脂质-聚合物组合物及使用方法

背景技术

递送在水性介质中具有低溶解度的生物活性剂一直是药物递送的挑战。一种靶向递送不溶性生物活性剂的方法是使用脂质体和/或胶束纳米粒子作为载体系统。然而，稳定性、降解和生物利用度方面的挑战阻碍了此类递送系统的广泛实施。因此，需要纳米颗粒递送系统的新制剂来有效递送生物活性剂。

发明内容

在一个方面，本发明提供了一种组合物，所述组合物包含多个包封生物活性剂的脂质-聚合物复合颗粒。所述脂质-聚合物复合颗粒可包含嵌段共聚物、脂质(例如，中性脂质、阳离子脂质或阴离子脂质)和甾醇。多个脂质-聚合物复合颗粒可具有约10nm至约1000nm(例如，约10nm至约500nm、约10nm至约100nm、约500nm至约1000nm)的平均粒度。

在一些实施方案中，所述生物活性剂是治疗剂、营养剂或娱乐剂。

在一些实施方案中，所述生物活性剂是大麻素或大麻素衍生物、萜烯、类黄酮、抗生素、防腐剂、抗真菌剂、抗菌剂、止痛剂、抗炎剂、抗原生动物剂、甾体、抗病毒剂、亲脂性药物、抗VEGF剂、抗青光眼剂、精油、免疫原(例如疫苗组分)、烟碱或烟碱类似物、环孢菌素A、他克莫司、异维甲酸、丙泊酚、灰黄霉素或其任何组合。在一些实施方案中，所述精油包括茶树油、没药油、桉树油、丁香油、薰衣草油、薄荷油、罗马洋甘菊油、德国洋甘菊油、乳香油、永久花油、丝柏油、当归油、岩蔷薇油、酸橙叶油、橙叶油、香柠檬油、甜橙油、玫瑰草油、柠檬铁皮油、山鸡椒油、罗勒油、香马郁兰油(sweet marjoram oil)、香叶油、广藿香油、缬草油、檀香油、苦橙油、柚子油、芫荽油、香茅油、黑薄荷油、沟胶油(gully gum oil)、杜松枝油、留兰香油、苏格兰松油、迷迭香油、香紫苏油(clary oil)、姜油、柠檬油、柑橘油、孜然油、刺柏油、柠檬香脂、桃金娘油、罗文莎叶油(Ravensara oil)、甜百里香油、永久花油、麦卢卡油(manuka oil)、矮松油、牛至油、香根草油、蜂花油、白冷杉油、肉桂油、香茅油、梨莓油(limeoil)、冬青油、茴香油、依兰油或其组合。在一些实施方案中，所述精油的浓度按重量计为组合物的0.01％至95％(例如，5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％，或95％)。在一些实施方案中，所述组合物包含多种精油。在一些实施方案中，所述多种精油包括2至10种精油。在一些实施方案中，所述多种精油的浓度按重量计为组合物的0.01％至95％(例如，5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％，或95％)。在一些实施方案中，所述组合物被配制成滴眼制剂。

在一些实施方案中，所述嵌段共聚物是泊洛沙姆(例如泊洛沙姆407)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆和所述生物活性剂的重量比为约2至约15。

在一些实施方案中，所述脂质包含长度为4至22的碳链和具有中性或阳离子或阴离子头基的头基。在一些实施方案中，所述脂质是磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺或磷脂酰肌醇。

在一些实施方案中，所述脂质的浓度为约0.1mol％至约10mol％。

在一些实施方案中，所述甾醇是植物甾醇、合成甾醇、胆固醇或胆固醇类似物。

在一些实施方案中，所述甾醇的浓度为总脂质组合物的约5mol％至约50mol％。

在一些实施方案中，所述甾醇与所述脂质的重量比为约0.01至约0.50。

在另一个方面，本发明的特征在于包含如本文所述的组合物的免疫原性组合物。

在另一个方面，本发明的特征在于通过向受试者施用任何上述实施方案所述的组合物来向受试者提供生物活性剂的方法。

在一些实施方案中，所述生物活性剂包括大麻素并且剂量为约0.01mg/kg至约30mg/kg。

在一些实施方案中，施用方式是局部、经口腔、经注射、经舌下、经颊、经直肠、经阴道、经眼部途径、经耳部途径、经鼻部途径、经吸入、经雾化或经透皮。

在另一个方面，本发明的特征在于制备任何上述实施方案所述的组合物的方法。在一些实施方案中，制备任何上述实施方案所述的组合物包括多步骤过程。在一些实施方案中，所述多步骤过程包括第一步，其包括将生物活性剂与任何上述实施方案所述的聚合物匀化以产生均质溶液，以及第二步，其包括注射(例如，浸入式注射)任何上述实施方案中所述的脂质和甾醇到所述第一步的均质溶液中。

在另一个方面，本发明提供一种治疗干眼病、炎症、眼痛、急性结膜炎(pink eye)、黑眼圈、红眼、细菌性眼部感染、真菌性眼部感染、病毒性眼部感染、营养缺乏、黄斑变性、青光眼或眼压升高的方法，所述方法包括向受试者的眼睛施用具有多个包封生物活性剂的脂质-聚合物复合颗粒的组合物，其中所述脂质-聚合物复合颗粒包含嵌段共聚物、选自由中性脂质、阳离子脂质和阴离子脂质组成的组的脂质和甾醇，其中所述多个脂质-聚合物复合颗粒具有10和1000纳米之间的平均粒度。

在另一个方面，本发明的特征在于一种治疗选自炎症、疼痛、细菌性感染、真菌性感染、原生动物感染、焦虑、激动、压力、疲劳、失眠、精神疲劳、记忆丧失、器官排斥、湿疹、痤疮和皮肤感染的疾病和病状的方法，所述方法包括向受试者施用具有多个包封生物活性剂的脂质-聚合物复合颗粒的组合物，其中所述脂质-聚合物复合颗粒包含嵌段共聚物、选自由中性脂质、阳离子脂质和阴离子脂质组成的组的脂质和甾醇，其中所述多个脂质-聚合物复合颗粒具有10和1000纳米之间的平均粒度。

在上述任一方面的一些实施方案中，生物活性剂是大麻素或大麻素衍生物、萜烯、类黄酮、抗生素、防腐剂、抗真菌剂、抗菌剂、止痛剂、抗炎剂、抗原生动物剂、甾体、抗病毒剂、亲脂性药物、抗VEGF剂、抗青光眼剂、精油、免疫原(例如疫苗组分)、烟碱或烟碱类似物、环孢菌素A、他克莫司、异维甲酸、丙泊酚、灰黄霉素或其任何组合。

在一些实施方案中，所述嵌段共聚物是泊洛沙姆。在一些实施方案中，所述泊洛沙姆和所述生物活性剂的重量比在2和15之间。

在一些实施方案中，所述脂质包含长度为4至22的碳链和中性、阳离子或阴离子头基。在一些实施方案中，所述脂质是磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺或磷脂酰肌醇。在一些实施方案中，所述脂质的浓度为约0.1mol％至约10mol％。在一些实施方案中，所述甾醇是植物甾醇，或合成甾醇，或胆固醇或胆固醇类似物。在一些实施方案中，所述甾醇的浓度为总脂质组合物的约5mol％至约50mol％。在一些实施方案中，所述甾醇与所述脂质的重量比为约0.01至约0.50。

在另一个方面，本发明的特征在于一种娱乐使用的方法，所述方法包括向受试者施用包含多个包封生物活性剂的脂质-聚合物复合颗粒的组合物，其中所述脂质-聚合物复合颗粒包含嵌段共聚物、选自由中性脂质、阳离子脂质和阴离子脂质组成的组的脂质和甾醇，其中所述多个脂质-聚合物复合颗粒具有10和1000纳米之间的平均粒度。

在上述方面的一些实施方案中，生物活性剂是娱乐剂。在一些实施方案中，生物活性剂是大麻素或大麻素衍生物、萜烯、类黄酮、抗生素、防腐剂、抗真菌剂、抗菌剂、止痛剂、抗炎剂、抗原生动物剂、甾体、抗病毒剂、亲脂性药物、抗VEGF剂、抗青光眼剂、精油、免疫原(例如疫苗组分)、烟碱或烟碱类似物、环孢菌素A、他克莫司、异维甲酸、丙泊酚、灰黄霉素或其任何组合。在一些实施方案中，所述嵌段共聚物是泊洛沙姆。

在任何上述方面的一些实施方案中，所述精油包括茶树油、没药油、桉树油、丁香油、薰衣草油、薄荷油、罗马洋甘菊油、德国洋甘菊油、乳香油、永久花油、丝柏油、当归油、岩蔷薇油、酸橙叶油、橙叶油、香柠檬油、甜橙油、玫瑰草油、柠檬铁皮油、山鸡椒油、罗勒油、香马郁兰油、香叶油、广藿香油、缬草油、檀香油、苦橙油、柚子油、芫荽油、香茅油、黑薄荷油、沟胶油、杜松枝油、留兰香油、苏格兰松油、迷迭香油、香紫苏油、姜油、柠檬油、柑橘油、孜然油、刺柏油、柠檬香脂、桃金娘油、罗文莎叶油、甜百里香油、永久花油、麦卢卡油、矮松油、牛至油、香根草油、蜂花油、白冷杉油、肉桂油、香茅油、梨莓油、冬青油、茴香油、依兰油或其组合。在一些实施方案中，所述精油的浓度按重量计为组合物的0.01％至95％(例如，5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％，或95％)。在一些实施方案中，所述组合物包含多种精油。在一些实施方案中，所述多种精油包括2至10种精油。在一些实施方案中，所述多种精油按重量计为0.01％至95％(例如，5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％，或95％)。在一些实施方案中，所述方法包括被配制成滴眼制剂的组合物。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆和所述生物活性剂的重量比在2和15之间。在一些实施方案中，所述脂质包含长度为4至22的碳链和中性、阳离子或阴离子头基。在一些实施方案中，所述脂质是磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺或磷脂酰肌醇。在一些实施方案中，所述脂质的浓度为约0.1mol％至约10mol％。在一些实施方案中，所述甾醇是植物甾醇，或合成甾醇，或胆固醇或胆固醇类似物。在一些实施方案中，所述甾醇的浓度为总脂质组合物的约5mol％至约50mol％。在一些实施方案中，所述甾醇与所述脂质的重量比为约0.01至约0.50。

定义

为促进对本发明的理解，以下定义多个术语。本文定义的术语具有与本发明相关领域的普通技术人员通常理解的含义。术语诸如“a”、“an”和“the”并非旨在仅指单个实体，而是包括可以使用特定实例来说明的一般类别。本文的术语用于描述本发明的特定实施方案，但它们的使用不限制本发明，除非在权利要求中概述。

