NMDA受体调节剂及其前药、盐和用途

本申请是申请日为2014年10月27日、发明名称为“NMDA受体调节剂及其前药、盐和用途”的申请号为201480064349.X的中国发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年10月28日提交的美国临时申请No.61/896,308的权益，该临时申请全文以引用方式并入本文。

背景

N-甲基-d-天冬氨酸(NMDA)受体是突触后离子型受体，其尤其响应于兴奋性氨基酸谷氨酸、甘氨酸和合成化合物NMDA。NMDA受体控制二价和一价离子经过受体相关通道进入突触后神经细胞的流动(Foster等，Nature 1987,329:395-396；Mayer等，Trends inPharmacol.Sci.1990,11:254-260)。NMDA受体在发育期间参与指定神经元结构和突触联系，并且可参与经验依赖性突触修饰。此外，NMDA受体也被认为参与长时程增强和中枢神经系统疾患。

NMDA受体在作为加强许多更高认知功能例如记忆获得、保留和学习的突触可塑性中，以及在某些认知途径和疼痛感觉中发挥主要作用(Collingridge等，The NMDAReceptor,Oxford University Press,1994)。此外，NMDA受体的某些特性表明它们可参与加强意识本身的脑信息处理。

NMDA受体得到特别关注的原因是其似乎参与广泛的CNS疾患。例如，在由中风或创伤性损伤引起的脑缺血期间，从损害或缺氧的神经元释放过量的兴奋性氨基酸谷氨酸。此过量谷氨酸结合至NMDA受体，这打开它们的配体门控离子通道；继而钙内流产生高水平的细胞内钙，其激活生物化学级联，导致蛋白质降解和细胞死亡。这种现象被称为兴奋性中毒，也被认为是导致与低血糖和心脏骤停乃至癫痫的范围的其它疾患相关联的神经损害的原因。此外，有初步报告指出类似地参与亨廷顿氏病(Huntington's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)和阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease)的慢性神经变性中。已证实NMDA受体的激活是导致中风后痉挛的原因，并且在某些癫痫模型中，已证实NMDA受体的激活是产生癫痫发作的所必要的。NMDA受体的神经精神参与也已得到公认，因为动物麻醉剂PCP(苯环利定)阻断NMDA受体Ca

据信NMDA受体由包埋在突触后膜中的若干蛋白质链组成。目前发现的前两种类型的亚基形成大细胞外区域，其可能含有变构结合位点中的大多数，成环并且折叠以便形成可渗透Ca

NMDA受体化合物可以通过变构位点对NMDA受体发挥双重(激动剂/拮抗剂)作用。这些化合物通常称为“部分激动剂”。在主要位点配体存在下，部分激动剂将替换某些配体并从而减少经过受体的Ca

本领域中一直需要新型并且更特异的/有效的化合物，其能够结合NMDA受体的甘氨酸结合位点，并且提供药物益处。此外，医学领域中一直需要此类化合物的可口服递送形式。

概述

本文至少部分提供化合物，其为NMDA调节剂，例如NMDA的部分激动剂。例如，本文公开了由下式表示的化合物：

及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物，其中：L、R

在另一方面，本文公开了由下式表示的化合物：

及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物，其中：R

在另一方面，本文公开了由下式表示的化合物：

及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物，其中：L、R

在另一方面，本文公开了由下式表示的化合物：

及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物，其中：R

在另一方面，本文公开了由下式表示的化合物：

其中：

n为8至20的整数；

R

R

R

在另一方面，本文公开了由下式表示的化合物：

与所述第一化合物复合的第二化合物，其中所述第二化合物选自由以下组成的组：

其中：

n为8至20的整数；

R

R

R

本文还提供了药学上可接受的组合物，其包含所公开的化合物，和药学上可接受的赋形剂。例如，此类组合物可适于口服施用给患者。

在另一方面，提供了一种治疗有需要的患者的疾患的方法，所述疾患选自由以下组成的组：孤独症、抑郁、癫痫、AIDS痴呆、多系统萎缩、进行性核上麻痹、弗里德利希共济失调(Friedrich's ataxia)、唐氏综合征(Down’s syndrome)、脆性X综合征、结节性硬化症、橄榄体脑桥小脑萎缩、脑性麻痹、药物诱发视神经炎、周围神经病变、脊髓病、缺血性视网膜病变、糖尿病视网膜病变、青光眼、心脏骤停、行为障碍、冲动控制障碍、阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease)、伴随早期阿尔茨海默氏病的记忆丧失、注意力缺陷障碍、ADHD、精神分裂症、焦虑、阿片改善、尼古丁成瘾、酒精成瘾、创伤性脑损伤、脊髓损伤、创伤后压力综合征和亨廷顿舞蹈病(Huntington’s chorea)。所述方法包括向所述患者施用药学上有效量的所公开的化合物及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

附图简述

图1示出NRX-3004的

图2示出NRX-3004的IR光谱。

图3示出NRX-3008的

图4示出NRX-7005的

详述

本公开通常涉及能够调节NMDA的化合物，例如NMDA拮抗剂或部分激动剂，以及使用所公开的化合物的组合物和/或方法。

定义

在一些实施方案中，本文所述的化合物可被任意数量的取代基或官能部分取代。一般来讲，术语短语“取代的”(无论是否冠以术语“任选地”)以及各式中所含的取代基均是指用指定取代基的基团取代给定结构中的氢原子。

