一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法

技术领域

本发明属于中药消毒技术领域，具体是指一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法。

背景技术

传染病给世界社会经济秩序、人的生命与健康造成了前所未有的伤害与损失，类似飞机、高铁、地铁、商场、工厂、医院、学校、幼儿园等人员相对聚集的公共环境的空气消毒成为重点，然而目前国内外常用的消毒剂为化学制剂，如过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯、戊二醛、碘、季铵盐、甲醛、84消毒液，虽然化学制剂消毒剂能够有效杀灭致病微生物，但普遍存在毒副作用、刺激性、腐蚀性，不适合或不可以在有人的环境使用且长期使用对生态环境和对人的健康有不利影响，因此现有技术尤其缺乏可以在有人环境使用的安全性能高的空气消毒剂。

经空气传播致病菌所引发的传染性疾病属中医“温病”范畴，中国两千多年前的医著《黄帝内经》中就有预防传染病的记载；晋朝葛洪的《肘后方》记载了“虏疮”（天花）、“狂犬咬”（狂犬病）等，其后的医书对疟疾、麻疹、白喉、水痘、霍乱、痢疾、肺结核等急性传染病及其辨证治疗办法都有明确记载；据《实用中西医结合临床》2003年4月第3卷第2期《中药空气消毒法的研究进展》，用于空气消毒的中药多以挥发性和清热解毒、芳香化湿为主，包括苍术、板蓝根、鱼腥草、大黄、黄连、黄柏、藿香、丁香、细辛、柳叶、山楂核、艾叶、苦荞、槐花、蛇床子、白花蛇舌草、花椒、薄荷、苦参、百部、冰片、薄荷脑、金银花、蒲公英、栀子、甘草、麦冬，等；近十年，采用挥发性的植物（中药）精油作为空气熏蒸消毒剂的研究或文献逐渐增多，包括丁香油、百里香酚、连翘油、艾叶油、茶树油、藿香油，等。

山楂核作为中药已收录在我国2020版药典中，山楂核提取物可应用于消毒、杀菌，例如2022年3月31日，山西省卫健委批准山西白木堂科技有限公司用山楂核提取物生产“净坤R山楂核妇用抗菌凝胶”（第二类消毒产品），但是由于使用山楂核精制备消毒即所需的浓度较高（一般含量在30-50%方可达到消毒标准），而高浓度的使用导致刺激性气味大，因此限制了山楂核提取物在室内有人环境的应用。

柳叶为杨柳科植物垂柳（

因此，亟需一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法，为了解决现有消毒剂难以在有人空间使用的问题，本发明采用山楂核精、柳叶提取物、香芹酚作为消毒主要活性成分，从而降低消毒剂对人体的损害，同时本发明经过再回流和分离获得了无色无刺激性气味的山楂核精，解决了现有技术难以应用山楂核精作为空气型消毒剂使用的技术难题，并采用添加抗氧化剂解决了柳叶提取物易氧化变色的问题，另外，本发明采用了二氧化硅气凝胶吸附香芹酚和食品防腐剂作为柳叶提取物的协同增效剂，显著提高了柳叶提取物的消毒功效，本发明严格按照《消毒技术规范》（2002年版）消毒效果评价方法，进行了中和剂筛选试验和消毒效果的鉴定试验，证明本发明组合物作用30秒对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌的杀灭对数值＞5.00，对白色念珠菌的杀灭对数值＞4.00，对冠状病毒灭活对数值＞4.00，消杀时间快且种类多，符合《消毒技术规范》（2002年版）标准要求，本发明制备的中药消毒组合物，配方和制备方法简单，具有柳叶的自然芳香气味，对人体无刺激、无毒副作用，可以快速清除公共环境空气中存在的新冠肺炎病毒、流感病毒、结核杆菌、嗜肺军团菌等病原菌，可用于家庭、医院、卫生场所等有人的环境和空气消毒。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：本发明提出了一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法，其特征在于：所述中药消毒组合物包括如下原料：山楂核精、柳叶水醇提取物、香芹酚、食品防腐剂和水。

进一步地，所述中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料：山楂核精0.5-3.0%；柳叶水醇提取物10-90%；香芹酚0.1-1.0%；食品防腐剂0.2-1.0%；水余量。

