一种复方植物消毒剂、其制备方法及应用

技术领域

本发明属于消毒剂技术领域，具体涉及一种复方植物消毒剂、其制备方法及应用。

背景技术

大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌为常见的致病性真菌，在免疫抑制、器官移植、获得性免疫缺陷综合征等多种易感因素出现的情况下，侵袭性致病性真菌会严重威胁患者生病安全，需使用相应的抗菌素或抗生素进行治疗。目前，有效控制其感染和传播的主要技术手段之一为日常消毒。随着社会的进步，人们对生活质量的要求和环保认识的日益提高，绿色环保、易清除、使用安全、无毒无味的消毒产品成为人们的首选。因此，由植物中具有杀菌作用的成分或提取物组成的植物消毒剂，得到了人们的关注。但单一植物消毒产品一般研发成本高、抗菌谱窄且易使细菌产生抗药性等缺陷，如将两种植物消毒产品混合的话，其不稳定，易结晶，储藏性能差，杀菌作用不是很好。

发明内容

(一)要解决的技术问题

为了解决现有技术的上述问题，本发明提供一种复方植物消毒剂，其具有良好的稳定性和杀菌性，能够满足抗菌、长期储藏等多方面的要求。

(二)技术方案

为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

一种复方植物消毒剂，其包括按质量份计的如下组分：槐果碱4～6份、绿原酸3.2～4.8份、金银花提取物0.8～1.2份、含Tween-80的水溶液8～12份、溶有苦参提取液的pH为8.0的PBS(磷酸缓冲盐溶液)0.6～0.9份，前面质量份的单位为mg计时，加入pH为8.0的PBS溶液至100mL。

如上所述的复方植物消毒剂，优选地，所述槐果碱、绿原酸、金银花提取物按5:4:1进行配制成。

如上所述的复方植物消毒剂，优选地，所述苦参提取液在pH为8.0的磷酸缓冲盐溶液中的含量为0.3～1.1％，苦参提取液的含量为2～3mg/mL。

如上所述的复方植物消毒剂，优选地，所述复方植物消毒剂还包括三氯生乙醇溶液0.03～0.08份，所述三氯生乙醇溶液是指按1～3g的三氯生加入100mL的无水乙醇的比例配置混合获得。

如上所述的复方植物消毒剂，优选地，所述含Tween-80的水溶液为体积分数为3％的Tween-80与水混合的溶液。

如上所述复方植物消毒剂的制备方法，其包括如下步骤：将槐果碱、绿原酸、金银花提取物与含Tween-80的水溶液混合，在恒温水浴中搅拌，加入0.03～0.08份的三氯生乙醇溶液，加入溶有苦参提取液的pH为8.0的PBS，如果质量份的单位均为mg时，并补加PBS至90mL左右，搅拌溶解后，将上述溶液用相同的PBS定容至100mL，获得复方植物消毒剂。

如上所述的制备方法，优选地，所述恒温水浴的温度为55～65℃。

如上所述的制备方法，优选地，所述苦参提取液的制备方法为称取苦参粉末8～12g，加100mL 50～75％乙醇浸泡24h后进行渗滤，渗滤流速为5mL/min。

如上所述的制备方法，优选地，所述搅拌溶解的速率为150转/分钟，搅拌溶解的时间为30min～80min。

如上所述的复方植物消毒剂在皮肤消毒、餐具消毒中的应用。

(三)有益效果

本发明的有益效果是：

本发明提供的一种复方植物消毒剂，将槐果碱、金银花及绿原酸三种抗菌性能良好的活性成分进行复配，充分利用了天然有效成分的复杂性、不易使菌体产生抗性，及化学杀菌物质作用快的特点，有效增强其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抗菌谱，拓宽了使用面。

本发明提供的一种复方植物消毒剂，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌，分别作用0.5min、1min、1.5min，杀灭率均≥99.97％。该消毒剂在54℃条件下密闭存放14d，杀菌效果无明显变化。该消毒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌具有较高灭菌性能且稳定性能良好。

具体实施方式

为了更好的解释本发明，以便于理解，下面通过具体实施方式，对本发明作详细描述。其中下面实施例中所用的槐果碱、绿原酸、金银花提取物、购自中国药品生物制品鉴定所，三氯生可购自武汉新大地环保材料有限公司。

实施例1

槐果碱、绿原酸、金银花提取物按5:4:1进行配制成，取总质量20-30mg与2-3mg的含3％的Tween-80水溶液混合，60℃恒温水浴搅拌30min，滴入1-2滴1-3％的三氯生乙醇溶液，加入溶有质量分数为0.3～1.1％的苦参提取液的pH为8.0的磷酸缓冲盐溶液(PBS)1.5mg，并补加PBS至90mL左右，150转/分钟下搅拌溶解1h后，将上述溶液用相同的PBS定容至100mL，制备新型复方植物消毒剂。

其中，3％的Tween-80水溶液配制时，按照3m L的Tween-80与97mL水混合后形成的溶液。

1-3％的三氯生乙醇溶液是指按1～3g的三氯生加入100mL的无水乙醇的比例配置混合获得。

苦参提取液的制备方法为称取苦参粉末8～12g，加100ml 65％乙醇浸泡24h后进行渗滤，渗滤流速为5mL/min，获得含量为2～3mg/mL的苦参提取液，加入pH为8.0的磷酸缓冲盐溶液(PBS)制成质量分数为0.3～1.1％苦参提取液。

