新型Rho相关蛋白激酶抑制剂的制备方法和此制备方法中的中间体

本发明涉及新型Rho相关蛋白激酶抑制剂的制备方法和此制备方法中的中间体。

发明背景

Rho相关蛋白激酶(ROCK)为AGC激酶家族的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其包括两种亚型，ROCK1和ROCK2。ROCK1和ROCK2在特定组织中被差异性地表达和调节。例如ROCK1以相对高的水平普遍表达，而ROCK2在心脏、脑和骨骼肌中优先表达。ROCK是第一个被发现的Rho蛋白下游效应因子，其通过磷酸化下游的效应蛋白(MLC、Lin-11、Isl-1、LIMK、ERM、MARCKS、CRMP-2等)来实现其生物学功能。研究表明多种疾病(如肺纤维化、心脑血管疾病、神经系统疾病和癌症等)与ROCK介导的通路有关，因此在药物研发中，ROCK被认为是一类重要的靶点。

本申请人已发现(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮可用作有效的Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂(参见PCT/CN2018/093713，将其整体通过援引加入本文)，但对于适于以更大规模制备该化合物的方法尚未有报道。

发明概述

在一个方面中，本发明提供制备式(I)-c的化合物的方法，

其中：

PG为-CH(OR

Hal

R

R选自H和C

R

R

R

上述亚烷基、烷基、烯基、环烃基、杂环基、芳基、杂芳基和芳烷基在每次出现时各自任选地被一个或多个独立地选自卤素、C

R

m在每次出现时各自独立地为0、1、2或3的整数；并且

n在每次出现时各自独立地为0、1或2的整数；

所述方法包括将式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物在催化剂(例如金属催化剂，优选钯催化剂)的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(I)-c的化合物。

在另一方面中，本发明提供制备式(I)的化合物的方法，

其中：

R

其余各基团如上文所定义；

所述方法包括以下步骤：

第一步：将式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物在催化剂(例如金属催化剂，优选钯催化剂)的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(I)-c的化合物；以及

第二步：移除式(I)-c的化合物中的PG保护基以得到式(I)的化合物；并且当R

在另一方面中，本发明提供上述方法中涉及的中间体。

本发明的方法具有多种优点，例如副产物较少，最终产物收率较高；反应条件较温和；反应周期较短；并且适合用于大规模合成。

附图简要说明

图1为实施例1步骤9中反应液的HPLC色谱图。

图2为对比例中反应液的HPLC色谱图。

发明详述

定义

除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。

术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。

如本文中所使用，术语“亚烷基”表示饱和二价烃基，优选表示具有1、2、3、4、5或6个碳原子的饱和二价烃基，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基或亚丁基。

如本文中所使用，术语“烷基”定义为线性或支化饱和脂肪族烃。在一些实施方案中，烷基具有1至12个，例如1至6个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“C

如本文中所使用，术语“烯基”意指线性的或支化的单价烃基，其包含一个双键，且具有2-6个碳原子(“C

如本文中所使用，术语“炔基”表示包含一个或多个三键的单价烃基，其优选具有2、3、4、5或6个碳原子，例如乙炔基或丙炔基。

如本文中所使用，术语“环烷基”指饱和的单环或多环(诸如双环)烃环(例如单环，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基，或双环，包括螺环、稠合或桥连系统(诸如双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、双环[3.2.1]辛基或双环[5.2.0]壬基、十氢化萘基等))，其任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代。所述环烷基具有3至15个碳原子。例如，术语“C

如本文中所使用，术语“亚环烃基”、“环烃基”和“烃环”是指具有例如3-10个(适合地具有3-8个， 更适合地具有3-6个)环碳原子的饱和(即，“亚环烷基”和“环烷基”)或不饱和的(即在环内具有一个或多个双键和/或三键)单环或多环烃环，其包括但不限于(亚)环丙基(环)、(亚)环丁基(环)、(亚)环戊基(环)、(亚)环己基(环)、(亚)环庚基(环)、(亚)环辛基(环)、(亚)环壬基(环)、(亚)环己烯基(环)等。

