布雷那兰的口服配制品

技术领域

本发明涉及适合于口服给予的儿科药物组合物，其包含5-(1H-吡唑-4-基)-2-(6-((2,2,6,6-四甲基哌啶-4-基)氧基)哒嗪-3-基)苯酚(INN：布雷那兰(branaplam))和药学上可接受的环糊精。特别地，本发明涉及此类组合物，其包含羟丙基-β-环糊精、一种或多种增味剂/掩味剂并且不含防腐剂。本发明进一步提供了治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予有效量的本文披露的药物组合物。

背景技术

近端脊髓性肌肉萎缩症(SMA)是一组以脊髓的前角细胞退化为特征的遗传性、临床异质性神经肌肉障碍。患者躯干和四肢的肌肉呈对称性无力，下肢较上肢易受侵犯，并且近端的肌肉比远端的肌肉更无力；隔膜、面部和眼部肌肉幸免。有三种儿童发作型SMA(I型、II型和III型)和一种近期分类的成人发作型IV型，所有这些类型均可以根据发作年龄以及通过临床检查、肌肉活检和肌电图(EMG)评估的临床过程的严重程度来区分(Munsat T L,Davies K E(1992))。

I型(沃德尼格·霍夫曼病(Werdnig-Hoffmann disease))是最为急性和严重的形式，在出生6个月内发作并且通常在两岁前死亡；婴儿无法自行坐立。疾病的症状可以在子宫内就出现，表现为胎动减少；在出生时出现；或者更常见的，在出生后的前四个月内出现。患病的婴儿特别软弱无力，表现出进食困难和腹式呼吸，并且特征在于肋间肌和辅助呼吸肌总体无力。患病婴儿永远无法坐立或站立，并且通常在2岁前死亡；死亡原因通常是呼吸功能障碍。

II型(中度，慢性形式)在6至18月龄之间发作；常现肌束颤动，并且肌腱反射逐渐减弱。婴儿无法自行站立或行走。进食和吞咽问题在II型SMA中并不常见，但有些患者可能需要饲管。大部分患者通常出现渐进性脊柱侧凸，可能需要手术矫正。与I型疾病患者一样，由于延髓功能差以及肋间肌无力，气管分泌物清除和咳嗽可能存在困难。这些患者具有严重的肌张力低下、对称性迟缓性瘫痪，并且无法控制头部运动。

III型(库格尔贝格-韦兰德病(Kugelberg-Welander disease)或青少年脊髓性肌肉萎缩症)是一种轻度的慢性形式，其在18个月后发作；运动发展指标正常，并且可以持续轻度运动直到不同年龄。这些患者通常会出现脊柱侧凸，并且经常可以看到关节过度使用的症状，这通常是由于无力造成的。预期寿命基本正常，但生活质量显著下降。

I型、II型和III型随时间而进展，伴有患者状况的恶化。

成人发作型IV型的特征是在二十或三十岁时出现无力，有轻度的运动障碍，但不存在呼吸或营养问题。成人SMA的特征在于发作时症状不明显并且进展非常缓慢。在IV型中，延髓肌很少受侵犯。尚不清楚IV型SMA在病因学上是否与I至III型相关。

脊髓性肌肉萎缩症的其他形式包括X连锁病、伴有呼吸窘迫的脊髓性肌肉萎缩症(SMARD)、脊髓延髓肌肉萎缩症(肯尼迪病(Kennedy’s disease)或延髓-脊髓性肌肉萎缩症)和远端脊髓性肌肉萎缩症。

SMA是由于运动神经元存活(SMN)基因的突变引起的，该基因以两种形式存在于人类中(SMN1和SMN2)。SMN的缺失对于运动神经元是有害的并导致神经肌肉功能不足，这是该疾病的标志性特点。从遗传学的角度，SMA是常染色体隐性遗传病，由位于5q13的SMN1基因的破坏引起(Lefebvre S.等人(1995)Cell[细胞]80:155-165)。超过98％的脊髓性肌肉萎缩症患者具有缺失、重排或突变造成的SMN1纯合破坏。但是，所有这些患者均保留至少一个SMN2拷贝。

在基因组水平，仅发现了5个使SMN1基因区分于SMN2基因的核苷酸。此外，这两种基因产生相同的mRNA，只是在外显子7中有一个沉默核苷酸变化，即SMN2的外显子7中向内六个碱基对的C→T改变。该突变调节外显子剪接增强子的活性(Lorson和Androphy(2000)Hum.Mol.Genet.[人类分子遗传学]9:259-265)。内含子和启动子区中该核苷酸变化和其他核苷酸变化的结果是大部分SMN2被可变剪接，并且它们的转录物缺乏外显子3、5或7。相比之下，从SMN1基因转录的mRNA通常是全长mRNA，其转录物中仅有一小部分被剪接除去了外显子3、5或7(Gennarelli等人(1995)Biochem.Biophys.Res.Commun.[生物化学与生物物理学研究通讯]213:342-348；Jong等人(2000)J.Neurol.Sci.[神经科学杂志]173:147-153)。所有的SMA个体具有至少一个、通常是两个至四个SMN2基因拷贝，其编码与SMN1相同的蛋白；然而，SMN2基因仅产生低水平的全长SMN蛋白。

SMNΔ7蛋白是无功能的，并且认为其被迅速降解。约10％的SMN2前体mRNA被恰当剪接并在随后被翻译成全长SMN蛋白(FL-SMN)，其余的是SMNΔ7拷贝。SMN2剪接的效率可能取决于疾病的严重程度，并且SMN2全长转录物的产率可以在10％至50％的范围内。此外，SMN1基因(其大约90％变成了FL-SMN基因产物和蛋白)的存在或缺失通过是否能够补偿截短SMNΔ7拷贝影响SMA的严重性。低水平的SMN蛋白允许胚胎发育，但不足以维持脊髓运动神经元的存活。

SMA患者的临床严重程度与SMN2基因数量和所产生的功能性SMN蛋白水平呈负相关(Lorson C L等人(1999)PNAS[美国科学学院学报]；96:6307-6311)(Vitali T.等人(1999)Hum Mol Genet[人类分子遗传学]；8:2525-2532)(Brahe C.(2000)Neuromusc.Disord.[神经肌肉障碍]；10:274-275)(Feldkotter M等人(2002)Am J HumGenet[美国人类遗传学杂志]；70:358-368)(Lefebvre S等人(1997)Nature Genet[自然遗传学]；16:265-269)(Coovert D D等人(1997)Hum Mol Genet[人类分子遗传学]；6:1205-1214)(Patrizi A L等人(1999)Eur J Hum Genet[欧洲人类遗传学杂志]；7:301-309)。

目前针对SMA的治疗策略大部分集中在提高全长(野生型)SMN蛋白水平、调节对外显子7包含的剪接和稳定野生型蛋白，以及在较小程度上集中在通过提供营养支持或通过抑制骨骼肌萎缩来恢复SMA中的肌肉功能。

尽管所述疾病的动物模型的可用性正在迅速增加对该领域的认知，但是导致运动神经元丧失和肌肉萎缩的机制仍然不清楚(Frugier T等人(2000)Hum Mol.Genet.[人类分子遗传学]9:849-58；Monani U R等人(2000)Hum Mol Genet[人类分子遗传学]9:333-9；Hsieh-Li H M等人(2000)Nat Genet[自然遗传学]24:66-70；Jablonka S等人(2000)HumMol.Genet.[人类分子遗传学]9:341-6)。此外，SMN蛋白的功能仍然部分未知，并且研究表明所述SMN蛋白可以参与mRNA代谢(Meister G等人(2002).Trends Cell Biol.[细胞生物学的发展趋势]12:472-8；Pellizzoni L等人(2002).Science.[科学]298:1775-9)，并且可能参与将蛋白质/mRNA运输至神经肌肉接头(Ci-fuentes-Diaz C等人(2002)HumMol.Genet.[人类分子遗传学]11:1439-47；Chan Y B等人(2003)Hum Mol.Genet.[人类分子遗传学]12:1367-76；McWhorter M L等人(2003)J.Cell Biol.[细胞生物学杂志]162:919-31；Rossoll W等人(2003)J.Cell Biol.[细胞生物学杂志]163:801-812)。

除SMA外，还已经单独报告了神经源性先天性多关节挛缩症(先天性AMC)的亚类涉及SMN1基因缺失，这表明患病者中的病理在某种程度上可能是由于运动神经元SMN的低水平。(L.Burgien等人,(1996)J.Clin.Invest.[临床研究杂志]98(5):1130-32)。先天性AMC影响人和动物，例如马、牛、绵羊、山羊、猪、狗和猫(M.Longeri等人,(2003)Genet.Sel.Evol.[遗传选择进化]35:S167-S175)。此外，还发现肌萎缩性侧索硬化(ALS)的发病风险或严重程度也与低水平的运动神经元SMN有关。