如本文所用，在数值范围内提供的任何值都包括上限和下限，以及含在上限和下限内的任何值。

如本文所用，术语“约”是指所列举的值的±10％。

术语“施用”是指将本发明的制剂引入有需要的患者体内以治疗疾病或病状。

如本文所用，术语“生物活性剂”是指具有所需生物或生理作用的任何合成或天然存在的化合物(游离形式、盐形式或溶剂化或水合形式)，诸如蛋白质、药物、抗原、营养物、化妆品、香料、调味剂、诊断剂、药、维生素或食疗剂，并且将被配制为足以提供功能水平的体内浓度(包括局部组合物的局部浓度)的水平。在一些情况下，脂质基质i)的一种或多种组分(例如，组分(a)、(b)、(c)和/或(d))也可以是活性剂，尽管优选的是任选的生物活性剂(iii)不应该是这些组分之一(例如，不应该是脂质基质的组分)。最优选的活性剂是药剂(例如API)，包括药物、疫苗和诊断剂。

如本文所用，术语“嵌段共聚物”是指沿其主链具有特征为类似的亲水性、疏水性或化学性质的区域或嵌段的线性聚合物。

术语“二嵌段共聚物”是指包含两个嵌段的嵌段共聚物。

术语“三嵌段共聚物”是指包含三个嵌段的嵌段共聚物。

术语“多嵌段共聚物”是指包含多个嵌段的嵌段共聚物。

如本文所用，术语“包封(encapsulate)”、“包封的(encapsulated)”或“包封有(encapsulating)”是指将部分(例如，如本文定义的生物活性剂)封入封闭的聚合物组装结构(例如胶束)内。包封的生物活性剂(例如包封的大麻素)被聚合物组装结构封闭，例如，这种包封的部分位于聚合物组装结构的疏水内部(例如胶束的内腔)。

如本文所用，术语“阴离子头基”是指在生理pH下携带净负电荷的脂质头基。

如本文所用，术语“阳离子头基”是指在生理pH下携带净正电荷的脂质头基。

如本文所用，术语“中性头基”是指在生理pH下以不带电形式存在的脂质头基。

如本文所用，“脂质纳米颗粒”或“LNP”是包含脂质层的囊泡，所述脂质层包封了基本为固体的脂质核心；所述脂质核心可以含有药学活性分子。LNP通常含有阳离子脂质、非阳离子脂质和防止颗粒聚集的脂质(例如，PEG-脂质缀合物)。

如本文所用，术语“脂质-聚合物复合颗粒”是指通过非共价键诸如氢键、范德华力、静电相互作用、疏水效应和Pi-Pi相互作用保持在一起的分子复合物。脂质-聚合物复合颗粒可包括形成例如球状结构的大分子复合物。脂质-聚合物复合颗粒包括例如脂质纳米颗粒和胶束。

如本文所用，术语“胶束(micelle/micellar)”或其变体是指由亲水壳(或冠)和疏水壳(或冠)和/或离子内部组成的聚合物组装体。此外，术语胶束可指由具有净正电荷的多嵌段共聚物和合适的带负电荷的多核苷酸组成的任何聚离子复合组装体。

如本文所用，术语“纳米颗粒”是指具有在纳米范围内(例如，1nm-1000nm)的直径的基于聚合物的颗粒。

术语“营养剂”是指作为食物或其一部分，和/或除了食品中存在的基本营养价值外，还给予额外的健康益处的任何物质。例如，营养剂可含有来自食物来源的组分。示例性营养剂包括但不限于抗氧化剂、膳食补充剂、强化乳制品、植物提取物、维生素、矿物质和草药。

如本文所用，术语“多个”意指多于一个，诸如至少2、20、50、100、1000、10000、100000、1000000、10000000或甚至更多。

如本文所用，术语“娱乐剂”或“娱乐物质”或其变体是指可用于为受试者提供放松、愉快和娱乐活动的化合物。

如本文所用，术语“受试者”可为人、非人灵长类动物或其他哺乳动物，诸如但不限于狗、猫、马、牛、猪、火鸡、山羊、鱼、猴、鸡、大鼠、小鼠和绵羊。

如本文所用，术语“甾醇”包括所有甾醇但不限于例如：

谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、芸苔甾醇(包括二氢芸苔甾醇)、链甾醇、海绵甾醇(chalinosterol)、多孔甾醇、穿孔海绵甾醇、麦角甾醇、粪甾醇、刺松藻甾醇、异岩藻甾醇、岩藻甾醇、赪桐甾醇、神经甾醇(nervisterol)、7-烯胆(甾)烷醇、星鱼甾醇(stellasterol)、菠菜甾醇、粉苞苣甾醇、植物甾醇(peposterol)、燕麦甾醇、异燕麦甾醇、粪生甾醇、花粉烷甾醇(pollinastasterol)、胆固醇及其所有天然或合成形式和衍生物，包括异构体。应当理解，对甾醇的修饰(即包括侧链)也落入本发明的范围内。

术语“治疗剂”是指具有产生期望的、通常有益的效果的治疗特性的任何物质。例如，治疗剂可以治疗、改善、和/或预防疾病。此类剂可以是合成的或天然存在的非肽、蛋白质或肽、寡核苷酸或核苷酸、多糖或糖。

“囊泡”在本文中被定义为一种脂质-聚合物复合颗粒，其中两亲分子(例如脂质)共同限定体积，例如基本上为球形的体积。两亲分子(例如，脂质)通常组成囊泡的至少一个壳。在此壳中，两亲分子排列成双层，两亲分子的亲水部分相对于双层平面朝向外，并且两亲分子的疏水部分主要位于双层内。如果周围介质是疏水的，则存在相反的排列。

附图说明

图1示出了初级脂质体制剂Fa1、Fa2和Fa3的光学显微图像。标尺为50μm。

图2示出了为评估温度对颗粒制剂的影响而制备的初级脂质体制剂Fb1、Fb2和Fb3的光学显微图像。标尺为10μm。

图3是示出制剂Fc1-Fc7的有效直径和多分散性的表格。制剂Fc1、Fc2和Fc9负载有0.02％w/w CBD。制剂Fc3-Fc8负载有0.25％w/w CBD。报告平均值和标准偏差值。

图4是示出制剂Fc1-Fc9中颗粒的测量ζ电位的平均值和标准偏差值的表格。

图5是示出制剂Fd1-Fd6的光学透明度的照片图像。透明度随着泊洛沙姆

图6是示出泊洛沙姆浓度对制剂Fd6、Fd5、Fd4、Fd2和Fd1中可观察到的沉淀量的影响的照片图像。所有悬浮液的CBD浓度恒定为0.5％w/w而制剂Fd1、Fd2、Fd4、Fd5和Fd6的

图7是示出制剂Fd1-Fd6的有效直径和多分散性的图。所有制剂都产生了小于50μm的类似尺寸的胶束。

图8是示出制剂Fd1-Fd6的pH与市售滴眼液

图9是示出制剂Fd1-Fd6的粘度与水和两种市售滴眼液

图10是示出制剂Fd1-Fd6的尺寸稳定性的图。在制备当天(左侧条形图)和制备后储存在室温20℃(中间条形图)或4℃(右侧条形图)下30天计算所有制剂的有效直径和多分散性。

图11是示出制剂Fe1-Fe9的光学透明度的照片图像。制剂Fe1、Fe4和Fe7通过泊洛沙姆匀化，然后经由乙醇注入添加0.5％ CBD w/w和磷脂以及胆固醇来制备。制剂Fe2、Fe5和Fe8通过泊洛沙姆匀化，经由乙醇注入添加0.5％ CBD w/w，然后添加磷脂以及胆固醇来制备。制剂Fe3、Fe6和Fe9通过泊洛沙姆匀化，以粉末形式的0.5％ CBD w/w，然后添加磷脂以及胆固醇来制备。

图12是示出制剂Fe1-Fe9中脂质-聚合物复合颗粒的粒度、多分散性和跨度值的图。

图13是示出制剂Fe1-Fe9的pH的图。所有制剂的pH值接近中性。

图14是示出制剂Fe1-Fe9的张力与盐水、对照泊洛沙姆和CBD混悬液以及三种市售滴眼液

图15是示出制剂Fe1-Fe9的尺寸稳定性的图表。在制备当天(左侧条形图)和制备后储存在室温20℃(中间条形图)或4℃(右侧条形图)下19天计算所有制剂的有效直径和多分散性。

图16是示出优化的制剂Fd5、Fe5、Fe8和Fe2的粒度、多分散性和跨度值的图。

图17是示出搅拌到含有浓度为1、3、5、7、9、11、13和15％w/v的

图18是示出CBD在水(0％)、1、3、5、7、9、11、13、15％

图19是含有CBD的三种不同制剂的一系列透射电子显微镜(TEM)图像。在5％

图20是示出含有较高浓度DSPC和胆固醇的制剂的粒度和多分散性的图。与

图21是示出有或没有

图22是示出溶解在脂质浓度增加的缺乏(左)和含有

图23是示出含有较高浓度脂质(DSPC和胆固醇)的制剂的粒度和多分散性的图。同样，在没有

图24是示出有或没有

图25是示出溶解在脂质(DSPC和胆固醇)浓度增加的缺乏(左)和含有(右)

具体实施方式

本发明的特征在于新的脂质-聚合物复合颗粒，其可用于生物活性剂的制剂以施用于受试者，例如人类受试者。脂质-聚合物复合颗粒包含多个(例如，至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、100、1,000、10,000、100,000、1,000,000、10,000,000个或更多个)包封生物活性剂的纳米颗粒。纳米颗粒包含嵌段共聚物、脂质例如磷脂和甾醇。本文所述的生物活性剂(例如，治疗剂、营养剂或娱乐剂)的制剂提供了更容易装载具有更高药物装载能力、制剂稳定性和更低表面张力的脂质-聚合物复合颗粒，其允许脂质涂层和截留。此类用于制备具有脂质涂层的脂质-聚合物复合颗粒(例如胶束)的改进过程允许疏水性生物活性剂的水性负载以及受控的药物释放。此外，本文所述的组合物和方法避免使用有机溶剂例如乙醇来溶解疏水性生物活性剂。下面更详细地描述制剂的组分。

脂质-聚合物复合颗粒

脂质-聚合物复合颗粒可以用于配制用于递送的生物活性剂(例如，治疗剂、营养剂或娱乐剂，例如，大麻素)。脂质-聚合物复合颗粒包括通过非共价键(注入氢键、范德华力、静电相互作用、疏水效应和Pi-Pi相互作用)保持在一起的定义的分子复合物(例如，脂质和聚合物)。脂质-聚合物复合颗粒可以包括形成球状、杆状或片状结构的大分子复合物。脂质-聚合物复合颗粒包括例如胶束和LNP。脂质-聚合物复合颗粒可以具有预先确定的尺寸。结构的尺寸可以根据包在结构内的组分(例如，生物活性剂的分子的尺寸或数量)而变化。

