光散射检测装置
文献发布时间:2023-06-19 10:14:56
技术领域
本发明涉及用于测量分散在液体试样中的微粒子的分子量、旋转半径(尺寸)等的微粒子检测装置中所利用的光散射检测装置。
背景技术
作为用于对分散在液体试样中的蛋白质等微粒子进行分离的方法,已知有尺寸排阻色谱法(SEC:size exclusion chromatography)、凝胶渗透色谱法(GPC:Gel PermeationChromatography)。近年来,作为色谱检测装置,除紫外线(UV)吸光度检测装置、示差折射率检测装置以外,还使用多角度光散射(MALS)检测装置。MALS检测装置具有可以计算测量试样的分子量、粒径的优点(参照专利文献1以及2)。
图12示出MALS检测装置的基本构成例的俯视图,图13示出侧面图。在图12以及图13中,110是试样池,111是液体试样,120是光源,170是检测器,180是光束阻尼器。如图12以及图13所示,使液体试样111通入至圆筒体状的试样池110的内部,从光源120照射光使其通过试样池110以及流路中心。作为光源120通常使用可视激光。与光的行进方向所形成的角度θ被定义为水平面上(XY平面上)的散射角,在通过试样池110以及流路中心的水平面上(XY平面上)配置多个检测器170从而检测不同的散射角。
由于是圆筒状的试样池,所以具有检测器的配置角度和散射角一致的优点。图14A~图14C是示出散射光强度和散射角的关系的说明图。图14A是粒径为10nm的情况,图14B是粒径为100nm的情况,图14C是粒径为1000nm的情况。入射光的波长为660nm、粒子的折射率为1.6、溶剂的折射率为1.33是通过Mie散射(米式散射)理论计算的结果。如图14A~图14C所示,散射光强度和散射角的关系依赖于试样的粒径。在试样远小于入射光的波长的情况下,散射光各向同性地产生,不存在散射光强度的散射角依赖性。随着试样的粒径变大,散射光向前方的散射变强。对于配置了多个的检测器的散射光强度,能够通过向0度角散射外推来计算粒径、分子量。(参照非专利文献1)
期望MALS检测装置能够测量更低浓度的试样,且具有较高的S/N比。为此要求使检测器高效地对从试样产生的散射光进行受光的光学系统。即,需要进入各检测器的散射光的立体角较大。在增大检测器的立体角时,若增大水平方向(光轴面上)的立体角,则各检测器的角度分辨率变差,因此期望将竖直方向的立体角设定得较大。由于为了增大立体角而增大检测器的尺寸会使暗电流增加,因此不优选。为了不增大检测器尺寸而增大立体角,采用以透镜等进行聚光的方法。即,采用在试样池的流路产生的散射光经由成像透镜在检测器上成像的构成。
作为其他的MALS检测装置的基本构成,例举有专利文献1以及2所公开的方式。在该方式中,以贯通圆柱状的试样池的侧面的方式形成流路,使光平行地入射至流路。通过使圆柱状的试样池的侧面起到透镜的作用,能够不降低角度分辨率而将水平方向的立体角设定得较大。然而,也指出了由于使光平行地入射至流路,从而易于受到流路内的液流场的扰乱的影响,在低散射角中精度较差。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开平07-72068号公报
专利文献2:日本特开2015-111163号公报
非专利文献1:《利用光散射法解析蛋白质的绝对分子量和复合体形成》尾高雅文,生物工学89卷
发明内容
发明要解决的技术问题
成像于检测器的受光面上的散射光的像的大小根据配置检测器的角度而不同。在试样均匀地分布在试样池内的情况下,来自试样的散射光以与试样池的内径L一致的长度产生。若将检测器的配置角度设为θ,将由池以及成像透镜构成的成像光学系统的倍率设为M,则成像于检测器上的散射光像的长度为MLsinθ。在检测器的大小相同的情况下,根据检测器的配置角度,检测器所受光的散射光的产生区域变得不同。在试样池中,由于在空气和玻璃的界面以及玻璃和液体的界面产生散射光,因此不期望使用覆盖试样整个区域那么大的检测器。
