一种干预抑郁症形成的组合物和口服液

技术领域

本发明涉及一种组合物，具体涉及一种干预抑郁形成的组合物和口服液。

背景技术

抑郁症在目前工作竞争激烈、社会压力大的环境下，已成为一种全球性、不同年龄层段都常见的精神障碍性疾病。由于其复杂的发病原因，发病机制还没有得到明确的解释，抗抑郁药物的治疗也存在许多弊端。与药物不同，功能性食疗更加安全可靠，易被人们接受。近年来科研人员发现抑郁症患者不仅存在心里方面的障碍，时常还伴随着肠道功能的紊乱。牛磺酸作为一种含硫非蛋白氨基酸，天然存在于海洋的鱼、贝类、特别是牡蛎、墨鱼、章鱼中，具有抗炎，抗疲劳，促进婴幼儿大脑神经发育，提高视觉等生理功能，常被添加到运动型功能饮料中。最近研究表明牛磺酸对抑郁模型大鼠具有抗抑郁的干预效果，但是单纯利用牛磺酸来干预和防止抑郁，效果并不十分理想。

发明内容

本发明的目的是提供一种干预抑郁症形成的组合物，该组合物具有明显干预抑郁症形成的作用，能够制成口服液用于防止抑郁症的形成，其抗抑郁效果显著、天然无害、成分稳定。

为了实现上述目的，本发明采取如下技术方案：

一种干预抑郁症形成的组合物，按重量计包括如下组分：牛磺酸25~35份，山楂原花青素6~10份。

优选的，按重量计包括如下组分：牛磺酸30份，山楂原花青素8份。

所述山楂原花青素通过如下方法提取：

将山楂果实干燥后制成粉末，加入体积比浓度70%的乙醇作为提取溶剂，料液比为1克对25mL，提取温度为79-82℃，提取时间为120分钟；然后将提取液冷却至室温，用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯与提取液的体积比为1.5︰1，萃取3-5次；利用大孔树脂AB-8对上层萃取液进行纯化，解析液为体积比浓度50%乙醇溶液，收集解析液，旋转蒸发浓缩后冻干，待用。

牛磺酸一般为纯度为99%的牛磺酸纯品。

上述干预抑郁症形成的组合物和辅料一起能够制成口服液用于易患抑郁症的人群，从而有效防止抑郁症的形成。

本发明的有益效果是，发现牛磺酸和山楂原花青素组合物对动物具有显著的抗抑郁效果。通过干预慢性不可预知温和刺激(CUMS)诱导的抑郁模型小鼠，牛磺酸和山楂原花青素组合物相对于单纯的牛磺酸可以显著改善CUMS抑郁小鼠因抑郁所导致的体重下降现象，而服用氟西汀药物的阳性对照组（FLU）出现了体重减轻的情况，说明组合物可以更好的维持身体的稳态，优于抗抑郁药物的效果。小鼠在摄入组合物后显著改善了由抑郁导致的单胺类神经递质的降低，改善了抑郁行为。牛磺酸和原花青素都是天然存在于动、植物体内，对人体没有毒副作用，相比副作用繁多的抑郁药，牛磺酸-山楂原花青素组合物抗抑郁更加的健康安全。

附图说明

图1是牛磺酸及牛磺酸-山楂原花青素组合物对CUMS抑郁小鼠体重的影响(，n=10)；

竖坐标：悬尾不动时间(S),

横坐标：从左到有依次为：对照组，抑郁症模型组，氟西汀药物对照组，牛磺酸组，牛磺酸-山楂原花青素组合物组。

图2为牛磺酸及牛磺酸-山楂原花青素组合物对CUMS抑郁小鼠行为学指标(FST、TST)的影响(，n=10)，与阴性对照组相比，△：P＜0.05，△△：P＜0.01；与模型组相比，#：P＜0.05，##：P＜0.01；

图2A竖坐标：强迫游泳不动时间(S)；图2B竖坐标：悬尾不动时间(S)

横坐标：从左到右依次为：对照组，抑郁症模型组，氟西汀药物对照组，牛磺酸组，牛磺酸-山楂原花青素组合物组。

图3为牛磺酸及牛磺酸-山楂原花青素组合物对CUMS抑郁小鼠5-HT、DA、NE、BDNF的影响(，n=10)，与阴性对照组相比，△：P＜0.05，△△：P＜0.01；与模型组相比，#：P＜0.05，##：P＜0.01；

图3A竖坐标：五羟色胺（5-HT）的含量；图3B竖坐标：多巴胺（DA）的含量图；3C竖坐标：去甲肾上腺素（NE）的含量；图3D竖坐标：脑源性神经营养因子（BDNF）的含量。

横坐标：从左到右依次为：对照组，抑郁症模型组，氟西汀药物对照组，牛磺酸组，牛磺酸-山楂原花青素组合物组。

具体实施方式

为了进一步说明本发明，下面结合附图及具体实施例对本发明进行进一步的详细说明。

实施例1 干预抑郁症形成的组合物配方1

牛磺酸25克，山楂原花青素6克。

实施例2 干预抑郁症形成的组合物配方2

牛磺酸35克，山楂原花青素10克

实施例3 干预抑郁症形成的组合物配方3

牛磺酸30克，山楂原花青素8克。

实施例4 山楂原花青素的提取方法

将山楂果实干燥后制成粉末，加入体积比浓度70%的乙醇作为提取溶剂，料液比为1克对25mL，提取温度为79-82℃，提取时间为120分钟；然后将提取液冷却至室温，用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯与提取液的体积比为1.5︰1，萃取3-5次；利用大孔树脂AB-8对上层萃取液进行纯化，解析液为体积比浓度50%乙醇溶液，收集解析液，旋转蒸发浓缩后冻干，待用。通过高效液相色谱仪对山楂原花青素类物质的各个组份进行定性和定量。

