一种外源性禽白血病抗原检测试剂盒及检测方法

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种外源性禽白血病抗原检测试剂盒及检测方法。

背景技术

禽白血病是由禽白血病病毒和禽肉瘤病病毒群中的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称。该病对鸡能引起多种具有传染性的良性和恶性肿瘤。该病可引起鸡增重缓慢、性成熟延迟、蛋小、蛋壳薄、产蛋量下降、受精率和孵化率低、胴体废弃率增加、死亡率增高等，造成直接经济损失。同时还可引起机体非特异性抵抗力下降和免疫抑制，造成间接经济损失。由于该病能垂直传播，因此对养禽业危害很大，是危害养鸡业的主要疾病之一。

为了便于检测一般通过试剂盒来对禽白血病进行检测，试剂盒是通过采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA)原理来检测禽白血病病毒的P27抗原，目前的试剂盒大多为一次性的，内部放置有多个试剂管、包被板等物件，实际测试过程中，需要人为使用单通道移液枪分别将多种试剂加入包被板上的多个孔洞内，需要大量的反复操作，检测速度慢，也容易出现遗漏的情况，并且洗涤也需要人为反复洗涤，操作负担重。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种外源性禽白血病抗原检测试剂盒及检测方法，该试剂盒能够自动化的将多种试剂按次序加入包被板的多个孔洞内，并且可实现自动化的多次洗涤过程，大大加快检测速度。

为解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：

一种外源性禽白血病抗原检测试剂盒，包括盒体，所述盒体的左侧固定安装有储液罐，所述储液罐的顶部固定安装有多个试剂瓶，所述盒体的左侧内固定安装有多个泵液筒，多个所述泵液筒与多个试剂瓶一一对应，所述盒体的底部固定安装有洗涤槽，所述洗涤槽与泵液筒的顶部之间固定安装有多个纵向设置的条形吸液槽，所述泵液筒可将对应试剂瓶内的试剂泵入对应的条形吸液槽内，所述洗涤槽的槽口处安装有可180°翻转的放置槽，所述放置槽内磁吸有包被板，所述盒体的内顶部安装有可横向移动的多通道移液枪，所述洗涤槽的内底部还安装有可多次洗涤包被板的洗涤机构。

优选地，所述泵液筒内设有活塞，所述活塞的顶部固定连接有延伸出泵液筒的连接杆，所述盒体的顶部安装有第一电动伸缩杆，所述第一电动伸缩杆的伸缩端通过连接板与多根连接杆固定连接，所述泵液筒的底部两侧分别设有吸液管和出液管。

优选地，所述吸液管和出液管内均安装有单向阀，所述吸液管的末端与对应试剂瓶连通，所述出液管的末端与对应条形吸液槽的底部连通。

优选地，所述盒体的顶部内侧壁上设有安装槽，所述安装槽内转动连接有螺纹杆，所述螺纹杆上螺纹连接有移动块，所述移动块的末端固定安装有竖直设置的第二电动伸缩杆，所述第二电动伸缩杆的伸缩端通过连接臂与多通道移液枪固定连接，所述盒体的侧壁安装有可带动螺纹杆转动的第一电机。

优选地，所述洗涤槽的两侧均设有凹槽，两个所述凹槽内分别滑动安装有滑块和第二电机，所述第二电机的输出端固定连接有转杆，所述转杆的末端与滑块转动连接，所述放置槽固定安装在转杆上。

优选地，所述盒体上安装有控制器，所述第一电机、第二电机、第一电动伸缩杆以及第二电动伸缩杆均与控制器电性连接。

优选地，所述包被板的底部与放置槽的底部间通过一对磁板磁吸。

优选地，所述洗涤机构包括设置在洗涤槽后侧内壁上的条形口，所述条形口内滑动安装有电磁块，所述电磁块的前侧固定连接有纵向设置的分液管，所述分液管的底部设有多根洗涤管，分液管的底部连接有进液管，所述进液管的末端与出液管连接，所述吸液管的侧壁与储液罐之间连接有连接管，所述进液管与出液管的连接处以及吸液管与连接管的连接处均安装有三通阀，所述移动块的底部固定连接有向下延伸的移动板，所述移动板的底部嵌设有与电磁块配合的铁块。