WO 2014/028459披露了一组SMA调节剂化合物，特别是用于调节来自SMN2基因的SMN蛋白表达的化合物。其中的实例17-13涉及盐酸盐形式的布雷那兰。然而，其中没有指定对于布雷那兰的特定配制品。

布雷那兰是分子量为393.48的小分子。布雷那兰是两性的，测量的pKa为11.5(酸)、9.8(碱)和2.3(碱)，并且亲脂性低，测量的logP为2.6。布雷那兰盐酸盐是(例如在水中)具有pH依赖性溶解度的晶体，其溶解度随着pH的增加而降低(pH 6.8时的溶解度为0.004mg/mL)。它被归类为BCS II类分子，具有低溶解度(在FeSSIF V2中为0.06mg/mL；在FaSSIF V2中为0.02mg/mL)和高渗透性。

目前尚无适合儿科使用的布雷那兰药物配制品。实际上，这种配制品的开发受到若干技术挑战的严重阻碍，所述技术挑战诸如布雷那兰在水性介质中的溶解度差(即使在存在表面活性剂的情况下)、pH依赖性稳定性(在pH 4下稳定性差)以及布雷那兰与一些防腐剂(如山梨酸钾)不相容。另外，这种配制品的目标人群，即小于两岁的婴儿和儿童，施加了进一步的障碍，如可接受的赋形剂的选择非常有限、口服溶液中药物物质的不适味道以及所需的剂量灵活性和准确性。因此，迫切需要开发有效且合适的用于儿科使用的布雷那兰口服配制品。

发明内容

本发明提供了一种支持布雷那兰给予的创新性儿科口服溶液，尤其是对于小于两岁的患者，所述创新性儿科口服溶液提供剂量灵活性，具有良好的耐受性(不含防腐剂)且无余味，并结合了无菌制造策略。

在第一方面，本发明涉及一种包含布雷那兰或其药学上可接受的盐、以及一种药学上可接受的环糊精或多种药学上可接受的环糊精的组合的药物组合物。

在第二方面，本发明涉及根据第一方面所述的药物组合物，其用于治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症。

在第三方面，本发明涉及一种治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予有效量的根据第一方面所述的药物组合物。

在第四方面，本发明涉及根据第一方面所述的药物组合物，其用于制造治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症的药物。

附图说明

图1显示了实例25a中示例的制备布雷那兰溶液的过程流程图。

定义

为了可以更容易地理解本披露内容，首先定义某些术语。另外的定义在整个具体实施方式中陈述。

如本文所用，术语“一个/种(a/an)”、“该(the)”以及在本披露内容的上下文中使用的类似术语(尤其在权利要求的上下文中)应被解释为涵盖单数和复数二者，本文中除非另外指示或与上下文明显相矛盾。因此，术语“一个”(或“一种”)、“一个或多个”和“至少一个”在本文中可以互换使用。

“和/或”意指列表的组分或特征中的每一者或两者或全部、尤其是其中两个或更多个是替代或累积方式的可能的变体。

与数值X相关的术语“约”意指例如X±15％，包括该范围内的所有值。

如本文所用，术语“(一种或多种)游离形式”或“以游离形式”或“以所述游离形式”是指非盐形式(如碱游离形式)的化合物。

在本文中，“包含”意指可以添加不影响最终结果的其他步骤和其他成分。该术语包括术语“由……组成”和“基本上由……组成”。本发明的组合物和方法/过程可以包括本文所述的本发明必要元件和限制以及本文所述的任何另外或任选成分、组分、步骤或限制，由其组成和基本上由其组成。

本文将术语“药物组合物”定义为指含有至少一种待给予至受试者(例如人)以便预防或治疗影响人的特定疾病或病症的治疗剂的混合物或溶液。

本文使用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断的范围，适合用于与人类和动物的组织接触而不产生过度毒性、刺激、过敏反应、或其他问题或并发症，同时具有相称的合理受益/风险比的那些化合物、材料、组合物、和/或剂型。

如本文所用，术语“患者”或“受试者”应理解为意指人。除非指出时，否则所述术语“患者”或“受试者”在本文中可互换地使用。

如本文所用，如果受试者将在生物学上、在医学上或在生活质量上从治疗中获益，则这名受试者是“需要”这种治疗的。

在给予药物的上下文中，术语“一周一次”或“每周一次”在本文意指每周给予一个剂量的药物一次，其中所述剂量是例如在一周的同一天给予。

在给予药物的上下文中，术语“一周两次”在本文意指每周给予一个剂量的药物两次，其中每次给予是例如在分开的两天，例如以规则的间隔，例如间隔72小时。

术语“药物”、“活性物质”、“活性成分”、“药物活性成分”、“活性剂”、“治疗剂”或“药剂”应理解为意指游离形式或药学上可接受的盐形式的化合物。具体地，在本发明的上下文中，它是布雷那兰或其药学上可接受的盐。

本发明的配制品将包含以有效量存在的活性剂。术语“有效量”或“治疗有效量”或“药学有效量”意指当给予至受试者时足以引起所希望或期望的反应的活性剂的量或数量，或换言之，足以引起可察觉的生物学反应的量。应当理解，“有效量”或“治疗有效量”可以因受试者而变化，这是由于受试者的布雷那兰代谢、年龄、体重、一般状况、所治疗的病症、所治疗病症的严重程度以及开处方的医师的判断的变化。

术语“治疗”包括：(1)预防或延迟可能患有或易患所述状态、障碍或病症但尚未经历或展现出所述状态、障碍或病症的临床或亚临床症状的动物、特别是哺乳动物并且尤其是人中正在发展的所述状态、障碍或病症的临床症状的出现；(2)抑制所述状态、障碍或病症(例如在维持治疗的情况下阻止、减缓或延迟所述疾病的发展或所述疾病的复发、所述疾病的至少一种临床或亚临床症状的发展)；和/或(3)缓解所述病症(即导致所述状态、障碍或病症或者其临床或亚临床症状中的至少一种的消退)。对要治疗的患者的益处是统计上显著的，或者对于患者或医师至少是可察觉的。然而，可以理解的是，当将药物给予至患者以治疗疾病时，结果可能并不总是有效的治疗。

本文所用的术语“与SMN缺乏相关的病症”包括但不限于脊髓性肌肉萎缩症(SMA)、神经源性先天性多关节挛缩症(先天性AMC)和肌萎缩性侧索硬化(ALS)。

如本文所用，术语“脊髓性肌肉萎缩症”或“SMA”包括三种形式的儿童发作型SMA：I型(沃德尼格·霍夫曼病)、II型(中度，慢性形式)、III型(库格尔贝格-韦兰德病)；成年发作型IV；以及其他形式的SMA，包括X连锁病、伴有呼吸窘迫的脊髓性肌肉萎缩症(SMARD)、脊髓延髓肌肉萎缩症(肯尼迪病或延髓-脊髓性肌肉萎缩症)和远端脊髓性肌肉萎缩症。

如本文所用，术语“抑制(inhibit、inhibition或inhibiting)”是指减少或抑制给定的病症、症状或障碍、或疾病，或显著降低生物活性或过程的基线活性。

具体实施方式

在开发布雷那兰口服配制品的过程中，发现布雷那兰在水中的溶解度非常低。然而，令人惊讶的是，通过使用特殊的增溶剂，可以使布雷那兰达到足够的溶解度。

在制造过程中，发现山梨酸钾(防腐剂)在开发的配制品中不相容或无效。因此，不能制成可接受的不含对羟基苯甲酸酯的防腐的儿科配制品。然而，在本发明的上下文中，这通过使用无菌制造程序来克服，任选地补充使用具有防儿童/显窃启盖的适当瓶子。

因此，本发明是基于以下令人惊讶的发现：使用特殊的组合物和制造程序有可能开发出适合于儿科用途的稳定的布雷那兰配制品。该配制品克服了布雷那兰(例如在水中)的pH依赖性溶解度(其中溶解度在pH升高时降低(布雷那兰盐酸盐在pH 6.8时的溶解度为0.004mg/mL))，使浓度达到1mg/ml或更高，适用于药用预期用途；该配制品及其中的赋形剂也支持特殊目标人群(<2岁且病重)；作为不含防腐剂的一次性配制品，它避免了1)由于HP-b-CD(羟丙基环糊精)与防腐剂的相互作用而导致的高防腐剂水平负担，2)布雷那兰与山梨酸钾的化学相互作用，以及3)数量有限的被批准适合于婴儿(<2岁)的防腐剂。所披露的配制品还具有合适的余味，克服了布雷那兰的厌恶性味道，并且可以通过支持不含防腐剂的配制品的制造的无菌制造过程来生产。