在一些情况下，当任何给定结构中不止一个位置可以被不止一个选自指定群组的取代基所取代时，在每个位置上的取代基可相同或者不同。

如本文所用，设想术语“取代的”包括有机化合物的所有允许的取代基。在广泛的方面，允许的取代基包括有机化合物的非环状和环状、支链和非支链的、碳环和杂环的、芳族和非芳族的取代基。在一些实施方案中，诸如氮的杂原子可具有氢取代基和/或本文所述有机化合物的任何允许取代基，该取代基满足杂原子的化合价。取代基的非限制性例子包括酰基；脂族基；杂脂族基；芳基；杂芳基；芳烷基；杂芳基烷基；烷氧基；环烷氧基；杂环基烷氧基；杂环氧基；杂环基氧基烷基；烯氧基；炔氧基；芳氧基；杂烷氧基；杂芳基氧基；烷硫基；芳硫基；杂芳硫基；氧代；-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-NO

如本文所用，术语“酰基”是指包括羰基基团的部分。在一些实施方案中，酰基基团可具有选自以下的通式：-C(O)R

如本文所使用，术语“脂族基”包括饱和的和不饱和的、直链(即，非支链的)、支链的、非环状、环状或多环的脂族烃，其任选被一个或多个官能团取代。如本领域的普通技术人员所理解的，“脂族基”在本文中旨在包括但不限于烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、和环炔基部分。

如本文所用，术语“杂脂族基”是指包含一个或多个氧、硫、氮、磷或硅原子来例如代替碳原子的脂族部分。杂脂族部分可为支链的、非支链的、环状或非环状且包括饱和的和不饱和的杂环(例如吗琳代、吡咯烷基等)，其可任选地被一个或多个官能团取代或可未经取代。

如本文所用，术语“芳基”和“杂芳基”是指优选具有3-14个碳原子的单环或多环不饱和部分，其各自可经取代或未经取代。在某些实施方案中，"芳基"是指具有一个或两个芳环的单环或双环碳环系统，包括但不限于苯基、萘基、四氢萘基、茚满基、茚基等。在某些实施方案中，"杂芳基"是指具有一个或两个芳环的单环或双环杂环系统，其中一个、两个或三个环原子为独立地选自S、O和N的杂原子，剩余的环原子为碳。杂芳基基团的非限制性例子包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、苯硫基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基等。

如本文所用，术语"烯基"是指具有至少一个碳-碳双键的不饱和直链或支链烃，例如2-12、2-10或2-6个碳原子的直链或支链基团，在本文中分别称为C

如本文所用，术语“烯氧基”是指附接到氧的直链或支链烯基基团(烯基-O)。示例性烯氧基基团包括但不限于具有3-6个碳原子的烯基基团的基团，在本文中称为C

如本文所用，术语“烷氧基“是指附接到氧的烷基基团(-O-烷基)。示例性烷氧基基团包括但不限于具有1-12、1-8或1-6个碳原子的烷基基团的基团，在文中分别称为C

如本文所用，术语“烷氧羰基”是指附接到氧而氧附接到羰基的直链或支链烷基(烷基-O-C(O)-)。示例性烷氧羰基基团包括但不限于1-6个碳原子的烷氧羰基基团，在本文中称为C

如本文所用的术语“炔氧基”是指附接到氧的直链或支链炔基基团(炔基-O)。示例性炔氧基基团包括但不限于丙炔氧基。

如本文所用，术语"烷基"是指饱和直链或支链烃，例如1-6、1-4或1-3个碳原子的直链或支链基团，在文中分别称为C

如本文所用，术语“烷基羰基”是指附接到羰基的直链或支链烷基基团(烷基-C(O)-)。示例性烷基羰基基团包括但不限于1-6个原子的烷基羰基基团，在本文中称为C

如本文所用，术语“炔基”是指具有至少一个碳-碳三键的不饱和直链或支链烃，例如2-6或3-6个碳原子的直链或支链基团，在本文中分别称为C

如果未另外指明，则烷基、烯基和炔基基团可任选地被一个或多个选自烷氧基、烷基、环烷基、氨基、卤素和-C(O)烷基的基团取代。在某些实施方案中，烷基、烯基和炔基基团未被取代，即，它们是未经取代的。

如本文所用，术语“酰胺”或“酰胺基”是指形式-R

如本文所用，术语“胺”或“氨基”是指形式-NR

如本文所用，术语“环烷氧基”是指附接到氧的环烷基基团(环烷基-O-)。

如本文所用，术语“环烷基”是指例如3-6或4-6个碳的单环饱和或部分不饱和烃基，在本文中例如称为C

如本文所用，术语“卤代”或“卤素”是指F、Cl、Br或I。如本文所用，术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷基基团。

术语"杂环基"或"杂环基团"为本领域公知的并且是指饱和的或部分不饱和的3至10元环结构，或者为3至7元环，其环结构包括一至四个杂原子，例如氮、氧和硫。杂环还可为单环、二环或其它多环的环系统。杂环可以与一个或多个芳基、部分不饱和的或饱和的环稠和。杂环基基团包括例如生物素基、色烯基、二氢呋喃基、二氢吲哚基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二噻唑基、高哌啶基、咪唑烷基、异喹啉基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、草脲胺基、噁唑烷基、吩呫吨基(phenoxanthenyl)、吡嗪基、哌啶基、哌喃基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯烷-2-酮基、吡咯啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢吡喃基、四氢喹啉基、噻唑烷基、硫杂环戊烷基(thiolanyl)、硫代吗啉基、硫代哌喃基、呫吨基、内酯、诸如氮杂环丁酮和吡咯烷酮的内酰胺、磺内酰胺、磺内酯等。杂环可在一个或多个位置被取代基取代，所述取代基为例如烷酰基、烷氧基、烷基、烯基、炔基、酰胺基、脒基、氨基、芳基、芳烷基、叠氮基、氨基甲酸根、碳酸根、羧基、氰基、环烷基、酯基、醚、甲酰基、卤素、卤代烷基、杂芳基、杂环基、羟基、亚氨基、酮、硝基、磷酸根、膦酸根、次膦酸根、硫酸根、硫醚、磺酰胺基、磺酰基和硫代羰基。在某些实施方案中，杂环基团未被取代，即，杂环基团是未经取代的。