在各检测器中进行受光的散射光产生区域不同的情况下,受光的区域越广的检测器越是输出高散射光。在试样均匀地分布在试样池内的情况下,可以在受光的散射光产生区域中修正检测器的输出。然而,在试样不均匀地分布在试样池内的情况下,该修正变得不正确。即,由于散射光输出的角度轮廓(profile)变得不正确,从而计算出的粒径、分子量也变得不正确。
在一般的色谱中,相同试样的峰是在时间上具有宽度的峰形状。在内部具有流路的圆筒状的试样池的情况下,成为在峰的上升沿流路的中心的浓度较高,随着离开中心而浓度降低的浓度分布。在峰的下降沿,由于越靠流路的中心则与流动相溶剂的置换推进越快,从而成为中心的浓度较低的轮廓。因此,若受光的散射光产生区域根据检测器的配置角度而不同,则色谱中的试样的峰形状变得不同,从而分子量精度、粒径精度变差。
于是,本发明的目的在于提供一种光散射检测装置,在试样池通入液体时的峰形状不依赖于检测器的配置角度,能够良好地维持分子量精度以及粒径计算精度。
用于解决上述技术问题的方案
本发明的一实施方式的光散射检测装置是用于检测液体试样中的微粒子的光散射检测装置,其特征在于具备:透明的试样池,保持液体试样;光源,对所述试样池照射相干光;成像光学系统,对从所述试样池以不同的散射角向周围散射的光进行聚光;狭缝板,配置在所述成像光学系统的入射侧,用于限制散射角范围;检测器,对来自所述成像光学系统的聚光进行受光;孔板,配置于比所述成像光学系统的焦距更靠所述检测器侧,通过开口宽度限制向所述检测器的受光宽度,从该试样池的中心轴等间隔地在所述试样池的周围配置多个从所述试样池到所述检测器的检测光学系统,将相对于所述相干光向所述试样池的入射方向的角度为90°的位置作为基准位置,所述多个检测器包括配置于比所述基准位置近的位置的第1检测器、和比所述基准位置远的位置的第2检测器,所述第1检测器的孔的开口宽度比所述第2检测器的孔的开口宽度大。
在所述光散射检测装置的构成中,优选为各孔板的开口宽度是将从所述试样池的中心轴到所述检测器的距离、与各检测器的配置角度的正弦值相乘的值。
此外,优选为所述孔板的开口部中至少沿着竖直方向的边为直线状。
进而,优选为所述孔板为了微调所述开口宽度,而沿水平方向可转动地配置。
此外,优选为所述孔板具备控制装置,基于所述液体试样中的溶剂的折射率信息,用于控制所述孔板的转动角。
此外,优选为所述孔板具备:转动装置,用于使该孔板转动;和存储部,用于存储所述液体试样中的溶剂的折射率信息。
此外,优选为所述各狭缝板具有狭缝,开口而形成,来限制所述散射角范围,
所述各狭缝的宽度在相对于所述相干光向所述试样池的入射方向的配置角度为90°时达到最大,随着配置角度偏离90°而变小。
进而,优选为所述各狭缝的宽度是配置角度为90°时的所述狭缝宽度乘以各检测器70的配置角度的正弦值的值。
除此之外,优选为所述光源被配置为,从该光源入射至所述试样池的相干光的光轴相对于包括所述试样池以及所述检测器的平面(XY平面)倾斜规定的角度。
发明效果
根据本发明,能够提供光散射检测装置,在试样池通入液体时的峰形状不依赖于检测器的配置角度,能够良好地维持分子量精度以及粒径计算精度。
附图说明
图1是本发明的光散射检测装置的第1实施方式的俯视图。
图2是第1实施方式的光散射检测装置的侧视图。
图3是第1实施方式的光散射检测装置(MALS)的俯视图。
图4是配置角度为60度时检测器的受光面上的散射光像的观察照片。
图5是配置角度为90度时检测器的受光面上的散射光像的观察照片。