配制品也可用于成人人群中以治疗II型和III型SMA。

在第一方面，本发明涉及一种包含布雷那兰或其药学上可接受的盐、以及一种药学上可接受的环糊精或多种药学上可接受的环糊精的组合的药物组合物。

布雷那兰是5-(1H-吡唑-4-基)-2-(6-((2,2,6,6-四甲基哌啶-4-基)氧基)哒嗪-3-基)苯酚的INN，并且其特征在于以下化学式(I)：

本申请包括布雷那兰的药学上可接受的盐(优选衍生自无机酸或有机酸)、溶剂化物、水合物、对映体、多晶型物或其混合物。

“布雷那兰”或“布雷那兰游离碱”或“布雷那兰碱”或“所述游离形式的布雷那兰”或“游离形式的布雷那兰”是指所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物，并且对“其药学上可接受的盐”的任何提及特别是指其药学上可接受的酸加成盐。在优选的实施例中，如在本发明的上下文中(尤其是在上文或下文的任何实施例以及权利要求的上下文中)使用的术语“布雷那兰或其盐，如其药学上可接受的盐”因此应解释为涵盖所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，除非本文另有规定。如本文所用，术语“布雷那兰盐酸盐”或“布雷那兰单盐酸盐”或“盐酸盐形式的布雷那兰”是指5-(1H-吡唑-4-基)-2-(6-((2,2,6,6-四甲基哌啶-4-基)氧基)哒嗪-3-基)苯酚盐酸盐。具体地，布雷那兰是盐酸盐的形式。可以如WO 2014/028459中(例如在实例17-13中)所述制备布雷那兰或其药学上的盐(如布雷那兰盐酸盐)，所述文献通过引用并入本文。

如本文所用，对布雷那兰的量(例如mg、百分比)的提及应理解为所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物的量。如本文所用，对布雷那兰或其药学上可接受的盐的量(例如mg、百分比)的提及应理解为所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物的量，所述量对于药学上可接受的盐将相应地调整。

如本文所用，对布雷那兰的浓度(例如mg/ml)的提及应理解为所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物的量。如本文所用，对布雷那兰或其药学上可接受的盐的浓度(例如mg/ml)的提及应理解为所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物的量，所述量对于药学上可接受的盐将相应地调整。

如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所披露化合物的衍生物，其中通过根据需要使活性剂与酸或碱反应以形成离子结合对来对所述活性剂进行修饰。药学上可接受的盐保留了所述化合物的生物有效性和特性并且典型地不是生物学上或其他方面不希望的。性质上为碱性的本披露内容的化合物能够与各种无机酸和有机酸形成多种盐。可用于制备本披露内容的此类碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸是可形成无毒酸加成盐的酸，所述无毒酸加成盐即含有药学上可接受的阴离子的盐，如乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonate)、苯磺酸盐(besylate)、硫酸氢盐、丁酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、樟脑酸盐、氯化物/盐酸盐、氯茶碱盐(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、双葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐(gluceptate)、葡庚糖酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、乙醇酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、氢碘化物/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基磺酸盐(methanesulfonate)、甲基硫酸盐(methylsulphate)、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八烷酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、苦味酸盐、三甲基乙酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐(toluenesulfonate)、甲苯磺酸盐(tosylate)、三氟醋酸盐、十一烷酸盐、2-羟基乙磺酸盐和2-萘磺酸盐。其他合适的盐的列表可见于例如“Remington'sPharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学]”,第20版,Mack Publishing Company[麦克出版公司],宾夕法尼亚州伊斯顿,(1985)；以及Stahl和Wermuth的“Handbook ofPharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use[药物盐手册：特性、选择和使用]”(Wiley-VCH出版社,德国魏因海姆,2002)。由于单一本披露内容的化合物可包括一个以上酸性或碱性部分-，故本披露内容的化合物可包括单一化合物的单盐、二盐或三盐。

布雷那兰是分子量为393.48的小分子。该分子是两性的，其测量的pKa为11.5(酸)、9.8(碱)和2.3(碱)并且具有低亲脂性，测量的logP为2.6，以及pH依赖性溶解度(例如在水中)，溶解度在pH升高时降低(布雷那兰盐酸盐在pH 6.8时的溶解度为0.004mg/mL)。在另一方面，用于给予至婴儿的稳定剂的使用仅限于很少的赋形剂且浓度受限。研究了适合儿科目标人群的以下配制策略以增加所述药物的溶解度并开启布雷那兰对患者的治疗益处：使用助溶剂(例如，PEG 300、PEG400、丙三醇、丙二醇等)；使用表面活性剂(例如，Cremophor RH 40、吐温80等)；和pH调节。出乎意料的是，发现仅基于β-环糊精的媒介物能使布雷那兰溶解度提高至所需水平，并且在室温下使用17.5％HP-b-CD可以溶解高达约10mg/mL的布雷那兰(例如，高达约10mg/mL的布雷那兰)。不仅可以增加溶解度，而且所述配制品还可以用包括奶(即

环糊精(也称为环状直链淀粉)是由

由于吡喃葡萄糖单元的椅型构象，环糊精的形状像截锥体而不是完美的圆柱体。羟基功能取向椎体外部，其中糖残基的伯羟基基团位于椎体的狭窄边缘，仲羟基基团位于较宽的边缘。中心腔以葡萄糖残基的骨架碳和醚氧作为衬里，这使其具有亲脂性特征。β-环糊精分子的化学结构(左)和曲面形状(右)在下面的方案1中进行了说明。

天然环糊精、特别是β-环糊精具有有限的水溶性，这意味着由亲脂体与这些环糊精相互作用产生的络合物可能具有有限的溶解度，从而导致固体环糊精络合物从水和其他水性体系沉淀出来。实际上，天然环糊精的水溶性远低于可比较的无环糖的水溶性。认为这是由于在晶体状态下相对较强的分子间氢键合。形成羟基基团的任何氢键的取代，即使被亲脂性甲氧基官能团取代，也导致其水溶性的显著改善。具有药用价值的环糊精衍生物包括β-和γ-环糊精的羟丙基衍生物、无规甲基化的β-环糊精、磺丁基醚β-环糊精和所谓的支链环糊精，如葡糖基-β-环糊精。β-环糊精及其一些衍生物的结构和溶解度如下所示。

与γ-环糊精不同，天然的α-和β-环糊精不能被人唾液和胰淀粉酶水解。然而，肠道微生物区系可以发酵α-和β-环糊精两者。环糊精既大(MW在近1000道尔顿至超过2000道尔顿的范围内)，又因大量的H供体和受体而具有亲水性，因此不会以完整的形式从胃肠道吸收。亲水性环糊精在低至中等的口服剂量下被认为是无毒的。亲脂性环糊精衍生物(如甲基化环糊精)在一定程度上从胃肠道吸收到体循环中，并且在肠胃外给予后已经显示出毒性。

在一个实施例中，药学上可接受的环糊精为β-环糊精。更优选地，将β-环糊精进行化学修饰，尤其是烷基化或羟基烷基化。合适的经修饰的β-环糊精的非限制性实例是2-羟丙基-β-环糊精(也称为羟丙基倍他环糊精复合物(Betadex)；由HP-b-CD表示)、磺丁基醚-β-环糊精或其钠盐(也称为倍他环糊精复合物磺丁基醚钠和磺丁基醚β-环糊精钠；用SBE-b-CD表示；由CyDex制药公司(CyDex Pharmaceuticals,Inc.)以商标名称

在羟丙基化β-环糊精的情况下，平均取代度优选从2.8至10.5、更优选从4至8、甚至更优选从5.5至6.9、特别地从约6.1至约6.3变化。平均取代度应理解为每个环糊精环的取代基数。尤其是5至7的平均取代度，特别是约6.2，导致优异的溶解特性。

在产生根据本发明的布雷那兰配制品的过程中，环糊精与布雷那兰的摩尔比通常为1:4至200:1、优选1:2至100:1，更优选1:1至50:1，甚至更优选2:1至25:1、或2:1至20:1、或3:1至15:1，特别是约13.2:1。

