一种具有肠道粘膜免疫活性的黄精多糖的分离提取方法

技术领域

本发明属于生物质提取技术领域，具体是一种具有肠道粘膜免疫活性的黄精多糖的分离提取方法。

背景技术

黄精为百合科植物多花黄精、滇黄精、卷叶黄精等的干燥根茎，是湖南省邵阳市邵东市特色植物，别名鸡头黄精、鸡头根。其具有补中益气、滋润心肺、强壮筋骨等作用，久服可以延年益寿，为“药食同源”植物。现代药理学研究表明黄精中的主要化学成分为：黄精多糖。

药理学研究证明，黄精多糖参与了生命现象中细胞和机体的各种活动，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、抑菌抗炎、抗疲劳、降血糖、降血脂及肠道粘膜免疫活性等功效。

目前黄精多糖的提取主要有水提法以及超声波、微波辅助提取等方法，分离精制主要有传统水提醇沉法以及大孔树脂吸附、膜分离等方法以及不同方法之间的耦合，现有技术中，提取黄精多糖一般是利用黄精颗粒或黄精切片，黄精多糖的得率可达48％，经过研究发现中药材的溶出度受到粒径的影响，在以上提取方式中，均采用的较大粒径的原料，导致黄精多糖的提取量较少。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的是提供一种具有肠道粘膜免疫活性的黄精多糖的分离提取方法，以提高黄精多糖的得率。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：一种具有肠道粘膜免疫活性的黄精多糖的分离提取方法，包括如下步骤：

S1：准备2cm～3cm的黄精切片，将黄精切片烘干，再利用超音速粉碎设备将黄精切片粉碎至0.1mm～0.15mm的黄精颗粒，放置于容器中以备用；

S2：向容器中加入蒸馏水，浸泡1～2d，获取第一黄精溶液和残渣；

S3：再向残渣中加入蒸馏水，在73℃～85℃下浸提20min～30min，然后超声提取15min～25min，获得第二黄精溶液；

S4：将第一黄精溶液和第二黄精溶液混合，并形成第三黄精溶液，将第三黄精溶液离心，取其上清液；

S5：向上清液中加入第一乙醇溶液进行醇沉，静置，离心，取沉淀，再使用第二乙醇溶液洗涤，真空干燥，得到黄精多糖。

进一步，S2中，浸泡的方式包括如下步骤：步骤一：对黄精颗粒和蒸馏水进行加热；步骤二：每隔3h～4h获取一次第一黄精溶液，并将获取后的第一黄精溶液进行过滤。

进一步，步骤一中，加热温度为：41℃～55℃。

进一步，步骤二中，获取后的第一黄精溶液使用170目的筛网进行过滤。

进一步，S4中，第三黄精溶液使用170目～200目的筛网过滤。

进一步，S5中，第一乙醇溶液为60vol％-95vol％乙醇。

进一步，S5中，第二乙醇溶液为95vol％乙醇。

进一步，容器包括机架和固定在机架上的外筒，外筒内设置有上部开口的内筒，内筒上转动连接有用于封闭开口的盖板，机架上固定有驱动件，驱动件的输出轴与盖板固定连接，盖板上固定有溶剂喷头和气体喷头，内筒的侧壁上设置有第一筛网，盖板上竖向滑动连接有用于封闭第一筛网的挡板；外筒的底部设置有第二筛网，内筒上固定有气动件，气动件的输出轴固定有用于封闭第二筛网的封闭板。

进一步，外筒上固定有进液喷头和回收器。

进一步，回收器包括本体，本体内开有收集腔，收集腔连通有固定在本体上的进气单向阀，本体上开有冷却腔，冷却腔内设置有冷源。

采用上述方案后实现了以下有益效果：(1)S1和S2中，将黄精切片超音速粉碎为黄精颗粒，且粒径在0.1mm～0.15mm，以提高黄精的溶出度，在对黄精颗粒进行浸泡时，以提高黄精多糖的溶出量，并且在浸泡时加热，进一步提高黄精多糖的溶出量，使得黄精多糖的得率提高。