如本文中所使用，术语“杂环基”、“亚杂环基”和“杂环”是指具有例如3-10个(适合地具有3-8个，更适合地具有3-6个)环原子、其中至少一个环原子是选自N、O和S的杂原子且其余环原子是C的饱和(即，杂环烷基)或部分不饱和的(即在环内具有一个或多个双键和/或三键)环状基团。例如，“3-10元(亚)杂环(基)”是具有2-9个(如2、3、4、5、6、7、8或9个)环碳原子和独立地选自N、O和S的一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)杂原子的饱和或部分不饱和(亚)杂环(基)。亚杂环基和杂环(基)的实例包括但不限于：(亚)环氧乙烷基、(亚)氮丙啶基、(亚)氮杂环丁基(azetidinyl)、(亚)氧杂环丁基(oxetanyl)、(亚)四氢呋喃基、(亚)二氧杂环戊烯基(dioxolinyl)、(亚)吡咯烷基、(亚)吡咯烷酮基、(亚)咪唑烷基、(亚)吡唑烷基、(亚)吡咯啉基、(亚)四氢吡喃基、(亚)哌啶基、(亚)吗啉基、(亚)二噻烷基(dithianyl)、(亚)硫吗啉基、(亚)哌嗪基或(亚)三噻烷基(trithianyl)。所述基团也涵盖双环系统，包括螺环、稠合或桥连系统(诸如8-氮杂螺[4.5]癸烷、3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、2-氮杂双环[2.2.2]辛烷等)。亚杂环基和杂环(基)可任选地被一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)适合的取代基取代。

如本文中所使用，术语“(亚)芳基”和“芳环”指具有共轭π电子系统的全碳单环或稠合环多环芳族基团。例如，如本文中所使用，术语“C

如本文中所使用，术语“(亚)杂芳基”和“杂芳环”指单环、双环或三环芳族环系，其具有5、6、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是1或2或3或4或5或6或9或10个碳原子，且其包含至少一个可以相同或不同的杂原子(所述杂原子是例如氧、氮或硫)，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，“(亚)杂芳基”或“杂芳环”选自(亚)噻吩基、(亚)呋喃基、(亚)吡咯基、(亚)噁唑基、(亚)噻唑基、(亚)咪唑基、(亚)吡唑基、(亚)异噁唑基、(亚)异噻唑基、(亚)噁二唑基、(亚)三唑基、(亚)噻二唑基等，以及它们的苯并衍生物；或(亚)吡啶基、(亚)哒嗪基、(亚)嘧啶基、(亚)吡嗪基、(亚)三嗪基等，以及它们的苯并衍生物。

如本文中所使用，术语“芳烷基”优选表示芳基或杂芳基取代的烷基，其中所述芳基、杂芳基和烷基如本文中所定义。通常，所述芳基可具有6-14个碳原子，所述杂芳基可具有5-14个环原子，并且所述烷基可具有1-6个碳原子。示例性芳烷基包括但不限于苄基、苯基乙基、苯基丙基、苯基丁基。

如本文中所使用，术语“卤代”或“卤素”基团定义为包括F、Cl、Br或I。

如本文中所使用，术语“含氮杂环”指饱和或不饱和的单环或双环基团，其在环中具有2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13个碳原子和至少一个氮原子，其还可任选地包含一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)选自N、O、C＝O、S、S＝O和S(＝O)

术语“取代”指所指定的原子上的一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)氢被从所指出的基团的选择代替，条件是未超过所指定的原子在当前情况下的正常原子价并且所述取代形成稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅仅当这种组合形成稳定的化合物时才是允许的。

如果取代基被描述为“任选地被取代”，则取代基可(1)未被取代或(2)被取代。如果取代基的碳被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则碳上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可单独和/或一起被独立地选择的任选的取代基替代。如果取代基的氮被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则氮上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可各自被独立地选择的任选的取代基替代。