本发明的组合物的化合物和盐包括水合物和溶剂化物形式。

在一个实施例中，药物组合物是液体组合物。优选地，所述组合物是溶液。在优选的实施例中，溶剂是水。

在一个实施例中，本发明的组合物是浓缩物形式。在本申请中，“浓缩物”指的是优选不直接给予至患者而是在使用前稀释的配制品。例如，可以将浓缩物用合适的液体(例如水)，可替代地用5％葡萄糖溶液或盐水稀释以给出随时可用的配制品。可替代地，可以直接使用浓缩物。

在一个实施例中，布雷那兰或其任何药学上可接受的盐的浓度在约1mg/ml至约30mg/ml的范围内。在优选的实施例中，所述浓度在约3mg/ml至约10mg/ml的范围内。在更优选的实施例中，所述浓度为约3.5mg/ml。具体地，量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，并且如果使用其盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

在一个实施例中，环糊精的浓度在0.1％至70％(w/v)的范围内。在优选的实施例中，所述浓度在2％至25％(w/v)的范围内。在另一个优选的实施例中，所述浓度在2％至20％(w/v)的范围内。在更优选的实施例中，所述浓度为约17.5％(w/v)。

在一个实施例中，组合物的pH在3.5-9的范围内。在优选的实施例中，组合物的pH为约4。在另一个实施例中，组合物的pH在3.5至7的范围内或4至7的范围内。

在优选的实施例中，药物组合物包含浓度为1mg/ml至30mg/ml的布雷那兰或其药学上可接受的盐、浓度在2％至20％(w/v)的范围内的2-羟丙基-β-环糊精，并且组合物的pH为约4。具体地，量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，并且如果使用其盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

在优选的实施例中，药物组合物包含浓度为1mg/ml至30mg/ml的布雷那兰单盐酸盐、浓度在0.1％至70％(w/v)的范围内的2-羟丙基-β-环糊精，并且组合物的pH在3.5至9的范围内，其中pH通过使用酸(例如，盐酸盐、乙酸、磷酸、乳酸、酒石酸、柠檬酸)或碱(例如，氢氧化钠)来调节。

在优选的实施例中，药物组合物包含浓度为1mg/ml至40mg/ml的布雷那兰单盐酸盐、浓度在0.1％至70％(w/v)的范围内的磺丁基醚β-环糊精钠盐(例如

在一个实施例中，组合物进一步包含至少一种增味剂/掩味剂。增味剂/掩味剂是用于改善味道的感官添加剂。

在一个实施例中，增味剂/掩味剂可以是浓度在0.05％-0.5％(w/v)的范围内的甜味剂，例如糖精钠、蔗糖、葡萄糖、果糖、阿斯巴甜和/或三氯蔗糖。在优选的实施例中，所述增味剂/掩味剂为三氯蔗糖，优选浓度为0.05％(w/v)。

在一个实施例中，组合物进一步包含至少一种调味剂，即增味剂。法规(EC)第1333/20082号的附件I的第14点中关于食品添加剂制定了“增味剂”的定义：“增味剂是增强食品的现有味道和/或气味的物质”。

在一个实施例中，调味剂可以具有任何水果(如柠檬、苹果、香蕉、菠萝、橙子、浆果、杏、樱桃)和/或香草醛、薄荷、肉桂或是任何其他药学上可接受的调味赋形剂。在优选的实施例中，所述调味剂是香草醛，更优选浓度范围为0.05％至0.2％(w/v)，甚至更优选0.1％(w/v)。

在优选的实施例中，药物组合物包含浓度为3.5mg/ml的布雷那兰或其药学上可接受的盐、浓度为17.5％(w/v)的2-羟丙基-β-环糊精、浓度为0.05％(w/v)的三氯蔗糖、浓度为0.1％(w/v)的香草醛、水。优选地，组合物的pH在约4至约7的范围内，更优选地为约4。

在优选的实施例中，药物组合物包含在水中的布雷那兰或其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)(其中布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的浓度为1mg/ml至30mg/ml(例如3.5mg/ml))和浓度为17.5％(w/v)的药学上可接受的环糊精(例如，2-羟丙基-β-环糊精)。优选地，组合物的pH在约4至约7的范围内，更优选地为约4。量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，如果使用其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

在一个实施例中，药物组合物包含在水中的布雷那兰或其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)(其中布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的浓度为1mg/ml至30mg/ml(例如3.5mg/ml))、浓度为17.5％(w/v)的药学上可接受的环糊精(例如，2-羟丙基-β-环糊精)和浓度为0.05％至0.5％(w/v)(例如0.05％(w/v))的至少一种掩味剂(例如三氯蔗糖)。优选地，组合物的pH在约4至约7的范围内，更优选地为约4。量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，如果使用其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

在一个实施例中，药物组合物包含在水中的布雷那兰或其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)(其中布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的浓度为1mg/ml至30mg/ml(例如3.5mg/ml))、浓度为17.5％(w/v)的药学上可接受的环糊精(例如，2-羟丙基-β-环糊精)、浓度为0.05％至0.5％(w/v)(例如0.05％(w/v))的至少一种掩味剂(例如三氯蔗糖)和浓度为0.05％至0.2％(w/v)(例如0.1％(w/v))的至少一种调味剂(例如香草醛)。优选地，组合物的pH在约4至约7的范围内，更优选地为约4。量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，如果使用其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

在优选的实施例中，药物组合物包含在水中的布雷那兰或其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)(其中布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的浓度为1mg/ml至30mg/ml(例如3.5mg/ml))和浓度为10％(w/v)的药学上可接受的环糊精(例如2-羟丙基-β-环糊精)。优选地，组合物的pH在约4至约7的范围内，更优选地为约4。量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，如果使用其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

在一个实施例中，药物组合物包含在水中的布雷那兰或其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)(其中布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的浓度为1mg/ml至30mg/ml(例如3.5mg/ml))、浓度为10％(w/v)的药学上可接受的环糊精(例如，2-羟丙基-β-环糊精)和浓度为0.05％至0.5％(w/v)(例如0.05％(w/v))的至少一种掩味剂(例如三氯蔗糖)。优选地，组合物的pH在约4至约7的范围内，更优选地为约4。量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，如果使用其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

在一个实施例中，药物组合物包含在水中的布雷那兰或其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)(其中布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的浓度为1mg/ml至30mg/ml(例如3.5mg/ml))、浓度为10％(w/v)的药学上可接受的环糊精(例如，2-羟丙基-β-环糊精)、浓度为0.05％至0.5％(w/v)(例如0.05％(w/v))的至少一种掩味剂(例如三氯蔗糖)和浓度为0.05％至0.2％(w/v)(例如0.1％(w/v))的至少一种调味剂(例如香草醛)。优选地，组合物的pH在约4至约7的范围内，更优选地为约4。量(即mg/ml)是指布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]的量，如果使用其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)，则所述量将相应地调整。

HP-b-CD与防腐剂(例如，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯扎氯铵)的相互作用在文献中是众所周知的。在存在HP-b-CD的情况下，观察到对微生物的抗微生物活性的损失，从而导致防腐剂的最低抑菌浓度(MIC)增加。因此，需要增加配制品中防腐剂的水平以符合微生物学测试。保留HP-b-CD的配制品需要优化HP-b-CD:药物比例和防腐剂的选择，以将HP-b-CD与防腐剂的相互作用减到最小。然而，HP-b-CD优化(即降低HP-b-CD水平)增加在储存和保质期内药物沉淀的风险。

适合于目标婴儿人群的多用途口服产品的经批准可用防腐剂的数量有限。另外，布雷那兰显示出与具有抗菌和抗真菌特性的山梨酸钾不相容，因此需要特别针对酵母和霉菌的合适替代品。

在一个实施例中，药物组合物不含或基本上不含防腐剂。在本文中，术语“基本上”意指防腐剂在组合物中无法检测到，或者仅处于通常被认为与任何防腐效果无关的浓度下。可以根据本领域技术人员已知的测试(如针对防腐剂功效的测试(USP<51>))来确定组合物是否被有效地防腐。在一个实施例中，“防腐剂”是抑制微生物生长并且典型地添加到分散剂中以防止微生物生长的化合物。在另一个实施例中，如本文所用的术语“防腐剂”是指添加、特别是添加到水性制剂中以防止增殖或限制微生物污染的化合物，在正常的储存和使用条件下，特别是对于多剂量容器，所述增殖和微生物污染可能在产品中发生并且因制剂的感染和变质而对患者造成危害。典型地，使用如通过USP和EU方法描述的通过抗微生物有效性测试所需的防腐剂的量来测试适当的防腐剂水平。防腐剂包括但不限于丙酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸及其盐、对羟基苯甲酸的其他酯(如对羟基苯甲酸丁酯)、醇(如乙醇或苯甲醇)、酚类化合物(如苯酚)或四元化合物(如苯扎氯铵)。