实施例2

槐果碱、绿原酸、金银花提取物按5:4:1进行配制成，取总质量25mg与2.5mg的含3％的Tween-80水溶液混合，60℃恒温水浴搅拌30min，滴入2滴1.5％的三氯生乙醇溶液，加入溶有质量分数为0.7％的苦参提取液的pH为8.0的磷酸缓冲盐溶液(PBS)1.5mg，并补加PBS至90mL左右，150转/分钟下搅拌溶解1h后，将上述溶液用相同的PBS定容至100mL，制备新型复方植物消毒剂。

苦参提取液的制备方法为称取苦参粉末10g，加100mL 65％乙醇浸泡24h后进行渗滤，渗滤流速为5mL/min，获得含量为2.55mg/mL的苦参提取液，加入pH为8.0的磷酸缓冲盐溶液(PBS)制成质量分数为0.7％苦参提取液。

与上述步骤相同，仅不添加槐果碱-绿原酸-金银花提取物，制备复合剂，作为空白对照品。

在无菌环境下，打开冻干菌种管(大肠杆菌(ATCC25922)/金黄色葡萄球菌(ATCC6538)/白色念珠菌(ATCC 90028)，吸取营养肉汤适量加入其中，并轻轻吹洗数次，使菌种充分融化分散。然后取少量菌种悬浮液滴加到营养肉汤培养液的无菌试管中，在37℃下培育18-24h。用无菌接种环挑取第一代培养的菌悬液，轻轻划线接种在营养琼脂平板上，于37℃下培育18-24h。取出适量的上述第二代菌落接种在营养琼脂斜面上，在37℃下培育18-24h，得到第三代菌体。第三、四代的菌体繁殖比较稳定，可于每月在无菌条件下，划线传代接种于试管斜面上，于37℃恒温培养18-24h，获得供试菌株，置于0-4℃下冷藏备用。

染菌样液的制备：分别以上述大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌为试验菌，配制菌悬液，含菌量为1×10

中和剂鉴定试验：以实施例1制备的复方植物消毒剂原液为待测消毒剂，用含0.5％硫代硫酸钠、0.3％卵磷脂、3.0％Tween-80的PBS溶液为中和剂，对试验菌白色念珠菌作用0.5min。试验分组为：(1)复方消毒剂+染菌样液；(2)复方消毒剂+染菌样液+4.5mL中和剂；(3)4.5mL中和剂+染菌样液对照；(4)复方消毒剂+4.5mL中和剂+染菌样液对照；(5)染菌样液对照+4.5mL胰蛋白胨(TPS)；(6)试验所用同批次胰蛋白胨(TPS)。以此获得中和剂鉴定试验结果。在试验温度20℃±1℃条件下，重复三次。结果显示各组平板菌落平均生长量为：第(1)组0CFU/mL，第(2)组12CFU/mL，第(3)、(4)、(5)组分别为1890000CFU/mL、1870000CFU/mL、1900000CFU/mL，具体可见表1，其中第(3)、(4)、(5)组三组间误差率为0.53％。

表1中和剂鉴定试验结果

结果表明，中和剂可有效中和最高试验浓度新型复方植物消毒剂对细菌的残余作用，且中和剂对试验菌无明显影响。中和剂是为了中和抗菌剂有效成分，使其失效，在微生物灭杀试验中，用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液，中和微生物表面上残留的消毒剂，使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂，从而确认消毒剂的消杀。此实验证明，中和剂无明显消杀效果，并可很好的消除残留的消毒剂。

菌悬液定量杀菌试验：分别取平板上典型菌落接种于普通琼脂培养基平皿上，于37℃培养24小时，加入少量无菌PBS清洗菌苔，并以PBS稀释，试验菌悬液含菌量为1×10

表2消毒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的杀灭效果

注：阴性对照组无菌生长。

结果表明，新型复方植物消毒剂原液作用0.5分钟时，对三种菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的灭杀效果已≥99.97，作用1分钟，即可达到全部灭杀。此新型复方植物消毒剂对三种菌均具有很好的灭杀效果。

实施例3

采用加速实验法，将按实施例1方法配置好的复方植物消毒剂原液密封包装，置于54℃恒温箱中，存放14天，分别在存放前、存放后观察其颜色、澄清度变化、测试pH，按实施例2中定量杀菌试验，检测其杀灭效果，以评价该新型复方植物消毒剂的稳定性能。结果见表3。

表3复方植物消毒剂稳定性试验结果

结果表明，54℃存放14天后，新型复方植物消毒剂没有发生明显变化，pH中性，为无不溶物的深红色澄清溶液。对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用1min的灭杀效果，存放前为100％，存放后为99.99％。存放前后，对各种菌的杀灭效果无显著差异，说明本发明制备的复方植物消毒剂稳定性强。

实施例4将实施例1中制备的复方植物消毒剂涂抹在手部、器皿等需要消杀的位置表面，停留1min时，经检测消杀效果可达到100％。

对比例

经大量实验进行验证发现单独将槐果碱、绿原酸、金银花提取物中任两种进行混合，制备消毒剂，不可同时对三种菌得到理想的消杀效果。不同的pH值及Tween-80用量会对产品的外观及抗菌效果产生一定的影响。

按实施例1中方法进行复方植物消毒剂的配制，不同在于槐果碱、绿原酸、金银花提取物按2:2:1进行配制成，不加入苦参提取液，加入pH为10的磷酸缓冲溶液，结果发现产品的稳定性不好，放置3天后有沉淀生成，杀菌性能达到70％。

由此可见，优选采用实施例1中的方法进行复方植物消毒剂的配制。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明做其它形式的限制，任何本领域技术人员可以利用上述公开的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。