一种高纯度木犀草苷的提取分离方法

技术领域

本发明涉及植物提取物的提取分离技术领域，尤其涉及一种高纯度木犀草苷的提取分离方法。

背景技术

菊花为菊科菊属的干燥花蕾，中国自古以来就有将菊花用于食用或药用的传统，其具有散风清热、平肝明目的功效。菊花主要成分有黄酮类化合物、挥发油、氨基酸类化合物，其中黄酮类化合物包括槲皮素、木犀草素、木犀草苷、芦丁、紫云英苷、芹菜素和金合欢素-7-O-β-D葡萄糖苷。木犀草苷可溶于热水、热甲醇和乙醇。据报道，木犀草苷具有多种药理活性，例如，抗氧化能力、抑制肿瘤细胞的增殖以及抑制细菌的生长等。但是，要从多种黄酮类化合物中提取分离出高纯度的木犀草苷具有一定难度。

现阶段已有一些从植物中提取木犀草苷的方法，但是主要是从金银花以及其他植物中提取木犀草苷，如中国专利CN101985421A公开了“一种从金银花中同时制备绿原酸和木犀草苷的方法”，其中以金银花为原料提取了木犀草苷和绿原酸，使用柱层析的方法，以乙醇和水作为洗脱剂实现了对木犀草苷的纯化。中国专利CN108892694A公开了“木犀草苷的制备方法”，该方法也是使用金银花为原料，利用乙醇提取，大孔吸附树脂吸附，之后进行脱色和结晶，得到木犀草苷。另外，中国专利CN108997457A公开了“毛白杨叶中木犀草苷和槲皮素-3-O-β-吡喃葡萄糖苷的提取方法”，该方法使用乙醇和水作为溶剂进行柱层析可以分离得到木犀草苷。但是，以上方法中都是基于金银花和毛白杨叶等植物进行提取，成本较高，而且采用柱层析分离，分离效果较差，难以得到高纯度的木犀草苷。

因此，亟需提供一种能够以菊花为原料的高纯度木犀草苷的提取分离方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高纯度木犀草苷的提取分离方法，本发明提供的提取分离方法得到的木犀草苷纯度高，而且以菊花为原料，原料来源广、成本低。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种高纯度木犀草苷的提取分离方法，包括以下步骤：

(1)将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；

(2)将所述步骤(1)得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，得到分离粗品；

(3)将所述步骤(2)得到的分离粗品与甲醇混合后依次进行蒸发和过滤，得到滤液；

(4)将所述步骤(3)得到的滤液与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行二次中压分离，得到分离精品；