优选地，所述滑块以及第二电机的底部与对应凹槽底部间均弹性安装有弹簧，所述条形口的顶部设有条形槽，所述条形槽的内顶部等间距固定连接有多个导电座，所述电磁块的顶部固定安装有与导电座配合的导电头，所述导电座与弹簧电性连接。

本发明还公开了一种外源性禽白血病抗原检测方法，采用上述任一项所述的外源性禽白血病抗原检测试剂盒，包括以下具体步骤：

S1、将洗涤液通过纯化水稀释倍后装入储液罐内，再将样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液分别装入对应的试剂瓶内，将包被板置于放置槽内；

S2、启动第一电动伸缩杆，通过连接板以及多根连接杆带动多个活塞同时上下移动，将多个试剂瓶内对应的试剂通过泵液筒泵入对应的条形吸液槽内；

S3、通过控制器自动化的控制第一电机正反转动，螺纹杆转动通过移动块带动多通道移液枪在条形吸液槽以及包被板之间移动，将待测样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液按次序通过多通道移液枪加入包被板上，样品液加入后取出包被板至保温箱中37℃培育30min，酶标抗体加入后37℃培育30min，底物A液、底物B液加入后37℃培育10min进行显色，最后加入终止液终止显色反应；

S4、待测样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液每次加入后均需要进行洗涤：启动第二电机带动包被板翻转180°，打开三通阀，通过泵液筒将洗涤液通过多个洗涤管泵出，对包被板上的多个孔进行冲洗；

S5、使用酶标仪测定650nm波长处的OD值，判定是否有外源性禽白血病抗原蛋白。

本发明的有益效果为：

（1）.通过安装多个泵液筒以及多个条形吸液槽，可先将样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液分别装入对应的试剂瓶内，启动第一电动伸缩杆，通过连接板以及多根连接杆带动多个活塞同时上下移动，可将多个试剂瓶内对应的试剂通过泵液筒泵入对应的条形吸液槽内，条形的吸液槽适配多通道移液枪，便于一次性满足多通道的抽吸，加快移液速度。

（2）.通过安装控制器、第一电机、螺纹杆、第二电动伸缩杆，通过控制器自动化的控制第一电机正反转动，螺纹杆转动通过移动块带动多通道移液枪在条形吸液槽以及包被板之间移动，将待测样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液按次序通过多通道移液枪加入包被板上，自动化程度高。

（3）.通过安装第二电机以及洗涤机构，当需要对包被板进行洗涤时，只需启动第二电机，通过转杆带动放置槽以及包被板翻转180°，随后转动两个三通阀，启动第一电动伸缩杆往复伸缩，即可通过泵液筒将洗涤液通过进液管泵入分液管内，最终通过多个洗涤管向上喷出，同时通过螺纹杆带动移动块横向往复移动，当移动板移动至条形口处时，启动电磁块磁吸住铁块，进而可通过电磁块带动多根洗涤管横向往复移动，实现多个孔洞均匀的洗涤过程。

（4）.通过安装弹簧、导电座以及导电头，电磁块横向移动过程中，导电头间歇接触导电座，进而间歇为弹簧通电，实现弹簧往复伸缩过程，进而带动包被板上下抖动，提高洗涤效果。

附图说明

图1为本发明的结构示意图；

图2为本发明的俯视图；

图3为本发明提出的条形吸液槽俯视图；

图4为本发明提出的放置槽俯视图；

图5为本发明提出的移动块及其组件侧视图；

图6为图1中的A处结构放大示意图；

图7为本发明提出的多根洗涤管正视图。

图中：1、盒体；2、试剂瓶；3、储液罐；4、第一电动伸缩杆；5、泵液筒；6、连接杆；7、吸液管；8、连接管；9、活塞；10、出液管；11、进液管；12、洗涤槽；13、条形口；14、条形槽；15、导电座；16、第二电机；17、弹簧；18、凹槽；19、转杆；20、放置槽；21、磁板；22、包被板；23、条形吸液槽；24、多通道移液枪；25、移动板；26、三通阀；27、第二电动伸缩杆；28、安装槽；29、螺纹杆；30、第一电机；31、控制器；32、洗涤管；33、分液管；34、电磁块；35、导电头；36、滑块；37、移动块；38、铁块；39、连接臂。