作为本发明进一步优选地，所述中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料：山楂核精0.5%；柳叶水醇提取物90.0%；香芹酚0.2%；食品防腐剂0.3%；水9.0%。

作为本发明进一步优选地，所述中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料：山楂核精0.8%；柳叶水醇提取物10.0%；香芹酚1.0%；食品防腐剂0.2%；水88.0%。

作为本发明进一步优选地，所述中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料：山楂核精1%；柳叶水醇提取物80%；香芹酚0.1%；食品防腐剂0.5%；水18.4%。

作为本发明进一步优选地，所述中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料：山楂核精2%；柳叶水醇提取物90%；香芹酚0.2%；食品防腐剂0.3%；水7.5%。

作为本发明进一步优选地，所述中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料：山楂核精3%；柳叶水醇提取物10%；香芹酚1.0%；食品防腐剂0.2%；水85.8%。

进一步地，所述中药消毒组合物包括如下任一一种的应用：

（1）应用于表面消毒，所述表面包括皮肤表面、物体表面、瓜果蔬菜表面；

（2）应用于消杀大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型流感病毒、冠状病毒的一种或者多种；

（3）应用于预防呼吸道传染病，所述呼吸道传染病的病原菌包括新冠肺炎、流感、结核病、嗜肺军团菌。

此外，本发明还提出了一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物的制备方法，其特征在于：所述中药消毒组合物的制备方法包括如下步骤：

（1）所述山楂核精的制备

将山楂核精原料与蒸馏水按1:1-4的比例混合，在40-65℃条件下减压蒸馏1-3次，得到外观为无色透明的馏出液或外观深茶色的浓缩物，所述馏出液的pH值为2.0-3.0，所述馏出液的有机酸含量为4-9%；

（2）所述柳叶水醇提取物的制备与抗氧化

采摘垂柳树的叶子，自然晾或晒干，用垂柳树的叶子体积为15-20倍的乙醇-水溶液浸泡24小时，所述乙醇-水溶液中乙醇含量为5-10%（v/v），然后在90℃条件下回流提取2小时，压榨过滤，收集滤液；将滤渣加入10倍水，90℃继续回流提取1h，再压榨过滤，收集滤液，合并两次提取所得滤液，制得柳叶水醇粗提取物；所述柳叶水醇提取物的pH值为4.5-5.5；立即加入0.1%（v/v）的柠檬酸和0.1%（v/v）抗坏血酸，可保证柳叶提取物不氧化、不变色，外观可始终保持清透的淡茶水色，如果不加柠檬酸和抗坏血酸，柳叶提取物放置5分钟后即开始变色，1小时后变成深茶色，直接影响外观和使用；搅拌至柠檬酸和抗坏血酸完全溶解，水浴冷却，密封，避光保存；

（3）所述香芹酚的制备

将香芹酚原料与无水乙醇按体积比为1:1混溶，然后使用二氧化硅气凝胶吸附混溶液，经研磨制得含香芹酚的二氧化硅粉即为所述香芹酚；二氧化硅气凝胶是一种具有三维网状结构的纳米材料，粒径尺度于100纳米，同时具有小于100纳米的空间结构，每毫米厚度达10000层纳米孔，可达到较高的载药率，可吸附并通过“自组装”方式形成不易团聚的“纳米香芹酚分散体”，可替代溶剂法溶解香芹酚，将其加入本发明所述中药消毒组合物水溶液中；

（4）所述中药消毒组合物的制备

将步骤（1）中制备的山楂核精、步骤（2）中制备的柳叶水醇提取物和步骤（3）中制备的香芹酚、食品防腐剂、水按配比混合，经均质搅拌，即可得到本发明所述的中药消毒组合物，所述中药消毒组合物的剂型包括水剂、凝胶、固体、粉体。

作为本发明优选地，所述步骤（1）中楂核精原料与蒸馏水的配比按1:1的比例混合，在55-65℃条件下减压蒸馏3次，得到本发明所需的外观为无色透明的2段产物。

作为本发明优选地，所述步骤（2）中所述柳树叶经自然晾干，用20倍乙醇-水溶液浸泡24小时，水溶液中乙醇含量为5%，经提取制得抗氧化不变色的柳叶水醇提取物。

作为本发明优选地，所述步骤（3）中香芹酚的重量量百分比含量为0.1%，具体地，使用的是用纳米二氧化硅气凝胶吸附后的香芹酚，香芹酚是用无水乙醇溶解的液体，乙醇和香芹酚的比例是1:1，二氧化硅气凝胶吸附后的香芹酚经研磨并通过100-200目筛网即可。