如果取代基被描述为“独立地选自”一组，则各取代基独立于另一者被选择。因此，各取代基可与另一(其他)取代基相同或不同。

如本文中所使用，术语“一个或多个”意指在合理条件下的1个或超过1个，例如2个、3个、4个、5个或10个。

除非指明，否则如本文中所使用，取代基的连接点可来自取代基的任意适宜位置。

当取代基的键显示为穿过环中连接两个原子的键时，则这样的取代基可键连至该可取代的环中的任一成环原子。

本发明还包括所有同位素标记的化合物，其与本发明的化合物相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适 合包含入本发明的化合物中的同位素的实例包括(但不限于)氢的同位素(例如氘(

术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以几何异构体(顺式/反式)存在。类似地，本发明的化合物可以两种或更多种处于快速平衡的结构不同的形式的混合物(通常称作互变异构体)存在。互变异构体的代表性实例包括酮-烯醇互变异构体、苯酚-酮互变异构体、亚硝基-肟互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体等。要理解，本申请的范围涵盖所有这样的以任意比例(例如60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％)的异构体或其混合物。

本文中可使用实线

本发明涵盖本发明的化合物的所有可能的结晶形式或多晶型物，其可为单一多晶型物或多于一种多晶型物的任意比例的混合物。

还应当理解，本发明的某些化合物可以游离形式存在，或适当时，以其衍生物形式存在。在本发明中，所述衍生物包括但不限于，盐、溶剂合物，因此，当在本文中提及“本发明的化合物”时，也意在涵盖化合物的上述各种衍生物形式。

本发明的化合物的盐包括其酸加成盐及碱加成盐。

适合的酸加成盐由形成药学可接受盐的酸来形成。实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环己氨磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐及昔萘酸盐(xinofoate)。

适合的碱加成盐由形成药学可接受盐的碱来形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星青霉素盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、乙醇胺盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐及锌盐。

适合的盐的综述参见Stahl及Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use”(Wiley-VCH，2002)。用于制备本发明的化合物的盐的方法为本领域技术人员已知的。

本发明的化合物可以溶剂合物(优选水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。

本发明还涵盖含有保护基的本发明的化合物。在制备本发明的化合物的任何过程中，保护在任何有关分子上的敏感基团或反应基团可能是必需的和/或期望的，由此形成本发明的化合物的化学保护的形式。这可以通过常规的保护基实现，例如，在T.W.Greene&P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley&Sons，1991中所述的那些保护基，这些参考文献通过援引加入本文。 使用本领域已知的方法，在适当的后续阶段可以移除保护基。

术语“约”是指在所述数值的±10％范围内，优选±5％范围内，更优选±2％范围内。

制备方法

在一些实施方案中，本发明提供制备式(I)-c的化合物的方法，

其中：

PG为-CH(OR

Hal

R

R选自H和C

R

R

R

上述亚烷基、烷基、烯基、环烃基、杂环基、芳基、杂芳基和芳烷基在每次出现时各自任选地被一个或多个独立地选自卤素、C

R

m在每次出现时各自独立地为0、1、2或3的整数；并且

n在每次出现时各自独立地为0、1或2的整数；

所述方法包括将式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物在催化剂(例如金属催化剂，优选钯催化剂)的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(I)-c的化合物。

在一些实施方案中，本发明提供制备式(I)的化合物的方法，

其中：

R

其余各基团如上文所定义；

所述方法包括以下步骤：

第一步：将式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物在催化剂(例如金属催化剂，优选钯催化剂)的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(I)-c的化合物；以及

第二步：移除式(I)-c的化合物中的PG保护基以得到式(I)的化合物；并且当R

在优选的实施方案中，

在优选的实施方案中，R为H。

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，R

在优选的实施方案中，所述式(I)-a的化合物为具有以下结构的化合物A-51：

所述式(I)-b的化合物为具有以下结构的化合物A-8：

并且

所述式(I)-c的化合物为具有以下结构的化合物A-103：

在优选的实施方案中，所述式(I)的化合物为具有以下结构的化合物A：

在优选的实施方案中，所述钯催化剂选自[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯、三(二亚苄基丙酮)二钯、三苯基膦钯和醋酸钯，优选为[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯。

