一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法

技术领域

本发明涉及海洋微生物制品技术领域，具体为一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA 藻油的生产方法。

背景技术

二十二碳六烯酸是对人体非常重要的长碳链多不饱和脂肪酸，俗称脑黄金，卫生部2010年3号公告，根据《中华人民共和国食品安全法》和《新资源食品管理办法》的规定，批准来源于裂壶藻或吾肯氏壶藻或寇氏隐甲藻种为原料，通过发酵、分离、提纯等工艺生产的藻油DHA作为新资源食品，DHA的来源主要有两种，一是来自于深海鱼油，另一是来自于微藻类，相对于来自于深海鱼油 DHA，藻油DHA具有来源于微藻、危害物含量低、EPA含量低等优势，在我国，微藻DHA广泛应用于婴幼儿配方食品、调制乳粉、食用油、保健食品、饮料和糖果等。

富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油与富含Sn-2位DHA的DHA藻油，营养代谢功能具有一定差异性，也具有不同物理特性，适用于不同的用途，未见生产富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的相关技术报道，为此，我们提出一种富含Sn-2 位棕榈酸的DHA藻油的生产方法。

发明内容

针对一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法，提出了本发明。

因此，本发明的目的是提供一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法，通过采用裂殖壶菌、吾肯氏湖藻，优选裂殖壶菌，利用菌株筛选以及优化发酵培养基、发酵条件，利用菌株发酵生产发酵液并提取DHA藻油，再采用冬化、多级冷冻结晶分离工艺方法，能够解决上述提出现有的问题。

为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，本发明提供了如下技术方案：

一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法，其包括如下操作步骤：

S1：利用筛选的吾肯氏壶藻、裂殖壶菌，采用优化的发酵培养基以及优化的工艺步骤、条件；

S2：发酵液先升温至35～65℃，再经离心机脱水浓缩；

S3：向浓缩发酵加入酶，以便让裂壶藻细胞破壁，然后加入柠檬酸，再升温75～90℃，经离心机分离脱除水以及溶解于水的固形物、机械杂质，得到粗 DHA藻油；

S4：先经脱胶中和，再经冬化脱蜡、干法分提，从而得到主产品富含Sn-2 位棕榈酸的DHA藻油。

作为本发明所述的一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述S1中发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约72-120小时，制备目标产物发酵液。

作为本发明所述的一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述S2中发酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到15％以上。

作为本发明所述的一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述S3中调节物料PH达到3.5～5.0，再升温至75～90℃，分离得到粗DHA藻油。

作为本发明所述的一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述S4中冬化条件：在20～37℃之间的某温度区间停留时间 12小时。

作为本发明所述的一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述S4中第一次干法分提的液相，再进行第二次干法分提，第一级干法分提条件：在温度10～15℃下养晶时间12小时。

作为本发明所述的一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述S4中第二级干法分提的条件为：第一次干法分提的液相，在2～9℃之间的某温度区间养晶时间12小时。

作为本发明所述的一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述S4中二级干法分提的固脂合并为一个组分，该组份富含Sn-2 位DHA。

与现有技术相比：本发明采用裂壶藻或吾肯氏壶藻，通过筛选菌株以及优化培养基、发酵条件，从而产生富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油，提取的DHA藻油，在冬化脱蜡之后，再利用冷冻结晶分离的方法，进一步提高目标产品的Sn-2 位棕榈酸甘油三酯的含量，目标产品含Sn-2位棕榈酸甘油酯以质量计≥40％，副产品含Sn-2位DHA甘油酯以质量计≥35％。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，对本发明的实施方式作进一步地详细描述。

实施例1，本发明提供一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法，包括如下操作步骤：

S1：利用筛选的吾肯氏壶藻，采用优化的发酵培养基以及优化的工艺步骤、条件，发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约100小时，制备目标产物发酵液；

S2：发酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到15％；

S3：将浓缩发酵液加入酶，以便让裂壶藻细胞破壁，然后加入柠檬酸，调节物料PH达到3.5，再升温至85℃，经离心机分离脱除水以及溶解于水的固形物、机械杂质，得到粗DHA藻油；