术语“杂芳基氧基”是指杂芳基-O-基团。

术语“杂环烷基”是本领域公知的并且是指如上所定义的饱和杂环基基团。如本文所用，术语“杂环基烷氧基”是指附接到烷氧基基团的杂环基。术语“杂环基氧基烷基”是指附接到氧(-O-)的杂环基，该氧附接到烷基基团。

如本文所用，术语“杂环基烷氧基”是指杂环基-烷基-O-基团。

术语“杂环基氧基”是指杂环基-O-基团。

术语“杂环基氧基烷基”是指杂环基-O-烷基-基团。

如本文所用的术语“羟基(hydroxy/hydroxyl)”是指基团-OH。

如本文所用,术语“氧代”是指基团＝O。

"药学上或药理学上可接受的"包括在适当时施用至动物或人类不产生不利、过敏或其它不良反应的分子实体和组合物。对于人类施用，制备物应满足FDA生物制品办公室(FDA Office of Biologics)标准要求的无菌性、致热原性、一般安全和纯度标准。

如在本公开中所用，术语"部分NMDA受体激动剂"被定义为能够与NMDA受体的甘氨酸结合位点结合的化合物；在低浓度下NMDA受体激动剂实质上作为激动剂，在高浓度下其实质上作为拮抗剂。对于每种和各个"部分激动剂"，通过实验确定这些浓度。

如本文所用，“药学上可接受的载体”或“赋形剂”包括任何和所有生理上相容的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。在一个实施方案中，载体适于肠胃外施用。或者，载体可适于静脉内、腹膜内、肌内、舌下和口服施用。药学上可接受的载体包括无菌水溶液或分散体和用于临时制备无菌注射液或分散体的无菌粉末。将此类介质和试剂用于药学活性物质是本领域熟知的。除非任何常规介质或试剂与活性化合物不相容，否则均设想了其在本发明的药物组合物中的应用。还可以向组合物中掺入补充的活性化合物。

如本文所用的术语“药学上可接受的盐”是指可存在于本组合物所用的化合物中的酸性或碱性基团的盐。在性质上为碱性的包含在本组合物中的化合物能够与多种无机酸和有机酸形成多种多样的盐。可用于制备此类碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸是形成无毒酸加成盐的那些，即，含有药理学上可接受的阴离子的盐，包括但不限于苹果酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐(gentisinate)、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、蔗糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐(即1,1'-亚甲基双(2-羟基-3-萘甲酸盐))。在包含氨基部分的本组合物中包括的化合物可以与除了上述酸以外的多种氨基酸形成药学上可接受的盐。在性质上为酸性的包含在本组合物中的化合物能够与多种药理学上可接受的阳离子形成碱盐。此类盐的实例包括碱金属盐或碱土金属盐，尤其是钙盐、镁盐、钠盐、锂盐、锌盐、钾盐和铁盐。

本公开的化合物可包含一个或多个手性中心和/或双键并且因此作为立体异构体(如几何异构体、对映体或非对映体)存在。当用于本文时术语“立体异构体”由所有几何异构体、对映体或非对映体组成。取决于立体异构源碳原子周围的取代基的构型，这些化合物可以由符号"R"或"S"指定。本发明涵盖这些化合物的各种立体异构体及其混合物。立体异构体对映体和非对映体。对映体或非对映体的混合物在命名法中可以指定为“(±)”，但是本领域的技术人员将认识到结构可以隐含地指代手性中心。

可以由含有不对称或立构中心的市售原料通过合成方法，或通过制备外消旋混合物接着进行本领域普通技术人员熟知的拆分方法而制备本发明化合物的单独立体异构体。通过以下举例来说明这些拆分方法：(1)将对映体的混合物附接到手性助剂、通过重结晶或层析法分离所得的非对映体混合物并从助剂释放出光学纯产物，(2)采用光学活性拆分剂形成盐，(3)在手性色谱柱上直接分离光学对映体的混合物。还可以通过熟知方法(诸如手性相气相色谱法、手性相高效液相色谱法)使化合物以手性盐复合物结晶或使化合物在手性溶剂中结晶来将立体异构混合物拆分成它们的组成性立体异构体。也可通过熟知的不对称合成方法从立体异构纯的中间体、试剂和催化剂获得立体异构体。

几何异构体也可存在于本发明的化合物中。符号

碳-碳双键周围的取代基可替代地被称为“顺式”或“反式”，其中“顺式”表示双键的相同侧上的取代基而“反式”表示双键的相对侧上的取代基。碳环周围取代基的排列被指定为"顺式"或"反式"。术语“顺式”表示环平面的相同侧上的取代基而术语“反式”表示环平面的相对侧上的取代基。将其中取代基同时位于环平面的相同侧和相对侧上的化合物的混合物指定为“顺式/反式”。

本文所公开的化合物可以与药学上可接受的溶剂诸如水、乙醇等形成的溶剂化形式和非溶剂化形式存在，并且本发明旨在包括溶剂化形式和非溶剂化形式。在一个实施方案中，化合物是无定形的。在一个实施方案中，化合物是多晶型物。在另一个实施方案中，化合物呈晶体形式。

