亚甲蓝在制备用于眼表晚期恶性肿瘤的药物中的用途

技术领域

本发明属生物制药技术领域，涉及亚甲蓝在制药中的新的用途具体涉及亚甲蓝在制备治疗眼表晚期恶性肿瘤药物中的用途，尤其是亚甲蓝在制备眼表晚期恶性肿瘤手术标记瘤体范围药物中的用途。

背景技术

资料公开了眼表晚期恶性肿瘤是一类治疗难度大、预后较差的疾病，其主要病理类型为恶性黑色素瘤(Conjunctival Melanoma，以下简称CM)。CM在亚洲人群的年发病率为0.15/百万人

临床实践中，手术治疗是CM的一线治疗。临床早期CM(cT1、cT2)可进行局部切除，临床晚期CM(cT3)则需行眶内容物剜除手术

为比较个性化眶内容、传统眶内容手术治疗晚期CM的长期预后，课题组回顾了2015年1月至2019年12月在所属医疗机构行眶内容手术的晚期CM患者，并于2020年1月进行电话随访以统计其生存率和外观情况。该项研究共31名患者入组，其中个性化手术组13名、传统手术组18名。数据分析表明，两组患者临床基线特征基本一致，5年生存率无显著差异，且个性化手术组的外观及伤口愈合情况显著优于传统手术组。该研究结果提示，个性化眶内容手术治疗晚期CM可取得满意疗效

目前，在眼表恶性肿瘤领域尚无关于亚甲蓝的研究，也无亚甲蓝用于解决眼表晚期恶性肿瘤手术标记瘤体范围问题的相关报道。基于现有技术的现状，本申请的发明人拟提供亚甲蓝在制药中的新的用途具体涉及亚甲蓝在制备治疗眼表晚期恶性肿瘤药物中的用途。

与本发明有关的参考文献有：

[1]Grimes JM,Shah NV,Samie FH,Carvajal RD,Marr BP.ConjunctivalMelanoma:Current Treatments and Future Options.Am J Clin Dermatol.2020；21:371-381.

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[3]Vora GK,Demirci H,Marr B,Mruthyunjaya P.Advances in the managementof conjunctival melanoma.Surv Ophthalmol.2017；62:26-42.

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[5]Shields JA,Shields CL,Demirci H,Honavar SG,Singh AD.Experiencewith eyelid-sparing orbital exenteration:the 2000Tullos O.CostonLecture.Ophthalmic Plast Reconstr Surg.2001；17:355-361.

[6]Ma R,Ren H,Zhou X,Gan L,Xu B,Guo J,Qian J.Orbital exenteration forconjunctival melanoma:comparison of long-term outcome between individualisedand conventional techniques.Eye(Lond).2021.doi:10.1038/s41433-021-01454-9.。

发明内容

本发明的目的是基于现有技术的现状，提供亚甲蓝在制药中的新的用途具体涉及亚甲蓝在制备治疗眼表晚期恶性肿瘤药物中的用途。尤其是亚甲蓝在制备治疗眼表晚期恶性肿瘤手术标记瘤体范围药物中的用途。

本发明基于现有技术的基础的个性化眶内容的手术关键为清晰标记瘤体范围，采用亚甲蓝为有效解决方案实现上述目标。所述亚甲蓝的化学名称为氯化3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪-5-鎓三水化合物，分子式为C

本发明经研究证实，亚甲蓝一方面可使上皮组织着色，从而清晰标记眼表晚期恶性肿瘤的瘤体范围；另一方面可辅助实现个性化眶内容手术，在完整摘除瘤体的同时最大化保留正常组织、减少损伤。

具体而言，本发明进行了包括以下步骤的实验研究：

(1)亚甲蓝可标记上皮组织；

(2)眼表恶性肿瘤表面覆盖上皮组织；

(3)亚甲蓝可标记眼表恶性肿瘤；

(4)亚甲蓝可辅助实现个性化眶内容手术；

(5)数据分析；

结果显示，

(1)亚甲蓝可使上皮组织清晰、持久着色

将亚甲蓝应用于眼表，可观察到上皮组织清晰着色(如图1所示)，且周围组织无渗透、无着染。与现有生物染料吲哚菁绿相比，亚甲蓝的显色度高、持续时间长(如图2所示)，所述亚甲蓝有助于在大型手术中进行术野标记。

(2)眼表恶性肿瘤有完整的上皮组织覆盖

对眼表恶性肿瘤标本进行染色切片观察，结果显示，眼表恶性肿瘤的表面有完整上皮覆盖(如图3所示)，该特点为亚甲蓝染色标记手术范围提供了必要条件。

(3)亚甲蓝可清晰标记眼表恶性肿瘤的瘤体范围

将亚甲蓝应用于眼表恶性肿瘤，有助于观察到瘤体清晰着色(如图4所示)，且周围组织无渗透、无着染，该染色技术为个性化眶内容手术提供了必要条件。

(4)亚甲蓝辅助下可显著缩小手术范围、减少组织损伤

应用亚甲蓝染色后，对上、下睑缘进行缝合，从而使瘤体包裹于荷包中，能最大程度避免术中扰动瘤体(如图5所示)；经眼眶深部组织可清晰透见亚甲蓝着色区域(如图6所示)，从而使肿瘤范围可视化，个性化判断瘤体切缘。

