化合物的制备方法和/或纯化方法

技术领域

本发明涉及包含化合物的制备方法和/或纯化方法，具体涉及高纯度化合物的制备方法。

背景技术

冠状病毒在系统分类上属冠状病毒属(Coronavirus)，冠状病毒是具有包膜的正链RNA病毒。由于2003年严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome,SARS)和2012年中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome,MERS)的爆发，冠状病毒逐渐成为病毒学领域的一个研究热点。新型冠状病毒肺炎(CoronaVirus Disease2019)为新发急性呼吸道传染病，由SARS-CoV-2(又称2019-nCoV)引发，其自2019年12月底爆发，截至当前已经造成全球超2亿人感染，超400万人死亡，目前已成为全球性重大公共卫生事件，对全球社会经济也带来了重大的影响。

2019新型冠状病毒(2019-nCoV)是以前从未在人类中发现的冠状病毒新毒株。目前，针对新型冠状病毒感染，临床上以支持治疗为主，无特异抗病毒药物可用。鉴于疫情的严峻形势，目前迫切需要切实有效的治疗手段。

发明内容

现有技术公开6-乙硫基-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮化合物的收率小于50％，且纯度不满足要求，后处理操作复杂，不适合工业化大生产，现有技术中无高收率制备该化合物的方法。

同时发明人还发现，现有技术中6-乙硫基-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮纯度较低，纯度小于90％，采用纯度小于90％的6-乙硫基-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮制备(6E)-6-[(6-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)亚氨基]-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪烷-2,4-二酮时，会出现较难分离的下式结构的杂质1，影响产品质量。

以上所述，本发明提供了解决上述问题的技术方案。

在本发明的第一方面，提供了一种制备式(II)化合物的方法，

其中

R’和R

X为卤素；

n为1-5；

其特征在于，包含以下步骤：

(i)使式(IV)化合物

其中，

R’、X和n如式(II)中所定义；

与式(V)化合物

其中，

R

在催化剂的存在下反应，得到式(II)化合物；

其中所述催化剂和/或所述式(V)化合物是分批加入；

其中所述式(V)化合物是游离碱形式或其盐形式。

在本发明的第二方面，提供了一种纯化式(II)化合物的方法，

其中

R’和R

X为卤素；

n为1-5；

其特征在于，包含以下步骤：

(ii)将待纯化的式(II)化合物在混合溶剂中重结晶。

在本发明的第三方面，提供了一种式(II)化合物

其中

R’和R

X为卤素；

n为1-5；

在制备式(I)化合物

其中

R

X为卤素；

n为1-5；的方法中的应用，其中式(II)化合物的纯度≥95.0％。

与现有技术相比，本发明的制备方法和/或纯化方法可得到高收率(70％-85％)和/或高纯度(≥95.0％)的目标产物即式(II)化合物。

附图说明

图1是对比实施例1制备的化合物的HPLC图谱。

图2是对比实施例4制备的化合物的HPLC图谱。

图3是实施例3制备的化合物的HPLC图谱。

图4是实施例4制备的化合物的HPLC图谱。

图5是实施例9制备的化合物的HPLC图谱。

具体实施方式

出于本发明的目的，除非另外说明，本申请所使用的术语具有以下含义：

术语“卤素”、“卤素原子”或“卤代”表示氟、氯、溴和碘，特别是溴、氯或氟，优选氯或氟。

术语“C

术语“C

术语“C

术语“二C

术语“C

本申请所提及的化合物可以游离形式，例如作为游离碱或作为游离酸或作为两性离子存在，或者可以盐的形式存在。所述盐可以为药剂学中常用的任何盐，有机或无机加成盐，特别是任何生理学上可接受的有机或无机加成盐。

出于本发明的目的，优选的盐为本申请所提及的化合物的生理学上可接受的盐。然而，也包括本身不适于药剂学应用但例如可用于本文所述化合物的分离或纯化的盐。

术语“生理学上可接受的盐”是指本文所述化合物的相对无毒性的、无机或有机酸加成盐，例如参见S.M.Berge等人，“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.1977,66,1-19。

本申请所提及的化合物的生理学上可接受的盐涵盖无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、二硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸的盐，或与有机酸形成的盐，所述有机酸为例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、十二烷酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)-苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡萄糖酸、辛烷酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、双羟萘酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、特戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、泛酸、粘液酸、琥珀酸、草酸、丙二酸、丁二酸、苹果酸、己二酸、褐藻酸、马来酸、富马酸、葡萄糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚糖酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸或硫氰酸。特别优选的是富马酸盐。其实例包括本申请所提及的化合物的所有可能的盐，其为单盐或所述盐以任何比例的任何混合物，例如3:1、2:1、1:1、1:2。

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，所述式(V)化合物是游离碱形式。

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，所述式(V)化合物与式(IV)化合物的摩尔比为3:1至1:2，优选为2:1至1:1。

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，所述催化剂为碱，例如选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、甲醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾，或其任意混合物。