本发明还包括本发明的同位素标记化合物，这些化合物与本文列举的那些相同，但一个或多个原子被具有与通常在自然界中发现的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子替代。可以并入本发明的化合物中的同位素的例子包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，例如分别为

(例如，用某些同位素标记的所公开的化合物(例如，用

如本公开中所用，"NMDA"被定义为N-甲基-d-天冬氨酸。

在本说明书中，术语“治疗有效量”意指研究人员、兽医、内科医生或其它临床医师正在寻求的将会引起组织、系统、动物或人的生物或医学响应的主题化合物的量。以治疗有效量来施用本发明的化合物以治疗疾病。或者，化合物的治疗有效量是达到期望的治疗和/或预防性效果所需的量，例如其终归定义为获得行为(例如，学习)、生理学响应(例如，LTP诱导)的最大增强或抑制神经性疼痛所需的量。

所公开的化合物包括由下式表示的化合物：

其中：

R

R

R

R

L选自由以下组成的组：环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的脂族基；环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的杂脂族基；经取代的或未经取代的芳基；和经取代的或未经取代的杂芳基；及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

在一些实施方案中，R

其中C

R

R

R

R

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

在一些情况下，R

在某些实施方案中，L可为-O-(C

在一些情况下，R

在一些实施方案中，R5和R6中的至少一者可为-C1-C6烷基-Ar。在一些情况下，R

在一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，所公开的化合物包括由下式表示的化合物：

其中：

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

在一些情况下，R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

R

在一些情况下，R

在一些情况下，R

在一些实施方案中，R

在一些实施方案中，R

在一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，所公开的化合物包括由下式表示的化合物：

其中：

R

R

R

R

L可选自由以下组成的组：环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的脂族基；环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的杂脂族基；经取代的或未经取代的芳基；和经取代的或未经取代的杂芳基；及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

在一些情况下，R

在一些实施方案中，L可为-O-(C

在一些情况下，R

在某些实施方案中，R

在一些情况下，R

在一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

其中：

A

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，所公开的化合物包括由下式表示的化合物：

其中：

R

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

在一些情况下，R

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

R

在一些实施方案中，R

在一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，R

R

R

R

R

R

R

R

R

在一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，n可为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。在某些实施方案中，n可为10。在另一个实施方案中，n可为15。在另一个实施方案中，n可为17。

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，n可为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。在另一个实施方案中，n可为15。

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，n可为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。在另一个实施方案中，n可为13。

在另一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

在一些实施方案中，n可为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。在另一个实施方案中，n可为13。

在一些实施方案中，所公开的化合物包括由下式表示的化合物：

其中X可选自由以下组成的组：

其中：

n为8至20的整数。

R

R

R

在一个示例性实施方案中，化合物可表示为：

与所述第一化合物复合的第二化合物，其中所述第二化合物可选自由以下组成的组：：

其中：

n可为8至20的整数；

R

R

R

在一些实施方案中，酰基可选自由乙酰基、苯甲酰基和4-硝基苯甲酰基组成的组。

在某些实施方案中，芳基磺酰基可为甲苯磺酰基。

在一些情况下，R

在一些实施方案中，n可为8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20。在另一个实施方案中，n可选自14和16。

在一些实施方案中，抗衡离子可为氨基酸或肽(例如二肽、三肽等)。例如，在一些实施方案中，抗衡离子可为氨基酸，氨基酸选自但不限于丙氨酸、半胱氨酸、硒代半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯基丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸或酪氨酸。氨基酸可为D异构体、L异构体或D异构体和L异构体的混合物。一般来讲，氨基酸的胺为经修饰的。例如，N-末端氨基基团可被酰化(例如乙酰化、苯甲酰化、4-硝基苯甲酰化等)或磺酰化(例如甲磺酰化、甲苯磺酰化等)。

在某些实施方案中，抗衡离子可选自由以下组成的组：

本公开的化合物及其制剂可具有多个手性中心。每个手性中心可以独立地为R、S、或R和S的任何混合物。例如，在一些实施方案中，手性中心的R:S比率可介于约100:0和约50:50之间、介于约100:0和约75:25之间、介于约100:0和约85:15之间、介于约100:0和约90:10之间、介于约100:0和约95:5之间、介于约100:0和约98:2之间、介于约100:0和约99:1之间、介于约0:100and 50:50之间、介于约0:100和约25:75之间、介于约0:100和约15:85之间、介于约0:100和约10:90之间、介于约0:100和约5:95之间、介于约0:100和约2:98之间、介于约0:100和约1:99之间、介于约75:25和25:75之间，以及约50:50。相对于所公开的化合物或化合物的混合物的外消旋制剂，包含较高比率的一种或多种异构体(即，R和/或S)的所公开的化合物的制剂可具有增强的治疗特性。

所公开的化合物可在NMDA受体处提供有效的阳离子通道打开，例如可与NMDA受体的谷氨酸位点结合或缔合以有助于打开阳离子通道。通过作为激动剂的作用，所公开的化合物可用于调节(打开或关闭)NMDA受体。