(5)将所述步骤(4)得到的分离精品与溶剂混合后进行结晶，得到高纯度木犀草苷。

优选地，所述步骤(1)中的菊花干粉的粒径为50～150目。

优选地，所述步骤(1)中菊花干粉的质量与提取剂的体积之比为(20～120)g：(500～900)mL。

优选地，所述步骤(1)中索氏提取的温度为100～250℃，索氏提取的时间为1～12h。

优选地，所述步骤(2)中的提取粗品与硅胶粉的质量之比为(2:1)～(8:1)。

优选地，所述步骤(4)中滤液的体积与硅胶粉的质量之比为(2～12)mL：(2～6)g。

优选地，所述步骤(2)中的硅胶粉和步骤(4)中的硅胶粉的粒径独立地为200～300目。

优选地，所述步骤(2)中的一次中压分离和步骤(4)中二次中压分离的压强独立地为0.1～2.0bar。

优选地，所述步骤(2)中的硅胶柱和步骤(4)中的硅胶柱的填料为200～300目的硅胶粉。

优选地，所述步骤(2)中的一次中压分离和步骤(4)中的二次中压分离独立地包括对目标产物依次进行的洗脱、分离和收集。

本发明提供的高纯度木犀草苷的提取分离方法，包括以下步骤：将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；将得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，得到分离粗品；将得到的分离粗品溶解于甲醇后依次进行蒸发和过滤，得到滤液；将得到的滤液与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行二次中压分离，得到分离精品；将得到的分离精品与溶剂混合后进行结晶，得到高纯度木犀草苷。本发明首先将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，其中索氏提取利用提取剂的回流和虹吸原理，能够对菊花干粉中的木犀草苷进行连续提取，且每次虹吸前，菊花干粉都能被纯的热提取剂所萃取，提取剂反复利用，萃取效率高，更有利于将菊花干粉中的木犀草苷被充分提取出来；在减压浓缩过程中能够去除大部分溶剂，由此得到的提取粗品在与硅胶粉混合后能够得到干样，更有利于填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，随后在一次中压分离中初步分离出非木犀草苷的其他菊花提取物成分；本发明将一次中压分离的分离粗品与甲醇混合后，可以使非木犀草苷溶解于甲醇中，在蒸发过程中随甲醇减少能够使分离粗品中非木犀草苷物质析出并将析出固体过滤出来，从而对分离粗品实现初步除杂以得到较高纯度的木犀草苷；随后在进行二次中压分离时，能够进一步分离出非木犀草苷的其他菊花提取物成分；最后通过结晶，能够有效纯化木犀草苷，从而得到高纯度木犀草苷。

实施例的结果表明，本发明提供的高纯度木犀草苷的提取分离方法得到的木犀草苷的纯度达到96％以上，而且以菊花为原料，原料来源广、成本低。本发明提供的高纯度木犀草苷的提取分离方法简单高效，在30～50min内单次可处理100～300g菊花干粉，能够实现高纯度木犀草苷的批量化提取分离；其中，分离粗品的纯度能够达到75～83％，且粗品分离率以菊花干粉计可达3.12％；另外，此方法可使用常规化学纯的溶剂以及硅胶填料进行分离，降低了工艺成本，使用的所有试剂均可以通过蒸馏的方式分离并反复利用，适合工业化生产，实现菊花的高值化利用。

附图说明

图1为本发明实施例1的提取分离的木犀草苷的液相色谱图；

图2为本发明实施例1的提取分离的木犀草苷的质谱图；

图3为本发明实施例1步骤(1)得到的提取粗品中的各组分的液相图。

具体实施方式

本发明提供了一种高纯度木犀草苷的提取分离方法，包括以下步骤：

(1)将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；

(2)将所述步骤(1)得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，得到分离粗品；

(3)将所述步骤(2)得到的分离粗品与甲醇混合后依次进行蒸发和过滤，得到滤液；

(4)将所述步骤(3)得到的滤液与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行二次中压分离，得到分离精品；

(5)将所述步骤(4)得到的分离精品与溶剂混合后进行结晶，得到高纯度木犀草苷。

本发明将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品。

在本发明中，所述菊花干粉的粒径优选为50～150目。本发明通过控制菊花干粉的粒径在上述范围内，更有利于充分提取菊花中的木犀草苷。

在本发明中，所述提取剂优选为乙醇或乙醇水溶液。本发明通过采用上述提取剂，更有利于将菊花干粉中的木犀草苷充分溶解出来。

在本发明中，所述菊花干粉的质量与提取剂的体积之比优选为(20～120)g：(500～900)mL，更优选为(25～100)g：(650～850)mL。本发明通过控制菊花干粉的质量与提取剂的体积之比在上述范围内，更有利于将菊花干粉中的木犀草苷充分溶解出来。

本发明对所述菊花干粉与提取剂的混合的操作没有要求，能够保证菊花干粉与提取剂混合均匀即可。

在本发明中，所述索氏提取的温度优选为100～250℃，更优选为120～200℃；所述索氏提取的时间优选为1～12h，更优选为2～10h。本发明通过控制索氏提取的温度和时间在上述范围内，更有利于菊花干粉中的木犀草苷充分溶出。

在本发明中，所述索氏提取的仪器优选为索氏提取器。本发明通过采用索氏提取器进行索氏提取，能够打破木犀草苷的溶解平衡，实现对木犀草苷的反复提取，萃取更为充分且萃取效率高。

在本发明中，所述减压浓缩的仪器优选为旋转蒸发仪。在本发明中，所述减压浓缩的温度优选为45～55℃，更优选为50℃。在本发明中，所述减压浓缩的氛围优选为真空。本发明对所述减压浓缩的时间没有特殊要求，能够保证在上述温度下将索氏提取的产物中的提取剂去除即可。

