滑的油面。脱水3天10～18号样品与1～9号样品相比，不透明的斑区一直存在，除18号外，没有出现半透明的现象。

2.对对比例3制备得到的黑顺片生物碱含量进行检测

生物碱含量检测方法同应用例1。

对比例3中的黑顺片生物碱含量检测结果如表4和图7所示。图7中的A为不同鲜度和蒸制时间对黑顺片的单酯型生物碱含量的影响图；图7中的B为不同鲜度和蒸制时间对黑顺片的双酯型生物碱含量的影响图；图7中的C为不同鲜度和蒸制时间对黑顺片的总生物碱含量的影响图。

表4对比例3中的黑顺片生物碱含量检测结果(单位μg/g)(均值)

由表4和图7可得，单酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐增加，直至出现平稳或略有波动；双酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐减少，直至出现平稳或略有波动。脱水1天，不进行蒸制的样品单酯型生物碱，双酯型生物碱和总生物碱含量均为最大。脱水3天，蒸制1.5h的样品单酯型生物碱和总生物碱含量最高，其他样品总体或高或低，但脱水4天的样品组整体呈现最低水平。

3.对对比例2制备得到的黑顺片的水分、灰分、酸不溶性灰分含量进行检测

本组实验样品的水分在4％～6％之间，灰分不超过4％，酸不溶性灰分在0.5％以下，全部符合药典要求。

对比例4

由胆附子按照药典要求加工而成的黑顺片样品的制备与采集。

选择大小均匀胆附子若干，连同浸液分别煮0min(不煮)、20min(煮至半透心)、40min(煮至透心)。捞出晾凉后纵切成5mm薄片，将不同煮制时间的三组各自再分四组，分别浸漂1天、2天、3天和4天(每天换水3次)。将每日浸漂所得附片蒸制4h，其中每半小时取一次样。50℃烘干后，得到黑顺片。

应用例4

1.对对比例4制备得到的黑顺片进行外观形态观察

对比例4制备得到的黑顺片的外观形态如图8所示。图8中的1～9号为浸漂时间2天，煮制时间为0min的黑顺片，10～18号浸漂时间2天，为煮制时间为20min的黑顺片，19～27号为浸漂时间2天，煮制时间为40min的黑顺片，每行9个黑顺片样品(从左至右)分别对应蒸的时间为0h、0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h和4h。

由图8可得，黑顺片形状呈圆形片状或上窄下宽的锥形片状，部分旁边伸出角状凸起，长和宽分别为2-4cm和1.5-3cm，厚度为0.5-0.7mm。其中未经蒸煮(煮0min、蒸0h)的1号样品呈白色粉质样，质略微松软酥脆，不透明，表面有粉性；经煮0min、蒸0.5～2.5h的2-6号样品呈黄白色半粉半角质样，质硬，粉质样减少，角质样增多，从不透明到半透明，中间或边缘出现了不同程度的白色不透明斑区；经煮0min、蒸3～4h的7-9号样品呈黄白色角质样，质硬，半透明，表面可见不透明的维管束。经煮20min、蒸0～1.5h的10-13号样品呈白色或黄白色半粉半角质样，质硬，有白色不透明斑块区，并随蒸制时间的增加不透明斑块区逐渐减少，表面可见不透明的维管束；经煮20min、蒸1.5～4h的14-18号样品呈黄白色角质状，质硬且脆，半透明，随着蒸制时间的增加，黑顺片样品表面出现光滑的油面，表面可见不透明的维管束。经煮40min，蒸0～1.5h的19-22号样品外表有呈白色或黄白色半粉半角质样，质硬，有白色不透明斑块区，并随蒸制时间的增加不透明斑块区逐渐减少，表面可见不透明的维管束；经煮40min、蒸1.5～4h的样品呈黄白色角质状，质硬且脆，半透明，随着蒸制时间的增加，黑顺片样品表面出现光滑的油面，表面可见不透明的维管束。

2.对对比例4制备得到的黑顺片生物碱含量进行检测

生物碱含量检测方法同应用例1。

对比例4制备得到的黑顺片生物碱含量检测结果如表5和图9所示。

表5对比例4制备得到的黑顺片生物碱含量检测结果(单位μg/g)(均值)

由表5和图9可得，单酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐增加，直至出现平稳或略有波动；双酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐减少，直至出现平稳或略有波动。去胆一天的样品生物碱含量最高，随着去胆时间增加，生物碱含量逐渐减少。经过煮制后，生物碱流失量更少。不煮制，去胆4天的样品生物碱含量处于最低水平。