作为本发明进一步优选地，所述步骤（4）中食品防腐剂为对羟基苯甲酸乙酯，别名：尼泊金乙酯，使用量是0.25%。

本发明所述中药消毒组合物的构效关系与作用：

所用的山楂核精是经再回流工艺处理的山楂核精分离液，外观无色和无刺激性气味，而未经回流分离的山楂核精原料，有色，刺激性气味大，不利于在室内有人的环境消毒空气；

所用山楂核精在组合物中的作用是协同柳叶提取物杀菌与消毒，与柳叶提取物合用具有相互增效的作用；

所用抗氧化柳叶提取物可减少山楂核精的使用量和刺激性气味；

所用香芹酚对柳叶提取物和山楂核精均有增效和减少用量的作用，所述二氧化硅气凝胶吸附香芹酚方法可替代溶剂法；

所用食品防腐剂对羟基苯甲酸乙酯（别名：尼泊金乙酯）对本发明中药消毒组合物具有防腐和保质的双重作用，同时对冠状病毒具有灭活和增效的作用。

所述中药消毒组合物的消毒效果鉴定方法

本发明所述一种可以在有人环境使用的中药消毒组合物，严格按照中国原卫生部2002年版《消毒技术规范》2.1.1.5.1消中和剂鉴定试验和【附】中和剂初选试验以及2.1.1.5.5中和剂悬液定量鉴定试验操作程序，经中和剂筛选实验，确定本中药消毒组合物消毒效果试验用的中和剂是：3.9%D/E肉汤培养基。

本发明取得的有益效果如下：

（1）本发明中药消毒组合物所用原料来源丰富、廉价，其中，山楂核是生产果品的废弃物；柳叶是自然脱离的废弃物，而且，两种原料在民间均具有较高的认知度，包括可食用和药用及安全性，几乎为家喻户晓，具有成本低，工艺简单，使用方便，易推广和普及的特点；

（2）购回的山楂核精原料经回流和分离工艺处理后，变为无色，刺激性气味显著降低，有利空气消毒剂使用；

（3）本发明通过香芹酚和食品防腐剂的协同增效作用，以及与柳叶提取物的组合应用，显著提高了消毒效果；

（4）采用二氧化硅气凝胶吸附使用香芹酚，不用溶剂和乳化剂即可溶于组合物水溶液中，具有增效作用；

（5）使用食品防腐剂，既可防止产品腐败和变质，又具有增效抗病毒的作用；

（6）本发明所述消毒组合物具有柳叶特有的芳香气味和清新空气的作用，消毒效力近似过氧乙酸或75%酒精，且无易燃风险，可用于家庭、医院、卫生场所等有人的环境与空气消毒；

（7）本发明所述中药消毒组合物，按照《消毒技术规范》（2002年版）中和剂筛选方法获得本发明中药消毒组合物鉴定所需的中和剂，经中和剂鉴定和杀灭试验，确认本发明中药消毒组合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、冠状病毒具有可信的消毒作用与效果，而且，消毒作用时间仅需30秒。

附图说明

图1为柳叶提取物添加与不添加柠檬酸和抗坏血酸外观颜色变化对比。

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用，但不能限制本申请的内容。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试验材料及试验菌株，如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到的。

实施例1

一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法

中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料（100kg级）：山楂核精1%；柳叶水醇提取物80%；香芹酚0.1%；食品防腐剂0.5%；水18.4%。

中药消毒组合物的制备方法具体步骤如下：

步骤1：山楂核精原料的再回流/分离与精制

参照专利申请号为2022116503823的制备方法进行，具体为称取适量购自承德本多宝公司生产的山楂核精原料，测得有机酸含量（以醋酸计）13.48%，酚含量（以愈创木酚计）2.62mg/g，醛含量（以庚醛计）9.0g/100mL，pH值为1.84，然后，称取1kg山楂核精与蒸馏水按质量比1:1的比例混合，在55℃条件下减压蒸馏1次，得到为1kg外观无色透明的馏出液，测得pH值为2.13，有机酸含量为4.35%，即为本发明所用山楂核精溜出液（无色），备用。