脂质-聚合物复合颗粒的尺寸可以从例如约10nm至约1,000nm变化。Z-均平均粒径的非限制性实例包括例如约10nm至约500nm、约10nm至约100nm、约500nm至约1000nm。例如，脂质-聚合物复合颗粒可具有例如约10nm、约15nm、约20nm、约25nm、约30nm、约35nm、约40nm、约45nm、约50nm、约55nm、约60nm、约65nm、约70nm、约75nm、约80nm、约85nm、约90nm、约95nm、约100nm、约105nm、约110nm、约115nm、约120nm、约125nm、约130nm、约135nm、约140nm、约145nm、约150nm、约155nm、约160nm、约165nm、约170nm、约175nm、约180nm、约185nm、约190nm、约195nm、约200nm、约205nm、约210nm、约215nm、约220nm、约225nm、约230nm、约235nm、约240nm、约245nm、约250nm、约255nm、约260nm、约265nm、约270nm、约275nm、约280nm、约285nm、约290nm、约295nm、约300nm、约305nm、约310nm、约315nm、约320nm、约325nm、约330nm、约335nm、约340nm、约345nm、约350nm、约355nm、约360nm、约365nm、约370nm、约375nm、约380nm、约385nm、约390nm、约395nm、约400nm、约405nm、约410nm、约415nm、约420nm、约425nm、约430nm、约435nm、约440nm、约445nm、约450nm、约455nm、约460nm、约465nm、约470nm、约475nm、约480nm、约485nm、约490nm、约495nm、约500nm、约505nm、约510nm、约515nm、约520nm、约525nm、约530nm、约535nm、约540nm、约545nm、约550nm、约555nm、约560nm、约565nm、约570nm、约575nm、约580nm、约585nm、约590nm、约595nm、约600nm、约605nm、约610nm、约615nm、约620nm、约625nm、约630nm、约635nm、约640nm、约645nm、约650nm、约655nm、约660nm、约665nm、约670nm、约675nm、约680nm、约685nm、约690nm、约695nm、约700nm、约705nm、约710nm、约715nm、约720nm、约725nm、约730nm、约735nm、约740nm、约745nm、约750nm、约755nm、约760nm、约765nm、约770nm、约775nm、约780nm、约785nm、约790nm、约795nm、约800nm、约805nm、约810nm、约815nm、约820nm、约825nm、约830nm、约835nm、约840nm、约845nm、约850nm、约855nm、约860nm、约865nm、约870nm、约875nm、约880nm、约885nm、约890nm、约895nm、约900nm、约905nm、约910nm、约915nm、约920nm、约925nm、约930nm、约935nm、约940nm、约945nm、约950nm、约955nm、约960nm、约965nm、约970nm、约975nm、约980nm、约985nm、约990nm、约995nm，或约1000nm的Z均平均粒径。

平均粒径可以通过ζ电位、动态光散射(DLS)、电泳光散射(ELS)、静态光散射(SLS)、分子量、电泳迁移率、尺寸排阻色谱(SEC)、场流分级或本领域已知的其他方法来测量。在特定实施方案中，脂质-聚合物复合颗粒含有约10nm至约100nm的Z-均平均粒径。本领域技术人员将理解，脂质-聚合物复合颗粒(例如，LNP或胶束)群体可以在群内具有一系列Z-均平均粒径。因此，所述群体可能是多分散的。所述群体可以具有0.3或更小(例如，0.05至0.3)的多分散指数。多分散指数可以使用DLS确定(参见，例如，ISO 22412:2017)。

脂质纳米颗粒

本发明的生物活性剂可以完全包封在脂质制剂中，例如LNP或另一种脂质-聚合物复合颗粒。LNP对全身应用极为有用，因为它们在静脉(iv)注射后表现出延长的循环寿命，并在远隔部位(例如，与施用部位物理分离的部位)积聚。LNP包括“pSPLP”，其包括如PCT公开号WO 2000/003683中列出的包封的缩合剂-核酸复合物。LNP可具有约50nm至约150nm、更典型地约60nm至约130nm、更典型地约70nm至约110nm、最典型地约70nm至约90nm的平均直径，并且基本上是无毒的。此外，当存在于本发明的LNP中时，生物活性剂在水溶液中对核酸酶的降解具有抗性。核酸-脂质颗粒和它们的制备方法公开于例如美国专利号5,976,567；5,981,501；6,534,484；6,586,410；6,815,432；美国公开号2010/0324120和PCT公开号WO96/40964中。

在一个实施方案中，脂质与药物的比(质量/质量比)(例如，脂质与生物活性剂的比)将在约1:1至约50:1、约1:1至约25:1、约3:1至约15:1、约4:1至约10:1、约5:1至约9:1，或约6:1至约9:1的范围内。上述范围的中间范围也被认为是本发明的一部分。

阳离子脂质的非限制性实例包括N,N-二油基-N,N-二甲基氯化铵(DODAC)、N,N-二硬脂基-N,N-二甲基溴化铵(DDAB)、N--(I-(2,3-二油酰氧基)丙基)-N,N,N-三甲基氯化铵(DOTAP)、N--(I-(2,3-二油酰氧基)丙基)-N,N,N-三甲基氯化铵(DOTMA)、N,N-二甲基-2,3-二油酰氧基)丙胺(DODMA)、1,2-二亚油酰氧基-N,N-二甲基氨基丙烷(DLinDMA)、1,2-二亚油烯氧基-N,N-二甲基氨基丙烷(DLenDMA)、1,2-二亚油酰氨甲酰氧基-3-二甲基氨基丙烷(DLin-C-DAP)、1,2-二亚油酰氧基-3-(二甲基氨基)乙酰氧基丙烷(DLin-DAC)、1,2-二亚油酰氧基-3-吗啉丙烷(DLin-MA)、1,2-二亚油酰基-3-二甲基氨基丙烷(DLinDAP)、1,2-二亚油酰硫基-3-二甲基氨基丙烷(DLin-S-DMA)、1-亚油酰基-2-亚油酰氧基-3-二甲基氨基丙烷(DLin-2-DMAP)、1,2-二亚油酰氧基-3-三甲基氨基丙烷氯盐(DLin-TMA.Cl)、1,2-二亚油酰基-3-三甲基氨基丙烷氯盐(DLin-TAP.Cl)、1,2-二亚油酰氧基-3-(N-甲基哌嗪)丙烷(DLin-MPZ)，或3-(N,N-二亚油酰氨基)-1,2-丙二醇(DLinAP)、3-(N,N-二油酰氨基)-1,2-丙二醇(DOAP)、1,2-二亚油酰氧基-3-(2-N,N-二甲基氨基)乙氧基丙烷(DLin-EG-DMA)、1,2-二亚油酰氧基-N,N-二甲基氨基丙烷(DLinDMA)、2,2-二亚油基-4-二甲基氨基甲基-[1,3]-二氧戊烷(DLin-K-DMA)或其类似物、(3aR,5s,6aS)-N,N-二甲基-2,2-二((9Z,12Z)-十八-9,12-二炔四氢-3aH-环戊二烯并[d][1,3]二恶英-5-胺(ALN100)、(6Z,9Z,28Z,31Z)-三十七-6,9,28,31-四烯-19-yl4-(二甲基氨基)丁酸(MC3)、1,1'-(2-(4-(2-((2-(双(2-羟基十二烷基)氨基)乙基)(2-羟基十二烷基)氨基)乙基)哌嗪-1-基乙基氮杂二环十二烷-2-醇(Tech G1)，或其混合物。阳离子脂质可以占，例如，颗粒中存在的总脂质的约20mol％至约50mol％或约40mol％。

可离子化的/非阳离子脂质可以是阴离子脂质或中性脂质，包括但不限于二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)、二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二油酰磷脂酰甘油(DOPG)、二棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、棕榈酰油酰磷脂酰胆碱(POPC)、棕榈酰油酰磷脂酰乙醇胺(POPE)、二油酰-磷脂酰乙醇胺4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(DOPE-mal)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、16-O-单甲基PE、16-O-二甲基PE、18-1-反式PE、1-硬脂酰-2-油酰-磷脂酰乙醇胺(SOPE)、胆固醇及其混合物。如果包括胆固醇，非阳离子脂质可以是，例如，颗粒中存在的总脂质的约5mol％至约90mol％、约10mol％，或约60mol％。

抑制颗粒聚集的缀合脂质可以是例如聚乙二醇(PEG)-脂质，包括但不限于PEG-二酰基甘油(DAG)、PEG-二烷氧基丙基(DAA)、PEG-磷脂、PEG-神经酰胺(Cer)或其混合物。PEG-DAA缀合物可以是例如PEG-二月桂酰氧基丙基(C

脂质可以具有长度为4至22的碳链和中性、阳离子或阴离子头基。

在一些实施方案中，颗粒还包含例如为颗粒中存在的总脂质的约10mol％至约60mol％或约50mol％的甾醇(例如胆固醇)。

胶束

胶束是特殊类型的分子组装体，其中两亲分子排列成球形结构，使得分子的所有疏水部分都向内，而亲水部分与周围的水相接触。胶束可以由脂质制成。胶束相是由双层中单尾脂质的堆积行为引起的。难以填充双层内部的所有体积，同时通过脂质头基的水合来调节每个头基的面积，这导致了胶束的形成。此类胶束被称为正相胶束(水包油胶束)。反胶束在中心具有头基，而尾部向外延伸(油包水胶束)。

胶束大致呈球形。其他相，包括椭球体、圆柱体和双层等形状也是可能的。胶束的形状和大小是其表面活性剂分子的分子几何形状和溶液条件(诸如表面活性剂浓度、温度、pH和离子强度)的函数。形成胶束的过程称为胶束化，并根据它们的多态性形成许多脂质的相行为的一部分。

磷脂

本文所述的脂质-聚合物复合颗粒可以包含一种或多种磷脂。磷脂通常由两个疏水性脂肪酸尾部和一个具有磷酸基团的亲水性头部组成。这两种组分通常通过甘油分子连接在一起。磷酸基团可以用有机分子诸如胆碱、乙醇胺或丝氨酸修饰。可以用于本文所述的组合物中的合适的磷脂包括，例如，磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇。脂质-聚合物复合颗粒中的磷脂浓度可以为约2％至约20％v/v(例如，约4％至约18％、约5％至约15％，例如，约10％)。

嵌段共聚物

本文所述的脂质-聚合物复合颗粒可以包含嵌段共聚物。嵌段共聚物是指沿其主链具有特征为类似的亲水性、疏水性或化学性质的区域或嵌段的线性聚合物。嵌段共聚物可以包含例如两个、三个、四个或更多个嵌段(例如二嵌段或三嵌段共聚物)。多嵌段共聚物包含多个嵌段。

二嵌段共聚物

本文所述的组合物可以包含二嵌段共聚物，其包含两个不同的重复聚合物单元嵌段。如本文所述的二嵌段共聚物的一个实例包括两亲共聚物，诸如具有包含重复单元的亲水链的区域连接到包含具有或不具有接头的重复单元的疏水链的区域的两亲共聚物。此类二嵌段共聚物可以包含与聚氧丙烯(PPO)亚单元的疏水链连接的聚氧乙烯(PEO)亚单元的亲水链。PEO和PPO亚单元的二嵌段共聚物可以由下式表示：X

