一种提升藏茶中茶多糖含量的方法

技术领域

本发明属于茶叶加工领域，具体涉及一种提升藏茶中茶多糖含量的方法。

背景技术

600～900kDa茶多糖茶是茶叶中具有特殊生物活性的一类与蛋白质结合在一起的酸性多糖或酸性糖蛋白，经纯化的茶多糖包含葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、木糖和核糖等单糖组分。近年来研究发现其在医药、食品、化妆品等多个领域具有广阔的应用前景，特别是在医药领域中能治疗多种疾病。600～900kDa茶多糖具有多种药理功能与保健功效，降血糖、降脂减肥、抗氧化、抗癌、辐射损伤防护等保健功效；黑茶中茶多糖在抗氧化等方面显著优于其他茶类，且在某些方面甚至优于儿茶素。茶多糖类物质的研究与开发已成为茶叶研究的热点之一，不仅具有重要的理论价值，而且在食品保健等领域具有广阔的应用前景。然而，由于茶叶中茶多糖含量低，茶多糖的结构是其呈现生物活性的基础，组成十分复杂，具有品种多样性、生育期多样性和茶类多样性等。茶多糖的复杂架构让直接从茶中分离出高纯度茶多糖和了解茶多糖的结构变得十分困难。茶多糖的形成是通过萎凋提高鲜叶中酶的活性，并在渥堆发酵中生长代谢所致。由茶多糖的形成机理可知，萎凋和发酵是茶多糖形成的关键过程。因此，通过前期萎凋和发酵提高藏茶中茶多糖的含量，是提高藏茶品质的关键点之一。

发明内容

为提高藏茶中茶多糖的含量，使藏茶具有更佳的感官品质和保健功效，本发明提供了一种LED耦合霉菌发酵的技术来提高藏茶中的茶多糖含量。通过该方法，使发酵后的藏茶中的600～900kDa茶多糖含量提高至231.42-302mg/g。

为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

一种提升藏茶中茶多糖含量的方法，其中：

采用LED对藏茶进行萎凋处理后使用少孢根霉进行渥堆发酵，使发酵后藏茶中600～900kDa茶多糖的含量提高至231.42-302mg/g，具体：

将采摘的藏茶茶叶采用LED进行萎凋预处理。对经过预处理的藏茶进行揉捻初干和复干后，接入微生物进行渥堆发酵，即得发酵藏茶。

优选的，所述LED灯光选择黄光(570-600nm)或蓝光(430-450nm)，萎凋处理时间为12-24h。

优选的，所述初干包括：采用中型揉捻机对藏茶揉捻1-2min，揉至水分含量为65％-70％进行初干；所述复干包括：待含水量下降至32％-37％，二次揉捻5-6min。

优选的，所述漆酶的添加量为1.5-3.0g/100g初干茶叶。

优选的，所述微生物为少孢根霉，接种量为每公斤茶接种20-40万个真菌孢子。

优选的，渥堆发酵的环境温度为28-30℃，湿度为80％-90％，发酵时间为10-12d。

本发明还公开了一种采用上述任一方法制得的发酵藏茶。

本发明还公开了一种检测上述发酵藏茶茶多糖的方法，包括：

发酵藏茶干燥后使用热水提取，水提液冷却离心，取上清液经乙酸乙酯，乙醇提纯并离心，干燥。使用苯酚-硫酸法测定。经测定后发现藏茶中茶多糖含量提高至231.42-290.21mg/g。

优选的，所述热水温度为80-85℃，水与茶叶的液料比为40-50:1，乙酸乙酯与水提物的比为1-1.2:1，乙醇与水相液比为4-5:1，提取的体积分数为95-100％；所述提取时间为90-110min。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本申请在实验过程中，发现对比自然光萎凋和其他LED光照萎凋，黄光和蓝光萎凋茶叶能够显著提高藏茶中茶多糖的含量。经验证，LED光照可以提高相关酶的活性，进而促进相关物质转化为茶多糖，使藏茶中茶多糖含量显著提高。使用黄光和蓝光对藏茶进行萎凋，并接入少孢根霉进行渥堆发酵后，藏茶中600～900kDa茶多糖含量提高至231.42-302mg/g，而在以往的研究中，发酵藏茶中600～900kDa茶多糖的含量为40-150mg/g。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面结合具体实施方式，对本发明进一步详细说明。应该理解，这些描述只是示例性的，而并非要限制本发明的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知结构和技术的描述，以避免不必要地混淆本发明的概念。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1

一种提高藏茶中茶多糖含量的方法，其具体实施方案步骤如下：

(1)将采摘的藏茶茶叶均匀摊开，使用LED黄光(570nm)对茶叶进行萎凋处理12h。

(2)使用中型揉捻机揉捻2min，揉至水分含量为65％时进行初干，然后加入漆酶，加入量为1.5g/100g初干茶叶，待水分含量干至32％时，趁热进行第二次揉捻，复揉5min。

(3)揉捻后的茶叶接入少孢根霉进行渥堆发酵，少孢根霉的接种量为每公斤茶接种20万个真菌孢子。渥堆发酵的环境温度为28℃，湿度为80％，发酵时间为10d。

(4)发酵完成后的藏茶，采用80℃的热水浸提，乙酸乙酯与茶叶的液料比为1:1，乙醇与水相液的液料比为4:1，乙醇体积分数为95％，提取时间为100min。

(5)将提取液离心，干燥后，采用苯酚-硫酸法测定茶多糖含量进行测定，测得600～900kDa茶多糖含量为287.58mg/g。

实施例2

一种提高藏茶中茶多糖含量的方法，其具体实施方案步骤如下：

(1)将采摘的藏茶茶叶均匀摊开，使用LED蓝光(435nm)对茶叶进行萎凋处理24h。

(2)使用中型揉捻机揉捻1min，揉至水分含量为70％时进行初干，然后加入漆酶，加入量为3g/100g初干茶叶，待水分含量干至35％时，趁热进行第二次揉捻，复揉6min。