另外，在回流分离的过程中得到的深茶色山楂核精为浓缩物，测得pH值为1.93，有机酸含量为9.70%，可作为本发明的备用原料，替代无色透明的馏出液，参考用量为0.25-0.5%。

步骤2：制备抗氧化柳叶提取物

采摘新鲜的柳树叶子（柳叶），自然晾（晒）干，称取3kg干柳叶，用60kg乙醇-水溶液浸泡24小时，其中乙醇含量为5%，柳叶浸泡24小时后，在90℃条件下回流提取2小时，压榨过滤，收集约54kg滤液；将滤渣加入30kg乙醇-水溶液，90℃继续回流提取1小时，再压榨过滤，收集30kg滤液，合并两次提取所得滤液84kg，即为本发明所用的柳叶水醇提取液，提取结束后，即刻在柳叶提取物中加入0.1%柠檬酸和0.1%抗坏血酸，搅拌至溶解，水浴冷却后密封、避光保存，柳叶提取物不氧化、不变色，外观始终保持清透的淡茶水色，测得pH值为5.32，气味芳香，称取80kg柳叶水醇提取液，备用。

如图1所示，柳叶提取物添加与不添加柠檬酸和抗坏血酸外观颜色变化对比，详见图A和图B，其中，A图：添加柠檬酸和抗坏血酸的柳叶提取物，颜色清淡；B图：未添加柠檬酸和抗坏血酸的柳叶提取物，颜色似浓茶水。

步骤3：二氧化硅气凝胶替代溶剂/吸附香芹酚的制备

称取1kg市售二氧化硅气凝胶，测得粒径为80纳米，备用，再称取1kg市售香芹酚商品，然后准备1kg无水乙醇，按1:1比例将无水乙醇和香芹酚混合，再用二氧化硅气凝胶吸附无水乙醇/香芹酚混合液，经研磨机研磨3-5min，使吸附乙醇香芹酚的二氧化硅气凝胶均质，再放入40℃真空干燥箱内干燥，脱除乙醇，可制得香芹酚含量50%的二氧化硅凝胶纳米分散体，过100目筛网，即可用于替代溶剂法溶解香芹酚，称取0.2kg含量50%的二氧化硅凝胶粉吸附的香芹酚，备用。

步骤4：本中药消毒组合物的制备

将所述步骤1、步骤2、步骤3所述的山楂核精精馏回流液（无色分离物）、所述柳叶水醇混提物、二氧化硅吸附的香芹酚、食品防腐剂、蒸馏水按实施例1配方，称取山楂核精回流分离液1%（1.0kg），柳叶水醇提取物80%(80kg)，二氧化硅气凝胶吸附的香芹酚0.1%(0.2kg)；对羟基苯甲酸乙酯（食品防腐剂）0.5%（0.5kg），蒸馏水18.4%（18.4kg），将称重的原料分别放入均质机内，转速5000/min，均质搅拌15min，即可制得本发明实施例1所述的中药消毒组合物。

实施例2

一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法

中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料（100kg级）：山楂核精0.5%；柳叶水醇提取物90.0%；香芹酚0.2%；食品防腐剂0.3%；水9.0%。

中药消毒组合物的制备方法具体如下：

步骤1：山楂核精原料的再回流/分离与精制

方法同实施例1，取山楂核精原液1kg与蒸馏水按1:1的比例混合，在45℃条件下减压蒸馏3次，得无色透明的2段产物0.5kg，测得pH值为2.02，有机酸含量为8.10%，备用。

步骤2：制备抗氧化柳叶提取物

方法同实施例1，用60kg乙醇-水溶液浸泡4kg干柳叶24小时，其中乙醇浓度为8%，浸泡24小时后，在90℃条件下回流提取2小时，压榨过滤，收集滤液约52kg；再加40kg乙醇-水溶液回流提取1小时，压榨过滤，收集滤液40kg，合并两次滤液，添加0.1%柠檬酸和0.1%抗坏血酸，搅拌至溶解，水浴冷却后密封、避光保存，测得pH值为5.13，气味芳香，备用。