聚合物嵌段的长度可以定制。因此，存在许多不同的二嵌段共聚物。适用于与本公开的组合物和方法结合使用的二嵌段共聚物包括具有约5kDa至约30kDa(例如，6kDa、7kDa、8kDa、9kDa、10kDa、11kDa、12kDa、13kDa、14kDa、15kDa、16kDa、17kDa、18kDa、19kDa、20kDa、21kDa、22kDa、23kDa、24kDa、25kDa、26kDa、27kDa、28kDa、29kDa或30kDa)的平均分子量的那些。由于二嵌段共聚物的合成与一批与另一批之间的自然变化程度有关，因此上述数值(以及本文中用于表征给定二嵌段共聚物的那些)在合成时可能无法精确实现，并且平均值在某种程度上会有所不同。因此，如果没有另外明确说明，本文所用的术语“二嵌段共聚物”可以与术语“多种二嵌段共聚物”(代表若干二嵌段共聚物的实体，也称为二嵌段共聚物的混合物)互换使用。如本文所用，与一种或多种二嵌段共聚物的单体单元数或分子量相关的术语“平均”是技术上无法产生全部具有相同组成并因此具有相同分子量的二嵌段共聚物的结果。根据领域现有技术方法产生的二嵌段共聚物将作为二嵌段共聚物的混合物存在，每种二嵌段共聚物在其分子量方面显示出可变性，但混合物作为一个整体平均具有本文指定的分子量。