如本文所用，术语“不含防腐剂”或“不含防腐剂的”或“不含一种或多种防腐剂”意指没有故意将防腐剂添加到(或存在于)配制品或药物组合物中。

在第二方面，本发明涉及根据第一方面所述的药物组合物，其用于治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症(优选SMA)。在优选的实施例中，将所述组合物口服给予。

在第三方面，本发明涉及一种治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症(优选SMA)的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予有效量的根据第一方面所述的药物组合物。在一个实施例中，将所述组合物经由肠饲管给予。在另一个实施例中，将所述组合物口服给予。

在第四方面，本发明涉及根据第一方面所述的药物组合物，其用于制造治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症的药物。

在一个实施例中，将本发明的药物组合物在游离形式或药学上可接受的盐形式的布雷那兰为约0.625mg/kg至约3.125mg/kg的剂量下给予。例如，将本发明的药物组合物以单剂量给予，在所述单剂量中游离形式或药学上可接受的盐形式的布雷那兰为约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg。在另一个实施例中，所述剂量优选为约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg的游离形式的布雷那兰。将所述剂量一周给予一次、一周给予两次或每隔一天给予一次。优选地，将本发明的药物组合物一周给予一次。

在另一个实施例中，将本发明的药物组合物在布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]为0.625mg/kg(或12mg/m

在第五方面，本发明涉及一种治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症(优选SMA)的方法，所述方法包括将布雷那兰或其药学上可接受的盐以约0.625mg/kg至约3.125mg/kg的剂量一周给予一次、一周给予两次或每隔一天给予一次。例如，在本发明的方法中，将药学上可接受的盐形式的布雷那兰以约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg的单剂量给予。在优选的实施例中，将所述剂量一周给予一次。在另一个实施例中，所述剂量优选为0.625mg/kg或2.5mg/kg。在另一个实施例中，所述剂量优选为约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg的游离形式的布雷那兰。在另一个实施例中，将所述剂量以本发明的药物组合物的方式给予。在另一个实施例中，将所述剂量口服给予或经由肠饲管给予。在优选的实施例中，将所述剂量口服给予。

在另一方面，本发明涉及一种治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症(优选SMA)的方法，所述方法包括将布雷那兰或其药学上可接受的盐在布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]为0.625mg/kg(或12mg/m

在第六方面，本发明涉及用于治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症(优选SMA)的布雷那兰或其药学上可接受的盐，其中将布雷那兰或其药学上可接受的盐在约0.625mg/kg至约3.125mg/kg的剂量下一周给予一次、一周给予两次或每隔一天给予一次。例如，将游离形式或药学上可接受的盐形式的布雷那兰以约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg的单剂量给予。在优选的实施例中，将所述剂量一周给予一次。在另一个实施例中，所述剂量优选为0.625mg/kg或2.5mg/kg的游离形式或其药学上可接受的盐形式的布雷那兰。在另一个实施例中，所述剂量优选为约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg的游离形式的布雷那兰。在另一个实施例中，将所述剂量以本发明的药物组合物的方式给予。在另一个实施例中，将所述剂量口服给予或经由肠饲管给予。在优选的实施例中，将所述剂量口服给予。

在另一方面，本发明涉及用于治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症(优选SMA)的布雷那兰或其药学上可接受的盐，其中将布雷那兰在布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]为0.625mg/kg(或12mg/m

在第七方面，本发明涉及布雷那兰或其药学上可接受的盐用于制造治疗或预防或改善与SMN缺乏相关的病症的药物的用途，其中将所述药物在约0.625mg/kg至约3.125mg/kg的剂量下一周给予一次、一周给予两次或每隔一天给予一次。例如，将游离形式或药学上可接受的盐形式的布雷那兰以约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg的单剂量给予。在优选的实施例中，将所述剂量一周给予一次。在另一个实施例中，所述剂量优选为0.625mg/kg或2.5mg/kg的游离形式或其药学上可接受的盐形式的布雷那兰。在另一个实施例中，所述剂量优选为约0.625mg/kg、约1.25mg/kg、约2.5mg/kg或约3.125mg/kg的游离形式的布雷那兰。在另一个实施例中，将所述剂量以本发明的药物组合物的方式给予。在另一个实施例中，将所述剂量口服给予或经由肠饲管给予。在优选的实施例中，将所述剂量口服给予。

在另一方面，本发明涉及布雷那兰或其药学上可接受的盐用于制造治疗或预防或改善与SMN缺乏相关的病症(如脊髓性肌肉萎缩症(SMA))的药物的用途，其中将所述药物在布雷那兰[即所述游离形式的如本文中的式(I)的化合物]为0.625mg/kg(或12mg/m

本发明进一步提供包含减小作为活性成分的本发明化合物分解的速率的一种或多种药剂的药物组合物及剂型。此类药剂(本文中称为“稳定剂”)包括但不限于抗氧化剂(如抗坏血酸)、pH缓冲剂、或盐缓冲剂等。

“增溶剂”包括化合物，如克列莫佛RH 40、吐温80、丙二醇、三醋精、柠檬酸三乙酯、油酸乙酯、辛酸乙酯、十二烷基硫酸钠、多库酯钠、维生素E TPGS、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N-羟乙基吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、环糊精、乙醇、正丁醇、异丙醇、胆固醇、胆汁盐、聚乙二醇200至600、糖原质、还氧二元醇、丙二醇和异山梨醇二甲醚、米格列醇(miglyol)、甘油、丙三醇等。典型地，使用浓度在约1％至25％(例如w/v)的范围内的增溶剂。在优选的实施例中，浓度为17.5％(例如w/v)的2-羟丙基-β-环糊精用作增溶剂。

一种或多种药学上可接受的pH调节剂和/或缓冲剂可以包含在本发明的组合物中，所述一种或多种药学上可接受的pH调节剂和/或缓冲剂包括酸，如乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸和盐酸；碱，如氢氧化钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、乳酸钠和三羟甲基氨基甲烷；以及缓冲液，如柠檬酸盐/右旋糖、碳酸氢钠和氯化铵。此类酸、碱和缓冲液以维持组合物的pH所需的量被包含在内。

本发明还提供了制备液体配制品的方法。第一种方法包括以下步骤：形成包含环糊精和/或环糊精衍生物(例如2-羟丙基-β-环糊精)的第一水溶液；形成包含活性剂(即布雷那兰或其药学上可接受的盐)的悬浮液；以及将所述溶液和悬浮液混合以形成液体配制品。第二种方法类似于第一步骤，不同之处在于将活性剂直接添加到第一溶液中而没有形成悬浮液。第三种方法类似于第一种，不同之处在于将环糊精和/或环糊精衍生物直接添加到悬浮液中而没有形成第一溶液。第四种方法包括以下步骤：将包含活性剂的悬浮液添加到粉状或颗粒状的环糊精和/或环糊精衍生物中。第五种方法包括以下步骤：将活性剂直接添加到粉状或颗粒状的环糊精和/或环糊精衍生物中；以及添加第二溶液。第六种方法包括以下步骤：通过上述任何一种方法产生液体配制品，然后通过冻干、喷雾干燥、喷雾冷冻干燥、抗溶剂沉淀、利用超临界或接近超临界流体的过程或本领域普通技术人员已知的用以制备粉末的其他方法分离出固体材料以供重构。

本发明的液体配制品也可以转化为固体配制品以供重构。根据本发明的可重构固体药物组合物包含活性剂、衍生化环糊精和任选至少一种其他药物赋形剂。将该组合物用水性液体重构以形成防腐的液体配制品。组合物可以包含固体衍生化环糊精和含活性剂的固体以及任选至少一种固体药物赋形剂的混合物，使得在重构之前大部分活性剂不与衍生化环糊精络合。可替代地，组合物可以包含衍生化环糊精和活性剂的固体混合物，其中在重构之前大部分活性剂与衍生化环糊精络合。

可重构配制品可以根据以下任何一种过程来制备。首先制备本发明的液体配制品，然后通过冻干(冷冻干燥)、喷雾干燥、喷雾冷冻干燥、抗溶剂沉淀、利用超临界或接近超临界流体的多种过程或本领域普通技术人员已知的用以制备固体的其他方法来形成固体以供重构。

尽管不是必需的，但本发明的配制品可以包含常规的防腐剂、抗氧化剂、缓冲剂、酸化剂、碱化剂、着色剂、溶解度增强剂、络合增强剂、电解质、葡萄糖、稳定剂、张力调节剂、填充剂、消泡剂、油、乳化剂、冷冻保护剂、增塑剂、调味料、甜味剂、本领域普通技术人员已知的用于防腐配制品的其他赋形剂或其组合。