具体实施方式

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。

需要说明的是，当元件被称为“固定于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”，“水平的”，“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的，并不表示是唯一的实施方式。

参照图1-7，一种外源性禽白血病抗原检测试剂盒，包括盒体1，盒体1的左侧固定安装有储液罐3，储液罐3的顶部固定安装有多个试剂瓶2，盒体1的左侧内固定安装有多个泵液筒5，多个泵液筒5与多个试剂瓶2一一对应，泵液筒5内设有活塞9，活塞9的顶部固定连接有延伸出泵液筒5的连接杆6，盒体1的顶部安装有第一电动伸缩杆4，第一电动伸缩杆4的伸缩端通过连接板与多根连接杆6固定连接，泵液筒5的底部两侧分别设有吸液管7和出液管10。

进一步的，吸液管7和出液管10内均安装有单向阀，吸液管7的末端与对应试剂瓶2连通，出液管10的末端与对应条形吸液槽23的底部连通，启动第一电动伸缩杆4，通过连接板以及多根连接杆6带动多个活塞9同时上移，将多个试剂瓶2内对应的试剂通过吸液管7吸入泵液筒5内，活塞9下移，通过出液管10泵入对应的条形吸液槽23内。

盒体1的底部固定安装有洗涤槽12，洗涤槽12与泵液筒5的顶部之间固定安装有多个纵向设置的条形吸液槽23，泵液筒5可将对应试剂瓶2内的试剂泵入对应的条形吸液槽23内，洗涤槽12的槽口处安装有可180°翻转的放置槽20，放置槽20内磁吸有包被板22，包被板22的底部与放置槽20的底部间通过一对磁板21磁吸，洗涤槽12的两侧均设有凹槽18，两个凹槽18内分别滑动安装有滑块36和第二电机16，第二电机16的输出端固定连接有转杆19，转杆19的末端与滑块36转动连接，放置槽20固定安装在转杆19上，启动第二电机16带动包被板22翻转180°。

盒体1的内顶部安装有可横向移动的多通道移液枪24，盒体1的顶部内侧壁上设有安装槽28，安装槽28内转动连接有螺纹杆29，螺纹杆29上螺纹连接有移动块37，移动块37的末端固定安装有竖直设置的第二电动伸缩杆27，第二电动伸缩杆27的伸缩端通过连接臂39与多通道移液枪24固定连接，盒体1的侧壁安装有可带动螺纹杆29转动的第一电机30，第一电机30正反转动，螺纹杆29转动通过移动块37带动多通道移液枪24在条形吸液槽23以及包被板22之间往返。

洗涤槽12的内底部还安装有可多次洗涤包被板22的洗涤机构，洗涤机构包括设置在洗涤槽12后侧内壁上的条形口13，条形口13内滑动安装有电磁块34，电磁块34的前侧固定连接有纵向设置的分液管33，分液管33的底部设有多根洗涤管32，分液管33的底部连接有进液管11，进液管11的末端与最左侧（即为图中最左侧位置）的出液管10连接，最左侧的吸液管7侧壁与储液罐3之间连接有连接管8，进液管11与出液管10的连接处以及吸液管7与连接管8的连接处均安装有三通阀26，移动块37的底部固定连接有向下延伸的移动板25，移动板25的底部嵌设有与电磁块34配合的铁块38，打开进液管11与出液管10的连接处以及吸液管7与连接管8的连接处的三通阀26，通过泵液筒5即可将洗涤液通过进液管11泵出，再通过分液管33进入多个洗涤管32泵出，对包被板22进行洗涤。