步骤3：二氧化硅气凝胶替代溶剂/吸附香芹酚的制备

方法同实施例1，称取0.4kg含量50%的二氧化硅凝胶粉，备用。

步骤4：本中药消毒组合物的制备

方法同实施例1，按实施例1配方，称取山楂核精回流分离液0.5%（0.5kg），柳叶水醇提取物90%（90kg），二氧化硅气凝胶吸附的香芹酚0.2%(0.4kg)，对羟基苯甲酸乙酯）0.3%（0.3kg），纯净水9.0%（9.0kg），将称重的原料分别放入均质机内，转速4000r/min，均质搅拌20min，即可制得本发明实施例2所述的中药消毒组合物。

实施例3

一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法

中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料（100kg级）：山楂核精0.8%；柳叶水醇提取物10.0%；香芹酚1.0%；食品防腐剂0.2%；水88.0%。

中药消毒组合物的制备方法具体如下：

步骤1：山楂核精原料的再回流/分离与精制

方法同实施例1，取2kg山楂核精与蒸馏水按1:1的比例混合，在55℃条件下减压蒸馏3次，得无色透明的2段产物1.0kg，测得pH值为2.03，有机酸含量为6.14%，备用。

步骤2：制备柳叶提取物

方法同实施例1，用15kg乙醇-水溶液浸泡1kg干柳叶24小时，水溶液中乙醇含量为8%。柳叶浸泡24小时后，在90℃条件下回流提取3h，压榨过滤，收集滤液约13kg；再加10kg乙醇-水溶液回流提取1小时，压榨过滤，收集滤液，合并两次滤液，添加0.1%柠檬酸和0.1%抗坏血酸，搅拌至溶解，水浴冷却后密封、避光保存，测得pH值为5.0，气味芳香，备用。

步骤3：二氧化硅气凝胶替代溶剂/吸附香芹酚的制备

方法同实施例1，称取2.0kg含量50%的二氧化硅凝胶粉，备用。

步骤4：本中药消毒组合物的制备

方法同实施例1，按实施例2配方，称取山楂核精回流分离液0.8%（0.8kg），柳叶水醇提取物10%(10kg)，二氧化硅气凝胶吸附的香芹酚1.0%(2.0kg)；对羟基苯甲酸乙酯（食品防腐剂）0.2%（0.2kg）：纯净水88.0%（88.0kg），将称重的原料分别放入均质机内，转速4000r/min，均质搅拌40min，即可制得本发明实施例3所述的中药消毒组合物。

实施例4

一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法

中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料（100kg级）：山楂核精2%；柳叶水醇提取物90%；香芹酚0.2%；食品防腐剂0.3%；水7.5%。

中药消毒组合物的制备方法具体如下：

步骤1：山楂核精原料的再回流/分离与精制

方法同实施例1，取2.0kg山楂核精与蒸馏水按1:3的比例混合，在55℃条件下减压蒸馏3次，得无色透明的2段产物2.0kg，测得pH值为2.32，有机酸含量为4.54%，备用。

步骤2：制备柳叶提取物

方法同实施例1，称取4kg干柳叶，用80kg乙醇-水溶液浸泡24小时，其中乙醇含量为5%，柳叶浸泡24小时后，在90℃条件下回流提取2小时，压榨过滤，收集约72kg滤液；将滤渣加入40kg乙醇-水溶液，90℃继续回流提取1小时，再压榨过滤，收集约40kg滤液，合并滤液，加入0.1%柠檬酸和0.1%抗坏血酸，搅拌至溶解，水浴冷却后密封、避光保存。测得pH值为5.36，气味芳香。称取80kg柳叶水醇提取液，备用。

步骤3：二氧化硅气凝胶替代溶剂/吸附香芹酚的制备

方法同实施例1，称取0.4kg含量50%的二氧化硅凝胶粉，备用。

步骤4：本中药消毒组合物的制备

方法同实施例1，按实施例3配方，称取山楂核精回流分离液2%（2.0kg），柳叶水醇抗氧化提取物90%(90kg)，二氧化硅气凝胶吸附的香芹酚0.2%(0.4kg)，对羟基苯甲酸乙酯0.3%（0.3kg），纯净水7.5%（7.5kg），将称重的原料分别放入均质机内，转速3000r/min，均质搅拌30min，即制得本发明实施例4所述的中药消毒组合物。