得到提取粗品后，本发明将得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，得到分离粗品。

在本发明中，所述提取粗品与硅胶粉的质量之比优选为(2:1)～(8:1)，更优选为(3:1)～(7:1)。本发明通过控制提取粗品与硅胶粉的质量之比在上述范围内，更有利于将木犀草苷与其他成分分离，从而有效提高木犀草苷的纯度。

在本发明中，所述硅胶粉的粒径优选为200～300目。本发明通过控制硅胶粉的粒径在上述范围内，更有利于提高木犀草苷的分离纯度。

在本发明中，所述硅胶柱中的填料优选为200～300目的硅胶粉。本发明通过采用上述填料，更有利于提高木犀草苷的分离纯度。

在本发明中，所述填料的质量与提取粗品和硅胶粉的总质量之比优选为(10:1)～(20:1)，更优选为(12:1)～(18:1)。

在本发明中，所述一次中压分离优选包括对目标产物依次进行的分离、收集和洗脱。

在本发明中，所述分离的压强优选为0.1～2.0bar，更优选为0.5～1.5bar。本发明通过控制分离的压强在上述范围内，更有利于提高木犀草苷的分离纯度。

在本发明中，所述收集的方式优选为紫外线色谱识别；所述紫外线色谱识别的波长优选为250～350nm。本发明通过采用上述方式进行收集，能够将木犀草苷与其他成分区分开，更有利于收集到高纯度的木犀草苷。

在本发明中，所述洗脱的方式优选为等度洗脱和梯度洗脱中的一种或两种。本发明通过采用上述洗脱方式，更有利于将除木犀草苷以外的其他成分去除，从而得到高纯度的木犀草苷。

在本发明中，所述洗脱所用的洗脱剂优选为二氯甲烷、甲醇和水中的两种，更优选为二氯甲烷和甲醇的混合液，或甲醇和水的混合液，最优选为二氯甲烷和甲醇的混合液。在本发明中，所述二氯甲烷与甲醇的体积比优选为3:1～20:1，更优选为5:1～18:1。本发明通过控制所用洗脱剂的种类，更有利于将除木犀草苷以外的其他成分去除，从而得到高纯度的木犀草苷。

得到分离粗品后，本发明将得到的分离粗品与甲醇混合后依次进行蒸发和过滤，得到滤液。

在本发明中，所述滤液与甲醇的体积之比优选为(1:4)～(1:7)，更优选为(1:5)～(1:6)。本发明通过控制滤液与甲醇的体积之比在上述范围内，能够将非木犀草苷成分在蒸发过程中随甲醇含量降低而析出，从而去除部分杂质，提高木犀草苷的纯度。

本发明对所述蒸发的温度和时间没有特殊要求，能够保证蒸发和过滤后的滤液与甲醇的体积之比在上述范围内即可。

在本发明中，所述过滤的方式优选为减压抽滤。本发明对所述减压抽滤的具体操作没有特殊限定，能够保证将滤液中的固体全部分离出来以得到滤液即可。

得到滤液后，本发明将得到的滤液与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行二次中压分离，得到分离精品。

在本发明中，所述滤液的体积与硅胶粉的质量之比优选为(2～12)mL：(2～6)g，更优选为(5～10)mL：(3～5)g。本发明通过将滤液的体积与硅胶粉的质量之比控制在上述范围内，能够有效分离出滤液中剩余的非木犀草苷成分，更有利于提高滤液中木犀草苷的纯度。

在本发明中，所述硅胶粉的粒径优选为200～300目。本发明通过控制硅胶粉的粒径在上述范围内，更有利于提高木犀草苷的纯度。

在本发明中，所述硅胶柱中的填料优选为200～300目的硅胶粉。本发明通过采用上述填料，更有利于提高木犀草苷的纯度。

在本发明中，所述填料的质量与提取粗品和硅胶粉的的总质量之比优选为(10:1)～(20:1)，更优选为(12:1)～(18:1)。本发明通过控制填料的质量与提取粗品的总质量与硅胶粉的质量之比在上述范围内，更有利于分离出高纯度的木犀草苷。

