一种控制水果中真菌毒素的方法

技术领域

本发明涉及食品安全技术领域，尤其涉及一种控制水果中真菌毒素的方法。

背景技术

水果采后容易受到病原菌的侵染发生腐烂。部分真菌侵染过程中产生真菌毒素等次生代谢产物，引起水果及其加工制品的污染，造成食品安全问题。污染水果的主要真菌毒素包括棒曲霉素(patulin，也叫展青霉素)，链格孢毒素、单端孢霉烯族毒素等。其中，棒曲霉素是污染水果及其加工制品的主要毒素，具有急性和慢性毒性，危害神经系统、消化系统、生殖系统等。

控制水果及其加工制品中的真菌毒素污染对保障食品安全具有重要意义。

发明内容

(一)要解决的技术问题

鉴于上述提及的真菌毒素污染水果及其加工制品所造成的食品安全问题，本发明提及了一种控制水果中真菌毒素的方法，其实现了减少水果及其加工制品中的真菌毒素的含量。

(二)技术方案

为了达到上述目的，参考图5，本发明采用的主要技术方案为，本发明提及了一种控制水果中真菌毒素的方法，包括：

S110：配制含有扩展青霉菌的孢子悬浮液；

S120：将孢子悬浮液接种至目标载体；

S130：将目标载体在低氧条件下进行贮藏。

进一步地，低氧条件为，控制目标载体所在环境的氧气浓度为1％-10％。

进一步地，低氧条件为，控制目标载体所在环境的氧气浓度为1％。

进一步地，方法还包括：

S140：将目标载体置于低氧的环境条件下贮藏。

进一步地，目标载体的类别包括：水果。

进一步地，低氧条件为，控制目标载体所在环境的氧气浓度为1％-10％，余量气体包括：二氧化碳、氮气。

进一步地，余量气体中二氧化碳的浓度为5％。

进一步地，将目标载体在低氧条件下进行贮藏，控制目标载体的贮藏温度为0℃-10℃。

进一步地，将目标载体在低氧条件下进行贮藏，控制目标载体的贮藏温度为0℃。

(三)有益效果

本发明的有益效果是：本申请提及了一种控制水果中真菌毒素的方法，包括：配制含有扩展青霉菌的孢子悬浮液，将孢子悬浮液接种至目标载体，将目标载体在低氧条件下进行贮藏。其中，控制目标载体所在环境的氧气浓度为1％-10％，目标载体的类别包括：水果。

本申请通过低氧离体条件下处理扩展青霉菌，在氧气浓度极低的条件下，扩展青霉菌的生长状态相较正常条件受到严重抑制，菌丝生物量减少，棒曲霉素产量极大降低。因此，通过对水果进行低氧处理，低氧环境能够影响侵染水果的扩展青霉病菌的生长和棒曲霉素合成过程，最终导致水果中棒曲霉素污染降低，进而减少因腐烂而造成食品安全风险，同时减少了食品浪费问题。

附图说明

图1为本发明提及的一种控制水果中真菌毒素的方法中低氧处理对P.expansum产毒的影响示意图；

图2为本发明本发明提及的一种控制水果中真菌毒素的方法中接种不同浓度P.expansum后桃果实不同贮藏条件下的发病情况的柱状图；

图3为本发明本发明提及的一种控制水果中真菌毒素的方法中接种不同浓度P.expansum后桃果实不同贮藏条件下的发病情况示意图；

图4为本发明本发明提及的一种控制水果中真菌毒素的方法中接种不同浓度P.expansum后桃果实不同贮藏条件下的毒素积累情况示意图。

图5为本发明本发明提及的一种控制水果中真菌毒素的方法的流程图。

具体实施方式

为了更好的解释本发明，以便于理解，下面结合附图，通过具体实施方式，对本发明作详细描述。

当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。

在这些实施例中，除非另有指明，所述的份和百分比均按质量计。“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位，1份可表示任意的单位质量，如可以表示为1g，也可表示3.527g等。假如我们说A组分的质量份为a份，B组分的质量份为b份，则表示A组分的质量和B组分的质量之比a：b。或者，表示A组分的质量为aK，B组分的质量为bK(K为任意数，表示倍数因子)。不可误解的是，与质量份数不同的是，所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)。

下面将结合附图以实施例的方式阐述本发明的技术方案，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。

实施例1：低氧对离体条件下扩展青霉产毒的影响

方法：

1.孢悬液配制

取25℃下培养10-14d的P.expansum(扩展青霉菌)孢子加入含有1mL无菌水的离心管中，涡旋振荡混合均匀，经无菌滤布过滤，利用细胞计数器进行计数，然后用无菌水将孢子悬浮液稀释至所需浓度。

2.低氧处理

收取P.expansum孢子，并配制浓度为1×10

3.棒曲霉素检测

高效液相色谱仪(Waters)备有双向HPLC泵(Waters 1525)、自动进样器(Waters2695)以及紫外检测器(Waters 2489)，色谱柱采用ODS反相柱(GL Sciences，C18柱，5μm，250×4.6mm)。流动相为乙腈和水(乙腈:水＝1:9v/v)检测波长为276nm。

