一种抗疲劳的片剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种抗疲劳的片剂及其制备方法和应用。

背景技术

豌豆肽是一种优质食源性蛋白肽类物质,具有分子量小、易吸收、支链氨基酸含量多的特点，不但能够为人体提供必需的营养元素，且具有良好的理化指标和功能特性。豌豆肽属于一种小分子蛋白，人体吸收速度较快，速度高达正常蛋白质的20倍左右，是正常氨基酸的3倍以上，具有缓解疲劳、提高肌肉力量及运动能力等良好效果。相比于因具有副作用而限量使用的咖啡因、激素等抗疲劳药物来说，豌豆肽具有生物效价高、营养丰富、安全低毒等优点，且价格低廉。

紫苏是一种唇形科紫苏属一年生草本植物，紫苏籽的蛋白质含量约为25％，氨基酸种类丰富且组成合理。目前，对紫苏油开发利用比较广泛，然而对紫苏分离蛋白和紫苏肽的开发不足。紫苏籽肽能够通过增加机体糖原积累，提高血清乳酸脱氢酶(LDH)活性，促进代谢产物的清除，从而有效提高运动能力，具有良好的抗疲劳效果。

目前在抗疲劳功能食品行业，对于植物蛋白肽的重视程度在不断提高，研究开发较多的为大豆肽、玉米肽、乌鸡蛋清肽等。专利申请CN108142952A公开了一种具有改善疲劳、提高免疫力的复合肽粉，具体含有海洋鱼低聚肽粉、大豆肽粉、小麦低聚肽、玉米低聚肽粉、酪蛋白磷酸肽等原料，该复合肽粉不仅营养均衡，还具有缓解疲劳、提高免疫的作用。中国专利CN109758568B公开了一种乌鸡蛋清肽的组合物及其在制备治疗痛经的药品、抗疲劳保健食品、食品中的应用，该乌鸡蛋清肽的组合物，按重量份数计，包括如下组分：乌鸡蛋清肽10-300份、带蜜甘蔗糖10-9000份。制得的乌鸡蛋清肽的组合物可应用于制备治疗痛经的药品、抗疲劳的保健食品及食品。而现有技术中对豌豆肽和紫苏籽肽的抗疲劳作用关注甚少，且现有技术中关于豌豆肽类药物的研究发现，食用豌豆肽后还会产生胀气和消化吸收差等现象。

因此，当前需要一种抗疲劳效果好、能够快速恢复体力、制作方法简单且能够避免食用豌豆肽所产生的胀气的抗疲劳功能食品。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种抗疲劳的片剂及其制备方法和应用，该片剂包括豌豆肽粉、紫苏籽肽粉、菊粉、维生素、牛磺酸、增稠剂、甜味剂、食品防腐剂和助流剂，能够缓解体力疲劳，快速恢复体力，补充能量，且减轻豌豆肽的胀气、消化吸收差等现象。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供了一种抗疲劳的片剂，包括豌豆肽粉、紫苏籽肽粉、菊粉、维生素、牛磺酸、增稠剂、甜味剂、食品防腐剂和助流剂。

豌豆肽粉是豌豆蛋白质经酶解、分离、精制和干燥等加工过程而制得的小分子低聚肽的混合物。

紫苏籽肽粉为冻干粉，是紫苏籽蛋白质经酶解、分离、精制和干燥等加工过程而制得的小分子低聚肽的混合物。

菊粉为天然存在于植物中的一种多糖，是一种可溶性膳食纤维。

优选地，所述的片剂包括以下重量份的原料：豌豆肽粉5-30份、紫苏籽肽粉0.5-1.5份、菊粉0.5-3份、维生素0.1-0.5份、牛磺酸0.5-2份、增稠剂20-50份、甜味剂2-20份、食品防腐剂0.5-3份、助流剂类0.5-3份。

优选地，所述的豌豆肽粉、紫苏籽肽粉和菊粉的质量比为20-30：0.5-1.5：0.5-3。

优选地，所述的维生素包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸及维生素C中的三种或三种以上。

优选地，所述的增稠剂为β-环糊精、麦芽糊精、微晶纤维素、玉米淀粉中的一种或多种。

优选地，所述的甜味剂为低聚木糖、木糖醇、山梨糖醇、甜菊糖苷、三氯蔗糖、海藻糖中的一种或多种。

优选地，所述的助流剂为硬脂酸镁、微粉硅胶和滑石粉中的一种或多种。

优选地，所述的食品防腐剂为柠檬酸、抗坏血酸、苹果酸中的一种或多种。

本发明还提供了一种上述片剂的制备方法，具体将豌豆肽粉、紫苏籽肽粉、菊粉、维生素、牛磺酸、增稠剂、甜味剂、食品防腐剂和助流剂混合，之后进行搅拌、压片，压片后使用包衣剂进行包衣，即得抗疲劳的片剂。