图6A是孔板的开口宽度与配置角度无关且为恒定的情况时的色谱测量的说明图。
图6B是孔板的开口宽度与配置角度无关且为恒定的情况时的色谱测量的说明图。
图7A是使孔板的开口宽度根据配置角度而不同的情况时的色谱测量的说明图。
图7B是使孔板的开口宽度根据配置角度而不同的情况时的色谱测量的说明图。
图8是第2实施方式的光散射检测装置的俯视图。
图9是第3实施方式的光散射检测装置的俯视图。
图10A是使孔板的开口宽度根据配置角度而不同,且狭缝板的狭缝宽度与配置角度无关且为恒定的情况时的色谱测量的说明图(示出各配置角度中的各检测器所受光的散射光强度的相对值的图表)。
图10B是使孔板的开口宽度根据配置角度而不同且使狭缝板的狭缝宽度也根据配置角度而不同的情况时的色谱测量的说明图(示出各配置角度中的各检测器所受光的散射光强度的相对值的图表)。
图11是第4实施方式的光散射检测装置的俯视图。
图12是MALS检测装置的基本构成例的俯视图。
图13是MALS检测装置的基本构成例的侧视图。
图14A是示出粒径为10nm的散射光强度和散射角的关系的说明图。
图14B是示出粒径为100nm的散射光强度和散射角的关系的说明图。
图14C是示出粒径为1000nm的散射光强度和散射角的关系的说明图。
具体实施方式
以下,参照附图对本发明的光散射检测装置的第1以及第2实施方式进行说明。另外,在各图中标注相同的附图标记的部分具有相同或者等同的构成。
[第1实施方式]
[光散射检测装置的构成]
首先,参照图1~图3对本发明的光散射检测装置的第1实施方式的构成进行说明。图1是本发明的光散射检测装置的第1实施方式的俯视图。图2是第1实施方式的光散射检测装置的侧视图。如图1以及图2所示,本实施方式的光散射检测装置1是对分散在液体试样中的蛋白质等微粒子的分子量、旋转半径(尺寸)进行检测的装置。光散射检测装置1具备试样池10、光源20、光束阻尼器(beam damper)80、狭缝板40、成像光学系统50、孔板(apertureboard)60以及检测器70。以下,对各构成要素分别进行说明。
试样池10是将液体试样保持于内部的流路的透明的圆筒体状的池。试样池10例如由无色透明的石英玻璃形成。
光源20对试样池10照射相干光。“相干光”是指,光束内的任意2点的光波的相位关系随时间不变而保持为恒定,在以任意的方法分割光束后,即使赋予其较大的光路差后再次重叠也示出完全的干涉性的光。作为光源20例如采用用于照射可视光激光的激光光源。在自然界中不存在完全的相干光,以单模振荡的激光是接近相干状态的光。
在从光源20到达试样池10的入射光的光路L1配置有聚光光学系统21。作为聚光光学系统21例如采用单一的聚光透镜。该聚光透镜是平凸透镜,来自光源20的光的入射侧形成为凸面,出射侧形成为平面。在本实施方式中采用单一的聚光透镜作为聚光光学系统21,但聚光光学系统21也可以将多个复合透镜、聚光镜组合构成。
光源20以及聚光光学系统21被配置为使从光源20入射至试样池10的相干光的光轴相对于包括试样池10以及检测器50的平面(XY平面)倾斜规定的角度(倾斜角度α)。具体而言,以入射光从斜上方入射至试样池10的方式来配置光源20以及聚光光学系统21。通过使入射光相对于试样池10倾斜(角度α),能够使在试样池10的玻璃和空气之间的界面以及玻璃和流路之间的界面(以下,总称为“池界面”)处的反射光所引起的杂散光降低。从光源20照射的激光在通过聚光光学系统21后,在试样池10的中心轴附近聚光。
光束阻尼器80是对透过了试样池10的激光进行遮挡的机器。光束阻尼器80被配置于使入射至试样池10,且透过了该试样池10的激光直线前进的位置。光束阻尼器80也被称为电子束阱(beam trap),通过使激光在阻尼器内无限地反射,进而将向阻尼器外的反射抑制在最低限度。
