一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺

技术领域

本发明涉及一种发酵工艺，特别是涉及一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，属于乳酸菌培养技术领域。

背景技术

发酵乳酸菌，为原核生物的细菌，指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称，代谢类型为异养厌氧型。凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为发酵乳酸菌。

在人体肠道内栖息着数百种的细菌，其数量超过百万亿个。其中对人体健康有益的叫益生菌，以乳酸菌、双歧杆菌等为代表，对人体健康有害的叫有害菌，以大肝杆菌、产气荚膜梭状芽胞杆菌等为代表。益生菌是一个庞大的菌群，有害菌也是一个不小的菌群，当益生菌占优势时，人体则保持健康状态，否则处于亚健康或非健康状态。长期科学研究结果表明，以乳酸菌为代表的益生菌是人体必不可少的且具有重要生理功能的有益菌，它们数量的多和少，直接影响到人的健康与否，直接影响到人的寿命长短，科学家长期研究的结果证明，乳酸菌对人的健康与长寿非常重要。

现有的发酵乳酸菌的高密度发酵工艺存在以下不足：(1)现有的发酵乳酸菌存活率低；(2)现有的发酵乳酸菌的高密度发酵工艺在实际的生产过程发酵周期较长。

发明内容

本发明的主要目的是为了解决现有技术的不足，而提供一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺。

本发明的目的可以通过采用如下技术方案达到：

一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，取活化后的乳杆菌属放置在高密度发酵培养池中，所述高密度发酵培养池按重量份数计，低聚糖20～30份、王枣子提取物10～15份、牛肉粉6～15份、酵母粉5～10份、大豆分离蛋白10～15份。

优选的，所述高密度发酵培养池的制备过程如下：

步骤1：将低聚糖、王枣子提取物、牛肉粉、酵母粉以及大豆分离蛋白分别在120～130℃灭菌；

步骤2：将灭菌后的步骤1中的原料在200～250℃条件下活化，并将酵母粉用牛乳溶解；

步骤3：将活化后的原料在无菌环境下混合均匀后在高密度发酵培养池中撒上牛肉粉，在高密度发酵培养池制备完成。

优选的，所述发酵工艺包括如下步骤：

步骤1：将活化后的乳杆菌属在MRS琼脂平板活化三次，挑取单菌落接种于深层MRS液体试管，35～36℃条件下培养12～14小时后，以2％～4％接种量转接于MRS液体培养基，培养8～10小时后作为种子液；

步骤2：配制高密度发酵培养池，培养池降至所需温度时，接上溶氧电极，标定溶氧为100％，每隔10～15min滴注0.1～0.8ml的营养液；

步骤3：调节培养池中的PH，使其乳杆菌属活菌数达以上10000000000～10000000000000cfu/ml的发酵液。

优选的，所述高密度发酵培养池按重量份数计，低聚糖25～30份、王枣子提取物10～13份、牛肉粉10～15份、酵母粉7～10份、大豆分离蛋白10～13份。

优选的，所述乳酸菌为乳杆菌属，所述乳酸菌为嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌、乳杆菌属、罗伊氏乳杆菌或鼠李糖乳杆菌中的一种。

优选的，所述低聚糖为异麦芽低聚糖。

优选的，在步骤3中，所述调节培养池中的PH为5.7～6.5。

优选的，所述营养液为牛肉粉和牛乳混合液。

优选的，所述在发酵初期高密度发酵培养池中通入100％氧气15～30s后接上溶氧电极。

本发明的有益技术效果：按照本发明的发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，本发明提供的发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，在乳酸菌培养池中添加王枣子提取物能够具有抗氧化、降糖、抗衰老、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等多种的生物活性能够有效的帮助乳酸菌提高菌类的活性，便于提高乳酸菌存活率；同时在培养过程中持续的添加营养液便于提供菌类的发酵周期。

具体实施方式

为使本领域技术人员更加清楚和明确本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

本实施例提供的取活化后的乳杆菌属放置在高密度发酵培养池中，高密度发酵培养池按重量份数计，低聚糖20～30份、王枣子提取物10～15份、牛肉粉6～15份、酵母粉5～10份、大豆分离蛋白10～15份。

高密度发酵培养池的制备过程如下：

步骤1：将低聚糖、王枣子提取物、牛肉粉、酵母粉以及大豆分离蛋白分别在120～130℃灭菌；

步骤2：将灭菌后的步骤1中的原料在200～250℃条件下活化，并将酵母粉用牛乳溶解；

步骤3：将活化后的原料在无菌环境下混合均匀后在高密度发酵培养池中撒上牛肉粉，在高密度发酵培养池制备完成。

发酵工艺包括如下步骤：

步骤1：将活化后的乳杆菌属在MRS琼脂平板活化三次，挑取单菌落接种于深层MRS液体试管，35～36℃条件下培养12～14小时后，以2％～4％接种量转接于MRS液体培养基，培养8～10小时后作为种子液；