如本文所述的化合物可为甘氨酸位点NMDA受体部分激动剂。如在本上下文中使用的部分激动剂应理解为意指在低浓度下，该类似物充当激动剂，而在高浓度下，该类似物充当拮抗剂。甘氨酸结合不受谷氨酸或谷氨酸的竞争性抑制剂的抑制，并且在NMDA受体上也不结合在与谷氨酸相同的位点。NMDA受体处存在甘氨酸的第二单独结合位点。NMDA受体的配体-门控离子通道因此在至少这两个不同的变构位点的控制之下。所公开的化合物可能够结合或缔合NMDA受体的甘氨酸结合位点。在一些实施方案中，所公开的化合物可具有的效能是现有NMDA受体甘氨酸位点部分激动剂活性的10倍或更大。例如，所公开的化合物与GLYX-13相比可具有10倍至20倍增强的效能。GLYX-13表示为：

例如，本文提供与GLYX-13相比可更有效至少约20倍的化合物，如通过在50nM浓度下在海马CA1锥体神经元培养物中的迸发激活的NMDA受体-门控单一神经元电导(I

所公开的化合物可表现出高治疗指数。如本文所用，治疗指数是指在50％群体中产生毒性的剂量(即，TD

上述化合物可表现出超出GLYX-13的一个或多个有利特性。例如，所述化合物比GLYX-13更加稳定。例如，在一些实施方案中，所述化合物可具有增强的蛋白酶解稳定性，这可防止或降低化合物中的一个或多个酰胺键的水解。在一些实施方案中，上述环状化合物比GLYX-13更具蛋白酶解稳定性。所述化合物的增强的稳定性对于例如延长化合物的储存寿命而言是有利的。增强的稳定性对于化合物的口服施用而言也可为有益的。在一些实施方案中，所述化合物相对于GLYX-13可具有增强的口服生物利用率。

在一些实施方案中，上述环状化合物可抵抗肽酶的水解，对于酯酶活性可为生物可逆的，和/或相对于GLYX-13可具有提高的亲脂性。

在某些实施方案中，上文设想的化合物可为前药。即，所述化合物可在体内代谢成活性剂之前无活性或活性较低。在一些情况下，所述化合物可水解形成活性剂。例如，可在末端酰胺键、末端酯键、末端氨基甲酸酯键和/或末端碳酸酯键处发生水解。

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

其中：

R

R

R

R

L选自由环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的脂族基；环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的杂脂族基；经取代的或未经取代的芳基；和经取代的或未经取代的杂芳基组成的组；以及

其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

优选地，L为-O-(C

优选地，L为-O-[(C

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

其中：

R

R

R

R

其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

其中：

R

R

R

R

L选自由环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的脂族基；环状或非环状、经取代的或未经取代的、支链的或非支链的杂脂族基；经取代的或未经取代的芳基；和经取代的或未经取代的杂芳基组成的组；以及

其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

优选地，L为-O-(C

优选地，L为-O-[(C

优选地，R

优选地，R

优选地，R

优选地，R

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

在一些实施方案中，本文公开了由下式表示的化合物：

其中：

A

优选地，化合物由下式表示：

优选地，化合物由下式表示：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

其中：

R

R

R

R

R

其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

优选地，n为10。

优选地，n为15。

优选地，n为17。

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

优选地，n为15。

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

优选地，n为13。

在一些实施方案中，本文公开了一种肽基化合物，其具有式：

优选地，n为13。

在一些实施方案中，本文公开了一种化合物，其由下式表示：

其中X选自由以下组成的组：

其中：

n为8-20的整数；

R

R

R

其立体异构体、代谢物和水合物。

在一些实施方案中，本文公开了一种化学复合物，其包含第一化合物：

与所述第一化合物复合的第二化合物，其中所述第二化合物选自由以下组成的组：

其中：

n为8-20的整数；

R

R

R

其立体异构体、代谢物和水合物。

优选地，酰基选自由乙酰基、苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基组成的组。

优选地，芳基磺酰基为甲苯磺酰基。

优选地，R

优选地，n选自由14和16组成的组。

优选地，抗衡离子选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，本文公开了一种药物组合物，其包含：

治疗有效量的上文所述的化合物和药学上可接受的载体。

优选地，所述化合物为N-甲基-D-天冬氨酸受体激动剂。

优选地，所述化合物的治疗指数为至少100。

更优选地，所述化合物的治疗指数为至少200。

进一步优选地，所述化合物的治疗指数为至少500。

在一些实施方案中，本文公开了一种治疗有需要的患者的疾患的方法，所述疾患选自由以下组成的组：孤独症、抑郁、癫痫、AIDS痴呆、多系统萎缩、进行性核上麻痹、弗里德利希共济失调、唐氏综合征、脆性X综合征、结节性硬化症、橄榄体脑桥小脑萎缩、脑性麻痹、药物诱发视神经炎、周围神经病变、脊髓病、缺血性视网膜病变、糖尿病视网膜病变、青光眼、心脏骤停、行为障碍、冲动控制障碍、阿尔茨海默氏病、伴随早期阿尔茨海默氏病的记忆丧失、注意力缺陷障碍、ADHD、精神分裂症、焦虑、阿片改善、尼古丁成瘾、酒精成瘾、创伤性脑损伤、脊髓损伤、创伤后压力综合征和亨廷顿舞蹈病，所述方法包括向所述患者施用：

药学上有效量的上文所述的化合物及其药学上可接受的盐、立体异构体、代谢物和水合物。

在其它方面中，提供了包含所公开的化合物和任选的药学上可接受的赋形剂的制剂和组合物。在一些实施方案中，设想的制剂包含一种或多种所公开的化合物的外消旋混合物。

设想的制剂可以多种使用形式中的任一种来制备。以举例的方式而非限制，所述化合物可以适于口服施用、皮下注射的制剂来制备，或用药物领域已知的将活性剂施用于动物的其它方法来制备。