(5)应用亚甲蓝的个性化眶内容手术可显著改善外观及预后

亚甲蓝辅助下的个性化眶内容手术可显著改善患者外观(如图7所示)；术后生存率与传统的大范围手术相比，亚甲蓝辅助的个性化眶内容手术可取得相同甚至较优的疗效(如图8所示)。

本发明经实验研究证实，所述的亚甲蓝可清晰标记眼表恶性肿瘤的瘤体范围，有助于个性化眶内容手术的实施，在完整切除瘤体的基础上最大化保留正常组织、减少手术损伤；进一步，所述的亚甲蓝可用于制备治疗眼表晚期恶性肿瘤的药物，尤其制备治疗眼表晚期恶性肿瘤手术标记瘤体范围的药物。

本发明为治疗眼表晚期恶性肿瘤提供了新的对策和手段。

附图说明

图1，显示亚甲蓝可使上皮组织着色，其中，

A：亚甲蓝着色清晰(白色虚线区域)、显色度高、周围无渗透；

B：亚甲蓝使上皮组织(蓝色箭头)着色，不影响非上皮组织。

图2显示与现有生物染料吲哚菁绿相比，亚甲蓝褪色慢、着色时间长。

图3显示眼表恶性肿瘤有完整的上皮组织覆盖，其中，

A：有结膜组织浸润的眼表恶性肿瘤，表面覆盖完整的结膜上皮(蓝色箭头)；

B：有角膜组织浸润的眼表恶性肿瘤，表面覆盖完整的角膜上皮(蓝色箭头)。

图4显示亚甲蓝可清晰标记眼表恶性肿瘤的瘤体范围，其中，

A：在术野滴入亚甲蓝，并用棉签擦拭多余液体；

B：眼表恶性肿瘤的浸润范围得到清晰标记。

图5显示个性化眶内容手术的关键步骤为缝合睑裂，其中，

A：沿瘤体周围3mm做手术切口；

B：缝合上下眼睑，以避免术中扰动瘤体。

图6显示亚甲蓝染色可辅助完成个性化眶内容手术，其中，

A：经眼眶深部组织可清晰透见亚甲蓝着色区域(蓝色箭头)；

B：沿着染区域周围8-10mm做手术切口。

图7显示亚甲蓝辅助的个性化眶内容手术可显著改善患者外观，其中，

A：亚甲蓝辅助的个性化眶内容手术；

B：传统眶内容手术。

图8显示与传统眶内容手术相比，亚甲蓝辅助的个性化眶内容手术可取得相同甚至稍优的生存率。

具体实施方式

实施例1临床试验研究

31名患者入组进行临床试验研究(患者为复旦大学附属眼耳鼻喉科医院所行眶内容手术的晚期CM患者，对该临床试验研究均知情)，其中个性化手术组13名、传统手术组18名，数据分析表明，两组患者临床基线特征基本一致；

本发明进行了包括以下步骤的实验研究：

(1)亚甲蓝标记上皮组织；

(2)眼表恶性肿瘤表面覆盖上皮组织；

(3)亚甲蓝标记眼表恶性肿瘤；

(4)亚甲蓝辅助实现个性化眶内容手术；

(5)数据分析；

结果显示，

(1)亚甲蓝可使上皮组织清晰、持久着色

将亚甲蓝应用于眼表，可观察到上皮组织清晰着色(如图1所示)，且周围组织无渗透、无着染。与现有生物染料吲哚菁绿相比，亚甲蓝的显色度高、持续时间长(如图2所示)，所述亚甲蓝有助于在大型手术中进行术野标记。

(2)眼表恶性肿瘤有完整的上皮组织覆盖

对眼表恶性肿瘤标本进行染色切片观察，结果显示，眼表恶性肿瘤的表面有完整上皮覆盖(如图3所示)，该特点为亚甲蓝染色标记手术范围提供了必要条件。

(3)亚甲蓝可清晰标记眼表恶性肿瘤的瘤体范围

将亚甲蓝应用于眼表恶性肿瘤，有助于观察到瘤体清晰着色(如图4所示)，且周围组织无渗透、无着染，该染色技术为个性化眶内容手术提供了必要条件。

(4)亚甲蓝辅助下可显著缩小手术范围、减少组织损伤

应用亚甲蓝染色后，对上、下睑缘进行缝合，从而使瘤体包裹于荷包中，能最大程度避免术中扰动瘤体(如图5所示)；经眼眶深部组织可清晰透见亚甲蓝着色区域(如图6所示)，从而使肿瘤范围可视化，个性化判断瘤体切缘。

(5)应用亚甲蓝的个性化眶内容手术可显著改善外观及预后

亚甲蓝辅助下的个性化眶内容手术可显著改善患者外观(如图7所示)；术后生存率与传统的大范围手术相比，亚甲蓝辅助的个性化眶内容手术可取得相同甚至较优的疗效(如图8所示)。

本发明经实验研究证实，所述的亚甲蓝可清晰标记眼表恶性肿瘤的瘤体范围，有助于个性化眶内容手术的实施，在完整切除瘤体的基础上最大化保留正常组织、减少手术损伤。