优选地，所述搅拌的频率为20-30Hz，搅拌的时间为20-30分钟。

最优选地，所述搅拌的频率为25Hz；所述搅拌的时间为25分钟。

优选地，所述的包衣剂为聚乙二醇、羟丙基甲基纤维素中的一种或二种。

所述的包衣剂用量为3-5份。

本发明还提供了一种上述的片剂或上述的制备方法制备得到的片剂在制备抗疲劳保健食品中的应用。

本发明中的片剂包含豌豆肽粉、紫苏籽肽粉、菊粉、维生素、牛磺酸、增稠剂、甜味剂、食品防腐剂和助流剂，通过食品级包衣剂进行包衣的制备方法，其特定配比及生产工艺，各组分之间具有协同作用。其中，豌豆肽有分子量小、易吸收、支链氨基酸含量多的特点，不但能够为人体提供必需的营养元素，而且人体吸收速度很快，速度高达正常蛋白质的20倍左右，是正常氨基酸的3倍以上，适合需要快速恢复体力、补充能量的人员使用。紫苏籽中的有效成分对人体具有提高记忆力和视网膜反射能力、抗衰老、抗过敏、降血压、降血脂、增强免疫等保健功能和药用功效。添加菊粉，菊粉为膳食纤维，在豌豆肽缓解疲劳作用的同事可起到调节肠胃的效果，从而有效避免了豌豆肽引起腹胀、肠鸣等现象，适合大多数普通消费者的口味，进而大大提高了产品的市场满意度。维生素是人体代谢中必不可少的有机化合物，是维持和调节机体新陈代谢的重要物质。牛磺酸能够保护心肌，维持心脏功能，使血液循环正常，从而消除疲劳生成物，使机体能有效地产生能量，是重要的生理活性物质，和运动能力关系密切。

相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明提供的豌豆肽和紫苏籽肽片剂能够缓解体力疲劳，快速恢复体力、补充能量；

(2)本发明提供的豌豆肽和紫苏籽肽片剂避免了食用豌豆肽所产生的胀气、肠道消化吸收差等现象，提高了豌豆肽的生物利用度；

(3)本发明提供的豌豆肽和紫苏籽肽片剂的制备方法简化了豌豆肽的生产制备工艺，降低了生产成本，有利于实现工业化生产。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行说明，以使本发明技术方案更易于理解、掌握，但本发明并不局限于此，描述的实施例仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都应当属于本申请保护的范围。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

豌豆肽粉购自中食都庆(山东)生物技术有限公司；

紫苏籽肽粉购自宁夏香草生物技术有限公司；

尿素氮试剂盒购自武汉艾迪抗生物科技有限公司，货号为AD42002；

小鼠肌糖原试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司，货号为ml058103；

小鼠肝糖原试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司，货号为ml037785。

实施例1

抗疲劳片剂由以下重量份的原料制成：豌豆肽粉30份、紫苏籽肽粉1.5份、菊粉3份、维生素A 0.2份、维生素D 0.2份、维生素B1 0.1份、牛磺酸0.5份、β-环糊精10份、麦芽糊精10份、微晶纤维素5份、低聚木糖1份、木糖醇2份、甜菊糖苷2份、抗坏血酸3份、硬脂酸镁0.5份。

按上述比例进行配料，将配备好的原料加入SBH-500三维摆动混合机里，转速设置为25Hz，搅拌20分钟，使其混合均匀后，进行压片，之后用聚乙二醇：羟丙基甲基纤维素＝1：1的混合物进行包衣，包衣后增重4.3％，得抗疲劳压片片剂。

实施例2

抗疲劳片剂由以下重量份的原料制成：豌豆肽粉20份、紫苏籽肽粉1份、菊粉2份、维生素E 0.05份、维生素B6 0.02份、维生素B2 0.02份、烟酸0.01份、牛磺酸2份、β-环糊精10份、麦芽糊精10份、微晶纤维素15份、玉米淀粉15份、甜菊糖苷1份、三氯蔗糖1份、抗坏血酸1份、苹果酸1份、硬脂酸镁1.0份、微粉硅胶0.5份。