在来自试样池10的出射光的光路L2上配置有检测光学系统30。本实施方式的检测光学系统30由狭缝板40、成像光学系统50、孔板60以及检测器70构成。
成像光学系统50对来自试样池10的以不同的散射角向周围散射的光进行聚光。作为成像光学系统50例如采用单一的成像透镜。该成像透镜是平凸透镜,来自试样池10的散射光的入射侧形成为平面,出射侧形成为凸面。在本实施方式中,采用单一的成像透镜作为成像光学系统50,但成像光学系统50也可以将多个复合透镜、成像镜组合构成。
狭缝板40配置在来自试样池10的出射光的光路L2上、试样池10和成像光学系统50之间。狭缝板40对入射至成像光学系统50的散射角范围进行限制。即,为了限制水平方向的散射角且较多地获取竖直方向的光束,在狭缝板40开口的狭缝41是竖直方向上为竖长、且至少沿着竖直方向的边是直线状。具体而言,狭缝41在竖直方向上呈竖长的长方形状或长孔形状。
孔板60配置在在来自试样池10的出射光的光路L2上,比检测器70更靠成像光学系统侧。孔板60具有限制杂散光的功能,其开口部61在检测器70的受光面前处开口。孔板60的开口部至少沿着竖直方向的边为直线状。具体而言,孔板60的开口部61在竖直方向呈竖长的长方形状或长孔形状。
如图1以及图3所示,在试样池10的周围从其中心轴S以等间隔d配置多个从试样池10到检测器70的检测光学系统30。与光的前进方向所形成的角度θ被定义为水平面上(XY平面上)的散射角。在通过试样池10的中心轴S的水平面上(XY平面上)配置有多个检测器70,从而能够检测不同的散射角。在图1的方案中,以θ1、θ2的配置角度配置有2套检测光学系统30、31。此外,在图1的方式中,在将相对于相干光向试样池10的入射方向的角度为90°的位置作为基准位置的情况下,检测光学系统30的检测器70成为配置在比基准位置近的位置的、即位于配置角度θ1的第1检测器,检测光学系统31的检测器70为配置在比基准位置远的位置的、即位于比配置角度θ1大的配置角度θ2的第2检测器。在图3的方案中,在试样池10的周围以等间隔d配置14个检测器70。另外,在图3中省略聚光光学系统、狭缝板、成像光学系统以及孔板的图示。
像这样在试样池10的周围配置有多个检测器70,因此各孔板60的开口宽度根据各检测器70相对于试样池10的配置角度而不同。即,各孔板60的开口宽度在配置角度相对于相干光向试样池10的入射方向为90°时为最大,随着配置角度偏离90°而变小。然后,在本实施方式中,各孔板60的开口宽度是将从试样池10的中心轴到检测器70的距离、和各检测器70的配置角度的正弦值相乘来设定的值。另外,只要能够达成本发明的目的,即使是对该值增加了若干修正的值也包括在发明的范围内。
如上所述,若将试样池10的内径设为L,检测器70的配置角度设为θ,由池和结合透镜构成的成像光学系统的倍率设为M,则成像于检测器70上的散射光像的长度为MLsinθ。在此,试样池10的内径L以及成像光学系统的倍率M在所有的检测光学系统30、31…中都是相同的。因此,在试样池10的周围以等间隔d配置有多个检测光学系统30、31的情况下,各检测器前的孔板60的开口宽度根据各检测器70相对于试样池10的配置角度θ1、θ2…而不同。孔板60的开口宽度是将从试样池10的中心轴S到检测器70的距离d、和各检测器70的配置角度θ1、θ2的正弦值相乘来设定的。具体而言,配置角度θ1的孔板60的开口宽度由dsinθ1的宽度来设定。此外,配置角度θ2的孔板60的开口宽度由dsinθ2的宽度来设定。
检测器70对来自成像光学系统50的聚光进行受光。即,检测器70的受光面位于成像光学系统50的焦点。作为本实施方式的检测器70例如采用光电二极管(PD:photodiode),也可以采用二维CMOS等的阵列检测器。
