一种用于酒精性肝损伤的中药组合物、制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药组合物领域，具体涉及一种用于酒精性肝损伤的中药组合物、制剂及其制备方法。

背景技术

酒是人类生活中的主要饮料之一。中国制酒历史源远流长，品种繁多，名酒荟萃，享誉中外。黄酒是世界上最古老的酒类之一，约在三千多年前，商周时代，中国人独创酒曲复式发酵法，开始大量酿制黄酒。酒渗透于整个中华五千年的文明史中，从文学艺术创作、文化娱乐到饮食烹饪、养生保健等各方面在中国人生活中都占有重要的位置。

现在人们的饮酒习惯包括白酒、黄酒、啤酒、红酒、洋酒等，长期饮酒会造成肝损伤也就是常说的酒精性肝病，酒精性肝病表现多样，初期通常表现为脂肪肝，进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化。在严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死甚或肝功能衰竭。在我国发病率有增多的趋势。

目前市场上尚没有专门针对酒精性肝损伤进行预防和治疗的的产品上市，鉴于此，本发明提供一种用于酒精性肝损伤的中药组合物及其制备方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种用于酒精性肝损伤的中药组合物、制剂及其制备方法。本发明中药组合物药效实验表明可降低酒精性肝损伤动物模型血清中ALT、AST、TG水平，降低肝脏组织中MDA，提高肝脏组织中SOD和GSH含量，从而起到预防和治疗酒精性肝损伤的作用。

为了解决上述技术问题的技术方案如下，本发明的第一个目的是提供一种用于酒精性肝损伤的中药组合物，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成：白术3.5～8.5份，百合6.5～11.5份，柴胡6.5～11.5份，陈皮27.5～32.5份，大黄0.5～5.5份，大枣27.5～32.5份，当归3.5～8.5份，茯苓3.5～8.5份，覆盆子12.5～17.5份，葛根12.5～17.5份，枸杞27.5～32.5份，桂枝3.5～8.5份，黄精12.5～17.5份，黄芪6.5～11.5份，黄芩0.5～5.5份，姜黄12.5～17.5份，莲子3.5～8.5份，麻黄0.5～5.5份，麦冬6.5～11.5份，人参3.5～8.5份，肉苁蓉27.5～32.5份，桑葚12.5～17.5份，升麻3.5～8.5份，生姜3.5～8.5份，生地黄6.5～11.5份，锁阳27.5～32.5份，天门冬6.5～11.5份，玉竹12.5～17.5份，枳椇子6.5～11.5份，炙甘草3.5～8.5份，黄连30.5～5.5份，醋五味子6.5～11.5份，巴戟天3.5～8.5份，防风3.5～8.5份，怀牛膝12.5～17.5份，钟乳粉0.5～5.5份，牡荆子6.5～11.5份，盐菟丝子6.5～11.5份，车前子0.5～5.5份，石斛3.5～8.5份，山药0.5～5.5份，杜仲3.5～8.5份，制远志6.5～11.5份，附子0.5～5.5份，蛇床子3.5～8.5份，川芎6.5～11.5份，山茱萸6.5～11.5份，天雄3.5～8.5份，紫石英0.5～5.5份，菖蒲3.5～8.5份。

本发明的有益效果是：本发明药效学实验结果表明，本发明的中药组合物对酒精刺激的体内肝损伤具有显著防护作用。

本发明的中药组合物的特点为：采用陈皮、枸杞、大枣、肉苁蓉及锁阳为君药，覆盆子、黄精、姜黄、桑葚、玉竹及怀牛膝为臣药，百合、柴胡、黄芪、麦冬、生地黄、天门冬、枳椇子、醋五味子、牡荆子、盐菟丝子、制远志、川芎及山茱萸为佐药，剩余的其他的组分为使药；将大枣，枸杞，黄精，麦冬，肉苁蓉，桑葚，生姜，生地黄，天门冬，枳椇子，醋五味子，怀牛膝，盐菟丝子，制远志，煎煮浓缩得到药膏，与按上述份数取剩余的组分，粉碎过得到药粉组合配伍，酒精性肝损伤组合物干预后，显著降低血清AST，AST含量，使ALD小鼠肝功能恢复正常；显著降低肝组织TG含量，来有效降低脂肪合成率，减少TG在肝脏中的积累；降低ALD小鼠肝脏中MDA含量，显著提高ALD小鼠肝组织中最终SOD、GSH水平，增强机体抵抗脂质过氧化和清除氧自由基的能力，且避免肝细胞脂肪变性。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成：白术4.5～7.5份，百合7.5～10.5份，柴胡7.5～10.5份，陈皮28.5～31.5份，大黄1.5～4.5份，大枣28.5～31.5份，当归4.5～7.5份，茯苓4.5～7.5份，覆盆子13.5～16.5份，葛根13.5～16.5份，枸杞28.5～31.5份，桂枝4.5～7.5份，黄精13.5～16.5份，黄芪7.5～10.5份，黄芩1.5～4.5份，姜黄13.5～16.5份，莲子4.5～7.5份，麻黄1.5～4.5份，麦冬7.5～10.5份，人参4.5～7.5份，肉苁蓉28.5～31.5份，桑葚13.5～16.5份，升麻4.5～7.5份，生姜4.5～7.5份，生地黄7.5～10.5份，锁阳28.5～31.5份，天门冬7.5～10.5份，玉竹13.5～16.5份，枳椇子7.5～10.5份，炙甘草4.5～7.5份，黄连1.5～4.5份，醋五味子7.5～10.5份，巴戟天4.5～7.5份，防风4.5～7.5份，怀牛膝13.5～16.5份，钟乳粉1.5～4.5份，牡荆子7.5～10.5份，盐菟丝子7.5～10.5份，车前子1.5～4.5份，石斛4.5～7.5份，山药1.5～4.5份，杜仲4.5～7.5份，制远志7.5～10.5份，附子1.5～4.5份，蛇床子4.5～7.5份，川芎7.5～10.5份，山茱萸7.5～10.5份，天雄4.5～7.5份，紫石英1.5～4.5份，菖蒲4.5～7.5份。