在本发明中，所述二次中压分离优选包括对目标产物依次进行的洗脱、分离和收集。

在本发明中，所述洗脱的方式优选为等度洗脱和梯度洗脱中的一种或两种。本发明通过采用上述洗脱方式，更有利于将除木犀草苷以外的其他成分去除，从而得到高纯度的木犀草苷。

在本发明中，所述洗脱所用的洗脱剂优选为二氯甲烷、甲醇和水中的两种，更优选为二氯甲烷和甲醇的混合液，或甲醇和水的混合液，最优选为二氯甲烷和甲醇的混合液。在本发明中，所述二氯甲烷与甲醇的体积比优选为3:1～20:1，更优选为5:1～18:1。本发明通过采用上述洗脱剂，更有利于将除木犀草苷以外的其他成分去除，从而得到高纯度的木犀草苷。

在本发明中，所述收集的方式优选为紫外线色谱识别；所述紫外线色谱识别的波长优选为250～350nm。本发明通过采用上述方式进行收集，能够将木犀草苷与其他成分区分开，更有利于收集到高纯度的木犀草苷。

得到分离精品后，本发明将得到的分离精品与溶剂混合后进行结晶，得到高纯度木犀草苷。

在本发明中，所述溶剂优选为甲醇水溶液或乙醇水溶液；所述甲醇水溶液或乙醇水溶液的体积分数独立地优选为20～95％。本发明通过采用上述种类的溶剂，更有利于木犀草苷充分结晶，将杂质保留在溶剂中，更有利于提高木犀草苷的纯度。

在本发明中，所述结晶的方式优选为冷却析晶或者重结晶，更优选为重结晶。本发明对所述冷却析晶或者重结晶的具体操作没有特殊要求，能够保证木犀草苷从溶剂中充分析出即可。本发明采用上述结晶方式，能够使木犀草苷进一步纯化，从而得到具有高纯度的木犀草苷。

本发明提供的高纯度木犀草苷的提取分离方法得到的木犀草苷的纯度达到96％以上，而且以菊花为原料，原料来源广、成本低；本发明提供的高纯度木犀草苷的提取分离方法简单高效，在30～50min内单次可处理量100～300g菊花干粉，能够实现高纯度木犀草苷的批量化提取分离；其中，分离粗品的纯度能够达到75～83％，且粗品分离率以菊花干粉计可达3.12％；另外，此方法可使用常规化学纯的溶剂以及硅胶填料进行分离，降低了工艺成本，使用的所有试剂均可以通过蒸馏的方式分离并反复利用，适合工业化生产，实现菊花的高值化利用。

下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种高纯度木犀草苷的提取分离方法，具体为以下步骤：

(1)将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；具体地：将100g菊花干粉使用滤纸包裹放入索氏提取器的提取管中，在提取瓶中加入800mL乙醇作为提取剂，即，所述菊花干粉的质量与提取剂的体积之比为100g：800mL；设定索氏提取的温度为220℃，时间为3h，在提取瓶中得到绿色提取液；将提取瓶内的绿色提取液使用旋转蒸发仪在真空氛围进行减压浓缩除去提取剂，温度为50℃，得到绿色固体即提取粗品。

(2)将所述步骤(1)得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，得到分离粗品；具体地：将提取粗品与200～300目的硅胶粉共20g混合进行拌样，其中，提取粗品与硅胶粉的质量比为3：1，制得粗提取粗品的干样，并将干样填充至硅胶柱上端，其中，硅胶柱中的填料为200～300目的硅胶粉250g，即，填料的质量与提取粗品和硅胶粉(即制备干样所用硅胶粉)的总质量之比为12.5:1；一次中压分离的过程为对目标产物依次进行的洗脱、分离和收集；使用体积为10：1的化学纯二氯甲烷和甲醇的混合液作为洗脱剂进行等度洗脱，然后将压强设定为0.5bar进行分离，最后采用紫外线色谱识别对目标产物进行收集，收集在343nm处有紫外吸收的组分，即得到分离粗品，所述分离粗品中的木犀草苷的纯度为75％。