3.对对比例4制备得到的黑顺片的水分、灰分、酸不溶性灰分含量进行检测

对比例4制备得到的黑顺片的水分、灰分、酸不溶性灰分含量检测结果如表6和图10所示。

表6对比例4制备得到的黑顺片的水分、灰分、酸不溶性灰分含量检测结果(均值)

由表6和图10可得，对比例4制备得到的黑顺片水分全部符合药典规定，去胆一天的样品灰分几乎全部不符合药典规定，去胆一天的样品酸不溶性灰分部分不符合药典规定。

对比例5

由干附片加工而成的黑顺片

选择单个重量20g左右的鲜附子适量，洗净后，切成5mm薄片，70℃烘干得到干附片；

选择干附片若干，置于池中进行复水，水以刚淹没干附片为止。复水至干附片完全软化，无硬芯白芯，而后捞出清洗干净，蒸制4h，其中每半小时取一次样。50℃烘干后，得到黑顺片。

应用例5

1.对对比例5制备得到的黑顺片进行外观形态观察

对比例5制备得到的黑顺片外观形态如图11所示。图11中的1-9号样品分别对应蒸的时间为0h、0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h和4h。

由图11可得，对比例5中的黑顺片形状呈上窄下宽的锥形片，部分旁边伸出角状凸起，长和宽分别为2-4cm和1.5-3cm，厚度为0.5-0.7mm。其中未经蒸制的1号样品呈白色粉质状，质略微松软酥脆，不透明，表面有粉性。2-9号样品随着蒸制时间的增加，颜色逐渐加深，由黄白色到黄色最后变为红褐色和红黑色，尤其是皮下部分变为黑色，质由硬变为脆，不透明，均为半粉半角质样。

2.对对比例5制备得到的黑顺片生物碱含量进行检测

生物碱含量检测方法同应用例1。

对比例5制备得到的黑顺片生物碱含量检测结果如表7和图12～14所示。其中图12为对比例5制备得到的黑顺片单酯型生物碱含量随蒸制时间的变化图；图13为对比例5制备得到的黑顺片双酯型生物碱含量随蒸制时间的变化图；图14为对比例5制备得到的黑顺片总生物碱含量随蒸制时间的变化图。

表7对比例5制备得到的黑顺片生物碱含量检测结果(单位μg/g) (均值)

由表7和图12～14可得，单酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐增加，直至基本不再变化；双酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐减少，直至不再变化。蒸制时间为2.5h，继续蒸制单酯型生物碱含量和总生物碱含量虽继续变化，但基本趋于平稳。蒸制时间为3h，继续蒸制双酯型生物碱含量虽继续变化，但基本趋于平稳。单酯型生物碱含量最大达到了3326.90μg/g；双酯型生物碱含量最低为60.41μg/g；总生物碱含量最高达到了3387.31μg/g。

3.对对比例5制备得到的黑顺片水分、灰分及酸不溶性灰分进行检测

本组实验样品的水分在4％-6％之间，灰分不超过4％，酸不溶性灰分在0.5％以下，全部符合药典要求。

对比例6

选择单个重量20g左右的鲜附子适量，洗净后，70℃烘干得到干附子；

选择干附子若干，置于池中进行复水，水以刚淹没干附子为止。复水至干附子完全软化，无硬芯白芯，而后捞出清洗干净，纵切为5mm薄片，蒸制4h，其中每半小时取一次样。50℃烘干后，得到黑顺片。

应用例6

1.对对比例6制备得到的黑顺片进行外观形态观察

对比例6制备得到的黑顺片外观形态如图15所示。图15中的1-9号样品分别对应蒸的时间为0h、0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h和4h。

由图15可得，对比例6制备的黑顺片形状呈上窄下宽的锥形片，部分旁边伸出角状凸起，长和宽分别为2-4cm和1.5-3cm，厚度为0.5-0.7mm。其中未经蒸制的1号样品呈白色粉质状，质略微松软酥脆，不透明，表面有粉性。2-9号样品随着蒸制时间的增加，颜色逐渐加深，由黄白色到黄色最后变为红褐色和红黑色，尤其是皮下部分变为黑色，质由硬变为脆，不透明，均为半粉半角质样，部分有裂缝。

2.对对比例6制备得到的黑顺片生物碱含量进行检测

生物碱含量检测方法同应用例1。

对比例6制备得到的黑顺片生物碱含量检测结果如表8和图16～图18所示。

表8对比例6制备得到的黑顺片生物碱含量检测结果(单位μg/g) (均值)