按上述比例进行配料，将配备好的原料加入SBH-500三维摆动混合机里，转速设置为25Hz，搅拌25分钟，使其混合均匀后，进行压片，之后用聚乙二醇：羟丙基甲基纤维素＝1：1的混合物进行包衣，包衣后增重3.8％，得抗疲劳压片片剂。

实施例3

抗疲劳片剂由以下重量份的原料制成：豌豆肽粉25份、紫苏籽肽粉0.5份、菊粉0.5份、维生素B12 0.1份、维生素C 0.1份、维生素B6 0.1份、牛磺酸1份、β-环糊精5份、麦芽糊精5份、微晶纤维素5份、玉米淀粉5份、甜菊糖苷5份、三氯蔗糖2份、海藻糖8份、木糖醇5份、柠檬酸0.5份、硬脂酸镁1.0份、微粉硅胶1份、滑石粉1份。

按上述比例进行配料，将配备好的原料加入SBH-500三维摆动混合机里，转速设置为25Hz，搅拌30分钟，使其混合均匀后，进行压片，之后用聚乙二醇：羟丙基甲基纤维素＝1：1的混合物进行包衣，包衣后增重3.8％，得抗疲劳压片片剂。

对比例1

抗疲劳片剂由以下重量份的原料制成：豌豆肽粉20份、甜菜肽粉1份、菊粉2份、维生素E 0.05份、维生素B6 0.02份、维生素B2 0.02份、烟酸0.01份、牛磺酸2份、β-环糊精10份、麦芽糊精10份、微晶纤维素15份、玉米淀粉15份、甜菊糖苷1份、三氯蔗糖1份、抗坏血酸1份、苹果酸1份、硬脂酸镁1.0份、微粉硅胶0.5份。

按上述比例进行配料，将配备好的原料加入SBH-500三维摆动混合机里，转速设置为25Hz，搅拌25分钟，使其混合均匀后，进行压片，之后用聚乙二醇：羟丙基甲基纤维素＝1：1的混合物进行包衣，包衣后增重3.8％，得抗疲劳压片片剂。

对比例2

抗疲劳片剂由以下重量份的原料制成：豌豆肽粉30份、菊粉3份、维生素B12 0.1份、维生素C 0.1份、维生素B6 0.1份、牛磺酸2份、β-环糊精10份、麦芽糊精10份、微晶纤维素5份、低聚木糖1份、木糖醇2份、甜菊糖苷2份、抗坏血酸2份、硬脂酸镁0.5份。

按上述比例进行配料，将配备好的原料加入SBH-500三维摆动混合机里，转速设置为25Hz，搅拌25分钟，使其混合均匀后，进行压片，之后用聚乙二醇：羟丙基甲基纤维素＝1：1的混合物进行包衣，包衣后增重4.1％，得抗疲劳压片片剂。

对比例3

抗疲劳片剂由以下重量份的原料制成：豌豆肽粉36份、紫苏籽肽粉4份、菊粉4份、维生素A 0.2份、维生素D 0.2份、维生素B1 0.1份、牛磺酸0.5份、β-环糊精10份、麦芽糊精10份、微晶纤维素5份、低聚木糖1份、木糖醇2份、甜菊糖苷2份、抗坏血酸3份、硬脂酸镁0.5份。

按上述比例进行配料，将配备好的原料加入SBH-500三维摆动混合机里，转速设置为25Hz，搅拌25分钟，使其混合均匀后，进行压片，之后用聚乙二醇：羟丙基甲基纤维素＝1：1的混合物进行包衣，包衣后增重4％，得抗疲劳压片片剂。

对比例4

抗疲劳片剂由以下重量份的原料制成：豌豆肽粉40份、紫苏籽肽粉0.1份、菊粉4份、维生素B12 0.2份、维生素D 0.2份、维生素B1 0.1份、牛磺酸2份、玉米淀粉10份、麦芽糊精10份、微晶纤维素10份、低聚木糖1份、木糖醇2份、甜菊糖苷2份、抗坏血酸3份、硬脂酸镁0.5份、微粉硅胶1份、滑石粉0.5份。

按上述比例进行配料，将配备好的原料加入SBH-500三维摆动混合机里，转速设置为25Hz，搅拌25分钟，使其混合均匀后，进行压片，之后用聚乙二醇：羟丙基甲基纤维素＝1：1的混合物进行包衣，包衣后增重4.1％，得抗疲劳压片片剂。