如本文所述的制剂中所公开的化合物的量可以根据诸如个体的病情、年龄、性别和体重的因素而变化。可调整剂量方案以提供最佳的治疗响应。例如，可以施用单次推注，可以随时间施用几个分开的剂量，或者根据治疗状况的紧急情况所需，可以按比例减小或增加剂量。尤其有利的是将肠胃外组合物配制成容易施用并且剂量均匀的剂量单位形式。如本文所用的剂量单位形式是指适合作为单位剂量用于待治疗的哺乳动物受试者的物理不连续单位；每个单位含有预定量的活性化合物，经计算该预定量的活性化合物与所需的药物载体组合产生所需的治疗效果。

对本发明剂量单位形式的说明限定于且直接依赖于(a)所选化合物的独恃特性和要达到的特定治疗效果，和(b)本领域中固有的对于配混这种用于治疗个体敏感性的活性化合物的限制。

治疗性组合物通常必须是无菌的并在制备和储存条件下是稳定的。可以将组合物配制成溶液、微乳液、脂质体或其它适合高药物浓度的有序结构。载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液态聚乙二醇等)及其合适混合物的溶剂或分散介质。例如，通过使用诸如卵磷脂等包被材料，在分散体的情况下通过保持所需的粒度，以及通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。在很多情况下，组合物中优选包含等渗剂，例如，糖、多元醇诸如甘露糖醇、山梨糖醇或氯化钠。通过在组合物中加入延迟吸收剂，例如单硬脂酸盐和明胶，可实现注射型组合物的延长的吸收。

所述化合物可以定时释放制剂(例如在包含缓释聚合物的组合物中)施用。所述化合物可以与保护化合物不被快速释放的载体一起制备，诸如控释制剂，包括植入物和微囊化递送系统。可使用可生物降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐类、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯、聚乳酸和聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLG)。制备此类制剂的许多方法通常为本领域技术人员所知。

可通过以下方式制备无菌注射溶液：将化合物以要求的量连同以上列举的成分中的一种或其组合一起掺入合适的溶剂中，根据需要，随后过滤消毒。通常，通过将活性化合物掺入到含有基本分散介质和上面所列其它所需成分的无菌媒介物中而制备分散剂。对于用于制备无菌注射溶液的无菌粉末而言，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥，所述方法由其预先无菌过滤的溶液得到活性成分加任何额外所需成分的粉末。

根据本发明的可供选择的方面，化合物可与增强化合物溶解度的一种或多种另外的化合物配制。

提供了用于治疗认知疾患和用于增强学习的方法。此类方法包括将所公开的化合物中的一种或多种的药学上可接受的制剂施用于有需要的患者。还设想了治疗患有以下述疾病的患者的方法：与衰老相关的记忆缺失、精神分裂症、特殊学习疾患、癫痫发作、中风后痉挛、脑缺血、低血糖、心脏骤停、癫痫、偏头痛以及亨廷顿氏病、帕金森氏病和阿尔茨海默氏病。

设想的其它方法包括以下疾病的治疗：脑缺血症、中风、脑外伤、脑瘤、急性神经性疼痛、慢性神经性疼痛、睡眠疾患、药物成瘾、抑郁、某些视觉疾患、酒精戒断、焦虑、记忆和学习失能、孤独症、抑郁、癫痫、AIDS痴呆、多系统萎缩、进行性核上麻痹、弗里德利希共济失调、唐氏综合征、脆性X综合征、结节性硬化症、橄榄体脑桥小脑萎缩、脑性麻痹、药物诱发视神经炎、周围神经病变、脊髓病、缺血性视网膜病变、糖尿病视网膜病变、青光眼、心脏骤停、行为障碍、冲动控制障碍、阿尔茨海默氏病、伴随早期阿尔茨海默氏病的记忆丧失、注意力缺陷障碍、ADHD、精神分裂症、焦虑、阿片改善、尼古丁成瘾、酒精成瘾、创伤性脑损伤、脊髓损伤、创伤后压力综合征和亨廷顿舞蹈病。

在另一方面，提供了用于增强疼痛缓解和用于向动物提供痛觉缺失的方法。

在某些实施方案中，提供了用于治疗精神分裂症的方法。例如，妄想型精神分裂症、错乱型精神分裂症(即青春型精神分裂症)、紧张型精神分裂症、未分化型精神分裂症、残余型精神分裂症、后抑郁型精神分裂症和单纯型精神分裂症可以使用本文所设想的方法和组合物进行治疗。精神疾患诸如情感分裂性精神疾患、妄想症、暂时性精神病、分享性精神疾患和患有妄想或幻觉的精神疾患也可以使用本发明所设想的组合物进行治疗。

妄想型精神分裂症的特征可在于其中存在妄想或听觉幻觉但不存在思维疾患、行为紊乱或情感冷淡。妄想可为迫害的和/或夸大的，但除了这些之外，也可存在其它主题诸如妒忌、笃信或躯体化。

错乱型精神分裂症的特征可在于其中思维疾患和情感贫乏一起存在。

紧张型精神分裂症的特征可在于其中受试者可以为几乎不动的或表现出不安的、无目的的移动。症状可包括紧张性木僵和蜡样屈曲。

未分化型精神分裂症的特征可在于其中存在精神病症状但不满足妄想型、错乱型或紧张型的标准。

残余型精神分裂症的特征可在于阳性症状仅以低强度存在。

后抑郁型精神分裂症的特征可在于抑郁发作在精神分裂症疾病之后产生，其中仍可存在一些低水平的精神分裂症症状。

单纯型精神分裂症的特征可在于无精神病发作史的显著阴性症状的隐伏和逐渐形成。

在一些实施方案中，在一些实施方案中，提供了治疗可存在于其它精神疾患中的精神病症状的方法，所述其它精神疾患包括但不限于双相性精神疾患、边缘型人格疾患、药物中毒和药源性精神异常。

