抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白及疫苗

技术领域

本发明涉及抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白及疫苗，属于医药领域。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-Cov-2)是由世界卫生组织命名的一种新型的β属的冠状病毒。该病毒有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60-140nm。其基因特征与SARS-CoV和MERS-CoV有明显区别，是一种以前尚未在人类中发现的新冠状病毒分支。目前，变异新冠病毒主要有五大种类：Alpha、Beta、Gamma、Delta、Omicron，Omicron变异株又分为BA.1、BA.2、BA.2.12.1、BA.4、BA.5、BQ.1.1、XBB.1.5等几种亚系。

SARS-CoV-2的主要结构蛋白包括刺突蛋白(Spike，S)、信使蛋白(Envelop，E)、膜蛋白(Membrane，M)和核衣壳蛋白(Nucleocapsid，N)，其中，S蛋白在病毒的感染和毒力中起着关键作用，常被用来作为疫苗的抗原。由于SARS-CoV-2变异株含有多个突变位点，病毒的S蛋白也含有多个突变位点，导致变异株一定程度上能够逃逸新冠原型株(即“新冠病毒野生株”)疫苗激发的抗体，导致新冠疫苗失效或保护力降低，为新冠疫情防控工作带来巨大压力。因此，开发针对各变异的SARS-CoV-2病毒的疫苗，特别对各变异的SARS-CoV-2病毒的广谱疫苗非常重要。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的目的在于提供抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白。本发明的另一目的在于提供含有所述蛋白的用于预防和/或治疗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的疫苗。

本发明提供了抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白，含有如SEQIDNo.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5或SEQ ID No.6中任意一项所示的氨基酸序列；或含有与如SEQ ID No.1～SEQ ID No.6任意一项所示的氨基酸序列具有98％以上的同源性且具有相同或相似的生物学活性的氨基酸序列。

进一步地，所述如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示的同源性氨基酸序列满足以下至少一项：SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3第52位氨基酸F突变为S；第54位氨基酸P突变为S；第56位氨基酸F突变为S。

进一步地，所述如SEQ ID No.4或SEQ ID No.5所示的同源性氨基酸序列满足以下至少一项：SEQ ID No.4或SEQ ID No.5第351位氨基酸F突变为S；第353位氨基酸P突变为S；第355位氨基酸F突变为S；所述如SEQ ID No.6所示的同源性氨基酸序列满足以下至少一项：SEQ ID No.6第352位氨基酸F突变为S；第354位氨基酸P突变为S；第356位氨基酸F突变为S。

更进一步地，所述蛋白的氨基酸序列选自SEQ ID No.1～SEQ ID No.12中至少一种。

本发明还提供了所述蛋白的前体，其在所述抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白上连接了信号肽和/或蛋白标签。

优选地，所述的蛋白标签选自如下至少一种：组氨酸标签(6His标签)、硫氧还蛋白标签(Trx标签)、谷胱甘肽转移酶标签、泛素样修饰蛋白标签、麦芽糖结合蛋白标签、c-Myc蛋白标签、Avi tag蛋白标签、氮源利用物质A蛋白标签。

进一步地，在抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白上还连接了切除蛋白标签的蛋白酶识别区。

优选地，所述的蛋白酶选自如下至少一种：肠激酶(EK酶)、TEV蛋白酶、凝血酶、凝血因子Xa、羧肽酶A、鼻病毒3c蛋白酶。

更进一步地，所述前体的氨基酸序列选自SEQ ID No.13～SEQ ID No.24中至少一种。

本发明还提供了多核苷酸，其特征是：编码所述的蛋白或所述的前体。

进一步地，核苷酸序列选自SEQ ID No.25～SEQ ID No.30中至少一种。

本发明还提供了重组载体，其含有所述的多核苷酸。

进一步地，所述重组载体采用昆虫杆状病毒表达载体、哺乳动物细胞表达载体、大肠杆菌表达载体、酵母表达载体中至少一种。

优选地，所述的昆虫杆状病毒表达载体为pFastBac1。

优选地，所述的大肠杆菌表达载体为pET32a。

优选地，所述的酵母表达载体为pPICZaA。

优选地，所述的哺乳动物细胞表达载体为CHO细胞表达载体。

进一步优选地，所述的CHO细胞表达载体为pTT5或FTP-002。

本发明还提供了宿主细胞，其特征是：含有所述的重组载体。

进一步地，所述宿主细胞采用昆虫细胞、哺乳动物细胞、大肠杆菌、酵母中至少一种。优选地，所述的昆虫细胞选自sf9细胞、sf21细胞、Hi5细胞中至少一种。

优选地，所述的哺乳动物细胞为CHO细胞。

本发明还提供了所述的蛋白或所述的前体的制备方法，包括如下步骤：培养所述的宿主细胞，使其表达所述的蛋白或前体，然后回收所述的蛋白，即得。

本发明还提供了抗SARS-CoV-2或其突变体感染的蛋白组合物，其特征是：包括Delta蛋白、Delta全长S蛋白、BA.5蛋白、BQ.1.1蛋白、XBB.1.5蛋白、BA.4/5全长S蛋白、BQ.1.1全长S蛋白、XBB.1.5全长S蛋白、Mu-BA.5蛋白、Mu-BQ.1.1蛋白、Mu-XBB.1.5蛋白、BA.4/5氨基酸突变后的全长S蛋白、BQ.1.1氨基酸突变后的全长S蛋白、XBB.1.5氨基酸突变后的全长S蛋白中至少两种及以上组合；优选地，至少2种-4种蛋白组合。

更优选地，所述蛋白组合物含有BA.5蛋白、BQ.1.1蛋白、XBB.1.5蛋白、BA.4/5全长S蛋白、BQ.1.1全长S蛋白、XBB.1.5全长S蛋白中至少2种及以上组合。

更优选地，所述蛋白组合物含有Delta蛋白、Mu-BA.5蛋白、Mu-BQ.1.1蛋白、Mu-XBB.1.5蛋白中至少2种及以上组合。

更优选地，所述蛋白组合物含有Mu-BA.5蛋白、Mu-BQ.1.1蛋白、Mu-XBB.1.5蛋白、BA.4/5氨基酸突变后的全长S蛋白、BQ.1.1氨基酸突变后的全长S蛋白、XBB.1.5氨基酸突变后的全长S蛋白中至少2种及以上组合。

进一步地，所述BA.5蛋白、BQ.1.1蛋白、XBB.1.5蛋白、BA.4/5全长S蛋白、BQ.1.1全长S蛋白、XBB.1.5全长S蛋白、Mu-BA.5蛋白、Mu-BQ.1.1蛋白、Mu-XBB.1.5蛋白、BA.4/5氨基酸突变后的全长S蛋白、BQ.1.1氨基酸突变后的全长S蛋白、XBB.1.5氨基酸突变后的全长S蛋白含有所述的蛋白或所述的前体。

进一步地，所述Delta蛋白、Delta全长S蛋白、BA.5蛋白、BQ.1.1蛋白、XBB.1.5蛋白、BA.4/5全长S蛋白、BQ.1.1全长S蛋白、XBB.1.5全长S蛋白、Mu-BA.5蛋白、Mu-BQ.1.1蛋白、Mu-XBB.1.5蛋白、BA.4/5氨基酸突变后的全长S蛋白、BQ.1.1氨基酸突变后的全长S蛋白、XBB.1.5氨基酸突变后的全长S蛋白的氨基酸序列是基于如SEQ ID No.31、SEQIDNo.33、SEQ ID No.1～SEQ ID No.24所示的至少一种氨基酸序列构建的。

本发明还提供了预防和/或治疗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的疫苗，其含有所述的蛋白、所述的前体和/或所述的蛋白组合物，以及药学上可接受的辅料或者辅助性成分。