(3)揉捻后的茶叶接入少孢根霉进行渥堆发酵，少孢根霉的接种量为每公斤茶接种40万个真菌孢子。渥堆发酵的环境温度为30℃，湿度为90％，发酵时间为12d。

(4)发酵完成后的藏茶，采用83℃的热水浸提，乙酸乙酯与茶叶的液料比为1.1:1，乙醇与水相液的液料比为4.5:1，乙醇体积分数为95％，提取时间为103min

(5)将提取液离心，干燥后，采用苯酚-硫酸法测定茶多糖含量进行测定，测得600～900kDa茶多糖含量为301.62mg/g。

对比例1

相比实施例1，取消LED(570nm)黄光处理，利用绿光(550nm)处理，其余同实施例1。测得茶多糖含量为216.64mg/g。由此可见，在取消LED(570nm)黄光处理后，600～900kDa茶多糖的含量从既往的287.58mg/g下降至216.64mg/g，说明在保留LED黄光(570nm)处理的情况下，能更好的提升其茶多糖含量。

对比例2

相比实施例1，取消少孢根霉处理，其余同实施例1，测得茶多糖含量为229.26mg/g。由此可见，取消LED黄光(570nm)处理，采用绿光(550nm)处理后，600～900kDa茶多糖的含量从既往的287.58mg/g下降至229.26mg/g，说明在保留少孢根霉处理的情况下，能更好的提升其茶多糖含量。

对比例3

相比实施例1，取消LED黄光(570nm)和少孢根霉处理，其余同实施例1，测得茶多糖含量为97.88mg/g。由此可见，在取消LED黄光(570nm)以及少孢根霉的联合处理后，600～900kDa茶多糖的含量从既往的287.58mg/g下降至97.88mg/g，同时相比单纯取消LED黄光(570nm)处理、或单纯取消少孢根霉处理，藏茶中的茶多糖含量都更低。说明在保留LED黄光(570nm)处理以及少孢根霉的处理的情况下，能更显著的提升其茶多糖含量，两者联合处理在提升其茶多糖含量的效果上更为显著。

对比例4

相比实施例2，取消LED蓝光(430nm)的处理，采用青光(490nm)处理，其余同实施例2。测得茶多糖含量为212.18mg/g。由此可见，在取消LED蓝光(430nm)处理后，600～900kDa茶多糖的含量从既往的301.62mg/g下降至212.18mg/g，说明在保留LED蓝光(430nm)处理的情况下，能更好的提升其茶多糖含量。

对比例5

相比实施例2，取消少孢根霉的处理，其余同实施例2，测得茶多糖含量为247.43mg/g。由此可见，在取消少孢根霉处理后，600～900kDa茶多糖的含量从既往的301.62mg/g下降至247.43mg/g，说明在保留少孢根霉处理的情况下，能更好的提升其茶多糖含量。

对比例6

相比实施例2，取消LED蓝光(430nm)以及少孢根霉的处理，采用红光(660nm)处理，其余同实施例2，测得茶多糖含量为139.03mg/g。由此可见，在取消LED蓝光(430nm)以及少孢根霉的联合处理后，茶多糖的含量从既往的301.62mg/g下降至139.03mg/g，同时相比单纯取消LED蓝光(430nm)处理、或单纯取消少孢根霉处理，采用红光(660nm)藏茶中的茶多糖含量都更低。说明在保留LED蓝光(430nm)处理以及少孢根霉的处理的情况下，能更显著的提升其茶多糖含量，两者联合处理在提升其茶多糖含量的效果上更为显著。

对比例7

购买市面上多个品牌的发酵藏茶，对其中的600～900kDa茶多糖含量进行测定，结果为40-150mg/g。

对比例8

采用传统的处理工艺(1)将采摘的藏茶茶叶均匀摊开，使用自然光对茶叶进行萎凋处理24h。

(2)使用中型揉捻机揉捻1min，揉至水分含量为70％时进行初干，然后加入漆酶，加入量为3g/100g初干茶叶，待水分含量干至35％时，趁热进行第二次揉捻，复揉6min。

(3)揉捻后的茶叶进行自然渥堆发酵。渥堆发酵的环境温度为30℃，湿度为90％，发酵时间为12d。

(4)发酵完成后的藏茶，采用83℃的热水浸提，乙酸乙酯与茶叶的液料比为1.1:1，乙醇与水相液的液料比为4.5:1，乙醇体积分数为95％，提取时间为103min

(5)将提取液离心，干燥后，采用苯酚-硫酸法测定茶多糖含量进行测定，测得茶多糖含量为40-102.30mg/g。由此可见，自然光萎凋处理的的藏茶没有显著的上升。

综上所述，发现对比自然光萎凋和其他LED光照萎凋，黄光和蓝光萎凋茶叶能够显著提高藏茶中茶多糖的含量。经验证，LED黄光(570-600nm)和LED蓝光(430-450nm)可以提高糖苷酶、蛋白酶、水解酶和漆酶等酶的活性，进而促进糖类和蛋白质等结合转化为茶多糖，使藏茶中茶多糖含量显著提高。使用黄光和蓝光对藏茶进行萎凋，并接入少孢根霉进行渥堆发酵后，藏茶中茶多糖含量提高至0.4-0.7％，而在以往的研究中，发酵藏茶中茶多糖的含量为231.42-302mg/g。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。