在另一个实施方案中，提供了治疗可存在于例如妄想症中的妄想(例如"非怪异(non-bizarre)")的方法。

还提供了治疗疾患中回避社交的方法，回避社交包括但不限于社交焦虑疾患、回避型人格疾患和精神分裂型人格疾患。

另外，提供了用于治疗强迫性神经失调(OCD)的方法。

实施例

提供以下实施例只是为了说明的目的而非意欲限制本公开的范围。

方案A.GLYX-13和棕榈酸的复合。

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和棕榈酸(76.8mg,3mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为50℃-60℃的自由流动的固体。通过

方案B.GLYX-13和N-对甲苯磺酰甘氨酸的复合。

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和N-对甲苯磺酰甘氨酸(22.9mg,1mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为90℃-110℃的自由流动的固体。通过IR、

方案C.GLYX-13和硬脂酸的复合。

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和硬脂酸(85.2mg,3mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为55℃-90℃的自由流动的固体。通过IR、

方案D.GLYX-13和N-乙酰基-L-苯丙氨酸的复合。

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和N-乙酰基-L-苯丙氨酸(41.4mg,2mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为90℃-120℃的自由流动的固体。通过IR、

IR：图2示出NRX-3004的IR光谱。

方案E.GLYX-13和N-乙酰基-L-亮氨酸的复合。

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和N-乙酰基-L-亮氨酸(34.6mg,2mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为90℃-110℃的自由流动的固体。通过IR、

方案F.GLYX-13和

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和N-苯甲酰基-L-亮氨酸(23.5mg,1mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为90℃-110℃的自由流动的固体。通过IR、

方案G.GLYX-13和2-(4-硝基苯甲酰氨基)-3-苯基丙酸的复合。

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和2-(4-硝基苯甲酰氨基)-3-苯基丙酸(31.4mg,1mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为90℃-110℃的自由流动的固体。通过IR、

方案H.GLYX-13和4-甲基-2-(4-硝基苯甲酰氨基)-戊酸的复合。

在圆底烧瓶中将MeOH(5mL)中的GLYX-13(41.3mg,1mmol)和4-甲基-2-(4-硝基苯甲酰氨基)戊酸(28mg,1mmol)在室温下搅拌30分钟。在室温下去除甲醇，然后将二乙醚加入粗制化合物中。将二乙醚中的粗制化合物在室温下搅拌15分钟。蒸镏掉有机溶剂，得到熔点为80℃-110℃的自由流动的固体。通过IR、

将GLYX-13(58mg,1.4mmol)、棕榈酸(30mg,1.17mmol)和DIPEA(45.7mg,3.5mmol)溶解于DMF(5mL)中并冷却至0℃。在0℃下，将HATU(111mg,2.93mmol)加入上述反应混合物中。将反应混合物在室温下搅拌12小时。原料反应结束后，将反应混合物用水(2×5mL)稀释。将水层用乙酸乙酯(2×25mL)萃取，用盐水溶液(25mL)洗涤并经无水Na

质量m/z:652.5[M

方案J.NRX-7001的合成。

向GLYX-13(110mg,0.26mmol)在DMF(4mL)中的搅拌溶液加入二异丙基乙胺(DIPEA)(100μL)和2-羟基二苯甲酮(105mg,0.53mmol)并在室温下搅拌48小时。反应结束后，减压蒸发挥发性物质以得到粗制产物，将该粗制产物通过制备型HPLC纯化，得到NRX-7001(50mg,32％)。

质量m/z:594.3[M

方案K.NRX-7018的合成。

NRX-7002-1的合成

向GLYX-13(100mg,0.24mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的溶液加入(BOC)

NRX-7018-1的合成

在环境温度下，向NRX-7002-1(250mg,0.487mmol)在THF(8mL)中的搅拌溶液加入4-戊烯酸(146mg,0.16mL,1.46mmol)。向同一反应混合物中加入二异丙基乙胺(0.5mL,2.92mmol)，接着加入EDC.HC1(372mg,1.949mmol)和催化量的DMAP，并持续搅拌过夜。减压去除挥发性物质，将残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)中，用水(2×10mL)、5％柠檬酸水溶液(2×10mL)、5％碳酸氢钠溶液(1×15mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到呈白色固体的NRX-7018-1(290mg,收率87％)。

NRX-7018-2的合成

在环境温度下，向NRX-7018-1(200mg,0.295mmol)在DCM(600mL)中的搅拌溶液加入一代格拉布催化剂(1

NRX-7018-3的合成

在室温下，向NRX-7018-2(200mg,0.308mmol)在甲醇(8mL)中的搅拌溶液加入10％钯碳(20mg)。在氢压下持续搅拌18小时。反应结束后，将反应物料经硅藻土垫过滤，用甲醇(20mL)洗涤，并减压浓缩滤液。将粗制化合物通过柱层析(使用硅胶(100-200目)和作为洗脱液的DCM中的3％甲醇)纯化，得到呈灰白色固体的NRX-7018-3(60mg,收率30％)。

NRX-7018的合成

在0℃下，向NRX-7018-3(55mg,0.084mmol)在DCM(2.4mL)中的搅拌溶液加入5％盐酸甲醇(0.6mL)，并将溶液缓慢升温至室温并搅拌2小时。反应结束后，减压去除过量的挥发性物质。将粗制化合物用而乙醚研磨并真空干燥，得到呈白色固体的NRX-7018(50mg,收率89.4％)。