效果例1片剂缓解体力疲劳的作用研究

评价抗疲劳功效的方法主要为运动耐力试验和生化指标检测相结合。强制游泳试验被认为是观察药物抗疲劳作用最客观、最易操作的模型，也是应用最广泛的模型。常用的生化指标主要包括肝糖原、肌糖原、血清尿素氮、血乳酸等。若1项以上耐力运动试验和2项以上生化指标为阳性，或者3个剂量耐力运动试验阳性，1项生化指标阳性，则可以判定受试物具有抗疲劳活性。

1实验材料

1.1动物

清洁级雄性昆明小鼠，体重16-20g，长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。小鼠饲养环境：温度(22±2)℃，相对湿度50％-70％，全部动物均给予灭菌鼠饲料和灭菌水自由取用，光照循环12h亮/暗。

1.2仪器

AL20型电子分析天平，FL600型酶标仪，SK-1型快速混匀器，UV-5500紫外分光光度计，游泳箱(53cm×40cm×35cm)，铅绳，计时器，洁净工作台、无菌手术器械、注射器(1mL)、恒温水浴锅。

1.3试剂

肝素钠，尿素氮试剂盒，肝/肌糖原试剂盒

1.4样品

实施例1-3和对比例1-4得到的抗疲劳压片片剂

2实验过程

2.1分组与剂量

分别设置空白对照组、实验组1、实验组2、实验组3、对照组1、对照组2、对照组3和对照组4；每组动物10只。

除空白对照组外，每天给予各个小组2g/(kg·bw)抗疲劳压片片剂灌胃，实验组1、实验组2、实验组3、对照组1、对照组2、对照组3、对照组4中使用的片剂分别对应实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4得到的抗疲劳压片片剂，灌胃体积为0.1ml/(10g·bw)。空白对照组给予等体积的生理盐水，连续30天。

2.2体重测定

连续30天，每天记录各组小鼠给药前后的体重，并计算体重增长百分率。

2.3缓解体力疲劳实验方法

参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)试验方法，通过负重游泳试验测量保健品延长小鼠负重游泳时间的作用；测定肝糖原含量(蒽酮法)判定样品促进小鼠肝糖原储备的作用；测定血清尿素，判定样品减少疲劳小鼠血清尿素堆积的作用。

2.3.1负重游泳试验

末次给予受试样品30min后，将尾根部负荷5％体重的铅绳的小鼠置于游泳箱中游泳(水深：30cm，水温：25±0.5℃)。记录小鼠自由泳开始至力竭的时间，即小鼠负重游泳的时间。若受试样品组负重游泳时间明显长于对照组，且差异有显著性，可判定该实验结果阳性。

2.3.2血清尿素氮测定

小鼠负重游泳后，立即进行取血，离心(1500r/min，10min)取上清。采用尿素氮试剂盒对运动后小鼠血清中尿素氮含量进行测定。若受试样品组血清尿素低于对照组，且差异有显著性，可判定该实验结果为阳性。

2.3.3肝糖原、肌糖原测定

小鼠摘眼球取血后，脱颈椎处死，立即取后肢新鲜肌肉和肝脏。采用肝/肌糖原试剂盒对运动后小鼠肝糖原和肌糖原进行含量测定，若受试样品组糖原量高于对照组，且差异有显著性，可判定该实验结果为阳性。

3缓解体力疲劳实验结果

3.1样品对小鼠体重影响

表1对小鼠体重的影响(X±s，n＝10)

结果见表1，连续给药30天后，各给药组小鼠体重均增加，但组间无显著性差异，给药组与空白组相比，体重差异不显著(P＞0.05)，说明豌豆肽和紫苏籽肽压片片剂对小鼠体重无影响。

3.2样品对小鼠负重游泳时间、肝/肌糖原含量、尿素氮水平的影响

表2对小鼠负重游泳时间、肝/肌糖原含量、尿素氮水平的影响(X±s，n＝10)

注：与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。

由表2可知，实验组、对照组与空白对照组相比，均能延长小鼠负重游泳时间，且具有统计学意义(*P＜0.05)。结果表明，豌豆肽和紫苏籽肽压片片剂具有较好的缓解体力疲劳的作用。与对照组相比，实验组小鼠负重游泳时间最长，极显著高于空白对照组，表明本发明中的豌豆肽和紫苏籽肽在特定的比例下配合，具有协同增强抗疲劳效果的作用，当缺少其中部分组分时，会影响上述协同作用的发挥，导致抗疲劳效果下降。

由表2可知，实验组与空白对照组相比，均能显著降低小鼠血清中尿素氮含量。其中，对照组1、2、3、4与空白对照组相比无显著性差异(P＞0.05)，。但实验组1、2、3和空白对照组之间有显著性差异(P＜0.01)，故豌豆肽和紫苏籽肽在特定的比例下配合，具有协同增强抗疲劳效果的作用，这与耐力实验结果一致。