〔光散射检测装置的作用〕
接下来,参照图1~图8对本实施方式的光散射检测装置的作用进行说明。
如图1所示,液体试样11被通入至圆筒体状的试样池10的流路。若液体试样11的通入结束,则从光源20经由聚光光学系统21照射作为相干光的可视激光。可视激光沿着光路L1前进,从而使激光入射至试样池10的流路内的液体试样11。若激光入射至液体试样,则该光遇到液体试样11中包含的微粒子后以规定的散射角而进行散射。然后,从试样池10出射的散射光通过狭缝板40的狭缝41后,经过成像光学系统50以及孔板60,在检测器70的受光面上受光。另一方面,入射至试样池10并透过后直线前进的激光被光束阻尼器80吸收。
在散射光从试样池10出射时,在试样池10的空气和玻璃的界面以及玻璃和液体的界面处,产生作为杂散光的反射光RL。狭缝板40在竖直方向上通过竖长的狭缝41限制向成像光学系统50入射的散射光的散射角范围。成像光学系统50对散射光进行聚光,在检测器70的受光面上成像,但在检测器前,进一步通过孔板60的开口部61的开口宽度限制向检测器70的受光宽度。
如图1以及图3所示,在试样池10的周围以等间隔d配置多个从试样池10至检测器70的检测光学系统30。成像于检测器70的受光面上的散射光的像的大小根据配置检测器70的角度而不同。如上所述,在液体试样11均匀地分布在试样池10内的情况下,若将试样池10的内径设为L,检测器的配置角度设为θ,由池和成像透镜构成的成像光学系统的倍率设为M,则成像于检测器上的散射光像的长度为MLsinθ。
在此,由于试样池10的内径L以及成像光学系统的倍率M在所有的检测光学系统30、31…是相同的,所以各检测器前的孔板60的开口宽度根据各检测器70相对于试样池10的配置角度θ1、θ2而不同。即,孔板60的开口宽度是将从试样池10的中心轴S到检测器70的距离d、和各检测器70的配置角度θ1、θ2的正弦值相乘而设定的。这样通过使孔板60的开口宽度根据各检测器70的配置角度θ1、θ2而不同,能够将检测器70的受光宽度设定为最佳的宽度。
[检测器的受光面上的散射光像的观察]
为了确认第1实施方式的作用效果,对成像于检测器散射光像进行拍摄观察。图4是配置角度60度时的检测器的受光面上的散射光像的观察照片。图5是配置角度90度时的检测器的受光面上的散射光像的观察照片。在图4以及图5中,SL是来自溶剂的散射光,GL是来自玻璃的散射光。
拍摄条件的设定如下。试样池10例如是内径为1.6mm,外径为8.0mm的透明的圆筒体状的池。在距离试样池10的中心轴S 50mm的位置配置有成像透镜(平凸透镜)。成像透镜例如形成为凸径为Φ12.7mm,焦距为38mm。在距离试样池10的中心轴S 100mm的位置配置有孔板60以及检测器(PD)70。
如图4以及图5所示,对在将水作为溶剂封入的状态下的配置角度90度以及60度的检测器(PD)的受光面上的水的散射光像进行拍摄观察。散射光像的长度如上所述具有MLsinθ的关系,配置角度60度的检测器前的孔板60的开口宽度与配置角度θ的正弦值对应地变短。
[色谱测量]
图6A以及图6B是孔板的开口宽度与配置角度无关且为恒定的情况的色谱测量的说明图。即,示出相当于尺寸排阻色谱法测量中的BSA(牛血清白蛋白)单体的、配置角度为θ1和θ2的检测器(PD)的输出。图6A是以单体峰的最大值(1030sec)标准化的结果。图6B是θ2的输出除以θ1的输出后的结果。由于是在色谱柱分离的相同特性的试样,图6A中θ1和θ2的峰形状变得相同,虽然理想下图6B中θ2的值达到斜率为0,但变成为随着时间的经过不断上升的结果。若根据该结果计算分子量、粒径,则峰内计算结果变得不同,计算精度恶化。