泊洛沙姆

三嵌段共聚物的一个实例是泊洛沙姆。泊洛沙姆是指由聚氧丙烯的中心疏水性链侧接两个聚氧乙烯的亲水链组成的非离子三嵌段共聚物。泊洛沙姆也以商品名

可以与本公开的组合物和方法结合使用的泊洛沙姆包括聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量大于2,050g/mol(例如，聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约2,055g/mol、2,060g/mol、2,075g/mol、2,080g/mol、2,085g/mol、2,090g/mol、2,095g/mol、2,100g/mol、2,200g/mol、2,300g/mol、2,400g/mol、2,500g/mol、2,600g/mol、2,700g/mol、2,800g/mol、2,900g/mol、3,000g/mol、3,100g/mol、3,200g/mol、3,300g/mol、3,400g/mol、3,500g/mol、3,600g/mol、3,700g/mol、3,800g/mol、3,900g/mol、4,000g/mol、4,100g/mol、4,200g/mol、4,300g/mol、4,400g/mol、4,500g/mol、4,600g/mol、4,700g/mol、4,800g/mol、4,900g/mol，或5,000g/mol)的那些泊洛沙姆。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量大于2,250g/mol(例如，聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约2,300g/mol、2,400g/mol、2,500g/mol、2,600g/mol、2,700g/mol、2,800g/mol、2,900g/mol、3,000g/mol、3,100g/mol、3,200g/mol、3,300g/mol、3,400g/mol、3,500g/mol、3,600g/mol、3,700g/mol、3,800g/mol、3,900g/mol、4,000g/mol、4,100g/mol、4,200g/mol、4,300g/mol、4,400g/mol、4,500g/mol、4,600g/mol、4,700g/mol、4,800g/mol、4,900g/mol，或5,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量大于2,750g/mol(例如，聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约2,800g/mol、2,900g/mol、3,000g/mol、3,100g/mol、3,200g/mol、3,300g/mol、3,400g/mol、3,500g/mol、3,600g/mol、3,700g/mol、3,800g/mol、3,900g/mol、4,000g/mol、4,100g/mol、4,200g/mol、4,300g/mol、4,400g/mol、4,500g/mol、4,600g/mol、4,700g/mol、4,800g/mol、4,900g/mol，或5,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量大于3,250g/mol(例如，聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约3,300g/mol、3,400g/mol、3,500g/mol、3,600g/mol、3,700g/mol、3,800g/mol、3,900g/mol、4,000g/mol、4,100g/mol、4,200g/mol、4,300g/mol、4,400g/mol、4,500g/mol、4,600g/mol、4,700g/mol、4,800g/mol、4,900g/mol，或5,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量大于3,625g/mol(例如，聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约3,700g/mol、3,800g/mol、3,900g/mol、4,000g/mol、4,100g/mol、4,200g/mol、4,300g/mol、4,400g/mol、4,500g/mol、4,600g/mol、4,700g/mol、4,800g/mol、4,900g/mol，或5,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约2,050g/mol至约4,000g/mol(例如，约2,050g/mol、2,055g/mol、2,060g/mol、2,065g/mol、2,070g/mol、2,075g/mol、2,080g/mol、2,085g/mol、2,090g/mol、2,095g/mol、2,100g/mol、2,105g/mol、2,110g/mol、2,115g/mol、2,120g/mol、2,125g/mol、2,130g/mol、2,135g/mol、2,140g/mol、2,145g/mol、2,150g/mol、2,155g/mol、2,160g/mol、2,165g/mol、2,170g/mol、2,175g/mol、2,180g/mol、2,185g/mol、2,190g/mol、2,195g/mol、2,200g/mol、2,205g/mol、2,210g/mol、2,215g/mol、2,220g/mol、2,225g/mol、2,230g/mol、2,235g/mol、2,240g/mol、2,245g/mol、2,250g/mol、2,255g/mol、2,260g/mol、2,265g/mol、2,270g/mol、2,275g/mol、2,280g/mol、2,285g/mol、2,290g/mol、2,295g/mol、2,300g/mol、2,305g/mol、2,310g/mol、2,315g/mol、2,320 g/mol、2,325g/mol、2,330g/mol、2,335g/mol、2,340g/mol、2,345g/mol、2,350g/mol、2,355g/mol、2,360g/mol、2,365g/mol、2,370g/mol、2,375g/mol、2,380g/mol、2,385g/mol、2,390g/mol、2,395g/mol、2,400g/mol、2,405g/mol、2,410g/mol、2,415g/mol、2,420g/mol、2,425g/mol、2,430g/mol、2,435g/mol、2,440g/mol、2,445g/mol、2,450g/mol、2,455g/mol、2,460g/mol、2,465g/mol、2,470g/mol、2,475g/mol、2,480g/mol、2,485g/mol、2,490g/mol、2,495g/mol、2,500g/mol、2,505g/mol、2,510g/mol、2,515g/mol、2,520g/mol、2,525g/mol、2,530g/mol、2,535g/mol、2,540g/mol、2,545g/mol、2,550g/mol、2,555g/mol、2,560g/mol、2,565g/mol、2,570g/mol、2,575g/mol、2,580g/mol、2,585g/mol、2,590g/mol、2,595g/mol、2,600g/mol、2,605g/mol、2,610g/mol、2,615g/mol、2,620g/mol、2,625g/mol、2,630g/mol、2,635g/mol、2,640g/mol、2,645g/mol、2,650g/mol、2,655g/mol、2,660g/mol、2,665g/mol、2,670g/mol、2,675g/mol、2,680g/mol、2,685g/mol、2,690g/mol、2,695g/mol、2,700g/mol、2,705g/mol、2,710g/mol、2,715g/mol、2,720g/mol、2,725g/mol、2,730g/mol、2,735g/mol、2,740g/mol、2,745g/mol、2,750g/mol、2,755g/mol、2,760g/mol、2,765g/mol、2,770g/mol、2,775g/mol、2,780g/mol、2,785g/mol、2,790g/mol、2,795g/mol、2,800g/mol、2,805g/mol、2,810g/mol、2,815g/mol、2,820g/mol、2,825g/mol、2,830g/mol、2,835g/mol、2,840g/mol、2,845g/mol、2,850g/mol、2,855g/mol、2,860g/mol、2,865g/mol、2,870g/mol、2,875g/mol、2,880g/mol、2,885g/mol、2,890g/mol、2,895g/mol、2,900g/mol、2,905g/mol、2,910g/mol、2,915g/mol、2,920g/mol、2,925g/mol、2,930g/mol、2,935g/mol、2,940g/mol、2,945g/mol、2,950g/mol、2,955g/mol、2,960g/mol、2,965g/mol、2,970g/mol、2,975g/mol、2,980g/mol、2,985g/mol、2,990g/mol、2,995g/mol、3,000g/mol、3,005g/mol、3,010g/mol、3,015g/mol、3,020g/mol、3,025g/mol、3,030g/mol、3,035g/mol、3,040g/mol、3,045g/mol、3,050g/mol、3,055g/mol、3,060g/mol、3,065g/mol、3,070g/mol、3,075g/mol、3,080g/mol、3,085g/mol、3,090g/mol、3,095g/mol、3,100g/mol、3,105g/mol、3,110g/mol、3,115g/mol、3,120g/mol、3,125g/mol、3,130g/mol、3,135g/mol、3,140g/mol、3,145g/mol、3,150g/mol、3,155g/mol、3,160g/mol、3,165g/mol、3,170g/mol、3,175g/mol、3,180g/mol、3,185g/mol、3,190g/mol、3,195g/mol、3,200g/mol、3,205g/mol、3,210g/mol、3,215g/mol、3,220g/mol、3,225g/mol、3,230g/mol、3,235g/mol、3,240g/mol、3,245g/mol、3,250g/mol、3,255g/mol、3,260g/mol、3,265g/mol、3,270g/mol、3,275g/mol、3,280g/mol、3,285g/mol、3,290g/mol、3,295g/mol、3,300g/mol、3,305g/mol、3,310g/mol、3,315g/mol、3,320g/mol、3,325g/mol、3,330g/mol、3,335g/mol、3,340g/mol、3,345g/mol、3,350g/mol、3,355g/mol、3,360g/mol、3,365g/mol、3,370g/mol、3,375g/mol、3,380g/mol、3,385g/mol、3,390g/mol、3,395g/mol、3,400g/mol、3,405g/mol、3,410g/mol、3,415g/mol、3,420g/mol、3,425g/mol、3,430g/mol、3,435g/mol、3,440g/mol、3,445g/mol、3,450g/mol、3,455g/mol、3,460g/mol、3,465g/mol、3,470g/mol、3,475g/mol、3,480g/mol、3,485g/mol、3,490g/mol、3,495g/mol、3,500g/mol、3,505g/mol、3,510g/mol、3,515g/mol、3,520g/mol、3,525g/mol、3,530g/mol、3,535g/mol、3,540g/mol、3,545g/mol、3,550g/mol、3,555g/mol、3,560g/mol、3,565g/mol、3,570g/mol、3,575g/mol、3,580g/mol、3,585g/mol、3,590g/mol、3,595g/mol、3,600g/mol、3,605g/mol、3,610g/mol、3,615g/mol、3,620g/mol、3,625g/mol、3,630g/mol、3,635g/mol、3,640g/mol、3,645g/mol、3,650g/mol、3,655g/mol、3,660g/mol、3,665g/mol、3,670g/mol、3,675g/mol、3,680g/mol、3,685g/mol、3,690g/mol、3,695g/mol、3,700g/mol、3,705g/mol、3,710g/mol、3,715g/mol、3,720g/mol、3,725g/mol、3,730g/mol、3,735g/mol、3,740g/mol、3,745g/mol、3,750g/mol、3,755g/mol、3,760g/mol、3,765g/mol、3,770g/mol、3,775g/mol、3,780g/mol、3,785g/mol、3,790g/mol、3,795g/mol、3,800g/mol、3,805g/mol、3,810g/mol、3,815g/mol、3,820g/mol、3,825g/mol、3,830g/mol、3,835g/mol、3,840g/mol、3,845g/mol、3,850g/mol、3,855g/mol、3,860g/mol、3,865g/mol、3,870g/mol、3,875g/mol、3,880g/mol、3,885g/mol、3,890g/mol、3,895g/mol、3,900g/mol、3,905g/mol、3,910g/mol、3,915g/mol、3,920g/mol、3,925g/mol、3,930g/mol、3,935g/mol、3,940g/mol、3,945g/mol、3,950g/mol、3,955g/mol、3,960g/mol、3,965g/mol、3,970g/mol、3,975g/mol、3,980g/mol、3,985g/mol、3,990g/mol、3,995g/mol，或4,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约2,750g/mol至约4,000g/mol(例如，约2,750g/mol、2,755g/mol、2,760g/mol、2,765g/mol、2,770g/mol、2,775g/mol、2,780g/mol、2,785g/mol、2,790g/mol、2,795g/mol、2,800g/mol、2,805g/mol、2,810g/mol、2,815g/mol、2,820g/mol、2,825g/mol、2,830g/mol、2,835g/mol、2,840g/mol、2,845g/mol、2,850g/mol、2,855g/mol、2,860g/mol、2,865g/mol、2,870g/mol、2,875g/mol、2,880g/mol、2,885g/mol、2,890g/mol、2,895g/mol、2,900g/mol、2,905g/mol、2,910g/mol、2,915g/mol、2,920g/mol、2,925g/mol、2,930g/mol、2,935g/mol、2,940g/mol、2,945g/mol、2,950g/mol、2,955g/mol、2,960g/mol、2,965g/mol、2,970g/mol、2,975g/mol、2,980g/mol、2,985g/mol、2,990g/mol、2,995g/mol、3,000g/mol、3,005g/mol、3,010g/mol、3,015g/mol、3,020g/mol、3,025g/mol、3,030g/mol、3,035g/mol、3,040g/mol、3,045g/mol、3,050g/mol、3,055g/mol、3,060g/mol、3,065g/mol、3,070g/mol、3,075g/mol、3,080g/mol、3,085g/mol、3,090g/mol、3,095g/mol、3,100g/mol、3,105g/mol、3,110g/mol、3,115g/mol、3,120g/mol、3,125g/mol、3,130g/mol、3,135g/mol、3,140g/mol、3,145g/mol、3,150g/mol、3,155g/mol、3,160g/mol、3,165g/mol、3,170g/mol、3,175g/mol、3,180g/mol、3,185g/mol、3,190g/mol、3,195g/mol、3,200g/mol、3,205g/mol、3,210g/mol、3,215g/mol、3,220g/mol、3,225g/mol、3,230g/mol、3,235g/mol、3,240g/mol、3,245g/mol、3,250g/mol、3,255g/mol、3,260g/mol、3,265g/mol、3,270g/mol、3,275g/mol、3,280g/mol、3,285g/mol、3,290g/mol、3,295g/mol、3,300g/mol、3,305g/mol、3,310g/mol、3,315g/mol、3,320g/mol、3,325g/mol、3,330g/mol、3,335g/mol、3,340g/mol、3,345g/mol、3,350g/mol、3,355g/mol、3,360g/mol、3,365g/mol、3,370g/mol、3,375g/mol、3,380g/mol、3,385g/mol、3,390g/mol、3,395g/mol、3,400g/mol、3,405g/mol、3,410g/mol、3,415g/mol、3,420g/mol、3,425g/mol、3,430g/mol、3,435g/mol、3,440g/mol、3,445g/mol、3,450g/mol、3,455g/mol、3,460g/mol、3,465g/mol、3,470g/mol、3,475g/mol、3,480g/mol、3,485g/mol、3,490g/mol、3,495g/mol、3,500g/mol、3,505g/mol、3,510g/mol、3,515g/mol、3,520g/mol、3,525g/mol、3,530g/mol、3,535g/mol、3,540g/mol、3,545g/mol、3,550g/mol、3,555g/mol、3,560g/mol、3,565g/mol、3,570g/mol、3,575g/mol、3,580g/mol、3,585g/mol、3,590g/mol、3,595g/mol、3,600g/mol、3,605g/mol、3,610g/mol、3,615g/mol、3,620g/mol、3,625g/mol、3,630g/mol、3,635g/mol、3,640g/mol、3,645g/mol、3,650g/mol、3,655g/mol、3,660g/mol、3,665g/mol、3,670g/mol、3,675g/mol、3,680g/mol、3,685g/mol、3,690g/mol、3,695g/mol、3,700g/mol、3,705g/mol、3,710g/mol、3,715g/mol、3,720g/mol、3,725g/mol、3,730g/mol、3,735g/mol、3,740g/mol、3,745g/mol、3,750g/mol、3,755g/mol、3,760g/mol、3,765g/mol、3,770g/mol、3,775g/mol、3,780g/mol、3,785g/mol、3,790g/mol、3,795g/mol、3,800g/mol、3,805g/mol、3,810g/mol、3,815g/mol、3,820g/mol、3,825g/mol、3,830g/mol、3,835g/mol、3,840g/mol、3,845g/mol、3,850g/mol、3,855g/mol、3,860g/mol、3,865g/mol、3,870g/mol、3,875g/mol、3,880g/mol、3,885g/mol、3,890g/mol、3,895g/mol、3,900g/mol、3,905g/mol、3,910g/mol、3,915g/mol、3,920g/mol、3,925g/mol、3,930g/mol、3,935g/mol、3,940g/mol、3,945g/mol、3,950g/mol、3,955g/mol、3,960g/mol、3,965g/mol、3,970g/mol、3,975g/mol、3,980g/mol、3,985g/mol、3,990g/mol、3,995g/mol，或4,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约3,250g/mol至约4,000g/mol(例如，约3,250g/mol、3,255g/mol、3,260g/mol、3,265g/mol、3,270g/mol、3,275g/mol、3,280g/mol、3,285g/mol、3,290g/mol、3,295g/mol、3,300g/mol、3,305g/mol、3,310g/mol、3,315g/mol、3,320g/mol、3,325g/mol、3,330g/mol、3,335g/mol、3,340g/mol、3,345g/mol、3,350g/mol、3,355g/mol、3,360g/mol、3,365g/mol、3,370g/mol、3,375g/mol、3,380g/mol、3,385g/mol、3,390g/mol、3,395g/mol、3,400g/mol、3,405g/mol、3,410g/mol、3,415g/mol、3,420g/mol、3,425g/mol、3,430g/mol、3,435g/mol、3,440g/mol、3,445g/mol、3,450g/mol、3,455g/mol、3,460g/mol、3,465g/mol、3,470g/mol、3,475g/mol、3,480g/mol、3,485g/mol、3,490g/mol、3,495g/mol、3,500g/mol、3,505g/mol、3,510g/mol、3,515g/mol、3,520g/mol、3,525g/mol、3,530g/mol、3,535g/mol、3,540g/mol、3,545g/mol、3,550g/mol、3,555g/mol、3,560g/mol、3,565g/mol、3,570g/mol、3,575g/mol、3,580g/mol、3,585g/mol、3,590g/mol、3,595g/mol、3,600g/mol、3,605g/mol、3,610g/mol、3,615g/mol、3,620g/mol、3,625g/mol、3,630g/mol、3,635g/mol、3,640g/mol、3,645g/mol、3,650g/mol、3,655g/mol、3,660g/mol、3,665g/mol、3,670g/mol、3,675g/mol、3,680g/mol、3,685g/mol、3,690g/mol、3,695g/mol、3,700g/mol、3,705g/mol、3,710g/mol、3,715g/mol、3,720g/mol、3,725g/mol、3,730g/mol、3,735g/mol、3,740g/mol、3,745g/mol、3,750g/mol、3,755g/mol、3,760g/mol、3,765g/mol、3,770g/mol、3,775g/mol、3,780g/mol、3,785g/mol、3,790g/mol、3,795g/mol、3,800g/mol、3,805g/mol、3,810g/mol、3,815g/mol、3,820g/mol、3,825g/mol、3,830g/mol、3,835g/mol、3,840g/mol、3,845g/mol、3,850g/mol、3,855g/mol、3,860g/mol、3,865g/mol、3,870g/mol、3,875g/mol、3,880g/mol、3,885g/mol、3,890g/mol、3,895g/mol、3,900g/mol、3,905g/mol、3,910g/mol、3,915g/mol、3,920g/mol、3,925g/mol、3,930g/mol、3,935g/mol、3,940g/mol、3,945g/mol、3,950g/mol、3,955g/mol、3,960g/mol、3,965g/mol、3,970g/mol、3,975g/mol、3,980g/mol、3,985g/mol、3,990g/mol、3,995g/mol，或4,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的聚氧丙烯亚单元的平均摩尔质量为约3,625g/mol至约4,000g/mol(例如，约3,625g/mol、3,630g/mol、3,635g/mol、3,640g/mol、3,645g/mol、3,650g/mol、3,655g/mol、3,660g/mol、3,665g/mol、3,670g/mol、3,675g/mol、3,680g/mol、3,685g/mol、3,690g/mol、3,695g/mol、3,700g/mol、3,705g/mol、3,710g/mol、3,715g/mol、3,720g/mol、3,725g/mol、3,730g/mol、3,735g/mol、3,740g/mol、3,745g/mol、3,750g/mol、3,755g/mol、3,760g/mol、3,765g/mol、3,770g/mol、3,775g/mol、3,780g/mol、3,785g/mol、3,790g/mol、3,795g/mol、3,800g/mol、3,805g/mol、3,810g/mol、3,815g/mol、3,820g/mol、3,825g/mol、3,830g/mol、3,835g/mol、3,840g/mol、3,845g/mol、3,850g/mol、3,855g/mol、3,860g/mol、3,865g/mol、3,870g/mol、3,875g/mol、3,880g/mol、3,885g/mol、3,890g/mol、3,895g/mol、3,900g/mol、3,905g/mol、3,910g/mol、3,915g/mol、3,920g/mol、3,925g/mol、3,930g/mol、3,935g/mol、3,940g/mol、3,945g/mol、3,950g/mol、3,955g/mol、3,960g/mol、3,965g/mol、3,970g/mol、3,975g/mol、3,980g/mol、3,985g/mol、3,990g/mol、3,995g/mol，或4,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均环氧乙烷含量按质量计大于40％(例如，约41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％，或更大)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均环氧乙烷含量按质量计大于50％(例如，约50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％，或更大)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均环氧乙烷含量按质量计大于60％(例如，约60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％，或更大)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均环氧乙烷含量按质量计大于70％(例如，约60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％，或更大)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均环氧乙烷含量按质量计为约40％至约90％(例如，约40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％，或90％)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均环氧乙烷含量按质量计为约50％至约85％(例如，约50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％，或85％)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均环氧乙烷含量按质量计为约60％至约80％(例如，约60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量大于10,000g/mol(例如，约10,100g/mol、10,200g/mol、10,300g/mol、10,400g/mol、10,500g/mol、10,600g/mol、10,700g/mol、10,800g/mol、10,900g/mol、11,000g/mol、11,100g/mol、11,200g/mol、11,300g/mol、11,400g/mol、11,500g/mol、11,600g/mol、11,700g/mol、11,800g/mol、11,900g/mol、12,000g/mol、12,100g/mol、12,200g/mol、12,300g/mol、12,400g/mol、12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量大于11,000g/mol(例如，约11,100g/mol、11,200g/mol、11,300g/mol、11,400g/mol、11,500g/mol、11,600g/mol、11,700g/mol、11,800g/mol、11,900g/mol、12,000g/mol、12,100g/mol、12,200g/mol、12,300g/mol、12,400g/mol、12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量大于12,000g/mol(例如，约12,100g/mol、12,200g/mol、12,300g/mol、12,400g/mol、12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量大于12,500g/mol(例如，约12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量为约10,000g/mol至约15,000g/mol(例如，约10,000g/mol、10,100g/mol、10,200g/mol、10,300g/mol、10,400g/mol、10,500g/mol、10,600g/mol、10,700g/mol、10,800g/mol、10,900g/mol、11,000g/mol、11,100g/mol、11,200g/mol、11,300g/mol、11,400g/mol、11,500g/mol、11,600g/mol、11,700g/mol、11,800g/mol、11,900g/mol、12,000g/mol、12,100g/mol、12,200g/mol、12,300g/mol、12,400g/mol、12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量为约11,000g/mol至约15,000g/mol(例如，约11,000g/mol、11,100g/mol、11,200g/mol、11,300g/mol、11,400g/mol、11,500g/mol、11,600g/mol、11,700g/mol、11,800g/mol、11,900g/mol、12,000g/mol、12,100g/mol、12,200g/mol、12,300g/mol、12,400g/mol、12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量为约11,500g/mol至约15,000g/mol(例如，约11,500g/mol、11,600g/mol、11,700g/mol、11,800g/mol、11,900g/mol、12,000g/mol、12,100g/mol、12,200g/mol、12,300g/mol、12,400g/mol、12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量为约12,000g/mol至约15,000g/mol(例如，约12,000g/mol、12,100g/mol、12,200g/mol、12,300g/mol、12,400g/mol、12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