实施例2：低氧对离体条件下扩展青霉产毒的影响

方法：

1.孢悬液配制

取25℃下培养10-14d的P.expansum(扩展青霉菌)孢子加入含有1mL无菌水的离心管中，涡旋振荡混合均匀，经无菌滤布过滤，利用细胞计数器进行计数，然后用无菌水将孢子悬浮液稀释至所需浓度。

2.低氧处理

收取P.expansum孢子，并配制浓度为1×10

3.棒曲霉素检测

高效液相色谱仪(Waters)备有双向HPLC泵(Waters 1525)、自动进样器(Waters2695)以及紫外检测器(Waters 2489)，色谱柱采用ODS反相柱(GL Sciences，C18柱，5μm，250×4.6mm)。流动相为乙腈和水(乙腈:水＝1:9v/v)检测波长为276nm。

实施例3：低氧对离体条件下扩展青霉产毒的影响

方法：

1.孢悬液配制

取25℃下培养10-14d的P.expansum(扩展青霉菌)孢子加入含有1mL无菌水的离心管中，涡旋振荡混合均匀，经无菌滤布过滤，利用细胞计数器进行计数，然后用无菌水将孢子悬浮液稀释至所需浓度。

2.低氧处理

收取扩展青霉(P.expansum)孢子，并配制浓度为1×10

3.棒曲霉素检测

高效液相色谱仪(Waters)备有双向HPLC泵(Waters 1525)、自动进样器(Waters2695)以及紫外检测器(Waters 2489)，色谱柱采用ODS反相柱(GL Sciences，C18柱，5μm，250×4.6mm)。流动相为乙腈和水(乙腈:水＝1:9v/v)检测波长为276nm。

对比例1：低氧对离体条件下扩展青霉产毒的影响

方法：

1.孢悬液配制

取25℃下培养10-14d的P.expansum(扩展青霉菌)孢子加入含有1mL无菌水的离心管中，涡旋振荡混合均匀，经无菌滤布过滤，利用细胞计数器进行计数，然后用无菌水将孢子悬浮液稀释至所需浓度。

2.低氧处理

收取扩展青霉(P.expansum)孢子，并配制浓度为1×10

3.棒曲霉素检测

高效液相色谱仪(Waters)备有双向HPLC泵(Waters 1525)、自动进样器(Waters2695)以及紫外检测器(Waters 2489)，色谱柱采用ODS反相柱(GL Sciences，C18柱，5μm，250×4.6mm)。流动相为乙腈和水(乙腈:水＝1:9v/v)检测波长为276nm。

参考图1，环境中的氧气浓度降低减少了P.expansum棒曲毒素的产生，1％O

实施例4：低氧对活体条件下扩展青霉产毒的影响

1.果实接种

挑选成熟、无机械损伤、大小颜色均一的桃果实，将果实浸泡于2％次氯酸钠溶液2min，消毒处理后立即用清水冲洗残留的次氯酸钠溶液。同时，放置果实的塑料框也进行同样的消毒处理。在果实的腰部用接种针刺伤，伤口大小保持为宽2mm×深5mm。每个果实2个伤口。按照上面的方法配制P.expansum孢悬液(1×10

2.棒曲霉素的提取和测定

用消过毒的药匙将果实病斑全部挖出，用手术刀切成小块并于液氮中充分研磨，病斑周围1cm的果肉组织用手术刀切出，切成小块后同样经液氮研磨备用。称取5g果实样品于50mL离心管中，加7.5mL 10mmol/L的柠檬酸-乙腈溶液，恒温条件下震荡10min，加入1.5g氯化钠，继续涡旋振荡10min，5000r/min离心5min，吸取3mL有机相，加入150mg无水硫酸镁，涡旋振荡30s，常温静置5min后，过0.45μm有机滤膜于样品瓶中，待测分析。棒曲霉素的测试参考上述方法。

参考图2、图3和图4，对于接种相同孢子浓度的果实，气调组果实的病斑直径显著小于对照。2种气调条件下，接种1×10

接种后对照果实病斑及病斑周围1cm果肉组织中的棒曲霉素含量均显著高于2种气调条件下贮藏的果实。2种气调条件下，不同接种浓度的果实于5％O

在本发明的描述中，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。

在本发明的描述中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。

在本发明中，除非另有明确的规定和限定，第一特征在第二特征“上”或“下”，可以是第一和第二特征直接接触，或第一和第二特征通过中间媒介间接接触。而且，第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”，可以是第一特征在第二特征正上方或斜上方，或仅仅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”，可以是第一特征在第二特征正下方或斜下方，或仅仅表示第一特征水平高度低于第二特征。

在本说明书的描述中，术语“一个实施例”、“一些实施例”、“实施例”、“示例”、“具体示例”或“一些示例”等的描述，是指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行改动、修改、替换和变型。