进一步的，滑块36以及第二电机16的底部与对应凹槽18底部间均弹性安装有弹簧17，条形口13的顶部设有条形槽14，条形槽14的内顶部等间距固定连接有多个导电座15，电磁块34的顶部固定安装有与导电座15配合的导电头35，导电座15与弹簧17电性连接，电磁块34横向移动过程中，导电头35间歇接触多个导电座15，进而间歇为弹簧17通电，弹簧17通电收缩，断电复位，实现弹簧17的往复伸缩过程，进而带动包被板22上下抖动，将孔洞内洗涤液以及试剂快速抖干，提高洗涤效果。

进一步的，盒体1上安装有控制器31，第一电机30、第二电机16、第一电动伸缩杆4以及第二电动伸缩杆27均与控制器31电性连接，控制器31可单独控制第二电机16正反转动的圈数，第一电动伸缩杆4的伸缩次数，以及第二电动伸缩杆27的伸缩程度。

本发明还公开了一种外源性禽白血病抗原检测方法，包括以下具体步骤：

S1、将洗涤液通过纯化水稀释20倍后装入储液罐3内，再将样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液分别装入对应的试剂瓶2内，将包被板22置于放置槽20内；

S2、启动第一电动伸缩杆4，通过连接板以及多根连接杆6带动多个活塞9同时上下移动，可将多个试剂瓶2内对应的试剂通过泵液筒5泵入对应的条形吸液槽23内；

S3、通过控制器31自动化的控制第一电机30正反转动，螺纹杆29转动通过移动块37带动多通道移液枪24在条形吸液槽23以及包被板22之间移动，将待测样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液按次序通过多通道移液枪24加入包被板22上，样品液加入后取出包被板22至保温箱中37℃培育30min，酶标抗体加入后37℃培育30min，底物A液、底物B液加入后37℃培育10min进行显色，最后加入终止液终止显色反应；

S4、待测样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液每次加入后均需要进行洗涤，只需启动第二电机16带动包被板22翻转180°，打开三通阀26，通过泵液筒5将洗涤液通过多个洗涤管32泵出，对包被板22上的多个孔进行冲洗；

S5、使用酶标仪测定650nm波长处的OD值，判定是否有外源性禽白血病抗原蛋白。

工作原理：首先将洗涤液通过纯化水稀释20倍后装入储液罐3内，再将样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液分别装入对应的试剂瓶2内，将包被板22置于放置槽20内，通过一对磁板21磁吸，启动第一电动伸缩杆4，通过连接板以及多根连接杆6带动多个活塞9同时上移，将多个试剂瓶2内对应的试剂通过吸液管7吸入泵液筒5内，活塞9下移，通过出液管10泵入对应的条形吸液槽23内。

通过控制器31自动化控制第一电机30正反转动，螺纹杆29转动通过移动块37带动多通道移液枪24在条形吸液槽23以及包被板22之间往返，启动第二电动伸缩杆27可带动多通道移液枪24上下移动，插入对应的条形吸液槽23或者包被板22的孔洞内，将待测样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液以及终止液按次序加入包被板22上，样品液加入后取出包被板22至保温箱中37℃培育30min，酶标抗体加入后37℃培育30min，底物A液、底物B液加入后37℃培育10min进行显色，最后加入终止液终止显色反应。

待测样品液、酶标抗体、底物A液、底物B液每次加入后均需要进行洗涤：启动第二电机16带动包被板22翻转180°，打开进液管11与出液管10的连接处以及吸液管7与连接管8的连接处的三通阀26，通过泵液筒5即可将洗涤液通过进液管11泵出，再通过分液管33进入多个洗涤管32泵出，同时通过螺纹杆29带动移动块37横向往复移动，当移动板25移动至条形口13处时，通过控制器31启动电磁块34，磁吸住铁块38，进而可通过电磁块34带动多根洗涤管32横向往复移动，实现多个孔洞均匀的洗涤过程。电磁块34横向移动过程中，导电头35间歇接触多个导电座15，进而间歇为弹簧17通电，弹簧17通电收缩，断电复位，实现弹簧17的往复伸缩过程，进而带动包被板22上下抖动，将孔洞内洗涤液以及试剂抖干，提高洗涤效果。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。