在一些实施方案中，所述泊洛沙姆具有的平均摩尔质量为约12,500g/mol至约15,000g/mol(例如，约12,500g/mol、12,600g/mol、12,700g/mol、12,800g/mol、12,900g/mol、13,000g/mol、13,100g/mol、13,200g/mol、13,300g/mol、13,400g/mol、13,500g/mol、13,600g/mol、13,700g/mol、13,800g/mol、13,900g/mol、14,000g/mol、14,100g/mol、14,200g/mol、14,300g/mol、14,400g/mol、14,500g/mol、14,600g/mol、14,700g/mol、14,800g/mol、14,900g/mol，或15,000g/mol)。

泊洛沙姆P288、P335、P338和P407

可以与本公开的组合物和方法结合使用的泊洛沙姆包括具有近似化学式HO(C

在一些实施方案中，泊洛沙姆是P288的变体，诸如式HO(C

可以与本公开的组合物和方法结合使用的泊洛沙姆还包括具有近似化学式HO(C

在一些实施方案中，泊洛沙姆是P335的变体，诸如式HO(C

可以与本公开的组合物和方法结合使用的泊洛沙姆还包括具有近似化学式HO(C

在一些实施方案中，泊洛沙姆是P338的变体，诸如式HO(C

可以与本公开的组合物和方法结合使用的泊洛沙姆还包括具有近似化学式HO(C

在一些实施方案中，泊洛沙姆是P407的变体，诸如式HO(C

为清楚起见，术语“平均摩尔质量”和“平均分子量”在本文中可互换使用以指代相同的量。如本文所述，泊洛沙姆的平均摩尔质量、环氧乙烷含量和环氧丙烷含量可以使用Alexandridis和Hatton,Colloids and Surfaces A:Physicochemical and EngineeringAspects 96:1-46(1995)中公开的方法来确定，所述文献的公开内容以引用方式整体并入本文。

甾醇

本文所述的脂质-聚合物复合颗粒还可以包含一种或多种甾醇。甾醇是通常天然存在于植物、动物和真菌中的脂质。植物甾醇是指一类植物甾醇分子，其是在植物细胞膜中发现的天然存在的化合物。植物甾醇包括植物甾醇和甾烷醇。植物甾醇可以来源于任何常见的植物来源，诸如大豆、木材、妥尔油、植物油等。植物甾醇包括β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、豆甾烷醇、菜油甾烷醇、芸苔甾醇、麦角甾醇、羽扇豆醇、环阿屯醇等。如本文所述的甾醇可以是改变脂质层流动性的任何胆固醇或其衍生物。甾醇可以是天然存在的甾醇，例如来源于或存在于天然来源中的甾醇。或者，甾醇可以是合成甾醇，例如非天然存在的甾醇类似物或衍生物。在一些优选的实施方案中，甾醇是胆固醇或其类似物(例如硫代胆固醇、表胆固醇、β-谷甾醇(Si-Lip)、豆甾醇(St-Lip)或羊毛甾醇(La-Lip))。本文所述的组合物中甾醇的浓度可以是例如，总脂质组合物的约1％至约50％(例如，约5％至约45％、约10％至约40％)。

甾醇和磷脂可以以例如约0.01至约0.5甾醇:磷脂的重量比存在于颗粒中。例如，甾醇:磷脂的重量比可以是例如约0.01至约0.1、约0.1至约0.2、约0.2至约0.3、约0.3至约0.4、约0.4至约0.5、约0.01至约0.2、约0.01至约0.3、约0.01至约0.4、约0.1至约0.15、约0.1至约0.25。例如，甾醇:磷脂的重量比可以是约0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45或0.5。

甾醇还涵盖其酯化衍生物，有时称为甾醇酯或甾烷醇酯。甾醇酯是用脂肪酸酯化的甾醇，诸如长链(例如C

生物活性剂

本文所述的脂质-聚合物复合颗粒可以包封生物活性剂。生物活性剂可以包括治疗剂、营养剂或娱乐剂。在一些实施方案中，生物活性剂是大麻素或大麻素衍生物。在更优选的实施方案中，大麻素或其衍生物为大麻萜酚酸(CBGA)、大麻萜酚酸单甲醚(CBGAM)、大麻萜酚(CBG)、大麻萜酚单甲醚(CBGM)、大麻二酚酸(CBGVA)、大麻二酚(CBGV)、大麻色酸(CBCA)、大麻环萜酚(CBC)、次大麻色酚酸(CBCVA)、次大麻色酚(CBCV)、大麻二醇酸(CBDA)、δ-9-四氢大麻酚酸A(THCA-A)、δ-9-四氢大麻酚酸B(THCA-B)、δ-9-四氢大麻酚(THC)、δ-9-四氢大麻酚酸-C4(THCA-C4)、δ-9-四氢大麻酚-C4(THC-C4)、δ-9-四氢次大麻酚酸(THCVA)、δ-9-四氢次大麻酚(THCV)、δ-9-四氢大麻二酚酸(THCA-C1)、δ-9-四氢大麻酚(tetrahydrocannabiorcol)(THC-C1)、δ-7-顺-异-四氢次大麻酚、δ-8-四氢大麻酚酸(Δ

在一些实施方案中，生物活性剂包括免疫原(例如疫苗组分，例如DNA疫苗、RNA疫苗或多肽疫苗)。免疫原可以是例如多肽或其片段、变体或其类似物、核酸(例如DNA或RNA)或细胞的另一组分。在一些实施方案中，本发明的特征在于包含如本文所述的组合物的疫苗。

在一些实施方案中，精油包括茶树油、没药油、桉树油、丁香油、薰衣草油、薄荷油、罗马洋甘菊油、德国洋甘菊油、乳香油、永久花油、丝柏油、当归油、岩蔷薇油、酸橙叶油、橙叶油、香柠檬油、甜橙油、玫瑰草油、柠檬铁皮油、山鸡椒油、罗勒油、香马郁兰油、香叶油、广藿香油、缬草油、檀香油、苦橙油、柚子油、芫荽油、香茅油、黑薄荷油、沟胶油、杜松枝油、留兰香油、苏格兰松油、迷迭香油、香紫苏油、姜油、柠檬油、柑橘油、孜然油、刺柏油、柠檬香脂、桃金娘油、罗文莎叶油、甜百里香油、永久花油、麦卢卡油、矮松油、牛至油、香根草油、蜂花油、白冷杉油、肉桂油、香茅油、梨莓油、冬青油、茴香油、依兰油或其组合。

在一些实施方案中，泊洛沙姆与生物活性剂之间的重量比为约4至约8(例如，约4.1至约7.9，或约4.2至约7.8、约4.3至约7.7、约4.4至约7.6、约4.5至约7.5、约4.6至约7.4、约4.7至约7.3、约4.8至约7.2、约4.9至约7.1、约5.0至约7.0、约5.1至约6.9、约5.2至约6.8、约5.3至约6.7、约5.4至约6.6、约5.5至约6.5、约5.6至约6.4、约5.7至约6.3、约5.8至约6.2，或约5.9至约6.1)。在一些实施方案中，生物活性剂(例如，大麻素或其衍生物)以按组合物的重量计约0.01％至约10％(例如，约0.05％至约9.5％、约0.1％至约9％、约0.2％至约8.5％、约0.4％至约8％、约0.5％至约7.5％、约1％至约7％、约1.5％至约6.5％、约2％至约6％、约2.5％至约5.5％、约3％至约5％、约3.5％至约4.5％、约4％至约4.49％，例如，约0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.10％、0.11％、0.12％、0.13％、0.14％、0.15％、0.16％、0.17％、0.18％、0.19％、0.20％、0.21％、0.22％、0.23％、0.24％、0.25％、0.26％、0.27％、0.28％、0.29％、0.30％、0.31％、0.32％、0.33％、0.34％、0.35％、0.36％、0.37％、0.38％、0.39％、0.40％、0.41％、0.42％、0.43％、0.44％、0.45％、0.46％、0.47％、0.48％、0.49％、0.50％、0.60％、0.61％、0.62％、0.63％、0.64％、0.65％、0.66％、0.67％、0.68％、0.69％、0.70％、0.71％、0.72％、0.73％、0.74％、0.75％、0.76％、0.77％、0.78％、0.79％、0.80％、0.81％、0.82％、0.83％、0.84％、0.85％、0.86％、0.87％、0.88％、0.89％、0.90％、0.91％、0.92％、0.93％、0.94％、0.95％、0.96％、0.97％、0.98％、0.99％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％，或10.0％)的浓度存在于制剂中。在一些实施方案中，生物活性剂(例如，精油)以按组合物的重量计约0.01％至约95％(例如，约0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.10％、0.11％、0.12％、0.13％、0.14％、0.15％、0.16％、0.17％、0.18％、0.19％、0.20％、0.21％、0.22％、0.23％、0.24％、0.25％、0.26％、0.27％、0.28％、0.29％、0.30％、0.31％、0.32％、0.33％、0.34％、0.35％、0.36％、0.37％、0.38％、0.39％、0.40％、0.41％、0.42％、0.43％、0.44％、0.45％、0.46％、0.47％、0.48％、0.49％、0.50％、0.60％、0.61％、0.62％、0.63％、0.64％、0.65％、0.66％、0.67％、0.68％、0.69％、0.70％、0.71％、0.72％、0.73％、0.74％、0.75％、0.76％、0.77％、0.78％、0.79％、0.80％、0.81％、0.82％、0.83％、0.84％、0.85％、0.86％、0.87％、0.88％、0.89％、0.90％、0.91％、0.92％、0.93％、0.94％、0.95％、0.96％、0.97％、0.98％、0.99％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％、10.0％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％，或95％)的浓度存在于制剂中。