实施例5

一种可在有人空间使用的速效中药消毒组合物及制备方法

中药消毒组合物包括如下重量百分比的原料（100kg级）：山楂核精3%；柳叶水醇提取物10%；香芹酚1.0%；食品防腐剂0.2%；水85.8%。

中药消毒组合物的制备方法具体如下：

步骤1：山楂核精原料的再回流/分离与精制

方法同实施例1，取3.0kg山楂核精与蒸馏水按1:4的比例混合，在55℃条件下减压蒸馏3次，得无色透明的2段产物3.75kg，测得pH值为2.53，有机酸含量为4.01%，备用。

步骤2：制备柳叶提取物

方法同实施例1，用15kg乙醇-水溶液浸泡1kg干柳叶24小时，水溶液中乙醇含量为8%。柳叶浸泡24小时后，在90℃条件下回流提取3h，压榨过滤，收集滤液约13kg；再加10kg乙醇-水溶液回流提取1小时，压榨过滤，收集滤液，合并两次滤液，添加0.1%柠檬酸和0.1%抗坏血酸，搅拌至溶解，水浴冷却后密封、避光保存。测得pH值为5.0，气味芳香，备用。

步骤3：二氧化硅气凝胶替代溶剂/吸附香芹酚的制备

方法同实施例1，称取2.0kg含量50%的二氧化硅凝胶粉，备用。

步骤4：本中药消毒组合物的制备

方法同实施例1，按实施例4配方，称取山楂核精回流分离液3%（3.0kg），柳叶水醇抗氧化提取物10%(10kg)，二氧化硅气凝胶吸附的香芹酚1.0%(2.0kg)，对羟基苯甲酸乙酯0.2%（0.2kg），纯净水85.8%（85.8kg），将称重的原料分别放入均质机内，转速3000r/min，均质搅拌40min，即制得本发明实施例5所述的中药消毒组合物。

性能测试

实验例1

本发明中药消毒组合物用中和剂的筛选实验：

中和剂作用：中和消毒剂的杀菌作用，待达到规定杀菌时间时，加入中和剂停止消毒剂继续杀菌，以评价消毒剂在规定时间内的杀菌效果，防止因试验操作延迟，导致个别实验组消毒剂杀菌时间超过规定时间，而影响杀菌效果评价。

依据《消毒技术规范》（2002年版）2.1.1.5.1消中和剂鉴定试验和【附】中和剂初选试验以及2.1.1.5.5中和剂悬液定量鉴定试验操作程序和方法，对本发明所述中药消毒组合物用中和剂进行了的筛选与鉴定实验，具体如下：

试验样品：实施例1提供的中药消毒组合物试样

试验菌种：大肠杆菌8099、金黄色葡萄球菌ATCC6538，购自北京菌种保藏科技公司；白色念珠菌ATCC10231购自上海保藏生物技术中心。

中和剂：0.1 mol/L PBS溶液；3.9% D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液。

试验方法：参照《消毒技术规范》（2022年版）悬液法定量杀灭试验

试验结果：

表1 0.1mol/L PBS溶液作为中和剂鉴定试验结果

如表1所示，试验结果：依据国标GB/T38502-2020中5.4.4方法进行中和剂鉴定试验，用0.1mol/LPBS溶液作为中和剂，不能有效中和实施例1提供的中药消毒组合物对试验菌的残留作用，且中和产物对试验菌有明显影响。

表2 3.9%D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液作为中和剂鉴定试验结果

如表2所示，试验结果：依据国标GB/T38502-2020中5.4.4方法进行中和剂鉴定试验。用3.9%D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液作为中和剂，可有效中和实施例1消毒组合物对试验菌的残留作用，且中和剂、中和产物对试验菌无明显影响。

表3 3.9%D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液作为中和剂鉴定试验结果

如表3所示，试验结果：依据国标GB/T38502-2020中5.4.4方法进行中和剂鉴定试验。采用3.9%D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液作为中和剂，可有效中和实施例1对试验菌的残留作用，且中和剂、中和产物对试验菌无明显影响。

综上，通过中和剂悬液定量鉴定试验结果得知，0.1mol/LPBS溶液不能作为实施例1的消毒效果实验用中和剂，而3.9%D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液可有效中和实施例1的消毒组合物。据此，本发明申请人将3.9%D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液用作本发明所述消毒剂消毒效果试验的中和剂。