进一步地，所述的辅助性成分为免疫佐剂。

优选地，所述的免疫佐剂选自如下至少一种：鲨烯水包油乳剂、铝盐、钙盐、植物皂苷、植物多糖、单磷酸脂质A、胞壁酰二肽、胞壁酰三肽、细菌毒素、GM-CSF细胞因子、脂质、阳离子脂质体材料。

进一步地，所述的鲨烯水包油乳剂为MF59；所述的铝盐选自氢氧化铝、明矾中至少一种；所述的钙盐为磷酸三钙；所述的植物皂苷为QS–21或ISCOM；所述的植物多糖为黄芪多糖；所述的细菌毒素选自重组霍乱毒素、白喉毒素中至少一种；所述的脂质选自如下至少一种：磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、胆固醇、二油酰基磷脂酰乙醇胺；所述的阳离子脂质体材料选自如下至少一种：(2,3-二油氧基丙基)三甲基氯化铵、N-[1-(2,3-二油酰氯)丙基]-N,N,N-氯化三甲胺、阳离子胆固醇、三氟乙酸二甲基-2,3-二油烯氧基丙基-2-(2-精胺甲酰氨基)乙基铵、溴化三甲基十二烷基铵、溴化三甲基十四烷基铵、溴化三甲基十六烷基铵、溴化二甲基双十八烷基铵、CpG ODN。

进一步地，所述的疫苗为注射制剂、鼻喷给药制剂、口服制剂。优选地，所述的疫苗为肌肉注射制剂。

本发明还提供了所述的蛋白、所述的前体和/或所述的蛋白组合物或所述的疫苗在制备治疗和/或预防SARS-CoV-2或其突变体感染或致病的药物中的用途。

进一步地，所述SARS-CoV-2突变体选自Alpha、Beta、Gamma、Delta或Omicron毒株中至少一种，其中Omicron毒株包括BA.1、BA.2、BA.2.12.1、BA.4、BA.5、BQ.1.1、XBB.1.5中至少一种。

本发明还提供了预防和/或治疗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的mRNA疫苗，其含有编码SEQ ID No.1～SEQ ID No.24任一项氨基酸的多核苷酸序列。

本发明还提供了预防和/或治疗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的腺病毒疫苗，其含有编码SEQ ID No.1～SEQ ID No.24任一项氨基酸的多核苷酸序列。

以下序列是申请人基于SARS-CoV-2或其突变体Delta，Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的S蛋白中的RBD序列构建或突变1个及以上位点后构建的序列。

其中，基于Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的S蛋白RBD序列与SARS-CoV-2的S蛋白的七肽重复区HR1和HR2形成的重组蛋白或前体分别定义为BA.5蛋白、BQ.1.1蛋白、XBB.1.5蛋白；

基于Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的全长S蛋白序列构建的蛋白或前体定义为BA.4/5全长S蛋白、BQ.1.1全长S蛋白、XBB.1.5全长S蛋白。

在Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的S蛋白RBD序列上进行三个氨基酸(F371S、P373S、F375S，所述的位数是从SARS-CoV-2野生型的全长序列计数)突变后与SARS-CoV-2的S蛋白的七肽重复区HR1和HR2形成的重组蛋白或前体分别定义为Mu-BA.5蛋白、Mu-BQ.1.1蛋白、Mu-XBB.1.5蛋白。

在Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的S蛋白RBD序列上进行三个氨基酸(F371S、P373S、F375S)突变后的全长S蛋白序列构建的蛋白或前体定义为BA.4/5氨基酸突变后的全长S蛋白、BQ.1.1氨基酸突变后的全长S蛋白、XBB.1.5氨基酸突变后的全长S蛋白。

其中，SEQ ID No.1～SEQ ID No.3分别为Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的RBD-HR1-HR2氨基酸序列。

SEQ ID No.4～SEQ ID No.6分别为Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的S蛋白全长氨基酸序列。

SEQ ID No.7～SEQ ID No.9分别为Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的RBD氨基酸序列进行三个氨基酸(F371S、P373S、F375S)突变所得RBD-HR1-HR2氨基酸序列。

SEQ ID No.10～SEQ ID No.12分别为Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的RBD氨基酸序列进行三个氨基酸(F371S、P373S、F375S)突变所得S蛋白全长氨基酸序列。

SEQ ID No.13～SEQ ID No.24分别为Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的RBD-HR1-HR2氨基酸序列、突变的RBD-HR1-HR2氨基酸序列前添加信号肽-Trx标签-6His标签-EK酶的氨基酸序列即SEQ ID No.13～SEQ ID No.15、SEQ ID No.19～SEQ IDNo.21；Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的S蛋白全长氨基酸序列、突变的S蛋白全长氨基酸序列前添加信号肽，即SEQ ID No.16～SEQ ID No.18、SEQ ID No.22～SEQIDNo.24。

SEQ ID No.25～SEQ ID No.30分别为编码Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的RBD-HR1-HR2氨基酸序列(SEQ ID No.13～SEQ ID No.15)、突变的RBD-HR1-HR2氨基酸序列(SEQ ID No.19～SEQ ID No.21)前分别添加信号肽-Trx标签-6His标签-EK酶的氨基酸序列的核苷酸序列。

SEQ ID No.31为Delta蛋白前体氨基酸序列；SEQ ID No.32为编码SEQ ID No.31的核苷酸序列；SEQ ID No.33为Delta S抗原的全长氨基酸序列；SEQ ID No.34为Omicron-BA.1S抗原的全长氨基酸序列；SEQ ID No.35为Omicron-BA.1S抗原氨基酸序列突变后的全长氨基酸序列；SEQ ID No.36为Delta蛋白氨基酸序列；SEQ ID No.37为RBD

本发明可将Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1.5的S蛋白RBD上突变三个氨基酸(F371S、P373S、F375S)，从而增强疫苗的抗病毒活性，中和抗体显著增高。

SEQ ID No.1：BA.5-Omicron变异株亚系BA.4/5的RBD-HR1-HR2氨基酸序列

VQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.2：BQ.1.1-Omicron变异株亚系BQ.1.1的RBD-HR1-HR2序列

VQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.3：XBB.1.5-Omicron变异株亚系XBB.1.5的RBD-HR1-HR2序列

VQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.4：Omicron变异株亚系BA.4/5的S蛋白全长氨基酸序列

VNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.5：Omicron变异株亚系BQ.1.1的S蛋白全长氨基酸序列

VNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.6：Omicron变异株亚系XBB.1.5的S蛋白全长氨基酸序列

VNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPVDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.7：Mu-BA.5(Omicron变异株亚系BA.4/5的RBD-HR1-HR2氨基酸序列中RBD进行突变后的序列)

VQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.8：Mu-BQ.1.1(Omicron变异株亚系BQ.1.1的RBD-HR1-HR2氨基酸序列中RBD进行突变后的序列)

VQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.9：Mu-XBB.1.5(Omicron变异株亚系XBB.1.5的RBD-HR1-HR2氨基酸序列中RBD进行突变后的序列)

VQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.10：Omicron变异株亚系BA.4/5的S蛋白全长氨基酸序列突变后的序列

VNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.11：Omicron变异株亚系BQ.1.1的S蛋白全长氨基酸序列进行突变后的序列VNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.12：Omicron变异株亚系XBB.1.5的S蛋白全长氨基酸序列进行突变后的序列

VNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPVDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.13：BA.5的信号肽-Trx-6His-EK-RBD-HR1-HR2氨基酸序列

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAGDKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVFVKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.14：BQ.1.1的信号肽-Trx-6His-EK-RBD-HR1-HR2氨基酸序列

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAGDKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVFVKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.15：XBB.1.5的信号肽-Trx-6His-EK-RBD-HR1-HR2氨基酸序列

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAGDKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVFVKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.16：Omicron变异株亚系BA.4/5的S蛋白全长氨基酸序列前添加信号肽后的氨基酸序列

MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.17：Omicron变异株亚系BQ.1.1的S蛋白全长氨基酸序列前添加信号肽后的氨基酸序列

MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.18：Omicron变异株亚系XBB.1.5的S蛋白全长氨基酸序列前添加信号肽后的氨基酸序列

MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPVDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNFAPFFAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.19：Mu-BA.5的信号肽Trx-6His-EK-RBD-HR1-HR2氨基酸序列

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAGDKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVFVKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.20：Mu-BQ.1.1的信号肽Trx-6His-EK-RBD-HR1-HR2氨基酸序列

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAGDKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVFVKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.21：Mu-XBB.1.5的信号肽Trx-6His-EK-RBD-HR1-HR2氨基酸序列

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAGDKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVFVKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.22：突变后的Omicron变异株亚系BA.4/5的S蛋白全长氨基酸序列前添加信号肽后的氨基酸序列

MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.23：突变后的Omicron变异株亚系BQ.1.1的S蛋白全长氨基酸序列前添加信号肽后的氨基酸序列

MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLGRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSTVGGNYNYRYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGVNCYFPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.24：突变后的Omicron变异株亚系XBB.1.5的S蛋白全长氨基酸序列前添加信号肽后的氨基酸序列

MFVFLVLLPLVSSQCVNLITRTQSYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPALPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYQKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKEGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLERDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPVDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFHEVFNATTFASVYAWNRKRISNCVADYSVIYNSASFSAFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGNEVSQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKPSGNYNYLYRLFRKSKLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGPNCYSPLQSYGFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.25：编码SEQ ID No.13的核苷酸序列(构建BA.4/5蛋白)

ATGCTGCTGGTGAACCAGAGCCACCAGGGTTTCAACAAGGAACACACTAGCAAGATGGTGTCTGCTATCGTCCTCTACGTGCTGCTCGCCGCCGCTGCTCACTCAGCTTTCGCCGCTGACTCTATCCACATCAAGGACTCCGACGACCTCAAGAACCGTTTGGCCGAAGCCGGCGACAAGCTGGTCGTTATCGACTTCATGGCTACCTGGTGTGGCCCTTGCAAGATGATCGGACCTAAGCTGGACGAAATGGCTAACGAGATGAGCGACAGCATCGTCGTTCTGAAGGTGGACGTCGACGAATGTGAGGACATCGCCACTGAGTACAACATCAACAGCATGCCTACCTTCGTTTTCGTGAAGAACTCTAAGAAGATCGAGGAGTTCTCTGGTGCCAACGTGGACAAGCTCCGTAACACCATCATCAAGCTCAAGCTGGCCGGCAGCGGTAGCGGTCACATGCACCACCACCACCACCATTCAAGCGGCGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCAATCGTCCGCTTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCATTCGACGAGGTGTTCAACGCCACCCGTTTCGCCTCTGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGCATCTCCAACTGTGTCGCCGACTACAGCGTGCTGTACAACTTCGCTCCTTTCTTCGCATTCAAGTGTTACGGAGTGTCCCCTACCAAGCTCAACGATTTGTGCTTCACAAACGTGTACGCTGACAGCTTCGTGATCCGTGGTAACGAGGTTTCTCAAATCGCCCCTGGTCAGACAGGTAACATCGCTGACTACAACTACAAGCTCCCAGACGACTTCACTGGCTGTGTTATCGCTTGGAACTCAAACAAGCTGGACTCTAAGGTGGGTGGTAACTACAACTACCGGTACCGTCTGTTCCGCAAGAGCAACCTCAAGCCATTCGAACGTGACATCAGCACAGAGATCTACCAAGCCGGTAACAAGCCCTGCAACGGCGTTGCCGGAGTCAACTGCTACTTCCCCCTCCAGTCCTACGGATTCCGCCCAACCTACGGCGTGGGTCACCAGCCATACCGCGTGGTTGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCACGCCCCCGCTACCGTGTGTGGCCCTAAGAAGAGCACTAACCTCGTTAAGAACAAGTCCGTGAACTTCAACTTCAACGGTCTCTACGAAAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACTCCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCCCTGTCCTCCACAGCTTCCGCTCTGGGCAAGCTGCAGGACGTTGTGAACCAAAACGCTCAGGCCCTGAACACACTGGTGAAGCAACTGAAGAACCACACCAGCCCCGACGTTGACCTGGGTGACATCAGCGGTATCAACGCTAGCGTGGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACAGGCTGAACGAAGTGGCTAAGAACTTGAACGAGAGCCTCATCGACCTGCAGGAACTGTAA

SEQ ID No.26：编码SEQ ID No.14的核苷酸序列(构建BQ.1.1蛋白)

ATGCTGCTGGTGAACCAGAGCCACCAGGGTTTCAACAAGGAACACACTAGCAAGATGGTGTCTGCTATCGTCCTCTACGTGCTGCTCGCCGCCGCTGCTCACTCAGCTTTCGCCGCTGACTCTATCCACATCAAGGACTCCGACGACCTCAAGAACCGTTTGGCCGAAGCCGGCGACAAGCTGGTCGTTATCGACTTCATGGCTACCTGGTGTGGCCCTTGCAAGATGATCGGACCTAAGCTGGACGAAATGGCTAACGAGATGAGCGACAGCATCGTCGTTCTGAAGGTGGACGTCGACGAATGTGAGGACATCGCCACTGAGTACAACATCAACAGCATGCCTACCTTCGTTTTCGTGAAGAACTCTAAGAAGATCGAGGAGTTCTCTGGTGCCAACGTGGACAAGCTCCGTAACACCATCATCAAGCTCAAGCTGGCCGGCAGCGGTAGCGGTCACATGCACCACCACCACCACCATTCAAGCGGCGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCAATCGTCCGCTTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCATTCGACGAGGTGTTCAACGCCACCACTTTCGCCTCTGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGCATCTCCAACTGTGTCGCCGACTACAGCGTGCTGTACAACTTCGCTCCTTTCTTCGCATTCAAGTGTTACGGAGTGTCCCCTACCAAGCTCAACGATTTGTGCTTCACAAACGTGTACGCTGACAGCTTCGTGATCCGTGGTAACGAGGTTTCTCAAATCGCCCCTGGTCAGACAGGTAACATCGCTGACTACAACTACAAGCTCCCAGACGACTTCACTGGCTGTGTTATCGCTTGGAACTCAAACAAGCTGGACTCTACTGTGGGTGGTAACTACAACTACCGGTACCGTCTGTTCCGCAAGAGCAAGCTCAAGCCATTCGAACGTGACATCAGCACAGAGATCTACCAAGCCGGTAACAAGCCCTGCAACGGCGTTGCCGGAGTCAACTGCTACTTCCCCCTCCAGTCCTACGGATTCCGCCCAACCTACGGCGTGGGTCACCAGCCATACCGCGTGGTTGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCACGCCCCCGCTACCGTGTGTGGCCCTAAGAAGAGCACTAACCTCGTTAAGAACAAGTCCGTGAACTTCAACTTCAACGGTCTCTACGAAAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACTCCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCCCTGTCCTCCACAGCTTCCGCTCTGGGCAAGCTGCAGGACGTTGTGAACCAAAACGCTCAGGCCCTGAACACACTGGTGAAGCAACTGAAGAACCACACCAGCCCCGACGTTGACCTGGGTGACATCAGCGGTATCAACGCTAGCGTGGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACAGGCTGAACGAAGTGGCTAAGAACTTGAACGAGAGCCTCATCGACCTGCAGGAACTGTAA

SEQ ID No.27：编码SEQ ID No.15的核苷酸序列(构建XBB.1.5蛋白)