另一方面,图7A以及图7B是使孔板的开口宽度根据配置角度而不同的情况时色谱测量的说明图。即,是以使检测器(PD)对来自相同的试样区域的散射光进行受光的方式来调整孔板的开口宽度的结果。与图6A以及图6B相比,θ2的变动变小,具有分子量以及粒径的计算值在峰内的变动变小的效果。
如上说明所示,由于第1实施方式的光散射检测装置1使各检测器前的孔板60的开口宽度根据各检测器70相对于试样池10的配置角度θ1、θ2而不同,因此能够将对检测器70的受光宽度设定为最佳的宽度。由此,根据第1实施方式的光散射检测装置1,在试样池通入液体时的峰形状能够不依赖于检测器70的配置角度,良好地维持分子量精度以及粒径计算精度。
[第2实施方式]
接下来,参照图8对第2实施方式的光散射检测装置2进行说明。图8是第2实施方式的光散射检测装置的侧视图。另外,赋予与第1实施方式相同的附图标记的部分具有与第1实施方式相同的或者等同的构成。
如图8所示,第2实施方式的光散射检测装置2与第1实施方式不同的点为,为了微调孔板260的开口宽度,而配置其在水平方向可转动。即,构成为在孔板260例如在竖直方向的中心部由未图示的转动轴支承,使其沿水平方向可转动。孔板260具备:转动装置210,用于使该孔板260转动;存储部230,用于存储液体试样中的溶剂的折射率信息;控制装置220,用于基于溶剂的折射率信息,控制孔板260的转动角。
转动轴例如与步进电机等转动装置210连接,通过驱动转动轴,使孔板260转动。在存储部230存储有各种液体试样中的溶剂的折射率信息。控制装置220从存储部230提取成为分析对象的液体试样110的溶剂的折射率信息。控制装置220基于提取出的溶剂的折射率信息,驱动转动装置210,控制孔板260的转动角。通过控制孔板260的转动角,该孔板260沿水平方向倾斜,实质地对开口宽度微调。
第2实施方式的光散射检测装置2基本上起到与第1实施方式的光散射检测装置1同样的作用效果。特别的是第2实施方式的光散射检测装置2中孔板260为了微调开口宽度,被配置为沿水平方向可转动。此外,孔板260具备:转动装置210,用于使该孔板260转动;存储部230,用于存储液体试样中溶剂的折射率信息;控制装置220,基于溶剂的折射率信息,用于控制孔板的转动角度。因此,根据第2实施方式的光散射检测装置2,能够根据液体试样中的溶剂的折射率信息,微调孔板260的开口宽度。成像光学系统的倍率M依赖于溶剂的折射率。通过根据折射率调整孔开口宽度,能够不依赖于溶剂,对流路内的相同区域的散射光进行受光。因此,起到能够良好地维持分子量精度以及粒径计算精度的这样有利的效果。
[第3实施方式]
接下来,参照图9、图10A以及图10B对第3实施方式的光散射检测装置3进行说明。图9是第3实施方式的光散射检测装置的俯视图。图10A是使孔板的开口宽度根据配置角度而不同,且狭缝板的狭缝宽度与配置角度无关且为恒定的情况时的色谱测量的说明图(示出各配置角度中的各检测器所受光的散射光强度的相对值的图表)。图10B是使孔板的开口宽度根据配置角度而不同,且使狭缝板的狭缝宽度也根据配置角度而不同的情况时的色谱测量的说明图(示出各配置角度中的各检测器所受光的散射光强度的相对值的图表)。在本实施方式中,以与上述的第1实施方式的不同点为中心进行说明,对相同的事项省略其说明。此外,赋予与第1实施方式相同的附图标记的部分具有与第1实施方式相同或者等同的构成。此外,图10A以及图10B示出的图表均是将对在池中心(X=0)产生的散射光进行受光的光强度设为1,进而计算受光的散射光强度相对值的池位置依赖性(X依赖性)的结果。