质量m/z:552.3[M

本实施例展示可以用于评估候选NMDA受体调节剂的激动和/或拮抗特性的[

粗突触膜如在Moskal等(2001)，“The use of antibody engineering to createnovel drugs that target N-methyl-D-aspartate receptors,”Curr.Drug Targets,2:331-45中所述由大鼠前脑制备。将2至3月龄的雄性大鼠通过铡除刀未经麻醉而斩首，快速去除脑(约90秒)并将全皮质和海马在冰冷平台上切割，在干冰上冷冻并储存于-80℃。将样品在20体积冰冷的5mM Tris-HCl pH 7.4中通过Brinkman Polytron均化，在4℃下以48,000x g沉淀20分钟并如上述再洗涤3次。然后将膜重浮于5mM EDTA和15mM Tris-HCl pH7.4并在37℃下孵育1小时，在4℃下以48,000x g将膜沉淀20分钟，，在液氮中快速冷冻并储存于-80℃。在实验当天，将膜在室温下解冻并如上述在冰冷的5mM Tris-HCl(pH 7.4)中再洗涤7次。在最后一次洗涤后，将膜重悬于测定缓冲液(5mM Tris-乙酸盐pH 7.4)中，并且蛋白质含量通过BCA测定来确定。

[

对于每个数据点(即，测试化合物的单个浓度)，最大[

最大[

表示为在[

本实施例展示确定测试化合物对NMDAR电流的效果的测定。

如Zhang等(2008)“A NMD A receptor glycine site partial agonist,GLYX-13,simultaneously enhances LTP and reduces LTD at Schaffer collateral-CAlsynapses in hippocampus,”Neuropharmacology,55:1238-50中所述对来自14-18日龄的斯普拉-道来氏大鼠(Sprague-Dawley rat)的海马切片进行实验。全细胞记录由在用含有0mM[Mg2+]和3mM[Ca2+]外加10μm荷包牡丹碱和20μm CNQX的(人工脑脊液)ACSF灌注的切片中的钳制在-60mV的CA1锥体神经元电压获得以药理学上分离NMDAR依赖性兴奋性突触后电流(EPSC)。对不同浓度的测试化合物(10nM至1μM)进行浴施加并每30秒用单个电脉冲(80μs持续时间)刺激Schaffer侧支纤维一次。NMDAR EPSC的特征为较长的上升和衰减时间，并且在每次实验结束时通过NMDAR特异性拮抗剂D-2-氨基-5-膦酰基戊酸(D-AP5；50μM)的浴施加而完全阻断。测试化合物的功效被计算为NMDAR电流从基线增加的％。在施加测试化合物之前将基线测量为NMDAR电流。

本实施例展示确定测试化合物对LTP的效果的测定。

将来自14-18日龄斯普拉-道来氏大鼠的海马切片转移至界面记录室并在32±0.5℃下用充氧的ACSF以3ml/min连续地灌注。低电阻记录电极由薄壁的硼硅酸盐玻璃制成(在用ACSF填充之后为1-2ΜΩ)并插入CA1区域的辐射层中的Schaffer侧支终端区域的顶部树突区域以记录场兴奋性突触后电位(fEPSP)。将两极不锈钢刺激电极(FHC Co.)置于CA3辐射层中的Schaffer侧支连合纤维中，并调节恒定电流刺激强度以每30秒(50-100pA；100ms持续时间)诱发大约半数最大fEPSP一次。通过由20％-80％最大负偏移的线性插值法测量fEPSP斜率并且在开始实验之前确定斜率在±10％内稳定至少10分钟。在Schaffer侧支-CA1突触处通过高频刺激训练(3×l00Hz/500ms；箭号)在对照(媒介物)、未处理的切片或用测试化合物(10nM至100μM)预处理的切片中诱导长时程增强(LTP)。使用Multiclamp 700B放大器记录信号并用Digidata 1322(Axon Instruments,Foster City,CA)数字化。在IBM-兼容性个人电脑上使用pClamp软件(9版，Axon Instruments)分析数据。功效计算为与媒介物相比用测试化合物预处理的切片测量的长时程增强增加的％。

本实施例展示用于评估测试化合物的抗抑郁活性的Porsolt测试。

如在Burgdorf等(2009)“The effect of selective breeding fordifferential rates of 50-kHz ultrasonic vocalizations on emotional behaviorin rats,”Devel.Psychobiol.,51:34-46中所述进行实验。在测试前1小时以盲法用测试化合物(0.3至30mg/kg；经由尾静脉注射的静脉内或经由胃管饲法口服)或媒介物(1ml/kg无菌盐水或1ml/kg2,5-二氮杂螺[3.4]辛-1-酮的DMSO)对雄性斯普拉-道来氏大鼠(2-3月龄)给药。在测试当天于室温(23℃±0.5℃)下将动物置于46cm高×20cm直径的用自来水填充至30cm的透明玻璃管中保持5分钟。在每个游泳阶段之后将所有动物由实验者用毛巾擦干。每隔一只动物之后换水。对动物录像并由设盲实验者对漂浮行为(如定义成为了保持动物的头部在水的上方所需的最小移动)的总持续时间(秒)定量。

等效内容

本领域的技术人员将认识到或能够仅使用常规实验就能确定本文所述的本发明具体实施方案的许多等同形式。此类等效内容旨在由以下权利要求书所涵盖。

以引用方式并入

本文引用的所有专利、已公布的专利申请、网址和其它参考文献的全部内容据此以引用方式以其整体明确并入本文。