由表2可知，实验组1、2、3与空白对照组相比，均能显著增加小鼠肌糖原和肝糖原含量(P＜0.01)。对照组1、2与空白对照组有显著性差异(P＜0.01)，能显著增加小鼠肌糖原和肝糖原含量。空白对照组和对照组3、4之间无显著性差异(P＞0.05)。故豌豆肽和紫苏籽肽在特定的比例下配合，具有协同增强抗疲劳效果的作用，这与前述实验结果一致。

4实验结果

缓解体力疲劳实验中，豌豆肽和紫苏籽肽压片对小鼠体重无影响。与空白对照组相比，实验组和对照组均显著能延长小鼠负重游泳时间，说明本品具有较好的抗体力疲劳效果。本品实验组和对照组均能降低小鼠血清中尿素氮含量，其中，实验组对尿素氮含量降低极其明显，且能极显著增加小鼠组织中肌糖原和肝糖原含量。表明本发明中的豌豆肽和紫苏籽肽在特定的比例下配合，具有协同增强抗疲劳效果的作用，当缺少其中部分组分时，会影响上述协同作用的发挥，导致抗疲劳效果下降。

效果例2引起小鼠胃肠胀气现象的实验研究

1实验材料

1.1动物

清洁级雄性昆明小鼠，体重16-20g，长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。

小鼠饲养环境：温度(22±2)℃，相对湿度50％-70％，全部动物均给予灭菌鼠饲料和灭菌水自由取用，光照循环12h亮/暗。

1.2仪器

AL20型电子分析天平，FL600型酶标仪，SK-1型快速混匀器，UV-5500紫外分光光度计，洁净工作台、无菌手术器械、注射器(1mL)。

1.3试剂

肝素钠，尿素氮试剂盒，肝/肌糖原试剂盒，乙酰苯肼注射液，复方地芬诺酯片混悬液，环磷酰胺，多潘立酮片

1.4样品

实施例1-3和对比例1-4得到的抗疲劳压片片剂

2实验过程

2.1分组与剂量

分别设置空白对照组、模型对照组、阳性对照组、实验组1、实验组2、实验组3、对照组1、对照组2、对照组3和对照组4；每组动物10只。

适应性喂养一周后开始造模，除空白对照组外，其余各组小鼠第1，4，7，10天皮下注射乙酰苯肼60mg/kg，第10，11，12，13，14天腹腔注射环磷酰胺40mg/kg，同时开始灌胃复方地芬诺酯片混悬液(5d为1个给药周期，周期间停药2d，共给药4个周期)25mg/kg。造模成功后，第14天起，实验组1、实验组2、实验组3、对照组1、对照组2、对照组3和对照组4分别给予2g/(kg·bw)抗疲劳压片片剂灌胃，灌胃体积为0.1ml/(10g·bw)。其中，实验组1、实验组2、实验组3、对照组1、对照组2、对照组3、对照组4中使用的片剂分别对应实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4得到的抗疲劳压片片剂。

空白对照组和模型对照组用等体积生理盐水灌胃，阳性对照组用多潘立酮片磨粉后与等体积生理盐水配制成0.25mg/ml混悬液，进行灌胃连续28d，每天一次。

2.2对肠胀气的影响实验方法

参照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)试验方法，通过小肠运动实验测量保健品提高小肠墨汁推进率的作用。

2.2.1小肠运动实验

在第28天灌胃0.5h后，各小鼠分别给予2ml的墨汁(含5％的活性炭、10％阿拉伯树脂)，30min后立即脱颈椎处死小鼠，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门，下端至回盲部的肠管，测量肠管长度为小肠总长度，从幽门至墨汁前沿为墨汁推进长度，观察结果。在模型成立的前提下，实验组与模型对照组比较，墨汁推进率增加，经统计处理差异有显著性，可判定该实验结果阳性。

3.小肠胀气实验结果

表3对小鼠小肠运动的影响(X±s)

注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。

从表3中可以看出，模型对照组相对空白对照组减少了墨汁推进率，说明构建模型成功。相比于对照组1-4，实验组1-3的墨汁推进率均显著高于模型对照组，说明本发明制备得到的豌豆肽和紫苏籽肽压片片剂通过特定配比添加的菊粉可以显著改善胃肠动力，改善胃胀气等症状。

最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本发明技术方案的实质和范围。