进一步，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成：白术6份，百合9份，柴胡9份，陈皮30份，大黄3份，大枣30份，当归6份，茯苓6份，覆盆子15份，葛根15份，枸杞30份，桂枝6份，黄精15份，黄芪9份，黄芩3份，姜黄15份，莲子6份，麻黄3份，麦冬9份，人参6份，肉苁蓉30份，桑葚15份，升麻6份，生姜6份，生地黄9份，锁阳30份，天门冬9份，玉竹15份，枳椇子9份，炙甘草6份，黄连3份，醋五味子9份，巴戟天6份，防风6份，怀牛膝15份，钟乳粉3份，牡荆子9份，盐菟丝子9份，车前子3份，石斛6份，山药3份，杜仲6份，制远志9份，附子3份，蛇床子6份，川芎9份，山茱萸9份，天雄6份，紫石英3份，菖蒲6份。

本发明的第三个目的是提供一种用于酒精性肝损伤的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：

步骤S1，粉碎和制膏：按上述份数取大枣，枸杞，黄精，麦冬，肉苁蓉，桑葚，生姜，生地黄，天门冬，枳椇子，醋五味子，怀牛膝，盐菟丝子，制远志，煎煮2～4次，每次0.2-1h，合并煎液，浓缩得到药膏；按上述份数取剩余的组分，烘干，粉碎过50～150目筛，得到药粉；

步骤S2，制备中药组合物：将步骤S1中的药膏按照质量比9：(12～20)加入药粉，即制得中药组合物。

进一步，所述步骤S1中每次煎煮前使用8～10倍的水浸泡0.2-1h。

进一步，所述步骤S2将步骤S1中的药膏按照质量比9：16加入药粉，即制得中药组合物。

本发明的第二个目的是提供一种用于酒精性肝损伤的中药组合物的制剂，所述中药组合物的制剂包括上述所述的中药组合物和药用辅料。

进一步，所述中药组合物的制剂为片剂、粉剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂或丸剂。

进一步，将所述中药组合物和药用辅料混合，然后制成相应剂型的中药组合物制剂。

进一步，向所述中药组合物中按照质量比(21～29)：(9～18)加入药粉和蜂蜜，制得中药组合物软材，将药组合物软材置于制丸机中制丸，后干燥，即得丸剂型的中药组合物制剂；或者，向所述中药组合物中按照质量比1：(0.5～2)加入可压性淀粉，过筛，烘干，压制成片重0.5-1g的片，即得片剂型的中药组合物制剂。

另外还可以制备成制散剂:将上述中药组合物主要由如下的重量份数的原料粉碎过80目筛，即得。制颗粒剂:将上述中药组合物主要由如下的重量份数的原料粉粉碎过80目筛，按照药粉质量比1：(0.5～2)加入可压性淀粉(乳糖)过80目筛混合均匀，按照质量比0.3～0.6加入95％乙醇过10～20目筛制粒，60～80℃烘干，即得。制胶囊剂:将上述中药组合物主要由如下的重量份数的原料粉粉碎过80目筛，按照药粉质量比1：(0.5～2)加入可压性淀粉(乳糖)过80目筛混合均匀，按照质量比0.3～0.6加入95％乙醇过10～20目的筛制粒，60～80℃烘干，灌装成0.5g的胶囊，即得。

