一种吸入用硫酸沙丁胺醇溶液中阴离子的测定方法

技术领域

本发明属于药物检测领域，具体涉及一种吸入用硫酸沙丁胺醇溶液中阴离子的测定方法。

背景技术

慢性呼吸系统疾病作为全球四大慢性病之一，对人们的健康造成重大危害，防治形势日趋严峻。吸入制剂的应用凭借起效迅速、全身不良反应小等特点，已成为慢性呼吸系统疾病治疗的首选药物制剂。硫酸沙丁胺醇溶液是一种选择性激动支气管平滑肌上的β2-受体的药物，能够使支气管平滑肌松弛，从而解除支气管平滑肌痉挛，目前作为吸入制剂治疗支气管哮喘、喘息型支气管炎及肺炎等慢性呼吸系统疾病。

吸入制剂的疗效除药物本身外还有制剂的理化性质，这包括pH值、pKa值、密度、粒度分布、粉末表面特征、粉末形状、晶型、水分、溶解度、溶剂化/或水合状态等，其中pH值、渗透压和溶解度受制剂中的阴离子影响较大，因此，控制吸入制剂中阴离子的含量，以保障其疗效是很有必要的。

但目前尚无治疗慢性呼吸系统疾病的吸入剂，特别是吸入用硫酸沙丁胺醇溶液中阴离子含量的测定方法研究，以控制吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的质量。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种治疗慢性呼吸系统疾病的吸入剂中阴离子的测定方法，步骤如下：

a、制备供试品溶液：取待测吸入用硫酸沙丁胺醇溶液，加水混匀，即得；

b、制备对照品溶液：取无机阴离子对照品，加水溶解，得供试品溶液，即得；

c、分别将供试品溶液和对照品溶液注入离子色谱仪检测，色谱条件如下：

色谱柱：阴离子交换色谱柱Dionex IonPac AS11；

流动相：KOH溶液；

梯度程序为：

进一步地，步骤a所述吸入用硫酸沙丁胺醇溶液与水的体积比为1～5：10。

进一步地，步骤b所述对照品溶液每1ml中含无机阴离子对照品20～80μg。

更进一步地，所述无机阴离子对照品为硫酸钠、氯化钠和/或溴化钠。

进一步地，所述步骤c的色谱柱为Dionex IonPac AS11，4.0×250mm。

进一步地，所述步骤c的色谱条件还包括：柱温：30～35℃，流速：1.0～1.2mL/min，进样量为20～30μL。

更进一步地，所述柱温：30℃，流速：1.0mL/min，进样量为25μL。

更进一步地，所述色谱条件还包括：检测器：电导检测器，检测方式：抑制电导检测。

更进一步地，所述治疗慢性呼吸系统疾病的吸入剂中无机阴离子浓度按外标法以峰高或峰面积计算。

本发明通过对色谱条件的筛选，确定在对吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的阴离子硫酸根离子、氯离子和溴离子进行检测时，需要特定的色谱柱和特定的洗脱程序相配合，才能实现吸入剂中不同阴离子浓度的准确测定。本发明成功建立了吸入用硫酸沙丁胺醇溶液中无机阴离子的测定方法，该方法准确可靠、简便快速，为提高吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的质量控制水平奠定了基础。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1系统适用性试验溶液色谱图

图2硫酸钠对照品溶液色谱图

图3溴化钾溶液色谱图

图4供试品溶液色谱图

图5氯化钠溶液色谱图

图6空白溶液色谱图

图7柱温为35℃时供试品溶液色谱图

图8流速为1.2ml/ml时供试品溶液色谱图

图9色谱柱为AS18时供试品溶液色谱图

具体实施方式

实施例1本发明吸入用硫酸沙丁胺醇中无机阴离子的测定

1、对照品溶液的制备

取氯化钠10mg，溴化钠10mg，硫酸钠10mg，置同一100ml量瓶中，用超纯水稀释至刻度，作为混合对照品溶液；

2、供试品溶液的制备

取吸入用硫酸沙丁胺醇2ml，置10ml量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

3、离子色谱

1)色谱条件如下：

色谱柱：Dionex IonPacTM AS11 4.0×250mm

流动相：KOH溶液

流速：1.0mL/min。

梯度程序：

检测器：电导检测器；

检测方式：抑制电导检测

柱温：30℃。

进样量为25μL。

3)测定

将对照品溶液和供试品溶液分别注入离子色谱仪中，得到峰高或峰面积,按外标法以峰高或峰面积计算吸入用硫酸沙丁胺醇中硫酸根离子、氯离子和溴离子的浓度。

以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。

试验例1本发明检测方法研究

1 仪器与试药

1.1 仪器

Thermo ICS-5000+DC离子色谱仪，Milli-Q超纯水制备仪，eppendorff移液枪(500-5000μL、20-200μL)，RAININ E4XLS单道电动移液枪(100-1000μL、10-100μL)，sartorius CPA225D电子天平。