结果显示，山楂原花青素类物质纯度为为81.20%，其中主要组分及含量如表1所示。

实施例5 干预抑郁症形成的口服液

牛磺酸25~35mg/10mL，山楂原花青素6~10mg/mL，辅料有适量的白砂糖、柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠、山梨酸钾、香精和水。

实施例6 对小鼠的效果实验

实验动物分组及给药：ICR小鼠，雄性，体重18~22 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。实验动物适应性饲养3-4天。小鼠按体重随机分成6组：阴性对照组(CON)：灌胃蒸馏水、模型对照组(CUMS)：灌胃蒸馏水、氟西汀对照组(FLU)：灌胃氟西汀10 mg/kg·bw、牛磺酸组(Tau)：灌胃1g/ kg·bw，牛磺酸原花青素组合物组(HPC:Tau)：按0.2ml/10g体重灌胃牛磺酸和原花青素组合物溶液（牛磺酸和山楂原花青素按照重量比30:8的比例溶解于蒸馏水中），每组10只。每周记录各组小鼠体重。

CUMS抑郁模型造模方法：除阴性对照组外，其余各组小鼠每天灌胃1 h后给予一种不可预知刺激，持续6周。其中不可预知刺激主要包括：禁食( 24 h) 、禁水( 24 h) 、倾斜饲养( 45°, 24 h) 、湿笼( 洒150 ml 水在垫料上，24 h) 、摇晃鼠笼( 5 min)、夹尾( 距尾根1cm处夹闭1 min)、持续光照(光照24h)、冰水游泳(4℃，5 min)、昼夜颠倒。

实验药品和试剂盒：牛磺酸（纯度≥99.9%） 上海康丁生物科技有限公司；阳性对照盐酸氟西汀胶囊，国药准字J20170022。5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）酶联免疫吸附分析试剂盒、多巴胺（dopamine，DA）酶联免疫吸附分析试剂盒、去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）酶联免疫吸附分析试剂盒、脑源性神经营养因子（brain derivedneurotrophic factor，BDNF）酶联免疫吸附分析试剂盒均购于上海源叶生物技术有限公司。

实验仪器与设备

Scientz-ⅡD型超声细胞破碎仪 宁波新芝生物科

技股份有限公司；1500-823型全波长扫描酶标仪 美国

Thermo Scientific公司；SPX-250B型生化培养箱 北京

鑫骉腾达仪器设备有限公司；3-18R型低温（0～4 ℃）高速离心机 湖南恒诺仪器有限公司。

实验步骤

1、实施例3的组合物对CUMS抑郁小鼠体重的影响

实验方法：每周同一时间使用实验电子称记录每组每只小鼠体重变化。

效果：如图1所示，与阴性对照组相比，CUMS抑郁组小鼠体重显著性降低。氟西汀阳性对照组的体重没有明显改善效果，牛磺酸组和牛磺酸-原花青素组合物组体重与模型对照组出现极显著性差异，表明牛磺酸和原花青素均具有减缓抑郁小鼠体重下降的功效并且效果明显。

结论：与阴性对照组相比，模型组小鼠体重均极显著性降低（P<0.01）。氟西汀药物组有改善作用，但效果不明显。牛磺酸组和牛磺酸-山楂原花青素组合物组体重均与模型组出现极显著性差异，缓解了抑郁症导致的体重下降。

2、实施例3的组合物对CUMS抑郁小鼠行为学指标的影响

主要行为学实验为强迫游泳实验和悬尾实验，具体实验方法如下：

实验步骤：

强迫游泳实验(FST)：

末次给药60 min后，将小鼠置于水温20~25℃，水深10 cm的游泳水槽中，强迫游泳6 min，观察并记录后4 min 内小鼠静止时间。当小鼠呈漂浮状态停止挣扎时记录游泳不动时间（小鼠仅做轻微动作以保持头部浮于水面上也视为游泳不动）

悬尾实验(TST)：

末次给药60 min后，用医用胶布将小鼠尾（在距尾尖1 cm 处）粘在高出桌面15 cm的横杆上，使其呈倒立状态，四周以板隔离小鼠视线。小鼠为了克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间后出现间隙性静止，即显示失望状态。适应1 min 后，记录5 min 内小鼠的累计不动时间。

效果：如图2所示，与单纯使用牛磺酸相比，牛磺酸原花青素组合物组能够更好的改善由慢性不可预知温和应激导致的抑郁模型小鼠的抑郁行为，显著性的提高了悬尾实验和强迫游泳实验中小鼠静止不动时间，牛磺酸-原花青素组合物组与阳性药物氟西汀组效果相当。

结论：牛磺酸-山楂原花青素组合物组和牛磺酸组以及氟西汀药物组相比，悬尾不动时间和小鼠悬尾不动时间降低的更加明显，显示出了更强的抗抑郁的效果。

3、实施例3的组合物对CUMS抑郁小鼠五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺(NE)、脑源性神经营养因子(BDNF)的影响

实验方法：动物实验结束后，摘眼球取血，颈椎脱臼处死动物，冰台取脑组织并称重。分离血清、血浆，制备脑匀浆，依照酶联免疫试剂盒说明书采用ELISA法测定测定5-HT、DA、NE、BDNF指标。

效果：如图3所示，与单纯使用牛磺酸相比，牛磺酸原花青素组合物组能够更好的改善由慢性不可预知温和应激导致的抑郁模型小鼠神经递质水平的下降，显著性的提高5-HT、DA、NE和BDNF的水平。

结论：牛磺酸-山楂原花青素组合物组和牛磺酸组相比，神经递质的含量更高，与氟西汀药物组的含量更接近，说明抗抑郁的效果更加显著。