一种愈创洗液及其制备工艺和应用

技术领域

本发明属于愈创洗液技术领域，具体涉及一种愈创洗液及其制备工艺和应用。

背景技术

对难愈性创面进行早期清创冲洗治疗已成为创伤外科和卫勤专家的共识。研究表明，伤后30分钟内对污染创面进行早期冲洗清创，能够有效清除创面污染的致病微生物，降低感染的风险。创面冲洗清创后无菌包扎，72小时内可避免感染。

一些新型外用制剂，如抗感染药物、生长因子、新型敷料、抗氧化剂，被研制出来以控制开放创面感染及促进创面的愈合，但是其具有作用环节单一、易致肉芽过度生长、易产生耐药性、价格昂贵等缺点。因此，需要提供出一种愈创洗液，既可用于难愈性创面早期清创冲洗减少感染，又可以用于创面修复时期的抗感染促生长，预防多重耐药菌(MDRO)定植感染，实现多阶段效应的战创伤创面愈合治疗，以解决上述问题。

有文献报道过，肛瘘愈创洗液可以用于克罗恩病肛瘘的创面清洗，控制炎症，促进伤口愈合。但是其原料中含有较多黄酮类及酚酸类成分，其溶解度低，导致洗液稳定性较差。

发明内容

发明目的：为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种愈创洗液及其制备工艺和应用。

技术方案：为达到上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种愈创洗液，所述愈创洗液主要由以下重量份的原料制成：

丹参13-19份、千里光13-19份、黄芪8-14份、地榆8-14份、硼砂1-2份、甘油4-8份。

优选的，所述愈创洗液主要由以下重量份的原料制成：

丹参13-17份、千里光13-17份、黄芪8-12份、地榆8-12、硼砂1-2份、甘油4-6份。

优选的，，所述愈创洗液主要由以下重量份的原料制成：

丹参15份、千里光15份、黄芪10份、地榆10份、硼砂2份、甘油5份。

本发明还提供了所述的愈创洗液的制备工艺，包括以下步骤：

步骤一、取处方量丹参、千里光、黄芪和地榆，清洗，粉碎；

步骤二、初级提取，将粉碎后的上述四味原料加入水中浸泡，然后煎煮，过滤得初滤液和药渣；

步骤三、二次提取，将药渣加入水中，煎煮，过滤得次滤液；

步骤四、浓缩，将初滤液和次滤液混合，浓缩，放冷；

步骤五、除杂，向浓缩液中加入乙醇，搅拌均匀，冷藏过夜，过滤，滤液回收乙醇至无醇味；

步骤六、制液，另取硼砂加水加热搅拌至溶解，加入上述药液中，搅拌，放置过夜，过滤得滤液，滤液加甘油及适量水，搅拌均匀，灭菌，即得所述愈创洗液。

优选的，步骤二中，所述四味原料加入水中浸泡，其中，水的用量为原料重量的7-9倍，浸泡时间20-30min；所述煎煮的时间为100-140min。

优选的，步骤三中，所述煎煮，水的用量为药渣重量的7-9倍，煎煮时间为70-110min。

优选的，步骤四中，所述浓缩，浓缩至原料与浓缩液重量之比为1:(1.4-1.6)。

优选的，步骤五中，所述向浓缩液中加入乙醇，乙醇的用量为浓缩液重量的2-3倍。

本发明还提供了所述的愈创洗液在制备创面清洗和抗菌药物中的应用。

本发明最后提供了所述的愈创洗液的鉴定方法，包括以下步骤：

丹参的鉴定：将愈创洗液用乙醚振摇提取，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇溶解，得到供试品溶液；照薄层色谱法试验，将供试品点在硅胶G薄层板上，以甲苯和乙酸乙酯的混合物为展开剂，展开，晾干，观察；

黄芪的鉴定：将愈创洗液用乙醚振摇提取，弃去乙醚，水层挥尽乙醚后用正丁醇振摇提取，合并提取液，用氢氧化钾溶液和水洗至中性，将正丁醇提取液蒸干，残渣加甲醇溶解，得到供试品溶液；照薄层色谱法试验，将供试品点在硅胶G薄层板上，以三氯甲烷、甲醇、水的混合物为展开剂，展开，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在烘箱中烘至斑点清晰。

地榆的鉴定：将愈创洗液蒸干后加盐酸的甲醇溶液，加热回流，放冷后过滤，滤液用盐酸饱和的乙醚振摇提取，合并乙醚液，挥干后加甲醇溶解，得到供试品溶液；照薄层色谱法试验，将供试品点在硅胶G薄层板上，以甲苯(用水饱和)、乙酸乙酯、甲酸的混合物为展开剂，展开，晾干，喷以三氯化铁乙醇溶液，观察。