在优选的实施方案中，所述碱是选自乙酸钾、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、碳酸氢钠和碳酸氢钾的无机碱，优选为乙酸钾或碳酸钾。

在优选的实施方案中，在式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物的反应中，式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物的摩尔比为约1∶1-1∶2，优选为约1∶1-1∶1.5。

在优选的实施方案中，在式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物的反应中，式(I)-a的化合物与钯催化剂的摩尔比为约200∶1-80∶1，优选为约150∶1-90∶1。

在优选的实施方案中，在式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物的反应中，式(I)-a的化合物与碱的摩尔比为约1∶1-1∶5，优选为约1∶1-1∶3。

在优选的实施方案中，所述式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物的反应在具有1-10个碳原子的酰胺类(例如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺)和水的混合溶剂中进行，其中所述酰胺类溶剂和水的体积比优选为约10∶1-1∶1，更优选为约5∶1-1∶1。

在优选的实施方案中，所述式(I)-a的化合物与式(I)-b的化合物的反应在约100-20℃，优选约60-50℃的温度下进行。

在优选的实施方案中，在酸的存在下移除式(I)-c的化合物中的PG保护基，所述酸优选为盐酸。

在优选的实施方案中，所述移除式(I)-c的化合物中的PG保护基的反应在具有1-10个碳原子的醇类溶剂中进行，所述醇类溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、1-丙醇(正丙醇)、2-丙醇(异丙醇)、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇。

在优选的实施方案中，所述移除式(I)-c的化合物中的PG保护基的反应在约50-10℃，优选约30-20℃的温度下进行。

在优选的实施方案中，所述式(I)-a的化合物通过以下方法制备：

Hal

其余各基团如上文所定义；

所述方法包括以下步骤：

步骤A：向式(I)-a-1的化合物中引入PG保护基，以得到式(I)-a-2的化合物；

步骤B：使式(I)-a-2的化合物在还原条件下反应，以得到式(I)-a-3的化合物；并且当R不是H时，该步骤还包括与包含R的试剂的反应；以及

步骤C：使式(I)-a-3的化合物与式(I)-a-4的化合物反应，以得到式(I)-a的化合物；

优选地，在步骤A中使式(I)-a-1的化合物与乙烯基乙醚反应，以引入-CH(OCH

优选地，步骤A在醚类溶剂(例如具有3-10个碳原子的醚，优选为环状醚，例如呋喃类(包括四氢呋喃类)和二氧六环类，优选为四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃或1，4-二氧六环)中进行；

优选地，步骤A在酸的存在下进行，所述酸优选为盐酸的二氧化六环溶液；

优选地，步骤A在约50-10℃，优选约30-20℃的温度下进行；

优选地，步骤B中使用的还原剂为硫化钠，其中式(I)-a-2的化合物与硫化钠的摩尔比为约1∶1-1∶5，优选为约1∶1-1∶3；

优选地，步骤B的反应溶剂为具有1-10个碳原子的醇类溶剂(包括但不限于甲醇、乙醇、1-丙醇(正丙醇)、2-丙醇(异丙醇)、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇)、水或者所述醇类溶剂与水的混合溶剂；

优选地，步骤B在约100-20℃，优选约80-70℃的温度下进行；

优选地，步骤C中式(I)-a-3的化合物与式(I)-a-4的化合物的摩尔比为约1∶1-1∶2，优选为约1∶1-1∶1.5；

优选地，步骤C在碱的存在下进行，其中所述碱优选为选自咪唑、三乙胺、吡啶、2，6-二甲基吡啶、DBU和DIEA的有机碱，最优选为DIEA；式(I)-a-3的化合物与所述碱的摩尔比优选为约1∶1-1∶5，优选为约1∶1-1∶2；

优选地，步骤C在具有1-10个碳原子的醇类溶剂中进行，所述醇类溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、1-丙醇(正丙醇)、2-丙醇(异丙醇)、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇；