(2)S3、S4和S5中，由于浸泡过后残渣内仍然还有部分黄精多糖，再利用浸提和超声提取，将剩余的黄精多糖提取出来，提高黄精多糖的得率，并且利用醇沉，静置，离心以及洗涤，得出纯度较高的黄精多糖颗粒物。

(3)本方案中，将黄精颗粒浸泡，采用41℃～55℃的温度加热，并在73℃～85℃温度下对残渣进行浸提，如此残渣从41℃～55℃达到73℃～85℃的时间短，与从室温升温至73℃～85℃相比更为节能，在一定程度上降低了黄精多糖的提取成本。

附图说明

图1为本发明实施例二中容器的示意图；

图2为本发明实施例二中回收器的示意图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式进一步详细说明：

说明书附图中的附图标记包括：外筒11、空腔12、回收器13、进气单向阀131、冷却腔132、收集腔134、盖板14、进料喷头15、电机16、第一溶剂喷头17、内筒18、第二溶剂喷头19、第一筛网20、挡板21、气缸22、加热装置23、封闭板24、收集箱25、第二筛网26、超声波发生器27。

实施例一：

一种具有肠道粘膜免疫活性的黄精多糖的分离提取方法，包括如下步骤：

S1：准备2cm～3cm的黄精切片，将黄精切片烘干，再利用超音速粉碎设备将黄精切片粉碎至0.1mm～0.15mm的黄精颗粒，放置于容器中以备用；

S2：向容器中加入蒸馏水，黄精颗粒与蒸馏水的质量比为1∶6～1∶8，例如1kg黄精颗粒，则需要12kg的蒸馏水，将黄精颗粒浸泡1～2d，浸泡方式包括如下步骤：步骤一，在41℃～55℃的温度条件下对黄精颗粒和蒸馏水进行加热；步骤二：每隔3h～4h获取一次第一黄精溶液，最终获取第一黄精溶液和残渣，再将获取后的第一黄精溶液使用170目的筛网进行过滤；

S3：再向残渣中加入蒸馏水，在73℃～85℃下浸提20min～30min，然后超声提取15min～25min，获得第二黄精溶液；

S4：将第一黄精溶液和第二黄精溶液混合，并形成第三黄精溶液，将第三黄精溶液使用170目～200目的筛网过滤，再将第三黄精溶液离心，取其上清液；

S5：向上清液中加入第一乙醇溶液进行醇沉，第一乙醇溶液60vol％-95vol％乙醇，静置，离心，取沉淀，再使用第二乙醇溶液洗涤，第二乙醇溶液为95vol％乙醇，真空干燥，得到黄精多糖。

本实施例中，对黄精颗粒进行提取，提高了黄精多糖的溶出度，并对黄精进行浸提，然后在对残渣进行浸提和超声波提取，最大限度将黄精多糖从黄精中提取，提高了黄精多糖的提取量。其次，进行了多次过滤，减少了黄精杂质，提高了黄精多糖的纯度。

实施例二：

一种具有肠道粘膜免疫活性的黄精多糖的分离提取方法，包括如下步骤：S1：准备2cm～3cm的黄精切片，将黄精切片烘干，再利用超音速粉碎设备将黄精切片粉碎至0.1mm～0.15mm的黄精颗粒，如附图1和附图2所示，放置于一种容器的内筒18中以备用，本实施例中，一种容器包括机架，机架上螺栓固定有外筒11，外筒11内设置有与机架转动连接的内筒18，内筒18与外筒11之间构成空腔12，内筒18中空且上部开口，内筒18上设置有盖板14，盖板14一侧与内容转动连接，盖板14的另一侧与内筒18可拆卸连接，机架设置有驱动件，本实施例中驱动件为电机16，电机16的输出轴与盖板14固定连接，盖板14上螺钉固定有第一溶剂喷头17和进料喷头15，内筒18上螺栓固定有超声波发生器27(图中未示出)，内筒18的侧壁内螺栓固定有加热装置23，如：加热线圈，内筒18的侧壁上螺钉固定有170目筛的第一筛网20，盖板14上竖向滑动连接有用于封闭第一筛网20的挡板21。