如本文所用，常规的防腐剂是用于至少降低生物负荷增加速率的化合物，但是优选地保持生物负荷稳定或在污染后降低生物负荷。此类化合物包括但不限于例如苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲酸、苯甲醇、氯化十六烷基吡啶、氯丁醇、苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞、乙酸苯汞、硫柳汞、间甲酚、氯化肉豆蔻基γ吡啶鎓、苯甲酸钾、苯甲酸钠、丙酸钠、山梨酸、百里酚和对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯或对羟基苯甲酸丁酯以及本领域普通技术人员已知的其他化合物。

结合本发明的特定方面、实施例或实例所述的特征、整数、特性、化合物、化学部分或基团应理解为适用于本文所述的任何其他方面、实施例或实例，除非与其不相容。本说明书(包括任何所附的权利要求、摘要和附图)中披露的所有特征和/或如此披露的任何方法或过程的所有步骤都可以按任何组合(除了其中至少一些此类特征和/或步骤互相排斥的组合)进行组合。本文中特别且明确列举的任何实施例均可单独地或与一个或多个其他的实施例组合地构成放弃权项的基础。本发明不限于任何前述实施例的细节。本发明扩展到本说明书(包括任何所附权利要求、摘要和附图)中披露的任何一个新颖特征或任何新颖特征的组合，或者扩展到如此披露的任何方法或过程的任何一个新颖步骤或任何新颖步骤的组合。

以下实例旨在说明本发明，而不应被解释为对其的限制。温度以摄氏度给出。使用的缩写是本领域常规的缩写。

用于合成本发明的化合物的所有起始材料、结构单元、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催化剂是可商购获得的或可通过本领域普通技术人员已知的有机合成方法生产(Houben-Weyl第4版1952,Methods of Organic Synthesis[有机合成方法],Thieme[蒂梅出版社],第21卷)。具体地，布雷那兰可以通过WO 2014/028459在实例17-13中披露的有机合成方法来产生，所述文献通过引用特此并入。

实施例1：一种药物组合物，所述药物组合物包含

A)式(I)的化合物

或其药学上可接受的盐，和

B)一种药学上可接受的环糊精或多种药学上可接受的环糊精的组合。

实施例2：根据实施例1所述的药物组合物，其中所述式(I)的化合物是其盐酸盐形式。

实施例3：根据实施例1或2所述的药物组合物，其中所述环糊精是β-环糊精。

实施例4：根据实施例1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的环糊精(B)选自下组，该组由以下组成：2-羟丙基-β-环糊精、磺丁基醚-β-环糊精、β-环糊精、甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、乙基-β-环糊精、丁基-β-环糊精、琥珀酰基-(2-羟丙基)-β-环糊精、七(2,3,6-三-O-甲基)-β-环糊精、七(2,3,6-三-O-苯甲酰基)-β-环糊精、β-环糊精磷酸钠盐、β-环糊精硫酸钠盐、三乙酰基-β-环糊精、七(6-O-磺基)-β-环糊精七钠盐、羧甲基-β-环糊精钠盐、磺丁基醚-β-环糊精钠盐和6-O-对甲苯磺酰基-β-环糊精。

实施例5：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物是液体组合物，例如水性液体组合物。

实施例6：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中环糊精(B)是2-羟丙基-β-环糊精。

实施例7：根据实施例1至5中任一项所述的药物组合物，其中环糊精(B)是磺丁基醚-β-环糊精。

实施例8：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述式I的化合物或其任何药学上可接受的盐的浓度在约1mg/ml至约30mg/ml的范围内。

实施例9：根据实施例8所述的药物组合物，其中所述式I的化合物或其任何药学上可接受的盐的浓度在约3mg/ml至约10mg/ml的范围内。

实施例10：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述环糊精以0.1％至70％(w/v)的范围内的浓度存在。

实施例11：根据实施例10所述的药物组合物，其中所述环糊精以2％至25％(w/v)的范围内的浓度存在。

实施例12：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物的pH在3.5-9的范围内。

实施例13：根据实施例12所述的药物组合物，其中所述组合物的pH为约4。

实施例14：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，所述组合物包含：

A)浓度为1mg/ml至30mg/ml的所述式I的化合物或其药学上可接受的盐，

B)浓度在2％至25％(w/v)的范围内的2-羟丙基-β-环糊精，

并且其中所述组合物的pH为约4.0。

实施例15：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种掩味剂。

实施例16：根据实施例15所述的药物组合物，其中所述掩味剂是三氯蔗糖。

实施例17：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种调味剂。

实施例18：根据实施例17所述的药物组合物，其中所述调味剂是香草醛。

实施例19：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，所述组合物包含：

a)浓度为3.5mg/ml的所述式(I)的化合物的盐酸盐，

b)浓度为17.5％(w/v)的2-羟丙基-β-环糊精，

c)浓度为0.05％(w/v)的三氯蔗糖，

d)浓度为0.1％(w/v)的香草醛

e)水

并且其中所述组合物的pH为约4.0或更高。

实施例20：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物基本上不含防腐剂。

实施例21：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其用作药物。

实施例22：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中将所述组合物口服给予。

实施例23：根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其用于治疗或预防或改善与SMN缺乏相关的病症。

实施例24：根据实施例23的用于所述用途的药物组合物，其中所述与SMN缺乏相关的病症是脊髓性肌肉萎缩症(SMA)。

实施例25：一种治疗、预防或改善与SMN缺乏相关的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予有效量的根据前述实施例中任一项所述的组合物。

实施例26：根据实施例25所述的方法，其中所述与SMN缺乏相关的病症是脊髓性肌肉萎缩症(SMA)。

实施例27：根据实施例25所述的方法，其中将所述组合物在游离形式或药学上可接受的盐形式的布雷那兰为按受试者的重量计约0.625mg/kg至约3.125mg/kg的剂量下给予。

实施例28：根据实施例1至20或22中任一项所述的药物组合物用于制造治疗或预防或改善与SMN缺乏相关的病症的药物的用途。

缩写

HP-b-CD＝2-羟丙基-β-环糊精

DS＝(环糊精的)平均取代度

Captisol＝磺丁基醚β-环糊精钠盐

w/v＝重量/体积。当浓度以百分比表示时，N％w/v意指在整个溶液的100毫升中有N克溶质。

SD(如表2a、表3a、表3和表4中所用)＝标准差。

q.s.＝足量，即“与所需的一样多”。

mg/mL＝毫克/毫升。

mL＝ml＝毫升

RT＝室温(25℃±3℃)

AET＝抗微生物有效性测试

不适用(如表6a和表7中所用)＝不适用。

实例

实例1-实例8

实例1-实例8描述了本发明的一些优选的实施例。表1-表4中给出了如所述实例中的布雷那兰的口服配制品的细节。

表1.根据实例1的布雷那兰口服配制品。

表2.布雷那兰在2-羟丙基-β-环糊精溶液中的相溶解度数据(取代度为6.1)

表3.在pH 4下取代度为4.6的包含高达25.0％(w/w)的2-羟丙基-β-环糊精的布雷那兰口服配制品。

表4.在pH 4下取代度为6.3的包含高达25.0％(w/w)的2-羟丙基-β-环糊精的布雷那兰口服配制品。

实例8

表5.根据实例8的布雷那兰口服配制品。

程序：

将所需量的2-羟丙基-β-环糊精溶解于80％体积的目标水中并搅拌30分钟。然后在室温下将所需量的布雷那兰在搅拌下添加到所述溶液中。添加完成后，将溶液搅拌45分钟或更长的时间直到获得无颗粒的溶液。使用NaOH 0.1M或HCl 0.1M进行初始pH调节以达到预期的pH(±0.25)。将所需体积的水添加到溶液中以达到最终预期体积，并在添加完成后在25℃±3℃下搅拌至少10分钟。使用NaOH 0.1M或HCL 0.1M进行最终的pH调节以达到预期的pH。

对比实例1

评估布雷那兰在除环糊精以外的赋形剂(如克列莫佛RH40、吐温80、PG、PEG300和丙三醇)中的溶解度。选择这些赋形剂和浓度是因为它们适合于儿科配制品。所测试的赋形剂均不能支持开发包含如下浓度(即约2mg/ml或更高)的布雷那兰的配制品，所述浓度足够高以将剂量体积保持在合适的范围内(表6)。