(3)将所述步骤(2)得到的分离粗品溶解于甲醇后依次进行蒸发和过滤，得到滤液；具体地：将分离粗品全部溶解于50mL甲醇中，然后缓慢蒸发至10mL后静置3h待固体析出，减压抽滤分离固体，得到滤液；其中，所述滤液与甲醇的体积之比为1:5。

(4)将所述步骤(3)得到的滤液与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行二次中压分离，得到分离精品；其中，所述滤液的体积与硅胶粉的质量之比为10mL：5g；所述二次中压分离的过程以及所有参数与步骤(2)中一次中压分离的操作相同。

(5)将所述步骤(4)得到的分离精品与溶剂混合进行结晶，得到高纯度木犀草苷；具体地，使用体积分数为95％的乙醇作为溶剂，与分离精品混合后进行重结晶，得到高纯度木犀草苷；所述高纯度木犀草苷的纯度为95.8％。

对比例1

一种木犀草苷的提取分离方法，具体为以下步骤：

(1)将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；具体地：将25g菊花干粉使用滤纸包裹放入索氏提取器的提取管中，在提取瓶中加入650mL乙醇作为提取剂，即，所述菊花干粉的质量与提取剂的体积之比为25g：650mL；设定索氏提取的温度为180℃，时间为3h，得绿色提取液；将提取瓶内的绿色提取液使用旋转蒸发仪在真空氛围下除去提取剂，温度为50℃，得到提取粗品。

(2)将步骤(1)得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱中进行中压分离，得到分离粗品；其中，硅胶柱中的填料为C

(3)将步骤(2)得到的分离粗品与体积分数为75％的乙醇混合进行重结晶，得到纯度为90％的木犀草苷。

实施例2

一种高纯度木犀草苷的提取分离方法，具体为以下步骤：

(1)将菊花干粉与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；具体地：将25g菊花干粉使用滤纸包裹放入索氏提取器的提取管，在提取瓶中加入650mL乙醇作为提取剂，即，所述菊花干粉的质量与提取剂的体积之比为25g：650mL；设定索氏提取的温度为150℃，时间为3h，在提取瓶中得到绿色提取液；将提取瓶内的绿色提取液使用旋转蒸发仪在真空氛围进行减压浓缩除去提取剂，温度为50℃，得到绿色固体即提取粗品。

(2)将所述步骤(1)得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，得到分离粗品；具体地：将提取粗品与200～300目的硅胶粉共10g进行拌样，其中，提取粗品与硅胶粉的质量比为4：1，制得粗提取粗品的干样，并将干样填充至硅胶柱上端，其中，硅胶柱中的填料为200～300目的硅胶粉200g，即，填料的质量与提取粗品和硅胶粉(即制备干样所用硅胶粉)的总质量之比为20:1；一次中压分离的过程为对目标产物依次进行的洗脱、分离和收集；使用体积比为20:1的二氯甲烷和甲醇的混合液进行等度洗脱，再使用体积比为20:1的二氯甲烷和甲醇的混合液进行梯度洗脱，最后使用体积比为5:1的二氯甲烷和甲醇的混合液进行等度洗脱，然后将压强设定为0.8bar进行分离，最后采用紫外线色谱识别对目标产物进行收集，收集在343nm处有紫外吸收的组分，即得到分离粗品，所述分离粗品中的木犀草苷的纯度为83％。

(3)将所述步骤(2)得到的分离粗品溶解于甲醇后依次进行蒸发和过滤，得到滤液；具体地：将分离粗品全部溶解于30mL甲醇中，然后缓慢蒸发至5mL后静置3h待固体析出，减压抽滤分离固体，得到滤液；其中，所述滤液与甲醇的体积之比为1:6。

(4)将所述步骤(3)得到的滤液与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行二次中压分离，得到分离精品；其中，所述滤液的体积与硅胶粉的质量之比为5mL：3g；所述二次中压分离的过程以及所有参数与步骤(2)中一次中压分离的操作相同。