1.2试剂与试药

硫酸钠标准品(国家标准物质，编号：GBW(E)060319，国防科技工业应用化学一级计量站)氯化钠标准品、EDTA-2Na标准品。供试品为吸入用硫酸沙丁胺醇溶液，氯化钠(天津市科密欧化学试剂有限公司，20151023)，溴化钾(天津市美琳工贸有限公司，20190120)

2实验方法

2.1色谱条件

色谱柱：阴离子交换色谱柱(Dionex IonPacTM AS11 4.0×250mm)；流速：1ml/min；以氢氧化钾溶液作为淋洗液，梯度洗脱程序见表1；柱温30℃，进样量：25μL。

表1梯度洗脱程序

2.2离子色谱检测条件

电导检测器，检测方式为抑制电导检测。

2.3溶液配制

硫酸钠对照品溶液的制备：精密称取硫酸钠对照品约120mg，置100ml量瓶中，用超纯水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取4ml，至100ml量瓶中，用超纯水溶解并稀释制成刻度，摇匀，制成每1ml中约含硫酸根离子30μg的溶液，作为对照品溶液。

氯化钠对照品溶液的制备：精密称取氯化钠对照品约200mg，置100ml量瓶中，用超纯水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取4ml，至100ml量瓶中，用超纯水溶解并稀释制成刻度，摇匀，制成每1ml中约含氯离子50μg的溶液，作为对照品溶液。

溴化钠对照品溶液的制备：精密称取溴化钠对照品约100mg，置100ml量瓶中，用超纯水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取4ml，至100ml量瓶中，用超纯水溶解并稀释制成刻度，摇匀，制成每1ml中约含溴离子32μg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备：取供试品2ml，置10ml量瓶中，加超纯水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，供试品溶液中每1ml中约含硫酸沙丁胺醇为0.2mg(每1ml中约含硫酸根离子为30μg)。

空白溶液的制备：超纯水。

系统适用性溶液制备：精密称定氯化钠10mg，溴化钠10mg，硫酸钠10mg，置同一100ml量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀。

3方法学验证

3.1专属性

按实验方法考察显示空白无干扰(图6)。根据供试品制备工艺表显示，供试品溶液中主药含有硫酸沙丁胺醇，辅料有氯化钠、盐酸、高纯氮气等。经分析，辅料中氯离子、溴离子可能干扰硫酸根测定。因此进行辅料专属性考察，按实验方法考察，供试品溶液中硫酸根离子色谱峰能与氯离子、溴离子色谱峰良好分离，显示辅料无干扰(图1、图4)。

3.2精密度

取对照品溶液连续进样6次，计算硫酸根、氯离子、溴离子保留时间的相对平均偏差(RSD)，结果见表2，图2、图3和图5。

表2精密度

3.3重复性

取供试品，共6份，照供试品溶液制备方法制备重复性样品，依法测定，结果见表3。

表3供试品重复性试验结果(n＝6)

3.4耐用性

3.4.1柱温调整

调整柱温为35℃，其余色谱条件不变，依法测定供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液和供试品溶液中硫酸根离子保留时间一致。硫酸根离子能与相邻离子峰良好分离(图7)。

3.4.2流速调整

调整流速为1.2ml/ml,其余色谱条件不变，依法测定供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液和供试品溶液中硫酸根离子保留时间一致。硫酸根离子能与相邻离子峰良好分离(图8)。

3.4.3色谱柱更换

更换色谱柱为AS18(Dionex IonPacTM AS18 4.0×250mm)，其余色谱条件不变，依法测定供试品溶液和对照品溶液，供试品溶液中硫酸根离子和溴离子无法达到良好分离。通过改变淋洗液浓度分离效果也不佳，因此选择AS11(Dionex IonPacTM AS11，4.0×250mm)色谱柱作为该测定方法色谱柱(图9)。

4样品测定

取供试品，照供试品溶液制备方法制备样品，作为供试品溶液。取硫酸钠对照品，按对照品溶液制备方法制备，作为对照品溶液。依法测定，结果见表4。供试品溶液中硫酸根离子峰的保留时间与对照品溶液中硫酸根离子峰的保留时间一致。

表4供试品测定结果

综上，本发明通过特定的色谱柱和特定的洗脱程序相配合，能将吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的阴离子硫酸根离子、氯离子和溴离子有效分离，实现吸入剂中各阴离子浓度的准确测定。由于本发明方法避免了吸入用硫酸沙丁胺醇溶液辅料中氯离子、溴离子对硫酸根测定干扰，可以通过测定硫酸根离子的含量计算得到吸入剂中有效成分硫酸沙丁胺醇的含量。本发明方法测定吸入剂中无机阴离子准确可靠、简便快速，为提高吸入用硫酸沙丁胺醇溶液的质量控制水平奠定了基础。