优选地，步骤C在约120-20℃，优选约80-70℃的温度下进行。

在优选的实施方案中，所述式(I)-a-1的化合物为具有以下结构的化合物A-2：

在优选的实施方案中，所述式(I)-a-2的化合物为具有以下结构的化合物A-21：

在优选的实施方案中，所述式(I)-a-3的化合物为具有以下结构的化合物A-31：

在优选的实施方案中，所述式(I)-b的化合物通过以下方法制备：

Hal

LG为离去基团，例如-OH或者选自F、Cl、Br和I的卤素；并且

其余各基团如上文所定义；

所述方法包括以下步骤：

步骤I：使式(I)-b-1的化合物与含R

步骤II：使式(I)-b-2的化合物与含R

步骤III：使式(I)-b-3的化合物与硼酸或硼酸酯在催化剂(例如金属催化剂，优选钯催化剂)的催化下(优选在碱存在下)反应，得到式(I)-b的化合物；

优选地，所述含R

优选地，步骤I中式(I)-b-1的化合物与含R

优选地，步骤I在羧酸活化试剂(优选为CDI)的存在下进行，其中式(I)-b-1的化合物与所述羧酸活化试剂的摩尔比优选为约1∶1-1∶2，优选为约1∶1-1∶1.5；

优选地，步骤I在具有1-10个碳原子的酰胺类溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺)中进行；

优选地，步骤I在-10℃至60℃，优选10至30℃的温度下进行；

优选地，步骤II中所述式(I)-b-2的化合物与含R

优选地，当R

优选地，步骤II在具有1-10个碳原子的酰胺类溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺)中进行；

优选地，步骤II在碱的存在下进行，其中所述碱优选为选自TMED、咪唑、三乙胺、吡啶、2，6-二甲基吡啶、DBU和DIEA的有机碱，最优选为TMED；式(I)-b-2与所述碱的摩尔比优选为约5∶1-1∶1，优选为约2∶1-1∶1；

优选地，步骤II在约150-80℃，优选约130-100℃的温度下进行；

优选地，步骤III中的钯催化剂选自[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯、三(二亚苄基丙酮)二钯、三苯基膦钯和醋酸钯，优选为[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯；

优选地，所述碱是选自乙酸钾、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、碳酸氢钠和碳酸氢钾的无机碱，优选为乙酸钾或碳酸钾；

优选地，所述硼酸酯为联硼酸频哪醇酯；

优选地，在步骤III中，式(I)-b-3的化合物与硼酸或硼酸酯的摩尔比为约1∶1-1∶2，优选为约1∶1-1∶1.5；

优选地，式(I)-b-3的化合物与钯催化剂的摩尔比为约200∶1-80∶1，优选为约150∶1-90∶1；

优选地，式(I)-b-3的化合物与碱的摩尔比为约1∶1-1∶5，优选为约1∶1-1∶3；

优选地，步骤III在醚类溶剂(例如具有3-10个碳原子的醚，优选为环状醚，例如呋喃类(包括四氢呋喃类)和二氧六环类，优选为四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃或1，4-二氧六环)中进行；

优选地，步骤III在约110-20℃，优选约90-70℃的温度下进行。

在优选的实施方案中，所述式(I)-b-1的化合物为具有以下结构的化合物A-SM3：

在优选的实施方案中，所述式(I)-b-2的化合物为具有以下结构的化合物A-6：

在优选的实施方案中，所述式(I)-b-3的化合物为具有以下结构的化合物A-7：

本发明涵盖以上实施方案的任意组合。

中间体

在一些实施方案中，本发明提供化合物或者其盐、立体异构体、多晶型物、溶剂合物或同位素标记的化合物，所述化合物具有式(I)-c的结构：

其中各基团如上文所定义；并且

所述化合物优选为具有以下结构的化合物A-103：

以下结合实施例进一步描述本发明，但提供这些实施例并非意在限制本发明的范围。

化合物的结构通过核磁共振波谱(

化学位移(δ)以百万分之一(ppm)为单位给出。

薄层色谱法(TLC)使用黄海牌HSGF 254(5×20cm)硅胶板进行，薄层制备色谱法采用规格为烟台产GF 254(0.4～0.5nm)硅胶板进行。

采用薄层色谱法(TLC)检测反应，使用的展开剂体系包括二氯甲烷和甲醇体系、正己烷和乙酸乙酯体系以及石油醚和乙酸乙酯体系，根据要分离的化合物的极性不同对展开剂体系进行调节(通过调节溶剂的体积比或者加入三乙胺等进行)。

除非另外说明，实施例中使用的原料和试剂可商购获得，或者根据WO 2019/001572(将其通过援引加入本文)中公开的方法获得。

本发明中的缩写具有以下含义：

实施例1.