表6.在选择的赋形剂中的溶解度。

基于这些结果，无法鉴定出基于常规赋形剂的配制品。

对比实例2

将以下赋形剂针对其在口服溶液中作为防腐剂的用途进行评估：丙酸；溴硝丙二醇；苯酚；氯丁醇；苯扎氯铵；硫柳汞；苯甲醇；以及对羟基苯甲酸酯。对于儿科患者人群(新生儿、婴儿和幼儿)的口服允许的日暴露(Oral Permissible Daily Exposure，PDE)值计算如下：丙酸为9.3-22mg/天、溴硝丙二醇为0.19-0.46mg/天、氯丁醇为0.036-0.084mg/天、苯酚为0.038-0.091mg/天、对羟基苯甲酸甲酯为2.8mg/kg/天并且对羟基苯甲酸丙酯为2.0mg/kg/天。从毒理学的角度，对丙酸、苯甲酸和对羟基苯甲酸酯作为布雷那兰口服溶液的防腐剂进行了研究。将HP-b-CD浓度降低至7.5％(w/w)和10％(w/w)，以将可用于与防腐剂相互作用的游离HP-b-CD的浓度减到最小。较低浓度的HP-b-CD在冰箱中储存后会显示出沉淀，因此不建议使用。如实例1-实例8所述制备布雷那兰溶液，随后添加指定浓度的预期防腐剂。

表7显示了所测试配制品的抗微生物有效性测试(AET)结果。多剂量配制品必须符合AET测试。当HP-b-CD浓度降低至7.5％(w/w)且在存在苯甲酸的情况下，观察到沉淀。具有0.2％(w/v)对羟基苯甲酸丙酯和0.3％(w/w)对羟基苯甲酸甲酯和7.5％(w/w)HP-b-CD的配制品未能通过AET测试。在测试的配制品中，仅具有丙酸的配制品在具有或不具有对羟基苯甲酸酯的情况下均符合AET规范。然而，丙酸是易挥发的并且具有厌恶性气味；因此，不建议将其用于儿科口服溶液。

表7.布雷那兰多剂量配制品开发：AET结果。

基于这些结果，无法鉴定出支持多次给药的配制品。

实例9

在人类志愿者中进行了具有和不具有甜味剂和调味料的布雷那兰口服溶液的味道评估。表8显示了参与者报告的厌恶性余味感知水平和将样品作为药物长期使用的意愿以及使用尺度0“令人愉快的”和100“厌恶性的”的视觉模拟量表(VAS)。不具有任何掩味赋形剂或调味赋形剂的配制品被评定为在连续VAS量表的中点附近。将药物的味道描述为“苦的”和“厌恶性的”，在余味上存在特定问题。添加0.05％三氯蔗糖和0.1％香草醛在掩味方面最有效并且最受参与者青睐，其中在12名参与者中有11名愿意服用配制品，相比之下仅5名愿意服用不具有任何掩味赋形剂或调味赋形剂的配制品。与不具有任何掩味赋形剂或调味赋形剂的配制品(VAS＝54)相比，含有0.05％三氯蔗糖和0.1％香草醛的配制品被评定为显著不太厌恶的(VAS＝12.5)，并且没有参与者在5级分类面部量表上将其进行负面评定(表9)。测试的所有其他配制品组合在掩盖药物的厌恶性味道和余味方面均不那么有效。

表8.布雷那兰厌恶性余味。

表9.分类量表原始数据。

制备上述溶液的程序如下。将所需量的2-羟丙基-β-环糊精溶解于80％体积的目标水中并搅拌30分钟。然后在室温下将所需量的布雷那兰在搅拌下添加到所述溶液中。添加完成后，将溶液搅拌45分钟或更长的时间直到获得无颗粒的溶液。使用NaOH 0.1M或HCL0.1M进行初始pH调节以达到预期的pH(±0.25)。在室温下将所需量的三氯蔗糖在搅拌下添加到溶液中，并且在添加完成后继续搅拌至少10分钟。在室温下将所需量的香草醛在搅拌下添加到溶液中，并且在添加完成后继续搅拌至少10分钟。将所需体积的水添加到溶液中以达到最终预期体积，并在添加完成后搅拌至少10分钟。使用NaOH 0.1M或HCL 0.1M进行最终的pH调节以达到预期的pH。

实例10-实例15

实例10-15描述了本发明的一些优选的实施例。表10-表12中给出了如所述实例中的布雷那兰的口服配制品的细节。

表10.根据实例10的布雷那兰口服配制品。

表11.包含高达17.5％(w/w)的

表12.根据实例15的布雷那兰口服配制品。

程序：

将所需量的

实例16

本实例提供了制备不含防腐剂的布雷那兰配制品的示例性方法。

根据如实例1-实例15所述的程序制备不同的布雷那兰溶液，每种溶液的总体积为40升。然后将每种溶液通过0.45μm过滤器进行过滤(预过滤)。丢弃通过过滤器的前20mL本体溶液以确认滤筒的冲洗量。然后将溶液通过0.22μm过滤器过滤(无菌过滤)。丢弃通过过滤器的前500mL本体溶液以确认滤筒的冲洗量。然后将过滤的溶液填充到琥珀玻璃小瓶中(每瓶6ml)，并用冻干器塞子和可撕开的铝盖封闭。任选地，小瓶具有防儿童/显窃启的封闭系统。使用HP-b-CD制备布雷那兰配制品的过程示于图1中。当使用

表13.具有还原环糊精的布雷那兰口服配制品

实例1a-实例18a

实例1a-实例8a描述了本发明的一些优选的实施例。表1a-表4a中给出了如所述实例中的布雷那兰的口服配制品的细节。

表1a.布雷那兰在2-羟丙基-β-环糊精溶液中的相溶解度数据

表2a.在pH 4下平均取代度(DS)为4.6的包含高达25.0％(w/v)的2-羟丙基-β-环糊精的布雷那兰口服配制品。

表3a.在pH 4下平均取代度为6.3的包含高达25.0％(w/v)的2-羟丙基-β-环糊精的布雷那兰口服配制品。

实例18a

表4a.根据实例18a的布雷那兰口服配制品。

{*}3.826mg的布雷那兰单盐酸盐对应于3.5mg的布雷那兰(无水基础上的盐/游离形式比为1.093)

程序：

将所需量的2-羟丙基-β-环糊精溶解于80％体积(即最终预期体积)的目标水中并搅拌30分钟。然后在室温下将所需量的布雷那兰单盐酸盐在搅拌下添加到所述溶液中。添加完成后将溶液搅拌45分钟或更长的时间直到获得无(肉眼可见的)颗粒溶液。使用NaOH0.1M或HCl 0.1M进行初始pH调节以达到预期的pH(±0.25)。将所需体积的水添加到溶液中以达到最终预期体积，并在添加完成后在25℃±3℃下搅拌至少10分钟。使用NaOH 0.1M或HCL 0.1M进行最终的pH调节以达到预期的pH。

对比实例1a

评估布雷那兰在除环糊精以外的赋形剂(如克列莫佛RH40、吐温80、PG、PEG300和丙三醇)中的溶解度。选择这些赋形剂和浓度是因为它们适合于儿科配制品。所测试的赋形剂均不能支持开发包含如下浓度(即约2mg/ml或更高)的布雷那兰的配制品，所述浓度足够高以将剂量体积保持在合适的范围内(表5a)。

布雷那兰的溶解度测量如下：使用milli-Q水制备目标浓度的赋形剂储备溶液，并将其使用pH 4.0缓冲液进行调节。将过量的药物物质(即布雷那兰)添加到各个赋形剂储备溶液中并保持在设定温度25℃±0.5℃下的定轨摇床上。将悬浮液搅拌24小时(使用磁力搅拌器)以确保充分的涡流并监测温度。通过0.45μm标称孔径过滤器(例如，使用PES注射器)过滤悬浮液，并使用HPLC(高效液相色谱)测量滤液中布雷那兰的浓度。一式两份地进行测量，并报告平均值。

表5a.在选择的赋形剂中的溶解度。

基于这些结果，无法鉴定出基于常规赋形剂的配制品。

对比实例2a

将以下赋形剂针对其在口服溶液中作为防腐剂的用途进行评估：丙酸；溴硝丙二醇；苯酚；氯丁醇；苯扎氯铵；硫柳汞；苯甲醇；以及对羟基苯甲酸酯。对于儿科患者人群(新生儿、婴儿和幼儿)的口服允许的日暴露(PDE)值计算如下：丙酸为9.3-22mg/天、溴硝丙二醇为0.19-0.46mg/天、氯丁醇为0.036-0.084mg/天、苯酚为0.038-0.091mg/天、对羟基苯甲酸甲酯为2.8mg/kg/天以及对羟基苯甲酸丙酯为2.0mg/kg/天。从毒理学的角度，对丙酸、苯甲酸和对羟基苯甲酸酯作为布雷那兰口服溶液的防腐剂进行了研究。将HP-b-CD浓度降低至7.5％(w/v)和10％(w/v)，以将可用于与防腐剂相互作用的游离HP-b-CD的浓度减到最小。较低浓度的HP-b-CD在冰箱中储存后会显示出沉淀，因此不建议使用。如实例1a-实例18a所述制备布雷那兰溶液，随后添加指定浓度的预期防腐剂。