附图说明

图1为本发明酒精性肝损伤组合物减轻酒精诱导小鼠肝脏中的脂质积累、氧化应激和损伤程度；其中，A为血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)，B为天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量，C为肝脏甘油三酯(TG)，D为丙二醛(MDA)含量，E为肝超氧化物歧化酶(SOD)活性，F为肝谷胱甘肽(GSH)含量；

图2为本发明肝脏切片油红O(200×)染色的代表性图；

图3为本发明肝脏切片H&E(200×)染色的代表性图。

具体实施方式

以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例1

本实施例提供一种用于酒精性肝损伤的中药组合物，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成：白术3.5份，百合6.5份，柴胡6.5份，陈皮27.5份，大黄0.5份，大枣27.5份，当归3.5份，茯苓3.5份，覆盆子12.5份，葛根12.5份，枸杞27.5份，桂枝3.5份，黄精12.5份，黄芪6.5份，黄芩0.5份，姜黄12.5份，莲子3.5份，麻黄0.5份，麦冬6.5份，人参3.5份，肉苁蓉27.5份，桑葚12.5份，升麻3.5份，生姜3.5份，生地黄6.5份，锁阳27.5份，天门冬6.5份，玉竹12.5份，枳椇子6.5份，炙甘草3.5份，黄连30.5份，醋五味子6.5份，巴戟天3.5份，防风3.5份，怀牛膝12.5份，钟乳粉0.5份，牡荆子6.5份，盐菟丝子6.5份，车前子0.5份，石斛3.5份，山药0.5份，杜仲3.5份，制远志6.5份，附子0.5份，蛇床子3.5份，川芎6.5份，山茱萸6.5份，天雄3.5份，紫石英0.5份，菖蒲3.5份。

本实施例提供的一种用于酒精性肝损伤的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：

步骤S1，粉碎和制膏：按上述份数取大枣，枸杞，黄精，麦冬，肉苁蓉，桑葚，生姜，生地黄，天门冬，枳椇子，醋五味子，怀牛膝，盐菟丝子，制远志，煎煮3次，每次0.5h，合并煎液，浓缩得到药膏；按上述份数取剩余的组分，烘干，粉碎过100目筛，得到药粉；

步骤S2，制备中药组合物：将步骤S1中的药膏按照质量比9：16加入药粉，即制得中药组合物。

优选的，所述步骤S1中第一次煎煮前使用10倍的水浸泡0.5h，第二、三次煎煮前使用10倍的水浸泡0.5h。

实施例2

与实施例1相比，本实施例的一种用于酒精性肝损伤的中药组合物，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成，如表1，步骤S2中制备中药组合物中将步骤S1中的药膏按照质量比9：12加入药粉，即制得中药组合物，其余与实施例1相同。

实施例3

与实施例1相比，本实施例的一种用于酒精性肝损伤的中药组合物，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成，如表1，步骤S2中制备中药组合物中将步骤S1中的药膏按照质量比9：14加入药粉，即制得中药组合物，其余与实施例1相同。

实施例4

与实施例1相比，本实施例的一种用于酒精性肝损伤的中药组合物，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成，如表1，步骤S2中制备中药组合物中将步骤S1中的药膏按照质量比9：18加入药粉，即制得中药组合物，其余与实施例1相同。

实施例5

与实施例1相比，本实施例的一种用于酒精性肝损伤的中药组合物，所述中药组合物由如下的重量份数的原料制备而成，如表1，步骤S2中制备中药组合物中将步骤S1中的药膏按照质量比9：20加入药粉，即制得中药组合物，其余与实施例1相同。

表1实施例1-5各组分的重量含量

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实施例6

本实施例在实施例1基础上，制丸剂：将步骤S1中的药膏中按照质量比9：16：25加入药粉和蜂蜜，制得中药组合物软材，将药组合物软材置于制丸机中制丸，后干燥，即得中药组合物丸剂。其中，制丸机型号：AW-16高效率制丸机，温岭市奥力中药机械有限公司。

实施例7：药效学实验

1.实验材料与方法

1.1实验材料

本发明实施例6制备的酒精性肝损伤的中药组合物(XHW)；联苯双酯滴丸(H11020980)：购自北京协和医学院；无水乙醇为分析纯(广东光华科技有限公司)；AST、AST、TG、MDA、GSH、SOD试剂盒购自南京建成；超纯水由Mili-Q(Merck Milipore,Germany)制备。AT201电子天平(瑞士梅特勒-托莱多)；Legeno Micro 21R台式离心机(Thermo，美国)；KQ-250DE数控超声波清洗机(昆山超声波仪器有限公司)；GNP-9080防水恒温培养箱(上海景宏实验设备有限公司)；Infinite M200多功能酶标仪(Tecan，瑞士)。