实验例2

本发明制备的中药消毒组合物的消毒速率与效果的试验

（1）本发明制备的中药消毒组合物对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的消杀效果

试验样品：实施例1提供的中药消毒组合物试样。

试验菌种：大肠杆菌8099、金黄色葡萄球菌ATCC6538，购自北京菌种保藏科技公司；白色念珠菌ATCC10231购自上海保藏生物技术中心。

中和剂：0.1 mol/L PBS溶液；3.9%D/E中和肉汤培养基的0.1mol/LPBS溶液。

试验方法：参照《消毒技术规范》（2022年版）悬液法定量杀灭试验。

表4不同浓度的实施例1制备的中药消毒组合物对大肠杆菌的消毒效果试验

有必要说明的是：本发明申请人考虑实用性问题，即：新冠肺炎病毒在空气中和人与人之间的传播速度非常之快，如果是近距离或面对面，新冠病毒的传播速度可以秒计，因此，公共场所急需一种与病毒的传播速度相匹配的无毒的消毒产品，据此，在发明设计消毒产品的消毒作用时间和标准时，将空气消毒剂的最短作用时间设为30

本发明所述中药消毒组合物消毒速率试验见表1、表2，试验结果：对100%无水稀释的实施例1所述消毒剂和80%无水稀释的实施例1所述消毒剂进行消毒效果试验，作用30s，对大肠杆菌的杀灭对数值即可≥5；50%的实施例1的水稀释液，作用1min，对大肠杆菌的杀灭对数值可≥5；30%实施例1的消毒剂水稀释液，作用2min，对大肠杆菌的杀灭对数值亦可≥5；20%实施例1所述消毒剂稀释液，作用10min，对大肠杆菌的杀灭对数值≥5；10%实施例1和5%实施例1所述消毒剂稀释液，作用10min，对大肠杆菌的杀灭对数值仍小于5（不符消毒标准要求）。

表5不同浓度的实施例1制备的中药消毒组合物对金黄色葡萄球菌的消毒效果试验

试验结果：如表5所示，对100%实施例1无水消毒剂、80%实施例1+20%、50%实施例1+50%水、30%实施例1+70%水进行消毒效果试验，作用30s，对金黄色葡萄球菌的杀灭对数值即可≥5；20%实施例1消毒剂+80%纯净水，作用1min；10%实施例1+90%水，作用10min，对金黄色葡萄球菌的杀灭对数值大于5（用于防控新冠肺炎病毒没有实际意义）；5%实施例1+95%水，作用10min，对金黄色葡萄球菌的杀灭对数值小于5（无实用意义）。

（2）本发明制备的中药消毒组合物抗甲型流感病毒活性测试

试验方法为：将96孔细胞培养板中加入MDCK细胞培养液，培养其生长至单层，弃去上清液，用PBS缓冲液洗两遍，每孔加入实施例1-4制得的中药消毒组合物和H1N1病毒液各100μL；另外设空白对照组、病毒对照组，置于37℃、饱和湿度为70%，于5%CO

IC

以药物浓度为X轴，细胞存活率为Y轴，在Origin作图，求出50%细胞存活率对应的浓度则为IC50值。

表6本发明制备的中药消毒组合物处理后的IC50值

如表6所示，本发明实施例1-5所制中药消毒组合物对甲型流感病毒具有杀灭活性。

实验例3中药消毒组合物组分协同作用验证实验

（1）香芹酚与其他组分具有协同增效作用

为了证明本发明中药消毒组合物所用香芹酚和食品防腐剂与其他组分具有协同增效作用，专利申请人对比实施例1与对照组1和对照组2制备的中药消毒组合物对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的消杀效果，对照组1与实施例1的区别仅在于所有组分中不含香芹酚，其余组分、组分含量及制备方法与实施例1相同，具体实验方法参照实验例1；对照组2与实施例1的区别仅在于所有组分中不含山楂核精、柳叶水醇提取物（仅含有香芹酚），其余组分、组分含量及制备方法与实施例1相同，具体实验方法参照实验例1。

如表7所示，试验结果：实施例1制备的中药消毒组合物（100%）的作用30s，对大肠杆菌的杀灭对数值即可达到≥5的消毒标准；然而，对照组1和对照组2作用时间均长达5min，由此可以判断：1）单纯使用还是仅仅使用香芹酚的作用有限、迟缓，杀菌速率明显不及本发明制备的重要消毒组合物混配制剂；2）山楂核精和香芹酚之间存在明显的协同增效关系。