步骤2：配制高密度发酵培养池，培养池降至所需温度时，接上溶氧电极，标定溶氧为100％，每隔10～15min滴注0.1～0.8ml的营养液；

步骤3：调节培养池中的PH，使其乳杆菌属活菌数达以上10000000000～10000000000000cfu/ml的发酵液。

高密度发酵培养池按重量份数计，低聚糖25～30份、王枣子提取物10～13份、牛肉粉10～15份、酵母粉7～10份、大豆分离蛋白10～13份。乳酸菌为乳杆菌属，乳酸菌为嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌、乳杆菌属、罗伊氏乳杆菌或鼠李糖乳杆菌中的一种。低聚糖为异麦芽低聚糖。在步骤3中，调节培养池中的PH为5.7～6.5。营养液为牛肉粉和牛乳混合液。在发酵初期高密度发酵培养池中通入100％氧气15～30s后接上溶氧电极。

实施例1：

一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，发酵工艺包括如下步骤：

步骤1：将活化后的乳杆菌属在MRS琼脂平板活化三次，挑取单菌落接种于深层MRS液体试管，35℃条件下培养12小时后，以2％接种量转接于MRS液体培养基，培养8小时后作为种子液；

步骤2：配制高密度发酵培养池，培养池降至所需温度时，接上溶氧电极，标定溶氧为100％，每隔10min滴注0.1ml的营养液；

步骤3：调节培养池中的PH，使其乳杆菌属活菌数达以上10000000000cfu/ml的发酵液。

实施例2：

一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，发酵工艺包括如下步骤：

步骤1：将活化后的乳杆菌属在MRS琼脂平板活化三次，挑取单菌落接种于深层MRS液体试管，35.2℃条件下培养12.5小时后，以2％接种量转接于MRS液体培养基，培养8小时后作为种子液；

步骤2：配制高密度发酵培养池，培养池降至所需温度时，接上溶氧电极，标定溶氧为100％，每隔11min滴注0.2ml的营养液；

步骤3：调节培养池中的PH，使其乳杆菌属活菌数达以上100000000000cfu/ml的发酵液。

实施例3：

一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，发酵工艺包括如下步骤：

步骤1：将活化后的乳杆菌属在MRS琼脂平板活化三次，挑取单菌落接种于深层MRS液体试管，35.2℃条件下培养12.5小时后，以2％％接种量转接于MRS液体培养基，培养9小时后作为种子液；

步骤2：配制高密度发酵培养池，培养池降至所需温度时，接上溶氧电极，标定溶氧为100％，每隔13min滴注0.4ml的营养液；

步骤3：调节培养池中的PH，使其乳杆菌属活菌数达以上1000000000000cfu/ml的发酵液。

实施例4：

一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，发酵工艺包括如下步骤：

步骤1：将活化后的乳杆菌属在MRS琼脂平板活化三次，挑取单菌落接种于深层MRS液体试管，35.5℃条件下培养13.5小时后，以3％接种量转接于MRS液体培养基，培养9小时后作为种子液；

步骤2：配制高密度发酵培养池，培养池降至所需温度时，接上溶氧电极，标定溶氧为100％，每隔14min滴注0.7ml的营养液；

步骤3：调节培养池中的PH，使其乳杆菌属活菌数达以上1000000000000cfu/ml的发酵液。

实施例5：

一种发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，发酵工艺包括如下步骤：

步骤1：将活化后的乳杆菌属在MRS琼脂平板活化三次，挑取单菌落接种于深层MRS液体试管，36℃条件下培养14小时后，以4％接种量转接于MRS液体培养基，培养10小时后作为种子液；

步骤2：配制高密度发酵培养池，培养池降至所需温度时，接上溶氧电极，标定溶氧为100％，每隔10～15min滴注0.8ml的营养液；

步骤3：调节培养池中的PH，使其乳杆菌属活菌数达以上10000000000000cfu/ml的发酵液。

综上所述，在本实施例中，按照本实施例的发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，本实施例提供的发酵乳酸菌的高密度发酵工艺，由实施例1～实施例5可知，实施例4制备的发酵乳酸菌的高密度发酵工艺制备的乳酸菌发酵效率最快，发酵周期最短。

以上所述，仅为本发明进一步的实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明所公开的范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都属于本发明的保护范围。