如图9所示,在第3实施方式的光散射检测装置3中,在试样池10的周围配置有多个狭缝板340。然后,各狭缝板340的各狭缝341的宽度与各孔板60的开口宽度同样地,在配置角度相对于相干光向试样10的入射方向为90°时达到最大,随着配置角度偏离90°而变小。此外,在本实施方式中,各狭缝341的宽度是对配置角度为90°时的狭缝341的宽度乘以各检测器70的配置角度的正弦值而设定的值。例如,将配置角度为90°时的狭缝341的宽度设为w0时,配置角度θ1的狭缝341的宽度由w0×sinθ1的宽度来设定。此外,配置角度θ2的狭缝341的宽度由w0×sinθ2的宽度来设定。这样在本实施方式中,使狭缝431的宽度根据各检测器70的配置角度θ1、θ2而不同。另外,只要能够达成本发明的目的,对配置角度为90°时的狭缝341的宽度乘以各检测器70的配置角度的正弦值而设定的值加上若干修正的值也包括在本发明的范围内。
然而,虽然使各孔板60的开口宽度根据配置角度不同,但对于各狭缝341的宽度,在与配置角度无关且为恒定的情况下,即在省略使各狭缝341的宽度根据配置角度而不同的情况下,得到图10A示出的图表那样的结果。由图10A示出的图表清楚地可知,配置角度越小,各检测器70的光强度越小(例如配置角度为15度、30度的情况),对于配置角度较大时的光强度具有产生偏离的倾向。另外,在不使用所述配置角度较小的检测器70的情况下,防止该偏离对蛋白质等微粒子的分子量、旋转半径的检测结果造成影响。
因此,为了防止配置角度的大小中光强度的偏离,光散射检测装置3如上所述是使各孔板60的开口宽度根据配置角度而不同,且使各狭缝板341的宽度也根据配置角度而不同的构成。在该情况下,得到图10B示出的图表这样的结果。由图10B示出的图表清楚地可知,与配置角度的大小无关,与各配置角度相对应的光强度的图表几乎彼此重叠,防止了所述偏离的产生。由此,能够与检测器70的配置部位无关,高精度地检测蛋白质等微粒子的分子量、旋转半径。
[第4实施方式]
接下来,参照图11对第4实施方式的光散射检测装置4进行说明。图11是第4实施方式的光散射检测装置的侧视图。以与上述的第3实施方式的不同点为中心进行说明,对同样的事项省略其说明。此外,赋予与第3实施方式相同的附图标记的部分与第3实施方式具有相同或者等同的构成。
如图11所示,第4实施方式与第3实施方式的不同点在于,光散射检测装置4中,为了微调各狭缝341的宽度,而将其配置为沿水平方向可转动。即,在狭缝板340中,例如在竖直方向的中心部由未图示的转动轴支承,而沿水平方向可转动构成。狭缝板340具备:转动装置410,用于使该狭缝板340转动;控制装置420,用于控制狭缝板340的转动角。
转动轴例如与步进电机等转动装置410连接,能够通过驱动转动轴,使狭缝板340转动。控制装置420驱动转动装置410,控制狭缝板340的转动角。然后,通过对各狭缝板340使用相同的狭缝板340,控制该各狭缝板340的转动角,进而改变该各狭缝板340的姿势。由此,能够使各狭缝341的宽度根据配置角度而不同。此外,通过构成为使各狭缝板340转动,可以微调各狭缝341的宽度。
上述的实施方式是为了容易理解本发明,并不用于对本发明进行限定解释。实施方式具备的各要素以及其配置、材料、条件、形状以及尺寸等并不限定于例示,而是能够进行适当地变更。此外,可以将不同的实施方式中示出的构成部分置换或组合。
此外,本发明的光散射检测装置可以将所述各实施方式中任意2种以上的构成(特征)组合。
附图标记说明
1、2、3、4 光散射检测装置
10 试样单元
20 光源
30 检测光学系统
40、340 狭缝板
41、341 狭缝
50 成像光学系统
60、260 孔板
61 开口部
70 检测器
210、410 转动装置
220、420 控制装置
230 存储部。
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