本文所述的脂质-聚合物复合颗粒包封的生物活性剂还可以是萜烯、类黄酮、抗生素、防腐剂、抗真菌剂、抗菌剂、止痛剂、抗炎剂、抗原生动物剂、甾体、抗病毒剂、亲脂性药物、抗VEGF剂或抗青光眼剂。在一些实施方案中，萜烯是月桂烯、β-石竹烯、伽罗木醇、α-蒎烯、β-蒎烯、罗勒烯、萜品油烯、罗勒烯、萜品油烯、α-萜品醇、α-萜品烯、γ-萜品烯、α-水芹烯、伞花烃、莰烯、δ-3-蒈烯、葑醇、1,8-桉树脑、橙花叔醇、冰片、桉树脑、莰烯或柠檬烯。在一些实施方案中，类黄酮选自由以下组成的组：大麻黄素A、大麻黄素B、酚酸、芪类、植物化学物、二氢黄酮醇、花青素、花青素苷元、多酚、鞣质、黄酮、黄酮醇、黄烷-3-醇、黄烷-4-醇、黄烷-3,4-二醇、高异黄酮、苯丙素、间苯三酚、香豆素、酚酸、苯并二蒽酮、甾体糖苷、生物类黄酮或异黄酮。

在一些实施方案中，生物活性剂是疫苗组分，例如诱导免疫、预防感染性疾病和/或降低感染性疾病的风险的蛋白质或多肽片段。

在一些实施方案中，生物活性化合物是烟碱、烟碱类似物或烟碱衍生物。在其他实施方案中，生物活性剂是环孢菌素A、他克莫司、异维甲酸、丙泊酚、灰黄霉素、阿奇霉素或非甾体抗炎药(NSAID)。

药物组合物

优选将本文所述的组合物配制成以适合于体内施用的生物相容性形式向人受试者施用的药物组合物。药物组合物可以用药学上可接受的载体或赋形剂来配制。药学上可接受的载体或赋形剂是指不会显著干扰药物组合物的活性成分的生物活性或有效性并且其在其使用或施用的浓度下对宿主没有过度毒性的载体(例如，载体、介质、稀释剂、媒介物等)。其他药学上可接受的成分也可以存在于组合物中。合适的物质及其对药物活性化合物的制剂的用途是本领域众所周知的(参见，例如，Remington:The Science and Practiceof Pharmacy.第21版Philadelphia,PA.Lippincott Williams&Wilkins,2005对药学上可接受的物质和制备各种类型的药物组合物的方法的额外讨论)。

药物组合物通常被配制成与其预期的施用途径相容。对于口服施用，可以通过将生物活性剂与本领域熟知的药学上可接受的载体组合来配制药剂。此类载体使得本发明的剂能够配制成粉末、片剂、丸剂、胶囊、锭剂、液体、凝胶、糖浆、浆液、悬浮液等。已经认识到，如果口服施用，必须防止一些药物组合物被消化。这通常通过将蛋白质与组合物复合以使其对酸性和酶水解具有抗性或通过将蛋白质包装在适当的抗性载体诸如脂质体中来实现。适合口服剂型的赋形剂包括例如填充剂，诸如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素制剂，诸如例如淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。可以添加崩解，例如像交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂，或藻酸或其盐(诸如藻酸钠)。任选地，口服制剂也可以在盐水或缓冲液中配制以中和内部酸性条件，或者可以在没有任何载体的情况下施用。

对于吸入施用，可以将药物组合物配制成来自加压容器或分配器的气溶胶喷雾剂，其含有合适的推进剂(例如气体诸如二氧化碳、碳氟化合物)或雾化吸入剂形式。也可以使用液体或干燥的气溶胶(例如，干粉、大的多孔颗粒等)。对于局部施用，可以将药物组合物配制成含有悬浮或溶解于一种或多种药学上可接受的用在此类组合物中的载体中的活性组分的合适膏剂、洗剂、凝胶或霜剂。配制用于眼部施用的组合物可以例如用透明质酸配制。

如本领域技术人员将理解的，本文所述的组合物可以以多种形式施用于受试者，这取决于所选择的施用途径。本文所述的组合物可以例如通过允许组合物(例如脂质-聚合物复合颗粒，例如胶束或LNP)到达靶细胞的任何途径施用。组合物可以例如通过口服、局部、肠胃外、鞘内、脑室内、脑实质内、颊、舌下、鼻、直肠、贴片、泵、透皮、舌下、阴道、眼、耳或鼻施用，并且相应地配制药物组合物。组合物可以经由吸入或雾化施用。肠胃外施用包括静脉内、腹膜内、皮下、肌内、经上皮、经鼻、肺内、经直肠和局部施用模式。经舌下、经颊、经直肠、经阴道、通过眼部途径、耳部途径或鼻部途径。

在一些实施方案中，本文所述的组合物被配制为食物传输的一部分，例如，其可以作为食物或与膳食一起施用。

在一些实施方案中，本文所述的组合物包含一种或多种精油，例如，茶树油、没药油、桉树油、丁香油、薰衣草油、薄荷油、罗马洋甘菊油、德国洋甘菊油、乳香油、永久花油、丝柏油、当归油、岩蔷薇油、酸橙叶油、橙叶油、香柠檬油、甜橙油、玫瑰草油、柠檬铁皮油、山鸡椒油、罗勒油、香马郁兰油、香叶油、广藿香油、缬草油、檀香油、苦橙油、柚子油、芫荽油、香茅油、黑薄荷油、沟胶油、杜松枝油、留兰香油、苏格兰松油、迷迭香油、香紫苏油、姜油、柠檬油、柑橘油、孜然油、刺柏油、柠檬香脂、桃金娘油、罗文莎叶油、甜百里香油、永久花油、麦卢卡油、矮松油、牛至油、香根草油、蜂花油、白冷杉油、肉桂油、香茅油、梨莓油、冬青油、茴香油、依兰油或其组合。在一些实施方案中，组合物包含多种精油(例如，2、3、4、5、6、7、8、9或10种精油)。在一些实施方案中，组合物中精油的浓度按重量计为组合物的0.01％至95％(例如，5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％，或95％)。

在一些实施方案中，本文所述的组合物被配制成滴眼剂。在一些实施方案中，含有一种或多种精油的滴眼剂按重量计为组合物的0.01％至95％(例如，5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％，或95％)。

一般来说，药物组合物(例如，生物活性剂)的剂量可以在约1ng至约1g(例如，约1ng至约10ng，例如，2ng、3ng、4ng、5ng、6ng、7ng、8ng、9ng、10ng，例如，10ng-100ng，例如，20ng、30ng、40ng、50ng、60ng、70ng、80ng、90ng、100ng，例如，约100ng至约1μg，例如，200ng、300ng、400ng、500ng、600ng、700ng、800ng、900ng、1μg，例如，约1μg至约10μg，例如，1μg、2μg、3μg、4μg、5μg、6μg、7μg、8μg、9μg、10μg，例如，约10μg至约100μg，例如，20μg、30μg、40μg、50μg、60μg、70μg、80μg、90μg、100μg，例如，100μg–1mg，例如，200μg、300μg、400μg、500μg、600μg、700μg、800μg、900μg、1mg，例如，约1mg至约10mg，例如，2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg，例如，约10mg至约100mg，例如，20mg、30mg、40mg、50mg、60mg、70mg、80mg、90mg、100mg，例如，约100mg至约1g，例如，200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、700mg、800mg、900mg，或1g)的范围内。

药物组合物(例如，生物活性剂)的剂量可以按每kg受试者体重施用。例如，剂量可以为约0.01mg/kg至约100mg/kg，例如，约0.01mg/kg至约30mg/kg，例如，约0.01mg/kg至约10mg/kg、约0.1mg/kg至约1mg/kg，例如，约0.02mg/kg、0.03mg/kg、0.03mg/g、0.04mg/kg、0.05mg/kg、0.06mg/kg、0.07mg/kg、0.08mg/kg、0.08mg/kg、0.09mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg 0.4mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、0.6mg/kg、0.7mg/kg、0.8mg/kg、0.9mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、60mg/kg、65mg/kg、70mg/kg、75mg/kg、80mg/kg、85mg/kg、90mg/kg、95mg/kg，或100mg/kg。前述剂量可以每天、每周、每月或每年施用一次。

本文所述的组合物的剂量可以根据许多因素而变化，所述因素诸如剂的药效学特性；施用方式；接受者的年龄、健康状况和体重；症状的性质和程度；治疗的频率和同时治疗的类型(如果有的话)；以及组合物在待治疗动物中的清除率。本文所述组合物可以最初以适合的剂量施用，所述剂量可以根据临床反应根据需要进行调整。在一些实施方案中，组合物(例如，包含生物活性剂的组合物)的剂量是预防或治疗有效量。此外，应理解所有剂量可以连续给予或分成每个给定时间范围给予的剂量。例如，组合物可以每小时、每天、每周、每月或每年施用。在一些实施方案中，组合物可以被连续或全身施用。

本文所述的组合物可以使用多步骤过程制备。在一些实施方案中，此过程中的步骤顺序提供生物活性剂的最佳粒度、多分散性、溶液透明度、pH、张力、尺寸分布、稳定性和负载。在一些实施方案中，生物活性剂在第一步中与聚合物匀化，例如在约50℃至约70℃，例如约60℃的温度下。在第二步中，使用浸入式注射(例如乙醇注入)将含有脂质和甾醇的溶液添加到均质的生物活性剂和聚合物悬浮液中。

使用方法

本文所述的组合物被配制以治疗疾病或病状(例如眼部病状，例如炎症、眼痛、急性结膜炎、黑眼圈、红眼、细菌性眼部感染、真菌性眼部感染、病毒性眼部感染、肿胀、新生血管形成、营养缺乏、黄斑变性、青光眼或眼压升高、疼痛、细菌感染、真菌感染、原生动物感染、焦虑、激动、压力、疲劳、失眠、精神衰竭、记忆力减退、器官排斥、湿疹、痤疮和皮肤感染)。在一些实施方案中，组合物用于补充营养。在一些实施方案中，组合物用于娱乐目的。

本文所述的组合物可以配制成滴眼剂以治疗眼部病状，诸如干眼病、炎症、眼痛、急性结膜炎、黑眼圈、红眼、细菌性眼部感染、真菌性眼部感染、病毒性眼部感染、营养缺乏、黄斑变性、青光眼或眼压升高。

在一些实施方案中，组合物可以用于治疗选自炎症、疼痛、细菌感染、真菌感染、原生动物感染、焦虑、激动、压力、疲劳、失眠、精神疲惫、记忆丧失、器官排斥、湿疹、痤疮和皮肤感染(例如，脚癣、癣或股癣)的疾病和病状。