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，所述催化剂与式(IV)化合物的摩尔比为4:1至1:2，优选为3:1至1:1。

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，所述分批加入为分两次以上(如两次、三次或更多次)加入，优选地，每次加入量可相同或不同。优选地，分批加入为在不同的时间点分两次以上加入相同或不同量。

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，步骤(i)的反应温度在20℃至60℃范围内。优选地，步骤(i)的反应首先在室温(如20-30℃)进行，随后在升高的温度(例如40-60℃或者)进行。

在一个具体实施方案中，在本发明的方法中，步骤(i)的反应在溶剂中进行，例如所述溶剂为有机溶剂，其可选自N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基亚砜(DMSO)、乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMAC)、C

在一个具体的实施方案中，本发明的方法还包括以下步骤：

(ii)将待纯化的式(II)化合物在混合溶剂中重结晶。

在一个具体的实施方案中，本发明的方法还包括以下步骤：

(i')将步骤(i)的反应混合物过滤，取滤液，并将滤饼分散在第一溶剂中，再次过滤，合并两次滤液；

(i”)将滤液降温(例如降温至0-5℃)，加入氯化铵水溶液，任选地搅拌，随后过滤，并将滤饼分散在第二溶剂中，任选地搅拌，再次过滤；

(i”')将滤饼溶解在第三溶剂中，然后用第四溶剂萃取，任选地干燥，随后除去第三溶剂，得到待纯化的式(II)化合物。

具体地，步骤(i')-(i”')在步骤(i)之后，和/或，在步骤(ii)之前。

具体地，步骤(i”')还包括将待纯化的式(II)化合物进行干燥。

具体地，步骤(i”')中的萃取可为一次或多次。

具体地，过滤为抽滤；和/或，干燥为用干燥剂(如无水硫酸钠或无水硫酸镁)干燥或真空干燥。

具体地，第一溶剂、第二溶剂、第三溶剂和第四溶剂可相同或不同，其可选自水、二甲基甲酰胺(DMF)、C

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，步骤(ii)中混合溶剂为二氧杂环己烷、甲酸甲酯、四氢呋喃、二C

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，重结晶通过以下操作实现：使待纯化的式(II)化合物溶解在混合溶剂中的一种溶剂中，然后加入至混合溶剂中的另一种溶剂中，降温析出重结晶固体。

具体地，重结晶通过以下操作实现：使待纯化的式(II)化合物分散在混合溶剂中的一种溶剂(如四氢呋喃)中，加热搅拌至完全溶解，然后加入至混合溶剂中的另一种溶剂(如异丙醚)中，降温析出重结晶固体。

在一个具体的实施方案中，在本发明的方法中，步骤(ii)还包括将所得重结晶固体进行过滤，优选抽滤；和/或，步骤(ii)还包括将重结晶固体进行干燥，优选真空干燥。

在一个具体的实施方案中，式(II)化合物的纯度≥95.0％，优选≥98.0％。具体地，纯度为HPLC纯度。

在一个具体的实施方案中，在式(II)化合物中，X为氟或氯；和/或，n为2-4。

在一个具体的实施方案中，式(II)化合物为

在一个具体实施方案中，在本发明的式(II)化合物在制备式(I)化合物的方法中的应用中，其中式(I)化合物的纯度≥90.0％，和/或，收率为≥60.0％。

在一个具体实施方案中，在本发明的式(II)化合物在制备式(I)化合物的方法中的应用中，其中制备式(I)化合物的方法包括以下步骤：(a)使式(II)化合物与式(III)化合物反应，得到式(I)化合物。

具体地，步骤(a)在溶剂中进行，例如所述溶剂为有机溶剂，其可选自乙酸乙酯、甲酸甲酯、二C

具体地，步骤(a)在催化剂存在下进行。优选地，式(II)化合物与催化剂的摩尔比在1:1至1:3范围内，例如1:2。优选地，催化剂为碱，如六甲基二硅基氨基锂(LHMDS)、叔丁醇钾或二异丙基氨基锂。具体地，碱为六甲基二硅基氨基锂(LHMDS)、叔丁醇钾或二异丙基氨基锂。优选地，式(II)化合物与碱的摩尔比在1:1至1:3范围内，例如1:2。优选地，碱通过滴加加入，更有选地，碱通过缓慢滴加加入。

具体地，步骤(a)在0-55℃范围内进行；优选地，步骤(a)首先在低温(0-5℃)进行，随后在升高的温度(例如室温或更高的温度，如20-25℃或更高温度)进行。或者，优选地，步骤(a)在升高的温度(如20-30℃)进行。

具体地，式(II)化合物与式(III)化合物的摩尔比在1:1至1:1.5范围内，优选在1:1.1至1:1.4范围内，例如为1:1.2或1:1.3。

具体地，制备式(I)化合物的方法还包括纯化步骤。优选地，所述纯化步骤为柱层析和/或重结晶步骤。

具体地，在式(I)化合物中，X为氟或氯；和/或，n为2-4，例如3。

具体地，式(I)化合物为

本发明人发现，式(I)化合物中的较难纯化的杂质1，可通过控制参与反应的式(II)化合物的纯度来控制，当采用纯度≥95.0％的式(II)化合物制备得到的式(I)化合物时，式(I)化合物则不包含杂质1。杂质1其结构如下所示：