S4：粗DHA藻油先经脱胶中和，再经冬化、干法分提，从而得到目标产品富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油。冬化条件：在36℃下停留时间12小时，第一级干法分提条件：在温度15℃下养晶时间12小时；第二级干法分提的条件为：在7.5℃下养晶时间12小时，二级干法分提的固脂合并为一个组分。

富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油，占比73％；富含Sn-2位DHA的DHA藻油为副产品之一，占比20％，高熔点含蜡DHA藻油为副产品之二，占7％。相关指标如下：

实施例2，本发明提供一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法，包括如下操作步骤：

S1：利用筛选的吾肯氏壶藻，采用优化的发酵培养基以及优化的工艺步骤、条件，发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约110小时，制备目标产物发酵液；

S2：发酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到20％；

S3：将浓缩发酵液加入酶，以便让裂壶藻细胞破壁，然后加入柠檬酸，调节物料PH达到5.0，再升温至85℃，经离心机分离，脱除水以及溶解于水的固形物、机械杂质，得到粗DHA藻油；

S4：粗DHA藻油再经脱胶中和、冬化、干法分提，从而得到主产品富含Sn-2 位棕榈酸的DHA藻油，冬化条件：在35℃下停留时间12小时，第一级干法分提条件：在温度10℃下养晶时间12小时；第二级干法分提的条件为：在3℃下养晶时间12小时，二级干法分提的固脂合并为一个组分；

主产品为富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油，占比69.7％；副产品之一为富含 Sn-2位DHA的DHA藻油，占比21.3％，副产品之二为含蜡DHA藻油，占9％；相关指标如下：

实施例3，本发明提供一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法，包括如下操作步骤：

S1：利用筛选的裂壶藻菌株，采用优化的发酵培养基以及优化的工艺步骤、条件，发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约130小时，制备目标产物发酵液；

S2：发酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到25％；

S3：将浓缩发酵液送入喷雾干燥塔进行干燥脱水，然后送入双螺旋榨油机，得到压榨DHA藻油；压榨并经过亚临界萃取，得到萃取DHA藻油，合并压榨与萃取得到的粗DHA藻油；

S4：粗DHA藻油，先经脱胶中和，再经冬化，冬化条件：温度21℃、停留时间12小时；

检测Sn-2位棕榈酸占总棕榈酸含量达到40.6％，副产品为高熔点含蜡DHA 藻油，相关指标参阅下表：

实施例4，本发明提供一种富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油的生产方法，包括如下操作步骤：

S1：利用筛选的裂壶藻菌株，采用优化的发酵培养基以及优化的工艺步骤、条件，发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约120小时，制备目标产物发酵液；

S2：发酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到30％；

S3：将浓缩发酵液送入喷雾干燥塔进行干燥脱水，然后送入双螺旋榨油机，得到一部分DHA藻油；压榨饼渣经过亚临界萃取，也得到一部分DHA藻油，合并压榨与萃取得到的粗DHA藻油；

S4：粗DHA藻油，先经脱胶，再经冬化，冬化条件：温度20℃、停留时间 12小时；

检测冬化DHA藻油的Sn-2位棕榈酸占总棕榈酸含量达到42.0％，副产品为含蜡DHA藻油，相关指标参阅下表：

富含Sn-2位棕榈酸的DHA藻油，简称为UPU型DHA藻油，U表示多不饱和脂肪酸，P表示棕榈酸，DHA表示二十二碳六烯酸。

虽然在上文中已经参考实施方式对本发明进行了描述，然而在不脱离本发明的范围的情况下，可以对其进行各种改进并且可以用等效物替换其中的部件。尤其是，只要不存在结构冲突，本发明所披露的实施方式中的各项特征均可通过任意方式相互结合起来使用，在本说明书中未对这些组合的情况进行穷举性的描述仅仅是出于省略篇幅和节约资源的考虑。因此，本发明并不局限于文中公开的特定实施方式，而是包括落入权利要求的范围内的所有技术方案。