在一些实施方案中，本文所述的组合物可以作为免疫原性组合物(例如，疫苗)施用于受试者。生物活性剂可以包括免疫原(例如疫苗组分，例如DNA疫苗、RNA疫苗或多肽疫苗)。免疫原可以是例如多肽或其片段、变体或其类似物、核酸(例如DNA或RNA)或细胞的另一组分。可以将组合物施用于受试者以预防疾病或病状的发作或降低患疾病或病状的风险。免疫原性组合物可以例如局部、经口腔、经注射、经舌下、经颊、经直肠、经阴道、经眼部途径、经耳部途径、经鼻部途径、经吸入、经雾化或经透皮施用。在一些实施方案中，免疫原性组合物是静脉内、皮下或肌内施用。

组合物可以施用于受试者的眼睛、受试者眼睛周围的区域、眼睛的外部区域、眼睑(例如，眼睑的外部区域、眼睑的内部区域)或泪管。

组合物可以作为滴眼剂(例如，每天1、2、3、4、5、6、7、8、9或10剂滴眼剂)施用于每只受影响的眼睛。

在一些实施方案中，可以将组合物施用于受试者用于娱乐用途。当需要时，可以将组合物例如经口服、经吸入、经肠胃外或局部施用于受试者用于娱乐用途。

组合物可以一天一次、一天两次、一天三次、一天四次、一天五次、一天六次、一天七次、一天八次、一天九次、一天十次、一天十一次、一天十二次、一天十三次、一天十四次、一天十五次、一天十六次、一天十八次、一天十九次、一天二十次、一天二十一次、一天二十二次、一天二十三次，或一天二十四次施用。组合物也可以每周、每两周、每月或每两个月施用。组合物可以在睡眠前或睡眠后施用。

在一些实施方案中，组合物局部、经口腔、经注射、经舌下、经颊、经直肠、经阴道、经眼部途径、经耳部途径、经鼻部途径、经吸入、经雾化或经透皮施用于受试者。

实施例

提出以下实施例以便为本领域普通技术人员提供如何使用、制备和评估本文所述的组合物和方法的描述，并且这些实施例仅旨在作为本发明的示例而不旨在限制发明人认为是他们的发明的范围。

实施例1.制备磷脂初级脂质体

进行了磷脂脂质体组合物的制备和视觉表征。使用1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、大麻二酚(CBD)和任选的胆固醇制备三种变体制剂Fa1、Fa2和Fa3。Fa1通过在乙醇中混合DSPC(1mg/ml)、CBD(30mg/ml)和胆固醇(0.37mg/ml)来制备，然后注入DI水中(表1)。Fa2通过在乙醇中混合DSPC(1mg/ml)和CBD(30mg/ml)来制备，并且将其注入DI水中。Fa3通过在乙醇中混合DSPC(2mg/ml)、CBD(30mg/ml)和胆固醇(0.73mg/ml)来制备，然后注入DI水中。

表1.初级脂质体制剂Fa。

脂质体悬浮液、Fa1、Fa2和Fa3的视觉表征产生了具有混浊外观和一些沉淀的所有悬浮液(表2)。使用光学显微镜对脂质体的相对丰度进行定性表征(图1)，并且观察到配制Fa3的过程产生了最高浓度的脂质体。

表2.初级脂质体制剂Fa的视觉外观。

实施例2.温度对磷脂初级脂质体的影响

为了克服在Fa制剂实验中观察到的沉淀，在不同温度条件下制备了脂质体悬浮液。评估了水性溶剂的温度对脂质体悬浮液的溶解和视觉外观的影响。三种制剂Fb1、Fb2和Fb3如表3制备。Fb1在室温(20℃)下在去离子水中和在4℃的乙醇中制备。使用浸入注入技术将包含DSPC(2mg/ml)、CBD(30mg/ml)和胆固醇(0.73mg/ml，DSPC的15摩尔％)的乙醇溶液引入水中。所得悬浮液具有混浊外观，有CBD沉淀和非分散脂质。在20℃下使用去离子水，然后通过空气注入DSPC(2mg/ml)、CBD(30mg/ml)和胆固醇(0.73mg/ml，DSPC的15摩尔％)来制备Fb2。所得悬浮液也具有混浊外观，有CBD沉淀和非分散脂质。在20℃下使用去离子水，然后浸入式注入CBD和非分散脂质来制备Fb3。Fb3具有混浊外观，有可观察到的CBD沉淀和非分散脂质。(图2)

表3.用于Fb制剂的水温和乙醇注入方法。

实施例3.CBD浓度和制备方法的影响

进行脂质纳米颗粒制剂(Fc1-Fc9，表4)的制备以检查大麻二酚(CBD)浓度、温度和匀化方法对悬浮液中纳米颗粒的视觉外观、粒度和ζ电位的影响。

表4.在室温(20℃)或60℃下制备的脂质纳米颗粒中包封的CBD的制剂c(Fc)。

制剂中使用了两种浓度的CBD(2mg/ml和30mg/ml)，而1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)的浓度对于所有制剂来说都是恒定的，为2mg/ml。胆固醇浓度也保持恒定在0.73mg/ml(DSPC的15mol％)。Fc1和Fc4是当制备条件一致(例如温度和DSPC和胆固醇的浓度)时直接比较CBD浓度的制剂。还评估了温度的影响。Fc1-Fc4检查了在室温(20℃)或高温(60℃)下悬浮液外观、沉淀、粒度和ζ电位的差异(表5和图3至4)。在20℃(Fc5)或60℃(Fc8)下在制剂Fc5和Fc8中进行悬浮液的匀化。在室温(20℃)或高温(60℃)下的悬浮液外观、沉淀、粒度和ζ电位的目视检查(表5和图3至4)。制剂Fc6和Fc9检查了在将悬浮液保持在60℃并以逐滴方式添加CBD的情况下，CBD浓度(2mg/ml和30mg/ml)对悬浮液外观、沉淀、粒度和纳米粒子ζ电位的影响(表5和图3至4)。制剂Fc7是仅药物对照制剂。

表5.制剂Fc1-Fc9的视觉外观和沉淀的存在。

将制剂Fc1-Fc9的粒度评估为平均有效直径(nm)和具有标准偏差界限的平均多分散性(图3)。从制剂Fc1观察到最小尺寸的纳米颗粒。制剂Fc1和Fc4的制备方法仅不同在使用的CBD浓度。较高浓度的CBD导致较大的颗粒可能是由于与制剂Fc7中观察到的最大尺寸的颗粒一致的未包埋的CBD颗粒。制剂Fc1的制备方法还产生了较小的脂质纳米颗粒和较大的未包埋的CBD颗粒的混合物，这反映在Fc1中看到的大的多分散性。制剂Fc4显示了在给定最小纳米颗粒尺寸和低多分散性值的情况下进行的最佳方法(图3)。

还测量了制剂Fc1-Fc9(图4)的ζ电位。以mV为单位的平均ζ电位与三次测量的标准偏差(S.D.)一起记录，其中记录的每次测量是10次运行的平均值。制剂Fc4的ζ电位值为-0.05mV，S.D.为0.09，与选择Fc4作为最佳制剂一致，因为它证实了CBD被加载到纳米颗粒中并且纳米颗粒的表面电荷接近中性。

实施例4.泊洛沙姆对聚合物颗粒组成的影响

使用

表6.具有CBD的

制剂Fd1-Fd6都具有半透明外观(图5至6)，与在仅脂质纳米颗粒中观察到的混浊外观相反。观察到与所用

表7.观察到的胶束悬浮液透明度和沉淀的存在。

具有较高

实施例5.脂质-聚合物复合颗粒的制剂

用浓度为1％、3％和5％w/v的

表8.脂质-聚合物复合颗粒的制剂。

/>

随着

表9.观察到的Fe制剂透明度和沉淀的存在。

在制剂Fe1、Fe4和Fe7中，粒度和多分散性随着

表10.制剂Fe中的颜色变化。

实施例6.所选制剂的方法优化

进一步优化了一系列制剂(表11)。制备每种制剂Fd5、Fe5、Fe8和Fe2的重复，并表征粒度和多分散性(图16)。制剂Fd5、Fe5和Fe8产生了最佳粒度和多分散性。

表11.脂质-聚合物复合颗粒优化制剂。

/>

实施例7.

F127、18:0DSPC(1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱)和胆固醇(羊毛)购自Sigma Aldrich。大麻二酚(CBD)由MaxBiotech提供。含有浓度为1、3、5、7、9、11、13和15％w/v的/>

方法

CBD的饱和溶解度

为了确定在

确定增加脂质浓度的影响

在研究系统中脂质的影响时，使用20ml(v1)的体积作为目标最终体积。使用两种方法来研究增加脂质浓度对胶束系统的影响。在第一种中，在乙醇注入之前添加CBD，而在第二种中，在乙醇注入之后和在乙醇从系统中蒸发之后添加CBD。

如上所述在乙醇中制备不同的脂质储备液。将过量的CBD添加到20ml(v1)的5％

检查掺入更高浓度脂质的影响的另一种方法中，在乙醇注入后掺入CBD。此方法与上一节中描述的方法类似，不同之处在于掺入脂质的乙醇注入是在添加CBD之前完成的。乙醇注入后，将制剂在45℃下不加盖搅拌2小时，然后在室温下过夜以蒸发乙醇。第二天将过量的CBD添加到制剂中并搅拌。

通过在乙腈(ACN)中稀释样品(根据需要)然后使用HPLC分析它们来确定CBD含量。使用Agilent Infinity 1260系统进行校准曲线和样品定量。Eclipse Plus C18，4.6x150mm，3.5μm色谱柱购自Phenomenex。使用的流动相是ACN:水(82:18v/v)。HPLC分析在室温下以1ml/min的流速和20μl的进样量进行。用于HPLC分析的UV检测器设置为220nm。使用Brookhaven动态光散射系统测定粒度和多分散性。

结果

F127能够显著增加CBD在水中的溶解度，这将增加渗透性，从而提高口服施用CBD的生物利用率。在含有7％至11％的/>

在乙醇注入前添加CBD的制剂的表征

表征了在乙醇注入之前添加了CBD的制剂。记录制剂的视觉外观(表12)。在不存在

表12.在乙醇注入前添加CBD的制剂的视觉外观

当

表征了溶解在有

在乙醇注入后添加CBD的制剂的表征

在乙醇注入后添加有CBD的制剂。记录制剂的视觉外观(表13)。在不存在

表13.在乙醇注入后添加CBD的制剂的视觉外观

当

表征了溶解在有

讨论

如本实验所示，

其他实施方案

尽管本发明已经结合其具体的实施方案进行了描述，但应当了解能够对它进行进一步的修改并且本申请旨在涵盖任何基本根据本发明的原理而对本发明进行的变动、使用或适应性调整，并且包括虽然不属于本发明但属于本发明所属领域的已知或习用实施手段的和属于上文所述的实质特征的以及符合权利要求范围之内的变更。其他实施方案在权利要求内。