表7香芹酚的增效作用和对大肠杆菌的消毒效果试验

表8香芹酚的增效作用和对金黄色葡萄球菌的消毒效果试验

如表8所示，试验结果：实施例1制备的中药消毒组合物的（100%）作用30s，对金黄色葡萄球菌的杀灭对数值即可达到≥5的消毒标准；然而，不含香芹酚和食品防腐剂的对照组，作用5min才可使金黄色葡萄球菌的杀灭对数值大于5，与试验组比较差异性巨大，因此香芹酚和食品防腐剂可以提高山楂核精和柳叶水醇提取物对金黄色葡萄球菌的杀菌功效。

（2）山楂核精与其他组分具有协同增效作用

为了证明本发明中药消毒组合物所用山楂核精与其他组分具有协同增效作用，专利申请人对比实施例1与对照组1制备的中药消毒组合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及白色念珠菌进行消杀，其中对照组1与实施例1的区别仅在于所有组分中不含山楂核精，对照组2与实施例1的区别仅在于不含中药消毒组合物的柳叶提取物、香芹酚（仅含山楂核精），其余组分、组分含量及制备方法与实施例1相同。

采用2002年版《消毒技术规范》抑菌环（定性）方法，实验对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑制作用，用直径5mm滤纸片吸附去除山楂核精后的制剂，空白对照用滤纸吸附蒸馏水，实验结果见下表：

表9山楂核精的抑菌增效效果分析

抑菌环直径与杀菌率或消毒效果成正比关系，抑菌环直径越大，则杀菌率越高，结果分析表明，具体的抑菌环直径7mm表示有抑菌作用，抑菌环直径10mm表示较强，抑菌环直径20mm表示强，对照组1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有抑菌作用；对白色念珠菌无抑菌环和抑菌作用，且效果减弱，而对照组2对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌无抑制作用，表明山楂核精与柳叶提取物、香芹酚的组合，显著提高了对病原菌的消杀作用，具有协同增效的作用。

（3）柳叶水醇提取物单体的抑菌效果实验

本实验例是将本发明实施1配方中的其它配料全部去除，仅保留柳叶水醇提取物成分，实验方法参照实验例3（2）中进行。

表10实施例1中的柳叶提取物单独使用的抑菌效果实验

结果表明，柳叶水醇提取物单体对大肠杆菌的抑菌环直径为6.0mm、对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径为7.5mm、对白色念珠菌无抑菌环产生，5mm的滤纸片对照无抑菌环，表面生长的菌落数无法计数，由此可判定仅使用实施例1中的柳叶水醇提取物，对大肠杆菌无抑菌作用，对金黄色葡萄球菌的抑制作用微弱，对白色念珠菌无抑制作用，本实验空白对照菌落数无法计数，由此可推断单纯使用柳叶水醇提取物单独使用时杀菌效果不佳。

（4）香芹酚+防腐剂的增效防腐作用实验

需要说明的是，本发明所述中药消毒组合物是一个水溶性植物配方和制剂，如果不添加防腐剂，在炎热的夏季（30-40℃）存放20天，制剂即开始发霉、长霉、颜色变绿并产生异臭味。为此，本发明选用羟基苯甲酸乙酯（别名：尼泊金乙酯）作为防腐剂，在0.2-1.0%的使用范围内，在35℃储存，产品的保质期为3个月。如果将尼泊金乙酯与香芹酚复合使用，防腐保质期可延至18个月。

香芹酚+尼泊金乙酯的增效防腐作用实验例，是将本发明实施1配方中的其它配料全部去除，只保留香芹酚、尼泊金乙酯，分别设实施例1只含香芹酚不含尼泊金乙酯组（对照组1）、实施例1只含尼泊金乙酯不含香芹酚组（对照组2）和香芹酚+尼泊金乙酯组（实施例1），采用自然留样进行防霉和保质期试验，历经春夏秋冬四个季节（18个月），观察产品霉菌滋生、变色、气味，

表11香芹酚+防腐剂的增效防腐作用分析结果

如表11所示，实施例1制备的中药消毒组合物效果明显优于对照组1和对照组2，表明香芹酚+尼泊金乙酯具有极佳的组配效果。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，附图中所示的也只是本发明的实施方式之一，实际的应用并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。