优选的，所述的愈创洗液的成分鉴定方法：

丹参的鉴定过程中，甲苯和乙酸乙酯的混合物中甲苯和乙酸乙酯的体积比为19:1；

黄芪的鉴定过程中，三氯甲烷、甲醇、水的混合物中三氯甲烷、甲醇、水的体积比为13:7:2；

地榆的鉴定过程中，甲苯(用水饱和)、乙酸乙酯、甲酸的混合物中甲苯(用水饱和)、乙酸乙酯、甲酸的体积比为6:3:1。

优选的，所述的愈创洗液的成分鉴定方法：

在丹参的鉴定过程中，同时配制丹参的对照药材溶液以及不含丹参的阴性对照液；将供试品溶液点在硅胶G薄层板上的同时，将丹参的对照药材溶液以及不含丹参的阴性对照液点在硅胶G薄层板上；

在黄芪的鉴定过程中，同时配置黄芪甲苷对照品溶液以及不含黄芪的阴性对照溶液；将供试品点在硅胶G薄层板上的同时，将黄芪甲苷对照溶液以及不含黄芪的阴性对照溶液点在硅胶薄层板上；

在地榆的鉴定过程中，同时配置没食子酸对照品溶液以及不含地榆的阴性对照溶液；将供试品溶液点在硅胶G薄层板上的同时，将没食子酸对照溶液、不含地榆的阴性对照溶液点在硅胶G博层板上。

本发明在现有技术组方中加入硼砂，硼砂有清热解毒、消肿防腐的功效，对金黄色葡萄球菌等常见化脓菌有抗菌作用。由于原方中含有较多黄酮类及酚酸类成分，此类成分在碱性条件下，溶解度大大提高，加入硼砂后pH升高，增加了溶液的澄明度，因此，硼砂既可以显著增强药效，又可以调节pH以增强药液的稳定性。方中千里光清热解毒抑菌为君，丹参活血消肿为臣，地榆收敛固涩为佐，黄芪托毒排脓为使，加硼砂调节pH，由以上五味药形成的“愈创洗液”可能综合了五味药材的作用特点，可促进难愈性创面脓液排除、控制炎症、预防感染、促进伤口愈合。此外在药液中加入甘油用作保湿剂和柔和剂。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下优势：

1、本发明愈创洗液不仅能够提高抗菌效果，而且还能增强药液的稳定性，可促进难愈性创面脓液排除、控制炎症、预防感染、促进伤口愈合，效果优异。

2、本发明的愈创洗液的制备工艺，通过将愈创洗液中药处方进行提取、浓缩、除杂等步骤，即制备得到愈创洗液，该制备方法工艺简单，为愈创洗液的生产制备提供理论依据；

3、本发明的愈创洗液的成分鉴定，利用薄层色谱法，对愈创洗液中丹参、黄芪、地榆进行了定性鉴别研究，可以较为全面地反映中药复方所包含化学成分的信息，以初步保证产品的质量和疗效，为愈创洗液质量控制提供了良好的解决方案。

附图说明

图1为本发明制备方法的工艺流程图。

图2为本发明实施例2中丹参的展开示意图；

图3为本发明实施例2中黄芪的展开示意图；

图4为本发明实施例2中地榆的展开示意图；

图5为本发明实验例3中硼砂对愈创洗液pH稳定性的影响。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。实施例中采用的实施条件可以根据具体使用的不同要求做进一步调整，未注明的实施条件为本行业的常规条件。本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

实施例1

一种愈创洗液，包括以下组分：丹参、千里光、黄芪、地榆、硼砂、甘油；

各组分及其含量(以重量份数记)为：丹参15份、千里光15份、黄芪10份、地榆10份、硼砂2份、甘油5份。

该愈创洗液的制备方法，包括如下步骤：

步骤一、选材，挑选优质原料，并按重量份取丹参、千里光、黄芪、地榆；

步骤二、打粉，使用打粉机将各药材打粉至相似粒度，其中地榆先粗碎再粉碎，将按重量份取的丹参、千里光、黄芪、地榆清洗干净并粉碎均匀；

步骤三、初级提取，将打粉后的四味原料加入8倍重量的水中，浸泡25min，然后煎煮120min，过滤得初滤液和药渣；

步骤四、二次提取，将药渣加入8倍重量的水中，煎煮90min，过滤得次滤液；

步骤五、浓缩，将初滤液和次滤液混合在一起，在90℃水浴中进行高温浓缩，浓缩至药材与浓缩液之比为1:1.5，放冷；

步骤六、除杂，向浓缩液中加入2.5倍乙醇，搅拌均匀，冷藏过夜，抽滤，使用旋转蒸发仪对乙醇进行回收至无醇味，水浴温度设为50℃；

步骤七、制液，另取硼砂加适量水加热搅拌至溶解，加入上述药液中，搅拌，放置过夜，过滤得滤液，滤液加甘油及适量水，搅拌均匀，121℃灭菌15min，即得愈创洗液。

实施例2

本实施例提供了愈创洗液的成分鉴定方法，具体将实施例1中制备得到的愈创洗液进行鉴定试验，包括：

丹参的鉴定：取愈创洗液50ml，用乙醚振摇提取3次(30、30、20ml)，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参对照药材1g，粉碎，加乙醚50ml，同供试品溶液制备方法，制成对照药材溶液。按处方量1％的量，称取除丹参以外的其余药材按制剂工艺及供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各6ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯(19:1)为展开剂，展开，取出，晾干。