外筒11的底部呈锥形，外筒11的底部螺钉固定有170目～200目筛的第二筛网26，内筒18上固定有气缸22，气缸22的输出轴上固定有用于封闭第二筛网26的封闭板24，外筒11的侧壁上安装有加热器，外筒11的下方设置有收集箱25。外筒11上固定有第二溶剂喷头19和回收器13，如附图2所示，回收器13包括本体，本体内开有收集腔134，收集腔134连通有进气单向阀131，进气单向阀131固定在本体上，本体的侧壁上开有冷却腔132，冷却腔132内安装有冷源，本实施例中冷源为冰块。

S2：本实施例中，通过进料喷头15将黄精颗粒喷入至内筒18内，与此同时，通过第一溶剂喷头17向内筒18内喷入蒸馏水，以达到蒸馏水和黄精颗粒充分混合的目的，如此将黄精颗粒在蒸馏水中浸泡1～2d，在浸泡过程中，启动加热装置23，加热装置23对黄精颗粒进行加热，加热温度达到41℃～55℃，并且每隔3h～4h，将挡板21取走，再启动电机16，电机16带动盖板14和内筒18转动，离心提取第一黄精溶液每次提取2min～5min，第一黄精溶液提取后向内筒18内补充蒸馏水。在离心作用下第一黄精溶液经过第一筛网20的过滤，然后进入至空腔12内储存。

S3：完成若干次第一黄精溶液提取后，利用挡板21将第一筛网20封闭，再通过第一溶剂喷头17加入蒸馏水，并且控制加热装置23升温至73℃～85℃，在73℃～85℃下浸提20min～30min，然后启动超声波发生器27，对残渣超声提取15min～25min，获取第二黄精溶液。将挡板21取走，再启动电机16，电机16带动内筒18转动，在离心作用下，第二黄精溶液通过第一筛网20进入空腔12内。

S4：进入空腔12的第一黄精溶液和第二黄精溶液混合，并形成第三黄精溶液，启动气缸22，气缸22带动封闭板24，封闭板24打开第二筛网26，第三黄精溶解经过第二筛网26进入至收集箱25内。将收集箱25放置于内筒18内并固定，再次启动电机16，电机16带动内筒18和收集箱25转动，如此，对第三黄精溶液进行离心操作，操作人员通过针筒取其上清液。

S5：完成离心分离后，将上清液通过第二溶剂喷头19送入至空腔12内(此时气缸22带动封闭板24将第二筛网26封闭)，在通过第二溶剂喷头19向上清液内送入60vol％-95vol％的第一乙醇溶液进行醇沉。然后通过气缸22带动封闭板24，通过第二筛网26过滤醇沉后的溶液，并收集在收集箱25中，再进行静置，取沉淀，再使用95vol％第二乙醇溶液洗涤，真空干燥，得到黄精多糖。在醇沉过程中，冰块的低温会使得收集腔134内的气压变低，空腔12内的气压较高(由于加热作用)，在气压的作用下，挥发的乙醇会通过进气单向阀131进入至收集腔134内，以达到回收乙醇的目的。

本实施例中，容器的构成适应于多个步骤的重复利用，减少了操作人员在黄精多糖提取过程中设备的转移，即在一定程度上提高了黄精多糖的提取效率。同时，本方案中利用加热装置对残渣进行连续升温，使得S3和S4更为连续，降低了加热能耗。本方案中，在醇沉过程中，对乙醇进行一定的回收，进行二次利用，降低了一定的乙醇成本。

以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体结构和/或特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。