一种具有保肝活性的微囊粉

技术领域

本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种具有保肝活性的微囊粉。

背景技术

肝脏是人体内最大的代谢器官，在常量营养素的转化以及化学品和药物的清除中起着核心作用。肝损伤是指各种原因引起的肝脏组织学及功能的病变，长期的损伤状态可发展为肝纤维化、肝硬化、肝衰竭、肝癌等。肝损伤据发病原因可分为药物性肝损伤、化学性肝损伤、免疫性肝损伤、酒精性肝损伤等。肝损伤的发病率逐年上升，中药具有适应证广，多途径多靶点的作用优势，许多药物及活性成分均被证实有保肝作用，如枸杞多糖，可起效于肝损伤的多个阶段。

作为生命活动的四大基本物质之一，多糖正在改变人类对生命现象和复杂疾病的认知。大量文献报道表明，多糖不仅承载着细胞生长、能量代谢、信号传导等生理功能，而且在治疗神经性、精神性、代谢性等复杂疾病方面呈现出非凡的优势。与小分子不同，多糖是由相同或不同单糖通过糖苷键聚合而成的生物大分子，分子量从几千到数十万，结构十分复杂。不同分子量的多糖具有不同的生物活性和药理作用，如免疫调节、抗氧化、保护肝脏、抗病毒等。

橄榄油含有多种亲水、亲脂和两亲的生物活性化合物，比如酚类、角鲨烯、植物甾醇、生育酚等，这些活性成分普遍具有抗氧化、抗癌、降脂、保肝等多种生物活性，但同时这些化合物大多具有怕光、怕热、易挥发、不易储藏等特性。日常加工或储藏不当会引起活性成分损失或转变，从而使橄榄油品质下降。

目前橄榄油主要还是以初榨橄榄油为主要产品形态，不易长期储藏；且枸杞多糖主要以片剂、粉剂为主要产品形态，产品形态单一，市场竞争力较弱。

发明内容

本发明的目的是提供一种微囊粉，该微囊粉具有保肝活性且活性物质可稳态保持。

本发明所提供的微囊粉，包括芯材和壁材，其中芯材为鱼籽油和橄榄油，壁材为低聚异麦芽糖、枸杞多糖和酪蛋白酸钠；

更进一步的，所述的壁材中还包含有乳化剂，其中一个实施例的具体记载为单双甘油脂肪酸酯。

进一步的，所述芯材中鱼籽油和橄榄油的比例为1:7～10；

进一步的，所述壁材中酪蛋白酸钠的含量为2～4％；

进一步的，所述壁材中低聚异麦芽糖的含量为40～70％；

进一步的，所述壁材中枸杞多糖的含量为20～50％；

进一步的，所述乳化液中单双甘油脂肪酸酯的添加量为1～3％。

所述枸杞多糖的制备方法，本发明实施例的制备方法如下：

1)取干燥枸杞粉碎获得枸杞粉末；

2)取枸杞粉末，加入60～80％乙醇，料液比为1:8～15，回流提取0.5～2h，提取1～2次后，离心去除上清液，残渣用水回流提取1～3h。

3)水提取液用160Da的膜过滤浓缩后，浓缩液喷雾干燥得到枸杞多糖。

本发明所提供的微囊粉的制备方法，包括以下步骤：

1)将壁材和乳化剂加入到水中，得到水相，其中壁材与水的比例为1:1～2，乳化温度为55℃，乳化时间为30～50min；

2)将芯材加入到水相中，高压均质，得到乳状液，所述高压均质的压力为40MPa，均质时间为30～60min，均质次数为3次；

3)用喷雾干燥机对乳化液进行喷雾干燥，所述喷雾干燥机的进风温度为170℃，出风温度为90℃。

本发明通过优化乳化剂添加量、芯材和壁材的比例、乳化温度，确定最佳的微囊粉制备工艺，同时引入枸杞多糖作为壁材的组成部分，使得微囊粉具有保肝活性。所制备的微囊粉性能稳定、微囊粉活性良好。

附图说明

图1：微囊粉溶解后稳定性照片图。

具体实施方式

本发明实施例所使用的鱼籽油为鳕鱼的鱼籽经亚临界萃取得到，富含DHA和EPA；但还可以使用市售的鱼籽油产品。

所述的橄榄油为豆果、贝拉、科拉蒂、佛奥、柯基、鄂植8号、皮瓜尔等品种的油橄榄果榨油所得，富含包含羟基酪醇、角鲨烯等多种活性物质。

所述枸杞多糖的制备方法，本发明实施例的制备方法如下：

1)取干燥枸杞，粉碎。

2)取枸杞粉末，加入60～80％乙醇，料液比为1:8～15，回流提取0.5～2h，提取1～2次后，离心去除上清液，残渣用水回流提取1～3h。

3)水提取液用160Da的膜过滤浓缩后，浓缩液喷雾干燥得到枸杞多糖。

下面通过具体实施例对本发明做详细的说明。

实施例1

取干燥枸杞，粉碎；取枸杞粉末，加入80％乙醇回流提取1h(料液比1:10)，提取后，离心去除上清液；再加入60％乙醇回流提取1h(料液比1:10)，提取后，离心去除上清液；残渣用水回流提取1.5h；水提取液用160Da的膜过滤浓缩后，浓缩液喷雾干燥得到枸杞多糖。