步骤1：(E)-N-(3-(二甲基氨基)-2-(4-硝基苯基)亚烯丙基)-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(A-11)的制备

向反应瓶中加入DMF(400ml)，降温至0-10℃，向反应瓶中滴加POCl

MS m/z(ESI)：248.29M

1

步骤2：4-(4-硝基苯基)-1H-吡唑(A-2)的制备

向反应瓶中加入乙醇(670ml)、A-11(134.0g，0.40mol)和醋酸(20ml)。加毕，将反应体系升温至70-80℃，向反应体系滴加55％水合肼(43.7g，0.48mol)。滴加完毕后，在此温度下反应。TLC检测显示原料反应完全经后，停止反应，冷却反应液至45±5℃，向反应体系中滴加水(1340ml)，加毕，冷却反应体系至0-10℃，搅拌1h，过滤，将滤饼用水(268ml)淋洗，收集滤饼，45±5℃真空干燥，得黄色固体74.0g，纯度99.07％，收率约97.8％。

MS m/z(ESI)：190.12[M+H]

1

步骤3：1-(1-乙氧基乙基)-4-(4-硝基苯基)-1H-吡唑(A-21)的制备

向反应瓶中加入THF(365ml)、A-2(73.0g，0.38mol)和4M HCl的1，4-二氧六环溶液(2.4ml，9.6mmol)。加毕，在25±5℃下，滴加乙烯基乙醚(41.9g，0.579mol)。滴加完毕，搅拌反应。TLC检测显示原料反应完全后，向反应体系中加入碳酸氢钠(1.3g，15.4mmol)，搅拌1h，加入水(365ml)和乙酸乙酯(365ml)，分离并收集有机相，将有机相用水(365ml)洗涤一次，收集有机相，浓缩至约150ml，加入正庚烷(365ml)，析出大量固体，冷却至0-10℃，搅拌1h，过滤。将滤饼用正庚烷(150ml)淋洗，收集滤饼，45±5℃真空干燥，得淡棕色固体89.5g，纯度99.1％，收率约88.7％。

MS m/z(ESI)：262.08[M+H]

1

步骤4：4-(1-(1-乙氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)苯胺(A-31)的制备

向反应瓶中加入乙醇(264ml)和A-21(88.0g，0.34mol)，升温至70-80℃，向反应瓶中滴加Na

MS m/z(ESI)：232.29[M+H]

1

步骤5：2-氯-N-(4-(1-(1-乙氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)苯基)嘧啶-4-胺(A-51)的制备

向反应釜中加入A-31(70.0g，0.30mol)、乙醇(350ml)、2，4-二氯嘧啶(49.6g，0.33mol)和DIEA(78.2g，0.60mol)。加毕，将反应液升温至75±5℃，在此温度下搅拌反应过夜。TLC检测显示原料反应完全后，冷却反应液至45±5℃，浓缩至无馏分流出。向体系中加入乙酸乙酯(350ml)和水(350ml)，分离并收集有机相，有机相用饱和氯化钠溶液(350ml)洗涤，收集有机相，45±5℃下浓缩至约210ml，加入甲基叔丁基醚(350ml)，浓缩至约210ml，加入甲基叔丁基醚(700ml)，加热至50±5℃，搅拌1h，冷却至5±5℃，搅拌1h，过滤，滤饼用甲基叔丁基醚(140ml)淋洗，收集滤饼，45±5℃真空干燥，得黄色固体93.3g，纯度99.4％，收率约91.6％。

MS m/z(ESI)：344.29[M+H]