ATGCTGCTGGTGAACCAGAGCCACCAGGGTTTCAACAAGGAACACACTAGCAAGATGGTGTCTGCTATCGTCCTCTACGTGCTGCTCGCCGCCGCTGCTCACTCAGCTTTCGCCGCTGACTCTATCCACATCAAGGACTCCGACGACCTCAAGAACCGTTTGGCCGAAGCCGGCGACAAGCTGGTCGTTATCGACTTCATGGCTACCTGGTGTGGCCCTTGCAAGATGATCGGACCTAAGCTGGACGAAATGGCTAACGAGATGAGCGACAGCATCGTCGTTCTGAAGGTGGACGTCGACGAATGTGAGGACATCGCCACTGAGTACAACATCAACAGCATGCCTACCTTCGTTTTCGTGAAGAACTCTAAGAAGATCGAGGAGTTCTCTGGTGCCAACGTGGACAAGCTCCGTAACACCATCATCAAGCTCAAGCTGGCCGGCAGCGGTAGCGGTCACATGCACCACCACCACCACCATTCAAGCGGCGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCAATCGTCCGCTTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCATTCCACGAGGTGTTCAACGCCACCACTTTCGCCTCTGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGCATCTCCAACTGTGTCGCCGACTACAGCGTGATATACAACTTCGCTCCTTTCTTCGCATTCAAGTGTTACGGAGTGTCCCCTACCAAGCTCAACGATTTGTGCTTCACAAACGTGTACGCTGACAGCTTCGTGATCCGTGGTAACGAGGTTTCTCAAATCGCCCCTGGTCAGACAGGTAACATCGCTGACTACAACTACAAGCTCCCAGACGACTTCACTGGCTGTGTTATCGCTTGGAACTCAAACAAGCTGGACTCTAAGCCGTCTGGTAACTACAACTACCTCTACCGTCTGTTCCGCAAGAGCAAGCTCAAGCCATTCGAACGTGACATCAGCACAGAGATCTACCAAGCCGGTAACAAGCCCTGCAACGGCGTTGCCGGACCTAACTGCTACTCTCCCCTCCAGTCCTACGGATTCCGCCCAACCTACGGCGTGGGTCACCAGCCATACCGCGTGGTTGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCACGCCCCCGCTACCGTGTGTGGCCCTAAGAAGAGCACTAACCTCGTTAAGAACAAGTCCGTGAACTTCAACTTCAACGGTCTCTACGAAAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACTCCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCCCTGTCCTCCACAGCTTCCGCTCTGGGCAAGCTGCAGGACGTTGTGAACCAAAACGCTCAGGCCCTGAACACACTGGTGAAGCAACTGAAGAACCACACCAGCCCCGACGTTGACCTGGGTGACATCAGCGGTATCAACGCTAGCGTGGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACAGGCTGAACGAAGTGGCTAAGAACTTGAACGAGAGCCTCATCGACCTGCAGGAACTGTAA

SEQ ID No.28：编码SEQ ID No.19的核苷酸序列(构建Mu-BA.4/5蛋白)

ATGCTGCTGGTGAACCAGAGCCACCAGGGTTTCAACAAGGAACACACTAGCAAGATGGTGTCTGCTATCGTCCTCTACGTGCTGCTCGCCGCCGCTGCTCACTCAGCTTTCGCCGCTGACTCTATCCACATCAAGGACTCCGACGACCTCAAGAACCGTTTGGCCGAAGCCGGCGACAAGCTGGTCGTTATCGACTTCATGGCTACCTGGTGTGGCCCTTGCAAGATGATCGGACCTAAGCTGGACGAAATGGCTAACGAGATGAGCGACAGCATCGTCGTTCTGAAGGTGGACGTCGACGAATGTGAGGACATCGCCACTGAGTACAACATCAACAGCATGCCTACCTTCGTTTTCGTGAAGAACTCTAAGAAGATCGAGGAGTTCTCTGGTGCCAACGTGGACAAGCTCCGTAACACCATCATCAAGCTCAAGCTGGCCGGCAGCGGTAGCGGTCACATGCACCACCACCACCACCATTCAAGCGGCGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCAATCGTCCGCTTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCATTCGACGAGGTGTTCAACGCCACCCGTTTCGCCTCTGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGCATCTCCAACTGTGTCGCCGACTACAGCGTGCTGTACAACTCAGCTTCATTCTCAGCATTCAAGTGTTACGGAGTGTCCCCTACCAAGCTCAACGATTTGTGCTTCACAAACGTGTACGCTGACAGCTTCGTGATCCGTGGTAACGAGGTTTCTCAAATCGCCCCTGGTCAGACAGGTAACATCGCTGACTACAACTACAAGCTCCCAGACGACTTCACTGGCTGTGTTATCGCTTGGAACTCAAACAAGCTGGACTCTAAGGTGGGTGGTAACTACAACTACCGGTACCGTCTGTTCCGCAAGAGCAACCTCAAGCCATTCGAACGTGACATCAGCACAGAGATCTACCAAGCCGGTAACAAGCCCTGCAACGGCGTTGCCGGAGTCAACTGCTACTTCCCCCTCCAGTCCTACGGATTCCGCCCAACCTACGGCGTGGGTCACCAGCCATACCGCGTGGTTGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCACGCCCCCGCTACCGTGTGTGGCCCTAAGAAGAGCACTAACCTCGTTAAGAACAAGTCCGTGAACTTCAACTTCAACGGTCTCTACGAAAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACTCCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCCCTGTCCTCCACAGCTTCCGCTCTGGGCAAGCTGCAGGACGTTGTGAACCAAAACGCTCAGGCCCTGAACACACTGGTGAAGCAACTGAAGAACCACACCAGCCCCGACGTTGACCTGGGTGACATCAGCGGTATCAACGCTAGCGTGGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACAGGCTGAACGAAGTGGCTAAGAACTTGAACGAGAGCCTCATCGACCTGCAGGAACTGTAA

SEQ ID No.29：编码SEQ ID No.20的核苷酸序列(构建Mu-BQ.1.1蛋白)

ATGCTGCTGGTGAACCAGAGCCACCAGGGTTTCAACAAGGAACACACTAGCAAGATGGTGTCTGCTATCGTCCTCTACGTGCTGCTCGCCGCCGCTGCTCACTCAGCTTTCGCCGCTGACTCTATCCACATCAAGGACTCCGACGACCTCAAGAACCGTTTGGCCGAAGCCGGCGACAAGCTGGTCGTTATCGACTTCATGGCTACCTGGTGTGGCCCTTGCAAGATGATCGGACCTAAGCTGGACGAAATGGCTAACGAGATGAGCGACAGCATCGTCGTTCTGAAGGTGGACGTCGACGAATGTGAGGACATCGCCACTGAGTACAACATCAACAGCATGCCTACCTTCGTTTTCGTGAAGAACTCTAAGAAGATCGAGGAGTTCTCTGGTGCCAACGTGGACAAGCTCCGTAACACCATCATCAAGCTCAAGCTGGCCGGCAGCGGTAGCGGTCACATGCACCACCACCACCACCATTCAAGCGGCGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCAATCGTCCGCTTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCATTCGACGAGGTGTTCAACGCCACCACTTTCGCCTCTGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGCATCTCCAACTGTGTCGCCGACTACAGCGTGCTGTACAACTCCGCTTCTTTCTCCGCATTCAAGTGTTACGGAGTGTCCCCTACCAAGCTCAACGATTTGTGCTTCACAAACGTGTACGCTGACAGCTTCGTGATCCGTGGTAACGAGGTTTCTCAAATCGCCCCTGGTCAGACAGGTAACATCGCTGACTACAACTACAAGCTCCCAGACGACTTCACTGGCTGTGTTATCGCTTGGAACTCAAACAAGCTGGACTCTACTGTGGGTGGTAACTACAACTACCGGTACCGTCTGTTCCGCAAGAGCAAGCTCAAGCCATTCGAACGTGACATCAGCACAGAGATCTACCAAGCCGGTAACAAGCCCTGCAACGGCGTTGCCGGAGTCAACTGCTACTTCCCCCTCCAGTCCTACGGATTCCGCCCAACCTACGGCGTGGGTCACCAGCCATACCGCGTGGTTGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCACGCCCCCGCTACCGTGTGTGGCCCTAAGAAGAGCACTAACCTCGTTAAGAACAAGTCCGTGAACTTCAACTTCAACGGTCTCTACGAAAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACTCCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCCCTGTCCTCCACAGCTTCCGCTCTGGGCAAGCTGCAGGACGTTGTGAACCAAAACGCTCAGGCCCTGAACACACTGGTGAAGCAACTGAAGAACCACACCAGCCCCGACGTTGACCTGGGTGACATCAGCGGTATCAACGCTAGCGTGGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACAGGCTGAACGAAGTGGCTAAGAACTTGAACGAGAGCCTCATCGACCTGCAGGAACTGTAA