实验动物：36只清洁级6周龄C57BL/6J小鼠(体重18-22g)，购自于扬州大学(中国江苏)比较医学中心(生产许可证号：SCXK(苏)2017-0007)，所有小鼠均饲养于维持室温20℃-34℃、湿度50％-65％和光照/黑暗12h/12h循环的动物房，小鼠可自由饮水饮食。本研究的动物实验操作符合动物福利伦理要求，且获得了南京农业大学动物伦理委员会批准。

1.2方法

小鼠适应性喂养1周后，将其随机分为6组：正常组(Normal)、模型组(Model)、阳性对照组(Bifendate)、酒精性肝损伤的中药组合物低剂量(600mg/kg)组(XHW-L)、酒精性肝损伤的中药组合物中剂量(1200mg/kg)组(XHW-M)和酒精性肝损伤的中药组合物高剂量(2400mg/kg)组(XHW-H)，每组6只。阳性对照组和酒精性肝损伤组合物组分别给予联苯双酯(150mg/kg，i.g.)和酒精性肝损伤组合物(600、1200或1500mg/kg，i.g.)，正常组和模型组给予等量生理盐水连续灌胃15天。第16天给药后6小时，除正常组给予生理盐水外，其余动物均给予酒精(14ml/kg，50％酒精)灌胃，禁食不禁水，16小时后，所有小鼠用乙醚麻醉后，收集血液样本和肝组织以进行进一步检测。

2.结果和讨论

2.1血清中ALT和AST的含量检测血清中ALT(谷丙转氨酶)和AST(天门冬氨酸氨基转移酶)的含量是评价肝功能的关键生物学指标，可直接反映肝损伤程度。研究发现模型组酒精性肝损伤小鼠血清ALT、AST含量明显升高，说明过量饮酒损害了肝细胞的正常功能。酒精性肝损伤组合物干预后，XHW-M和XHW-H组显著降低血清ALT含量(图1A，P<0.01)，XHW-M组显著降低血清AST含量(图1B，P<0.05)，而XHW-H组极显著降低血清AST含量(图1B，P<0.01)，提示XHW可使ALD小鼠肝功能恢复正常。

2.2甘油三酯(TG)的含量检测

乙醇可增加脂肪合成酶的活性，加速脂肪的合成，使甘油三酯(TG)大量蓄积，引起肝脏血液循环异常，门脉压力升高，加速病情恶化。如图1C所示，模型组甘油三酯含量是正常组的2倍。酒精性肝损伤组合物干预后，XHW-M组和XHW-H组均显著降低肝组织TG含量(P<0.05)，说明酒精性肝损伤组合物能有效降低脂肪合成率，减少TG在肝脏中的积累。

2.3MDA、SOD及GSH的含量检测

氧化应激是ALD(醛固酮)的重要机制之一。MDA(丙二醛)是脂质过氧化的主要终产物。MDA的含量可以直接反映体内脂质过氧化损伤的程度。SOD(超氧化物歧化酶)是体内的超氧阴离子清除剂。GSH(谷胱甘肽)能去除脂质过氧化物，对肝损伤有保护作用。SOD活性和GSH含量的高低可以反映机体抗氧化能力的强弱。本实施例中，XHW-M和XHW-H组均能显着降低ALD小鼠肝脏中MDA含量(图1D，P<0.05)，显著提高ALD小鼠肝组织中最终SOD水平(图1E，P<0.01)，此外，XHW-M组(P<0.05)和XHW-H组(P<0.01)也能显著提高ALD小鼠肝组织中最终的GSH水平(图1F)。故其机制可能与增强机体抵抗脂质过氧化和清除氧自由基的能力有关。

2.4小鼠肝组织油红O染色比较

如图2所示，为各组小鼠肝组织油红O染色比较。正常组肝细胞形态正常，结构清晰，细胞核呈蓝色，细胞内无红色脂滴；模型组肝细胞明显肿胀，周围有红色大脂滴聚集；肝细胞红色脂滴均有不同程度的减少，剂量越高，红色脂滴减少越明显。

2.5小鼠肝组织HE染色结果比较

HE染色结果见图3，正常对照组小鼠肝小叶结构正常，肝索由中央静脉向周围呈放射状排列；模型组小鼠肝细胞有中度片状水肿，肝索排列紊乱，中央静脉周围肝细胞肿胀，胞浆内可见水泡状脂肪变性。XHW-L组肝细胞水肿减轻，但肝索仍排列紊乱；XHW-M组小鼠肝小叶基本正常，肝细胞轻度水肿，偶见肝细胞脂肪变性；XHW-H组小鼠肝小叶结构基本正常，偶有肝细胞水肿，无肝细胞脂肪变性。

综上所述，以上结果显示，本发明的组合物主要通过增强机体抵抗脂质过氧化和清除氧自由基的能力，来预防和改善酒精肝损伤。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。