本文述及的各实施方案或者不同优选级别的方案，除非另有说明，均可任意组合。

以下通过实施例形式举例说明本发明，但不应将此理解为本发明主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中使用的化合物或试剂可通过商业途径购得，或者通过本领域技术人员已知的常规方法制备得到；所使用的实验仪器可通过商业途径购得。

实施例

所有的市售试剂和溶剂均未进行进一步纯化。反应通过薄层色谱法或分析型液相色谱/质谱(LC/MS)进行监测，所述薄层色谱是在烟台江友硅胶板(HSGF254)上进行。柱层析使用鼎康硅胶预包装的硅胶和层析柱上完成。纯度是通过HPLC方法在AgilentTechnologies1260Infinity上测得，测试条件为：色谱柱：C18柱；进样体积：10μl；流动性：水+乙腈；95:5持续25min→10:90持续6min→95:5持续5min；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：254nm。

I.制备实施例

对比实施例1

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)、3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.99g,11.8mmol)和碳酸钾(3.27g,23.6mmol)在DMF(23mL)中的混合物在60℃搅拌3.5h。将反应混合物冷却至室温并用NH

对比实施例2

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)、3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.99g,11.8mmol)和碳酸钾(3.27g,23.6mmol)在DMF(23mL)中的混合物在60℃搅拌3.5h。将反应混合物冷却至室温并用NH

对比实施例3

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)、3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(1.99g,11.8mmol)和碳酸钾(3.27g,23.6mmol)在DMF(23mL)中的混合物在60℃搅拌3.5h。将反应混合物冷却至室温并用NH

对比实施例4

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)、3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(1.99g,11.8mmol)和碳酸钾(3.27g,23.6mmol)在DMF(23mL)中的混合物在60℃搅拌3.5h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例1

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，在60℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，继续在60℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例2

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.39g,8.3mmol)和碳酸钾(2.29g,16.5mmol)，在60℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(0.60g,3.5mmol)和碳酸钾(0.98g,7.1mmol)，继续在60℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例3

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，在60℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(0.60g,3.5mmol)和碳酸钾(0.98g,7.1mmol)，在60℃搅拌30min，然后再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(0.40g,2.4mmol)和碳酸钾(0.65g,4.7mmol)，继续在60℃搅拌2.5h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例4

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)、3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.99g,11.8mmol)和碳酸钾(3.27g,23.6mmol)在DMF(23mL)中的混合物在60℃搅拌3.5h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例5

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，在60℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，继续在60℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例6

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，在20℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，继续在20℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例7

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸铯(3.84g,11.8mmol)，在60℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸铯(3.84g,11.8mmol)，继续在60℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例8

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，在60℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，继续在60℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例9

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，在60℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，继续在60℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

实施例10

将6-乙硫基-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(2.50g,7.88mmol)溶解在DMF(23mL)中，加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，在20℃搅拌30min，再加入3-氯甲基-1-甲基-1H-1,2,4-三唑盐酸盐(1.00g,5.9mmol)和碳酸钾(1.64g,11.8mmol)，继续在20℃搅拌3h。将反应混合物冷却至室温并用NH

II.效果实施例

因(6E)-6-[(6-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)亚氨基]-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪烷-2,4-二酮中存在如下的结构的杂质1，较难分离。

当本发明尝试采用不同纯度的6-乙硫基-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮制备6E)-6-[(6-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)亚氨基]-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪烷-2,4-二酮时，可实现对杂质1的控制，具体方法如下：

将对比实施例2得到的化合物6-乙硫基-3-[(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲基]-1-(2,4,5-三氟苄基)-1,3,5-三嗪-2,4(1H,3H)-二酮(简称“化合物A”，300mg,0.727mmol)和6-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-胺(172mg,0.946mmol)在THF(6mL)中的溶液中，在0℃下滴加LHMDS(1M在THF中,1.46mL,1.46mmol)。将反应混合物在0℃搅拌2.5h，随后在室温下搅拌40min。将反应用NH

采用上述相同制备方法，分别采用对比实施例4、实施例2和实施例8得到的化合物A来制备化合物B。

经分析检测，本发明人发现采用对比实施例2和4得到的纯度为89.7％和92.2％的化合物A制备化合物B时，化合物B仍含有含量≥0.1％的杂质1。与之相比，本发明人意外地发现，当采用实施例2和8得到的纯度为95.8％和98.5％的化合物A得到化合物B时，化合物B中未检测出含有杂质1。因此本发明人发现当采用纯度≥95.0％的化合物A制备化合物B时，能够控制或去除特定的较难分离的杂质1，使制备得到的化合物B不含有该杂质1，提高了化合物B的质量可控性。

以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，应理解，以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明的保护范围，凡在本发明的精神和主旨之内所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围。