SEQ ID No.30：编码SEQ ID No.21的核苷酸序列(构建Mu-XBB.1.5蛋白)

ATGCTGCTGGTGAACCAGAGCCACCAGGGTTTCAACAAGGAACACACTAGCAAGATGGTGTCTGCTATCGTCCTCTACGTGCTGCTCGCCGCCGCTGCTCACTCAGCTTTCGCCGCTGACTCTATCCACATCAAGGACTCCGACGACCTCAAGAACCGTTTGGCCGAAGCCGGCGACAAGCTGGTCGTTATCGACTTCATGGCTACCTGGTGTGGCCCTTGCAAGATGATCGGACCTAAGCTGGACGAAATGGCTAACGAGATGAGCGACAGCATCGTCGTTCTGAAGGTGGACGTCGACGAATGTGAGGACATCGCCACTGAGTACAACATCAACAGCATGCCTACCTTCGTTTTCGTGAAGAACTCTAAGAAGATCGAGGAGTTCTCTGGTGCCAACGTGGACAAGCTCCGTAACACCATCATCAAGCTCAAGCTGGCCGGCAGCGGTAGCGGTCACATGCACCACCACCACCACCATTCAAGCGGCGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCAATCGTCCGCTTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCATTCCACGAGGTGTTCAACGCCACCACTTTCGCCTCTGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGCATCTCCAACTGTGTCGCCGACTACAGCGTGATATACAACTCCGCTTCTTTCTCTGCATTCAAGTGTTACGGAGTGTCCCCTACCAAGCTCAACGATTTGTGCTTCACAAACGTGTACGCTGACAGCTTCGTGATCCGTGGTAACGAGGTTTCTCAAATCGCCCCTGGTCAGACAGGTAACATCGCTGACTACAACTACAAGCTCCCAGACGACTTCACTGGCTGTGTTATCGCTTGGAACTCAAACAAGCTGGACTCTAAGCCGTCTGGTAACTACAACTACCTCTACCGTCTGTTCCGCAAGAGCAAGCTCAAGCCATTCGAACGTGACATCAGCACAGAGATCTACCAAGCCGGTAACAAGCCCTGCAACGGCGTTGCCGGACCTAACTGCTACTCTCCCCTCCAGTCCTACGGATTCCGCCCAACCTACGGCGTGGGTCACCAGCCATACCGCGTGGTTGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCACGCCCCCGCTACCGTGTGTGGCCCTAAGAAGAGCACTAACCTCGTTAAGAACAAGTCCGTGAACTTCAACTTCAACGGTCTCTACGAAAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACTCCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCCCTGTCCTCCACAGCTTCCGCTCTGGGCAAGCTGCAGGACGTTGTGAACCAAAACGCTCAGGCCCTGAACACACTGGTGAAGCAACTGAAGAACCACACCAGCCCCGACGTTGACCTGGGTGACATCAGCGGTATCAACGCTAGCGTGGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACAGGCTGAACGAAGTGGCTAAGAACTTGAACGAGAGCCTCATCGACCTGCAGGAACTGTAA

SEQ ID No.31：Delta蛋白前体氨基酸序列

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAGDKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVFVKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSKPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

基于SARS-CoV-2Delta株进行设计的氨基酸序列，形成的蛋白定义为Delta蛋白，氨基酸序列如SEQ ID No.36所示，该蛋白序列只包括RBD和HR序列，不包括信号肽、Trx、6His标签和EK氨基酸序列。

SEQ ID No.32：编码SEQ ID No.31的核苷酸序列

ATGCTACTAGTAAATCAGTCACACCAAGGCTTCAATAAGGAACACACAAGCAAGATGGTGAGCGCTATCGTGCTGTACGTCCTGCTGGCCGCTGCTGCTCACAGCGCTTTCGCTGCTGACTCCATCCACATCAAGGACAGCGACGACCTGAAGAACCGTCTGGCCGAGGCCGGTGACAAGCTGGTCGTCATCGACTTCATGGCCACTTGGTGCGGTCCTTGCAAGATGATCGGCCCTAAGCTGGACGAGATGGCTAACGAGATGTCCGACAGCATCGTGGTCCTGAAGGTGGACGTCGACGAGTGCGAGGACATCGCCACCGAATACAACATCAACAGCATGCCCACCTTCGTGTTCGTGAAGAACAGCAAGAAGATCGAGGAATTTTCCGGCGCTAACGTCGACAAGCTGCGTAACACCATCATCAAGCTGAAGCTGGCCGGCTCCGGCTCCGGCCACATGCATCACCACCACCACCATTCCTCCGGTGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCTATCGTCAGATTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCTTTCGGAGAGGTGTTCAACGCTACCAGGTTCGCCAGCGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGTATCAGCAACTGCGTCGCCGACTACTCTGTGCTGTACAACTCCGCTAGCTTCTCTACTTTCAAGTGCTACGGCGTGTCACCTACCAAGCTGAACGACCTGTGCTTCACTAACGTCTACGCCGACTCCTTCGTGATCCGCGGAGACGAAGTCCGTCAGATCGCTCCTGGACAGACCGGAAAGATCGCTGACTACAACTACAAGCTGCCAGACGACTTCACTGGCTGCGTGATCGCTTGGAACTCAAACAACCTGGACTCCAAGGTCGGTGGCAACTACAACTACCGGTACAGGCTGTTCAGAAAGTCAAACCTGAAGCCTTTCGAGCGCGACATCTCAACCGAAATCTACCAGGCTGGTTCCAAGCCCTGCAACGGTGTGGAGGGCTTCAACTGCTACTTCCCCCTGCAGTCCTACGGTTTCCAGCCAACCAACGGAGTCGGTTACCAGCCTTACCGTGTGGTCGTGCTGAGCTTCGAACTGCTCCACGCTCCTGCTACTGTGTGCGGTCCCAAGAAGTCTACTAACCTGGTCAAAAACAAAAGCGTCAACTTCAACTTCAACGGTCTGTACGAGAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACAGCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCACTGTCATCCACTGCCTCCGCTCTGGGAAAGCTGCAGGACGTCGTGAACCAGAACGCCCAGGCTCTGAACACCCTGGTCAAGCAGCTGAAGAACCACACCTCTCCTGACGTCGACCTGGGCGACATCAGCGGAATCAACGCTTCTGTCGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACCGCCTGAACGAAGTGGCCAAGAACCTGAACGAATCCCTGATTGACCTCCAAGAACTCTAA

SEQ ID No.33：Delta S抗原的全长氨基酸序列：

MFVFLVLLPLVSSQCVNLRTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSN

VTWFHAIHVSGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASTEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNA

TNVVIKVCEFQFCNDPFLDVYYHKNNKSWMESGVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQG

NFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPINLVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSY

LTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVE

KGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSA

SFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVI

AWNSNNLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSKPCNGVEGFNCYFPLQSY

GFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESN

KKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTE

VPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSR

RRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGD

STECSNLLLQYGSFCTQLNRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKDFGGFNFSQILPD

PSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFNGLTVLPPLLTDEMIA

QYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIG

KIQDSLSSTASALGKLQNVVNQNAQALNTLVKQLSSNFGAISSVLNDILSRLDKVEAEVQID

RLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQS

APHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIIT

TDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVN

IQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSC

CSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.34：Omicron-BA.1S抗原的全长氨基酸序列：

MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHVISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASIEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPIIVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNLAPFFTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVSGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGFNCYFPLRSYSFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLKGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFKGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDIFSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.35：Omicron-BA.1S抗原突变后的全长氨基酸序列：

MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLPPAYTNSFTRGVYYPDKVFRSSVLHSTQDLFLPFFSNVTWFHVISGTNGTKRFDNPVLPFNDGVYFASIEKSNIIRGWIFGTTLDSKTQSLLIVNNATNVVIKVCEFQFCNDPFLDHKNNKSWMESEFRVYSSANNCTFEYVSQPFLMDLEGKQGNFKNLREFVFKNIDGYFKIYSKHTPIIVRDLPQGFSALEPLVDLPIGINITRFQTLLALHRSYLTPGDSSSGWTAGAAAYYVGYLQPRTFLLKYNENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVSGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGFNCYFPLRSYSFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLKGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQGVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEYVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTKSHRRARSVASQSIIAYTMSLGAENSVAYSNNSIAIPTNFTISVTTEILPVSMTKTSVDCTMYICGDSTECSNLLLQYGSFCTQLKRALTGIAVEQDKNTQEVFAQVKQIYKTPPIKYFGGFNFSQILPDPSKPSKRSFIEDLLFNKVTLADAGFIKQYGDCLGDIAARDLICAQKFKGLTVLPPLLTDEMIAQYTSALLAGTITSGWTFGAGAALQIPFAMQMAYRFNGIGVTQNVLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNHNAQALNTLVKQLSSKFGAISSVLNDIFSRLDKVEAEVQIDRLITGRLQSLQTYVTQQLIRAAEIRASANLAATKMSECVLGQSKRVDFCGKGYHLMSFPQSAPHGVVFLHVTYVPAQEKNFTTAPAICHDGKAHFPREGVFVSNGTHWFVTQRNFYEPQIITTDNTFVSGNCDVVIGIVNNTVYDPLQPELDSFKEELDKYFKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQELGKYEQYIKWPWYIWLGFIAGLIAIVMVTIMLCCMTSCCSCLKGCCSCGSCCKFDEDDSEPVLKGVKLHYT

SEQ ID No.36：Delta蛋白氨基酸序列

VQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYRYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSKPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

SEQ ID No.37：RBD

MLLVNQSHQGFNKEHTSKMVSAIVLYVLLAAAAHSAFAADSIHIKDSDDLKNRLAEAG

DKLVVIDFMATWCGPCKMIGPKLDEMANEMSDSIVVLKVDVDECEDIATEYNINSMPTFVF

VKNSKKIEEFSGANVDKLRNTIIKLKLAGSGSGHMHHHHHHSSGDDDDKVQPTESIVRFPN

ITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNLAPFFTFKCYGVSPTKLNDLCFT

NVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVSGNYNYLY

RLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGFNCYFPLRSYSFRPTYGVGHQPYRVVVLSF

ELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGK

LQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLI

DLQEL

SEQ ID No.38：编码SEQ ID No.37的核苷酸序列：

ATGCTGCTGGTGAACCAGAGCCACCAGGGTTTCAACAAGGAACACACTAGCAAGATGGTGTCTGCTATCGTCCTCTACGTGCTGCTCGCCGCCGCTGCTCACTCAGCTTTCGCCGCTGACTCTATCCACATCAAGGACTCCGACGACCTCAAGAACCGTTTGGCCGAAGCCGGCGACAAGCTGGTCGTTATCGACTTCATGGCTACCTGGTGTGGCCCTTGCAAGATGATCGGACCTAAGCTGGACGAAATGGCTAACGAGATGAGCGACAGCATCGTCGTTCTGAAGGTGGACGTCGACGAATGTGAGGACATCGCCACTGAGTACAACATCAACAGCATGCCTACCTTCGTTTTCGTGAAGAACTCTAAGAAGATCGAGGAGTTCTCTGGTGCCAACGTGGACAAGCTCCGTAACACCATCATCAAGCTCAAGCTGGCCGGCAGCGGTAGCGGTCACATGCACCACCACCACCACCATTCAAGCGGCGACGACGACGACAAGGTGCAGCCAACCGAATCAATCGTCCGCTTCCCAAACATCACTAACCTGTGCCCATTCGACGAGGTGTTCAACGCCACCCGTTTCGCCTCTGTCTACGCTTGGAACCGCAAGCGCATCTCCAACTGTGTCGCCGACTACAGCGTGCTGTACAACCTTGCTCCTTTCTTCACCTTCAAGTGTTACGGAGTGTCCCCTACCAAGCTCAACGATTTGTGCTTCACAAACGTGTACGCTGACAGCTTCGTGATCCGTGGTGACGAGGTTCGCCAAATCGCCCCTGGTCAGACAGGTAACATCGCTGACTACAACTACAAGCTCCCAGACGACTTCACTGGCTGTGTTATCGCTTGGAACTCAAACAAGCTGGACTCTAAGGTGTCTGGTAACTACAACTACCTCTACCGTCTGTTCCGCAAGAGCAACCTCAAGCCATTCGAACGTGACATCAGCACAGAGATCTACCAAGCCGGTAACAAGCCCTGCAACGGCGTTGCCGGATTCAACTGCTACTTCCCCCTCCGTTCCTACTCATTCCGCCCAACCTACGGCGTGGGTCACCAGCCATACCGCGTGGTTGTGCTGAGCTTCGAACTGCTGCACGCCCCCGCTACCGTGTGTGGCCCTAAGAAGAGCACTAACCTCGTTAAGAACAAGTCCGTGAACTTCAACTTCAACGGTCTCTACGAAAACCAGAAGCTGATCGCTAACCAGTTCAACTCCGCCATCGGCAAGATCCAGGACTCCCTGTCCTCCACAGCTTCCGCTCTGGGCAAGCTGCAGGACGTTGTGAACCAAAACGCTCAGGCCCTGAACACACTGGTGAAGCAACTGAAGAACCACACCAGCCCCGACGTTGACCTGGGTGACATCAGCGGTATCAACGCTAGCGTGGTGAACATCCAGAAGGAGATCGACAGGCTGAACGAAGTGGCTAAGAACTTGAACGAGAGCCTCATCGACCTGCAGGAACTGTAA

SEQ ID No.39：RBD

VQPTESIVRFPNITNLCPFDEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNLAPFFTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGNIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNKLDSKVSGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGNKPCNGVAGFNCYFPLRSYSFRPTYGVGHQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKSVNFNFNGLYENQKLIANQFNSAIGKIQDSLSSTASALGKLQDVVNQNAQALNTLVKQLKNHTSPDVDLGDISGINASVVNIQKEIDRLNEVAKNLNESLIDLQEL

其中，上述所有氨基酸序列中，S蛋白的HR1和HR2序列是以“LYENQKL”为开端，以“IDLQEL”作为终端的序列段。

有益效果：本发明首先基于SARS-CoV-2变异株Delta、Omicron变异株亚系BA.4/5、BQ.1.1、BA.1、XBB.1.5的S蛋白中的RBD序列或突变的RBD序列与七肽重复区HR1和HR2能自发形成三聚体进行蛋白重组，也基于Delta、BA.4/5、BQ.1.1、BA.1、XBB.1.5的全长S蛋白序列进行蛋白构建，制备出多种重组蛋白，并制成疫苗，用于对抗不同SARS-CoV-2变异株感染。

本发明还将不同的重组蛋白进行组合，添加佐剂，制成二价、三价、四价等多价疫苗，动物实验证明，基于Delta、Omicron变异株亚系BA.4/5、XBB.1.5的RBD序列与七肽重复区HR1、HR2制备的重组蛋白RBD