1

步骤6：(6-溴-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(A-6)的制备

向反应瓶中加入6-溴-1H-吲哚-2-羧酸(80.0g，0.33mol)和DMF(560ml)，加入CDI(64.5g，0.40mol)，在25-30℃下搅拌反应。TLC检测显示原料完全转化成中间体后，向反应体系中加入3，3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐(47.5g，0.36mol)。TLC检测显示原料反应完全后，停止反应，向体系中加入水(1120ml)，搅拌0.5h，过滤，将滤饼用水(160ml)淋洗，收集滤饼，40-50℃干燥，得类白色固体99.5g，纯度99.0％，收率约94.7％。

MS m/z(ESI)：315.24[M+H]

1

步骤7：(6-溴-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(A-7)的制备

向反应釜中加入A-6(98.0g，0.31mol)、碳酸二甲酯(224.0g，2.49mol)、DMF(490ml)和TMED(18.0g，0.15mol)。加毕，升温反应液至110℃，搅拌反应。TLC检测显示原料反应完全后，停止反应，冷却反应液至55±5℃，减压浓缩至无馏分流出，冷却反应液至25±5℃，加入水(980ml)，冷却反应液至0-10℃，搅拌1h，过滤，滤饼用水(198ml)淋洗，收集滤饼，45±5℃真空干燥，得棕黄色固体96.2g，纯度91.0％，收率约94.0％。

MS m/z(ESI)：329.27[M+H]

1

步骤8：(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)(1-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚-2-基)甲酮(A-8)的制备

向反应釜中加入A-7(95.0g，0.29mol)、KOAc(70.8g，0.72mol)、联硼酸频哪醇酯(80.6g，0.32mol)和1，4-二氧六环(950ml)。加毕，氮气置换3次，加入Pd(dppf)Cl

MS m/z(ESI)：377.22[M+H]

1

步骤9：(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)(6-(4-((4-(1-(1-乙氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)甲酮(A-103)的制备

向反应瓶内加入A-51(60.0g，0.17mol)、A-8(72.3g，0.19mol)、碳酸钾(72.4g，0.52mol)、DMF(300ml)和水(60ml)，氮气置换6次，加入Pd(dppf)Cl

向反应液中加入乙酸乙酯(600ml)和水(600ml)，在60±5℃的温度下静置分液，收集有机相，再向反应液中加入水(300ml)，在60±5℃的温度下，分出水相，收集有机相，在45±5℃下减压浓缩至约300ml，加入乙酸乙酯(300ml)，加热至60±5℃，固体溶清，加入正庚烷(600ml)，冷却至5±5℃，搅拌1h，过滤，滤饼用正庚烷(120ml)洗涤，收集滤饼，在45±5℃下真空干燥，得黄色固体71.2g，纯度98.0％，收率约73.0％。

MS m/z(ESI)：558.23[M+H]

1

步骤10：(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(A)的制备

向反应瓶中加入乙醇(600ml)、A-103(60.0g，0.11mol)，在20-30℃的温度下滴加浓盐酸(33.6g，0.32mol)，搅拌反应。TLC检测显示原料反应完全后，向反应体系中加入三乙胺(43.4g，0.43mol)，搅拌1h。向反应体系中加入水(600ml)，冷却至0-10℃，搅拌1h，过滤，用水(120ml)淋洗，收集滤饼，在40-50℃下真空干燥，得黄色固体47.2g，收率90.3％。

MS m/z(ESI)：486.23[M+H]

1

对比例

向反应瓶内加入A-5(1.5g，4.03mmol)、A-8(1.67g，4.44mmol)、碳酸钾(1.71g，12.3mmol)、DMF(10ml)和水(2ml)，氮气置换6次，加入Pd(dppf)Cl

由HPLC检测可见，原料A-5反应完全，但反应产物很复杂，其中目标产品A-111(保留时间10.104min)仅占25.66％，原料A-5的脱保护基产物A-4(保留时间9.936min)占25.96％，原料A-8(保留时间14.492min)占16.48％，化合物A(保留时间9.839min)占0.25％。

除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的各种修改对本领域技术人员而言会是显而易见的。这样的修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。