由表8和图16～18可得，单酯型生物碱含量随蒸制时间的增加而逐渐增加，直至基本不再变化；双酯型生物碱(新乌头碱、次乌头碱和乌头碱)含量随蒸制时间的增加而逐渐减少，直至不再变化。蒸制时间为2.5h，继续蒸制单酯型生物碱含量，双酯型生物碱含量和总生物碱含量虽继续变化，但基本趋于平稳。单酯型生物碱含量最大达到了2657.92μg/g；双酯型生物碱含量逐为49.88μg/g；总生物碱含量最高达到了2726.71μg/g。

3.对对比例6制备得到的黑顺片水分、灰分及酸不溶性灰分进行检测

本组实验样品的水分在4％-6％之间，灰分不超过4％，酸不溶性灰分在0.5％以下，全部符合药典要求。

应用例7

实施例8、对比例2～5制备的黑顺片的比较分析

1.实施例8、对比例2～5制备的黑顺片的表观分析

对不同的黑顺片样品分别从颜色、表面质感、质地、透明度和质地均匀性进行了比较分析，并对它们进行综合排名，结果如表9所示。表4中的黑顺片A对应的是对比例2制备得到的黑顺片；黑顺片B对应的是对比例3制备得到的黑顺片；黑顺片C对应的是对比例4制备得到的黑顺片；黑顺片D对应的是对比例5制备得到的黑顺片；黑顺片E对应的是实施例8制备得到的黑顺片。

表9实施例8、对比例2～5制备的黑顺片的表观性状比较

由表9可得，黑顺片B的表观性状最优，其次是黑顺片E。表观最差的样品时黑顺片C和黑顺片D，其中黑顺片D表面有裂纹，易碎，表观最差。

2.实施例8、对比例2～5制备的黑顺片的生物碱含量分析

对不同的黑顺片样品分别从单酯型生物碱含量，双酯型生物碱含量，总生物碱含量和生物碱保留量进行比对分析，其中生物碱变化量计算公式为(黑顺片-泥附子)/泥附子×100％。

实施例8、对比例2～5制备的黑顺片的生物碱含量分析结果如表10所示。其中，表5中的黑顺片A对应的是对比例2制备得到的黑顺片(脱水2天，蒸制3.5h)；黑顺片B对应的是对比例3制备得到的黑顺片(煮20min，去胆1天)；黑顺片C对应的是对比例4制备得到的黑顺片(蒸制4h)；黑顺片D对应的是对比例5制备得到的黑顺片(蒸制3h)；黑顺片E对应的是实施例8制备得到的黑顺片。

表10实施例8、对比例2～5制备的黑顺片的生物碱含量分析结果

注：不同小写字母表示使用Duncan检验时在P<0.05水平上差异显著。

由表10可得，单酯型生物碱含量和增加量最高的是黑顺片A，是药典标准的35.37倍；双酯型含量最低的是黑顺片B，是药典标准的28.65％，5种黑顺片的双酯型生物碱变化量均为97.5％以上，总生物碱含量和增加量最高的是黑顺片A，相比于泥附子，增加了9.78％。

综合分析实施例8、对比例2～5制备的黑顺片采收期最简单的是黑顺片B的加工方式，只需投入胆巴池浸泡即可。最复杂的是黑顺片A的加工工艺，相当于采收后马上就加工成了最终的饮片，整个过程持续3-4天，同时由于鲜附子易腐，此工艺只可在采收期进行，加工周期限制很大。相比于黑顺片A，黑顺片E的煮制时间就短很多，一批附子一天即可完成采收期的趁鲜加工。黑顺片C由于是整个附子进行烘干，烘干时间较长，一批样品烘干需要2-3天。黑顺片D切片后直接烘干，一批附子一天内即可完成干燥。后续加工中，黑顺片B需要过程附子，需要煮制切片去胆等操作，持续时间长，需要2-3天完成一批饮片的加工。黑顺片C复水时间较长，需要3-4天，整个过程需要5-6天完成。黑顺片D和E复水时间短，整个后续加工一天内即可完成。综合分析可得，本发明实施例8制备的黑顺片E综合效果最优。

综上，本发明提供的杀青干附片的制备方法和由所述制备方法制备的杀青干附片进行黑顺片的制备方法，解决了现有技术中胆巴残留，生物碱含量低的技术问题，同时制备得到的杀青干附片表观性状良好且耐储存等，可有望成为无胆附子新工艺。

尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。