附图说明

图1为实施例1中pFastBac1-GP67-Trx-His-EK-S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR的设计图；

图2为实施例1中1～3#克隆PCR产物的1％琼脂糖凝胶电泳图；

图3为实施例1中重组bacmid的PCR鉴定1％琼脂糖凝胶电泳图；

图4为实施例1中重组杆状病毒包装及扩增流程图；

图5为实施例1中杆状病毒扩毒过程中的WB验证结果图；

图6为实施例1中杆状病毒感染后上清经Ni-亲和层析洗脱结果图；

图7为实施例1中EK酶切样品验证酶切效果结果图；

图8为实施例1中EK酶切后经Ni-亲和层析填料纯化及SDS-PAGE鉴定图；

图9为实施例3中不同疫苗免疫小鼠血清IgG结果；

图10为实施例4中多种疫苗组合小鼠血清中和抗体结果；

图11为实施例4中RBD

图12为实施例4中RBD

图13为实施例4中分别为1.67μg、10μg的RBD

图14为实施例4中按1:1:4混合的三价苗(RBD

图15为实施例4中不同比例混合的二价苗(RBD

图16为实施例4中单价苗RBD

图17为实施例4中单价苗RBD

图18为实施例5中按1:1:4混合的Tri-Vac小鼠血清真病毒中和抗体结果；

图19为实施例5中按1:1:4混合的Tri-Vac序贯小鼠血清真病毒中和抗体结果；

图20为实施例5中按1:3混合的二价苗(RBD

图21为实施例6中按1:1:4混合的三价苗Tri-Vac不同剂量免疫小鼠后攻毒实验结果；

图22为实施例6中二价苗(RBD

具体实施方式

术语缩写：

单磷酸脂质A(MPL)、鲨烯水包油乳剂(MF59)、重组霍乱毒素(rCTB)、黄芪多糖(APS)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)、胆固醇(Chol)、二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)、(2,3-二油氧基丙基)三甲基氯化铵(DOTAP)、N-[1-(2,3-二油酰氯)丙基]-N,N,N-氯化三甲胺(DOTMA)、阳离子胆固醇(DC-Chol)、三氟乙酸二甲基-2,3-二油烯氧基丙基-2-(2-精胺甲酰氨基)乙基铵(DOSPA)、溴化三甲基十二烷基铵(DTAB)、溴化三甲基十四烷基铵(TTAB)、溴化三甲基十六烷基铵(CTAB)、溴化二甲基双十八烷基铵(DDAB)、CpG ODN(含有非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸为核心序列的核苷酸序列,人工合成的CpG)。

本发明提供了抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白、单价和多价疫苗，主要是针对SARS-CoV-2病毒的S蛋白，特别是通过阻断S蛋白的ACE2受体结合区，诱导体内产生抗体等免疫反应，阻断SARS-CoV-2的S蛋白与宿主细胞ACE2受体的结合，从而帮助宿主抵抗冠状病毒感染，尤其是对SARS-CoV-2或其突变病毒引起的交叉感染有较好的防治效果，例如SARS-CoV-2或Delta变异株，Omicron变异株亚系BA.5、BQ.1.1、XBB.1.5等引起的交叉感染。

下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1用昆虫杆状病毒系统表达制备重组蛋白(以S-RBD

1.S-RBD

因新冠病毒SARS-CoV-2的S蛋白为定位于膜上的蛋白，因此，为了保证模拟其分泌过程，我们在构建新冠病毒S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR蛋白表达构建时，在蛋白的N-端加入了GP67的信号肽序列，以辅助蛋白的分泌表达，这一信号肽将在蛋白分泌的过程中自发被昆虫细胞所切除；同时，我们在GP67信号肽后加入了草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda，S.frugiperda)的硫氧还蛋白(Trx)标签用以辅助S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR折叠，加入了6xhis标签用以帮助后续纯化，加入了EK酶酶切位点，用以切除Trx和6xhis标签。此蛋白表达构建设计，通过EK酶切，将能够移除所有非S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR的冗余氨基酸。该表达构建设计的模式见图1，即GP67-Trx-His-EK-S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR的氨基酸序列如SEQ ID No.15所示，编码SEQ ID No.15的核苷酸序列如SEQID No.27所示。

上述序列的构建是以SARS-CoV-2Omicron突变株XBB.1.5的S蛋白的RBD序列的320-545位为基础，其中第52、54、56位氨基酸分别为F、P、F。

2.重组质粒构建的鉴定

以SEQ ID No.15为编码片段，即XBB.1.5的信号肽-Trx-6His-EK-RBD-HR1-HR2氨基酸序列，将设计的编码片段克隆入pFastBac1载体质粒中，并通过菌液PCR鉴定。菌液PCR鉴定结果显示，所挑选的3个克隆中，2#、3#克隆成功扩出GP67-Trx-His-EK-S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR片段，见图2。

3.重组bacmid的鉴定

选择鉴定正确的pFastBac1-GP67-Trx-His-EK-S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR重组克隆，提取重组质粒后，转化DH10B感受态细胞，并进行蓝白斑菌液PCR鉴定。菌液PCR产物经过1％琼脂糖凝胶电泳检测，鉴定结果见图3。白斑为发生重组的bacmid克隆，蓝斑为未发生重组的bacmid克隆。

4.重组杆状病毒的包装

将重组bacmid转染入sf9昆虫细胞中，5天后收获P0代重组杆状病毒。重组杆状病毒包装及杆状病毒扩增流程图见图4。

5.目的蛋白的表达验证

在上述杆状病毒的扩增过程中，同时伴随着目的蛋白的表达。而目的蛋白切除标签前，含有His标签，因此我们用Anti-His的WB实验，验证重组蛋白的表达情况。验证结果显示，在40KD～55KD Marker条带间均观察到一条明显的条带，大小与Trx-His-EK-S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR蛋白大小吻合，表明杆状病毒扩增成功，目的蛋白也能够成功表达。检测结果见图5。

6.目的蛋白的纯化鉴定

以P0代重组杆状病毒感染sf9细胞，3天后收获细胞培养液，并通过Ni-亲和层析填料进行蛋白纯化的验证工作。结果见图6。目的蛋白主要在40mM和250mM咪唑下被洗脱，洗脱后可得到高纯度的目的蛋白。

7.EK酶切切除标签的验证

将目的蛋白洗脱液浓缩，并调整浓度为1mg/mL，加入EK酶，18℃酶切14h后，通过SDS-PAGE凝胶电泳鉴定。结果见图7。显示EK酶能够将Trx-His-EK(EK酶切位点的氨基酸序列)标签从目的蛋白上切除。

8.切除的标签的去除验证

将EK酶切之后的样品，使用Ni-亲和层析填料反挂10min，样品流穿后，再使用250mM咪唑洗脱。将Trx-His-EK-S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR蛋白(未切开的完整蛋白)、S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR蛋白和被切下的Trx-His-EK标签分离开。结果见图8。结果显示，Trx-His-EK标签切除后，能够通过Ni-亲和层析填料反挂后续纯化手段去除，由此获得不含任何标签的S-RBD(Omicron_XBB.1.5)-HR蛋白，定义为重组蛋白RBD

同样地，参照上述重组蛋白RBD

构建重组蛋白RBD

构建重组蛋白RBD

构建重组蛋白RBD

构建重组蛋白RBD

构建重组蛋白RBD

同理，构建重组蛋白RBD

通过上述方法，申请人共成功表达构建重组蛋白RBD

实施例2动物准备、小鼠免疫和样品收集

1、单价苗免疫程序：6-8周龄的雌性NIH小鼠购买自维通利华公司，小鼠饲养在四川大学生物治疗国家重点实验室的无特殊病原体的环境中。将重组蛋白与常规剂量的佐剂混合，于小鼠第0、14、28天肌肉免疫三次，10μg蛋白/只/次小鼠，三免后7天取血检测中和抗体，评价疫苗的免疫效果。