细胞活力实验：取HepG2细胞(5×10

多糖单糖组成分析：分别对本实施例制备得到的枸杞多糖和市售枸杞多糖进行单糖组成分析，本实施例制备得到的枸杞多糖由半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸组成，且阿拉伯糖、木糖和半乳糖醛酸为其主要单糖组成；而市售枸杞多糖的主要单糖组成为葡萄糖和果糖，且葡萄糖含量特别高，基本看不到其他单糖。据文献报道，枸杞多糖发挥活性主要是糖醛酸的作用，所以多糖中糖醛酸的含量对多糖活性影响较大，这可能是本实施例制备得到的枸杞多糖对乙醇处理的HepG2细胞肝损伤的修复作用显著优于市售枸杞多糖的原因。

实施例2

将由低聚异麦芽糖(58％)、枸杞多糖(40％)和酪蛋白酸钠(2％)组成的壁材加入到同等量的水中，再加入1.5％的单双甘油脂肪酸酯，在55℃水浴条件下，乳化40min；再加入由鱼籽油(10％)和初榨橄榄油(90％)组成的芯材，高压均质3次，每次35min，得到乳状液。将乳状液喷雾干燥，得到微囊粉。

(1)取10mL乳状液在1000r/min转速下离心10min，未观察到明显分层，说明乳状液稳定性良好。

(2)准确称取2g微囊粉，将50mL石油醚分3次加入提取表面油，每次均振荡2min，过滤，合并滤液。将滤液于65℃水浴加热蒸发溶剂，再于105℃烘箱中烘干至恒重。按公式R

(3)包埋率为87.23％。

实施例3

将由低聚异麦芽糖(52.5％)、枸杞多糖(45％)和酪蛋白酸钠(2.5％)组成的壁材加入到1.5倍量的水中，再加入1.5％的单双甘油脂肪酸酯，在55℃水浴条件下，乳化30min；再加入由鱼籽油(12％)和初榨橄榄油(88％)组成的芯材，高压均质3次，每次50min，得到乳状液。将乳状液喷雾干燥，得到微囊粉。

(1)精确称量一定质量的微囊粉，平铺于烘干至恒重的表面皿中，于105℃下烘3h至恒重后称重，用公式R

(2)将样品溶解于小杯中，摇匀后静置30min，观察其溶解性和稳定性情况，样品很快溶解，并静置30min后未出现分层或漂油现象，如图1所示，与其他制备工艺得到的微囊粉相比，本实施例中的微囊粉均匀性、稳定性较好。

实施例4

将由低聚异麦芽糖(58％)、枸杞多糖(40％)和酪蛋白酸钠(2％)组成的壁材加入到1倍量的水中，再加入2％的单双甘油脂肪酸酯，在55℃水浴条件下，乳化45min；再加入由鱼籽油(10％)和初榨橄榄油(90％)组成的芯材，高压均质3次，每次40min，得到乳状液。将乳状液喷雾干燥，得到微囊粉。

(1)制备得到的微囊粉，具有淡淡的橄榄油香味，流动性良好，没有出现结块现象，也没有出现分层或漂油现象，溶液体系稳定，且放置一周后仍保持稳定，没有明显的分层或漂油现象。

(2)制备得到的微囊粉灭菌分装后放置在干燥器中，每两个月拿出一份溶解观察其是否出现结块、分层或漂油现象，连续观察24个月，均未出现上述现象，说明制备的微囊粉可在干燥条件下至少储存24个月。

实施例5

将由低聚异麦芽糖(53％)、枸杞多糖(45％)和酪蛋白酸钠(2％)组成的壁材加入到1倍量的水中，再加入1.5％的单双甘油脂肪酸酯，在55℃水浴条件下，乳化50min；再加入由鱼籽油(10％)和初榨橄榄油(90％)组成的芯材，高压均质3次，每次50min，得到乳状液。将乳状液喷雾干燥，得到微囊粉。

(1)细胞活力实验：取HepG2细胞(5×10

(2)细胞AST和ALT水平测定：AST和ALT是反映肝细胞状况的主要酶，这两种酶的水平是评估肝细胞损伤程度的间接指标。AST和ALT一般只存在于细胞内，当细胞膜受到刺激时，AST和ALT被释放到细胞外，导致培养基中AST和ALT水平增加。因此，细胞培养基中AST和ALT的水平可以反映肝细胞的损伤。取密度为1.5×10

(3)动物实验活性验证：1)选择成年小鼠(18－22克)，单一性别，每组8-12只。实验设三个剂量组、一个空白对照组和一个模型对照组，以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组，另设两个剂量组。用CCl