表6a.布雷那兰多剂量配制品开发：AET结果。

表6a显示了根据USP“<51>抗微生物有效性测试”(2012年5月1日有效的版本)进行的所测试配制品的抗微生物有效性测试(AET)结果。多剂量配制品必须符合AET测试。当HP-b-CD浓度降低至7.5％(w/v)且在存在苯甲酸的情况下，观察到沉淀。具有0.2％(w/v)对羟基苯甲酸丙酯和0.3％(w/v)对羟基苯甲酸甲酯和7.5％(w/v)HP-b-CD的配制品未能通过AET测试。在测试的配制品中，仅具有丙酸的配制品在具有或不具有对羟基苯甲酸酯的情况下均符合AET规范。然而，丙酸是易挥发的并且具有厌恶性气味；因此，不建议将其用于儿科口服溶液。

基于这些结果，无法鉴定出支持多次给药的配制品。

实例19a

在人类志愿者中进行了具有和不具有甜味剂和调味料的布雷那兰口服溶液的味道评估(如在实例18a中)。表7a显示了参与者报告的厌恶性余味感知水平和将样品作为药物长期使用的意愿以及使用尺度0“令人愉快的”和100“厌恶性的”的视觉模拟量表(VAS)。不具有任何掩味赋形剂或调味赋形剂的配制品被评定为在连续VAS量表的中点附近。将药物的味道描述为“苦的”和“厌恶性的”，在余味上存在特定问题。添加0.05％三氯蔗糖和0.1％香草醛(w/v)在掩味方面最有效并且最受参与者青睐，其中在12名参与者中有11名愿意服用配制品，相比之下仅5名愿意服用不具有任何掩味赋形剂或调味赋形剂的配制品。与不具有任何掩味赋形剂或调味赋形剂的配制品(VAS＝54)相比，含有0.05％三氯蔗糖和0.1％香草醛的配制品被评定为显著不太厌恶的(VAS＝12.5)，并且没有参与者在5级分类面部量表上将其进行负面评定(表8a)。测试的所有其他配制品组合在掩盖药物的厌恶性味道和余味方面均不那么有效。

表7a.布雷那兰厌恶性余味。

所述表中的环糊精是指HP-b-CD，如在实例18a中。

三氯蔗糖和香草的以百分比表示的浓度是指％w/v。

表8a.分类量表原始数据。

所述表中的环糊精是指HP-b-CD，如在实例18a中。

三氯蔗糖和香草的以百分比表示的浓度是指％w/v。

制备上述溶液的程序如下。将所需量的2-羟丙基-β-环糊精溶解于80％体积(即最终预期体积)的目标水中并搅拌30分钟。然后在室温下将所需量的布雷那兰在搅拌下添加到所述溶液中。添加完成后，将溶液搅拌45分钟或更长的时间直到获得无颗粒的溶液。使用NaOH 0.1M或HCL 0.1M进行初始pH调节以达到预期的pH(±0.25)。在室温下将所需量的三氯蔗糖在搅拌下添加到溶液中，并且在添加完成后继续搅拌至少10分钟。在室温下将所需量的香草醛在搅拌下添加到溶液中，并且在添加完成后继续搅拌至少10分钟。将所需体积的水添加到溶液中以达到最终预期体积，并在添加完成后搅拌至少10分钟。使用NaOH 0.1M或HCL 0.1M进行最终的pH调节以达到预期的pH。

实例20a-实例24a

实例20a-实例24a描述了本发明的一些优选的实施例。表9a和表10a中给出了如所述实例中的布雷那兰的口服配制品的细节。

表9a.包含高达17.5％(w/v)的

表10a.根据实例24a的布雷那兰口服配制品。

程序：

将所需量的

实例25a

本实例提供了制备不含防腐剂的布雷那兰配制品的示例性方法。

根据如实例1a-实例24a所述的程序制备不同的布雷那兰溶液，每种溶液的总体积为40升。然后将每种溶液通过0.45μm过滤器进行过滤(预过滤)。丢弃通过过滤器的前20mL本体溶液以确认滤筒的冲洗量。然后将溶液通过0.22μm过滤器过滤(无菌过滤)。丢弃通过过滤器的前500mL本体溶液以确认滤筒的冲洗量。然后将过滤的溶液填充到琥珀玻璃小瓶中(每瓶6ml)，并用冻干器塞子和可撕开的铝盖封闭。任选地，小瓶具有防儿童/显窃启的封闭系统。使用HP-b-CD制备布雷那兰配制品的过程示于图1中。当使用磺丁基醚β-环糊精钠盐(例如

表11a.具有还原环糊精的布雷那兰口服配制品

临床试验：在患有I型脊髓性肌肉萎缩症的婴儿中口服布雷那兰的概念研究的开放标签多重部分首次人体验证。

第1部分：这项研究的第一部分的目的是确定每周递增剂量的安全性和耐受性，并估算口服/肠内布雷那兰在患有1型SMA婴儿中的最大耐受剂量(MTD)。所有患者均具有2个SMN2基因拷贝。

在研究的第一部分中，用布雷那兰每周向患者给药一次。在随后的群组研究中，将布雷那兰剂量逐步增加直到确定MTD或PK结果确认由于较高剂量下的潜在药代动力学暴露平台而无法达到MTD为止。在收集第一剂量后14天的安全性数据后，做出了剂量升级到下一个群组的决定。完成13周治疗的患者被视为已完成研究。起始剂量为6mg/m

第1部分登记了14名患者；13名患者暴露于布雷那兰。暴露持续时间在4-33个月的范围内，有7名患者保持在研究中。7名患者中有六名正在接受60mg/m

初步安全性结果

·AE/SAE：13名患者中报告了455次AE；绝大多数归因于潜在疾病。发生了七十九次SAE，涉及59次住院，其中59次住院中有39次是由于呼吸事件或感染。

·死亡：共有五名患者死亡，全部是由于其潜在疾病导致的通气衰竭所致。减少剂量至6mg/m

·这导致运动稳定并且在若干情况下导致患者恢复一些运动机能。

初步功效结果

·费城儿童医院婴儿神经肌肉性疾病测试(CHOP INTEND)运动量表得分(测量非常虚弱的婴儿的肌肉力量)：在治疗第13周时，在12名可评估的患者中，有7名观察到CHOPINTEND得分随时间的推移而逐渐且实质性的增加；在任何患者中均未观察到显著降低。八名患者的CHOP INTEND得分>36，超过了历史对照研究中所观察到的结果。

·哈默史密斯(Hammersmith)婴儿神经系统检查-第2节(HINE，评估了典型发育中的婴儿到18月龄达到的8类婴儿运动发展指标)：在评估的11名患者中，有1名实现了独立坐立，这是1型SMA自然史研究中从未报道的发展指标(缺乏独立坐立是1型SMA的定义)。

·临床状态：经布雷那兰治疗的患者未遵循1型SMA患者的正常病程。

·喂养支持：1型SMA患者的喂养支持的中位年龄为约8月龄(自然史研究)。十名经治疗的患者在这个年龄未接受任何喂养支持，六名患者在治疗超过一年后未接受喂养支持，并且五名患者在治疗超过两年后未接受喂养支持。

·死亡或永久通气：达到此终点的中位年龄为13.5个月(自然史研究)。大多数经治疗的患者此时尚未达到此终点。治疗超过两年的四名患者未接受BiPAP的任何通气支持。

第2部分：本研究第二部分的目的是评估在1型SMA患者中每周给予2个剂量的布雷那兰持续52周的长期安全性和耐受性。所述研究的第2部分将患者分为2个群组：群组1的剂量为0.625mg/kg并且群组2的剂量为2.5mg/kg。选择的0.625mg/kg和2.5mg/kg剂量水平是基于来自第1部分的所有安全性数据以及来自第2部分开始时可获得的慢性青少年毒性研究的所有数据。群组1至2将登记六至10名患者。总共将登记最少12名患者和最多20名患者，并对其治疗52周。

起始剂量：基于研究的第1部分中收集的安全性和初步功效数据，将0.625mg/kg(对应于12mg/m

第二剂量：选择2.5mg/kg(对应于48mg/m