2、二价苗免疫程序：6-8周龄的雌性NIH小鼠购买自维通利华公司，小鼠饲养在四川大学生物治疗国家重点实验室的无特殊病原体的环境中。将两种不同重组蛋白按一定比例混合后与常规剂量的佐剂混合，于小鼠第0、14、28天肌肉免疫三次，10μg蛋白/只/次小鼠，三免后7天取血检测中和抗体，评价疫苗的免疫效果。

3、三价苗基础免疫程序：6-8周龄的雌性NIH小鼠购买自维通利华公司，小鼠饲养在四川大学生物治疗国家重点实验室的无特殊病原体的环境中。将三种不同重组蛋白按一定比例混合后与常规剂量佐剂混合，于小鼠第0、14、28天肌肉免疫三次，10μg蛋白/只/次小鼠，三免后7天取血检测中和抗体，评价疫苗的免疫效果。其中RBD

4、四价苗基础免疫程序：6-8周龄的雌性NIH小鼠购买自维通利华公司，小鼠饲养在四川大学生物治疗国家重点实验室的无特殊病原体的环境中。将四种不同重组蛋白按一定比例混合后与常规剂量的佐剂混合，于小鼠第0、14、28天肌肉免疫三次，10μg蛋白/只/次小鼠，三免后7天取血检测中和抗体，评价疫苗的免疫效果。

5、序贯免疫程序：6-8周龄的雌性NIH小鼠购买自维通利华公司，小鼠饲养在四川大学生物治疗国家重点实验室的无特殊病原体的环境中。第0、14、42天三次肌肉免疫灭活疫苗(中国医药集团有限公司生产)25U/只，于末次免疫后分别进行灭活苗、重组蛋白疫苗序贯加强，肌肉注射，免疫剂量为10μg/只，加强后14天采集血清检测假病毒中和抗体。

实施例3酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体

为了检测抗新型冠状病毒RBD特异性IgG和IgA，96孔板(NUNC-MaxiSorp，ThermoFisher Scientific)在碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液中涂覆1μg/mL重组RBD蛋白，在4℃过夜。第二天，用含有0.1％吐温-20(PBST)的1×PBS洗涤平板三次，然后用含有1％BSA的PBST在室温下封闭1小时。将连续稀释的血清、气管-肺洗液或稀释缓冲液中的鼻拭子加入孔中(100μl/孔)。在37℃孵育1小时后，将平板洗涤三次，然后加入稀释的辣根过氧化物酶(HRP)缀合的山羊-抗小鼠IgG(1:10000，southern biotech，Cat：0107-05)、HRP-缀合的山羊-抗小鼠IgA(1:5000)、HRP-缀合的山羊-抗兔IgG、HRP-缀合的山羊-抗兔IgG、HRP-缀合的山羊-抗人IgG(southern biotech，Cat：62-8420)或HRP-缀合的山羊-抗人IgA(southern biotech，Cat：2050-05)。然后，在37℃孵育1小时，进一步洗涤平板三次，并在室温下用3,3’,5,5’-四甲基联苯二胺(TMB)显影10分钟。用1M H

结果如图9所示，在完成三针免疫后，单价的RBD

实施例4新型冠状病毒假病毒中和试验

为了检测血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)样品中中和抗体的滴度，如前所述进行假病毒中和试验。表达荧光素酶的假病毒，包括原型、δ和Omicron亚系(BA.2.75、BA.5、BF.7、BQ.1、BQ.1.1、XBB、XBB.1.5和XBB.1.16等)，购自Genomeditech公司。

简言之，将灭活的血清和BALF样本(56℃30分钟)稀释三倍，范围为30-65610，然后与等体积不同稀释度的假病毒在37℃孵育1小时。然后，在每个孔中加入1.2×10

中和度(％)＝(阳性样本-待测样本/阳性样本-阴性样本)×100％

以RBD

以RBD

以RBD

为了验证Tri-Vac(1：1：4比例)的序贯免疫效果，首先在第0、14、42天三次肌肉免疫灭活疫苗(中国医药集团有限公司生产)25U/只，于末次免疫后70天分别进行灭活苗加强和重组蛋白疫苗序贯加强，肌肉注射，免疫剂量为10μg/只，加强后14天采集血清检测假病毒中和抗体。如图14所示，同源加强免疫仅对WT、Delta变异病毒能提供保护作用，对Omicron变异株病毒，特别是近期流行的XBB及其亚型变异株病毒，则不具有保护作用或者保护作用很弱；而使用1:1:4混合的Tri-Vac三价苗则对所有的新冠病毒具有广谱的保护效力，中和抗体达到1000以上。

同样，不同比例组成的二价苗(RBD

如图16和17所示，按照免疫程序：NIH小鼠，0、14、42天三次肌肉免疫灭活疫苗25U/只，于末次免疫后84天分别进行灭活苗、RBD

实施例5新型冠状病毒真病毒中和试验

通过真实的病毒中和试验进行来自三价苗Tri-Vac(按1:1:4混合)序贯小鼠血清样品中针对活的突变新型冠状病毒的中和抗体。将每组的稀释血清以50％的组织培养感染剂量(TCID50)与活新型冠状病毒混合。37℃孵育1小时后，将混合物加入覆盖有Vero E6细胞(5×10

第0、14、28天三次肌肉免疫三剂低剂量或高剂量的Tri-Vac疫苗(混合比例为1:1:4)，三免后7天取血，检测血清中针对活病毒的中和能力，结果如图18所示，三价苗免疫小鼠血清对Delta、BA.2、BA.5.2.48和XBB.1.16活病毒的中和能力，显著强于对照组，特别是近期流行株XBB.1.16的中和抗体滴度达到1000以上，且高剂量组高于低剂量，呈现剂量依赖性。

第0、14、42天三次肌肉免疫灭活疫苗25U/只，于末次免疫后84天分别进行灭活苗、Tri-Vac(按1:1:4比例混合)序贯加强，肌肉注射，免疫剂量为10μg/只，加强后14天采集血清检测真病毒中和抗体。结果显示如图19所示，三价苗Tri-Vac序贯血清对Delta、BA.2.75、BA.5.2.48和XBB.1.16活病毒的中和能力，显著强于灭活苗序贯，特别是近期流行株XBB.1.16的中和抗体滴度达到1000以上。

于0、14、42天免疫灭活苗三次，128天序贯免疫灭活疫苗或二价苗(RBD

实施例6新型冠状病毒XBB.1.16变异体的攻击

在第0、28和56天，用低剂量(5μg)和高剂量(10μg)的三价苗Tri-Vac(按1:1:4比例混合)肌肉免疫小鼠BALB/c小鼠。用单独佐剂免疫的小鼠作为对照，每组n＝6只小鼠。然后在最后一次疫苗接种后的第21天，用活的新型冠状病毒XBB.1.16奥密克戎突变体(1×10

如图21所示，病毒感染后，按1:1:4混合的三价苗Tri-Vac组小鼠体重变化显著弱于佐剂对照组小鼠体重；三价苗Tri-Vac治疗组小鼠，咽拭子病毒基本被清除干净，鼻甲、气管和肺组织中的病毒RNA均未检测到，肺组织学正常，肺泡结构完整，没有明显炎症；而佐剂对照组，咽拭子样本仍有较多的病毒载量，鼻甲、气管和肺组织中的病毒RNA水平较高，病理切片可观察到严重的病理变化，包括多灶性实变区和肺泡间隔增厚和肺泡充血；此外，在小血管附近偶尔观察到由巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞组成的小块炎症。显示出按1:1:4混合的三价苗Tri-Vac对XBB.1.16奥密克戎变异株的感染具有完全的保护作用，且安全性很好。

如图22所示，按1:3混合的二价苗(RBD