黄芪的鉴定：取愈创洗液40ml，用乙醚振摇提取3次(30、30、20ml)，弃去乙醚，水层挥尽乙醚，再用正丁醇振摇提取3次(30、30、20ml)，合并提取液，用1％氢氧化钾溶液洗涤3次，每次20ml，再用水洗3次至中性，每次30ml，正丁醇提取液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。按处方量1％的量，称取除黄芪以外的其余药材按制剂工艺及供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各6ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇－水(13:7:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰。

地榆的鉴定：取愈创洗液50ml，蒸干，残渣加10％盐酸的50％甲醇溶液50ml，45℃加热回流2小时，放冷，滤过。滤液用盐酸饱和的乙醚振摇提取2次(25ml、25ml)，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。按处方量1％的量，称取除地榆以外的其余药材按制剂工艺及供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各6ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯(用水饱和)-乙酸乙酯－甲酸(6:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液。

分别按照上述方法，对丹参、黄芪和地榆进行成分鉴定试验，结果如图2-4所示；图2-4中1-3为供试品溶液，4为对照品溶液，5为阴性对照溶液。

具体的，图2表示丹参在常温下薄层鉴别展开的示意图，从图中可以看出，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，同时阴性对照无此斑点，证明处方中其它药材对丹参的鉴别无干扰。

图3表示黄芪在常温下薄层鉴别展开的示意图，从图中可以看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，同时阴性对照无此斑点，证明处方中其它药材对黄芪的鉴别无干扰。

图4表示地榆在常温下薄层鉴别展开的示意图，从图中可以看出，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，同时阴性对照无此斑点，证明处方中其它药材对地榆的鉴别无干扰。

对比例1

本对比例相较于实施例1基本相同，不同之处仅在于：不添加硼砂。

实验例1

体外抑菌试验，以本申请实施例1和对比例1制得的愈创洗液以及2％硼酸溶液处理为实验组，以生理盐水为对照组。

培养基制备：①1:1浓度组：称取4份MH琼脂粉0.95克至100ml烧瓶，每瓶分别加入25ml对比例1、实施例1、2％硼砂、蒸馏水(对照组)；②1:5浓度组：称取4份MH琼脂粉0.95克至100ml烧瓶，分别加入5ml对比例1、实施例1、2％硼砂，再分别向每瓶中加入20ml蒸馏水，对照组直接加入25ml蒸馏水。121℃15min高压灭菌，待其冷却至56℃，倒入9cm平皿(每个平皿25ml)。琼脂完全凝固后，分别测定其对于抑制金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、白色念珠菌的生长效力，结果如表1所示。

结果显示，2％的硼砂及愈创洗液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、白色念珠菌均有一定抑制作用，添加硼砂的愈创洗液其抑菌效果优于不添加硼砂，且具有一定的协同作用。

表1愈创洗液体外抑菌试验结果

备注：a菌液浓度为0.5麦氏单位，b菌液量为0.05麦氏单位(注：1个麦氏单位为3×10

+：为细菌生长，-：为细菌未生长。

实验例2

小鼠金黄色葡萄球菌感染性创面修复实验，以本申请实施例1和对比例1制得的愈创洗液处理的小鼠创面为实验组，以生理盐水处理的小鼠创面为阴性对照组，模型组小鼠不做处理，记录各组小鼠创面面积变化，实验结果如表2所示。

结果显示，愈创洗液能有效减小金黄色葡萄球菌或大肠杆菌感染小鼠创面的面积，显著提高创面的收缩率，对创面的愈合有促进作用，表现为溃疡缩小，溃疡底部肉芽组织增生和成熟程度增加，溃疡边缘上皮再生增多。且添加硼砂的实施例1组优于不添加硼砂的对比例1组，与模型组及阴性对照组比有统计学差异。

表2愈创洗液对金黄色葡萄球菌感染性小鼠创面愈合的影响

注：与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01；与阴性对照比较，#p<0.05，##p<0.01。

实验例3

稳定性试验，同时对本申请实施例1和对比例1在接近药品的实际贮存条件下进行稳定性考察，在25±2℃条件下，分别于第1、2、4、8、16、30、60天取样检测pH，实验结果如图5所示。

结果显示，随着存放天数的增加，实施例1肉眼观察无沉降现象，pH基本不变，具有长期的稳定性。但未添加硼砂的对比例1在存放10天左右其pH出现明显的降低，且肉眼观察药液中出现沉降现象。

从上述实验结果可看出，本发明提供的加入硼砂的处方制备得到的愈创洗液相较于未加入硼砂的，增强了洗液稳定性的同时也增强了其抑菌效果，且对创面愈合的促进效果更好。

综上所述，本申请提供的制备方法，操作简单，制作过程能够最大限度保证有效成分的活性。不仅可以用于伤后第一时间创面的清洗以预防细菌根植，还可以有效促进创面的愈合。

本发明提供了一种思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。