(5)将所述步骤(4)得到的分离精品与溶剂混合进行结晶，得到高纯度木犀草苷；具体地，使用体积分数为95％的乙醇作为溶剂，与分离精品混合后进行重结晶，得到高纯度木犀草苷；所述高纯度木犀草苷的纯度为96.2％。

对比例2

一种木犀草苷的提取分离方法，具体为以下步骤：

(1)将菊花与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；具体地：直接将30g未经处理的菊花使用滤纸包裹放入索氏提取器中的提取管中，在提取瓶中加入650mL乙醇作为提取剂，即，所述菊花的质量与提取剂的体积之比为30g：650mL；设定索氏提取的温度为120℃，时间为4h，得绿色提取液；将提取瓶内的绿色提取液使用旋转蒸发仪在真空氛围下除去提取剂，温度为50℃，得到绿色膏状固体即提取粗品。

(2)将所述步骤(1)得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱上端进行一次中压分离，得到分离粗品；具体地：将提取粗品与100～200目的硅胶粉共10g进行拌样，将制得的干样填充在硅胶柱上端；所述硅胶柱中的填料为100～200目的硅胶粉200g，即填料的质量与提取粗品和硅胶粉(即制备干样所用硅胶粉)的总质量之比为20:1；所述中压分离的过程为对目标产物依次进行的洗脱、分离和收集；使用体积比为20:1的二氯甲烷和甲醇的混合液进行梯度洗脱，最后使用体积比为5:1的二氯甲烷和甲醇的混合液进行等度洗脱，然后设定压强为0.8bar进行分离，最后采用紫外线色谱识别进行收集，收集在265nm处有紫外吸收的组分，即得到分离粗品；所述分离粗品中的木犀草苷的纯度为76％。

(3)将步骤(2)得到的分离粗品使用旋转蒸发器去除部分溶剂后静置析晶，然后抽滤得到固体，最后用甲醇洗涤固体，得到纯度为87％的木犀草苷。

对比例3

一种木犀草苷的提取分离方法，具体为以下步骤：

(1)将菊花与提取剂混合后依次进行索氏提取和减压浓缩，得到提取粗品；具体地：直接将15g未经处理的菊花使用滤纸包裹放入索氏提取器中的提取管中，在提取瓶中加入300mL乙醇作为提取剂，即，所述菊花的质量与提取剂的体积之比为15g：300mL；设定索氏提取的温度为160℃，时间为2.5h，得绿色提取液；将提取瓶内的绿色提取液使用旋转蒸发仪在真空氛围下除去提取剂，温度为50℃，得到绿色膏状固体即提取粗品；

(2)将步骤(1)得到的提取粗品与硅胶粉混合后填充至硅胶柱中进行中压分离，得到分离粗品；其中，硅胶柱中的填料为C

(3)将步骤(2)得到的分离粗品与体积分数为75％的乙醇混合进行重结晶，得到纯度为85％的木犀草苷。

由实施例1和对比例1可以看出，采用不同的分离步骤制备的木犀草苷，实施例1的木犀草苷的纯度明显高于对比例1。由实施例2和对比例1～2可以看出，同时改变菊花原料的来源和分离步骤，会进一步降低木犀草苷的纯度。

对实施例1分离提纯的木犀草苷分别进行液相色谱分析和质谱分析，分析结果分别如图1～2所示。由图1～2可以看出，木犀草苷的含量为96.22％，木犀草苷分子量为448.377，保留时间2.28峰的质谱m/z为449.50[M+1]

对实施例1步骤(1)得到的提取粗品中的各组分进行分析，分析结果如图3所示。由图3可以看出，经步骤(1)索氏提取和减压浓缩得到的提取粗品中还含有较多的杂质，其中木犀草苷与杂质A和杂质B极性很接近，使得木犀草苷分离纯化难度加大，最后通过调节洗脱剂极性(即使用体积为10：1的化学纯二氯甲烷和甲醇的混合液作为洗脱剂)进行洗脱能够将杂质A和杂质B一同去除。

综上可知，本发明提供的提取分离方法得到的木犀草苷纯度高，而且以菊花为原料，原料来源广、成本低。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。