一种天然产物衍生物、酪氨酸酶抑制活性和在美白方面的应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，涉及化妆品添加剂的研发和应用，具体涉及一种天然产物衍生物、酪氨酸酶抑制活性和在美白方面的应用。

背景技术

黑色素是动植物中均含有的一种生物色素，由黑色素细胞生成并储存，黑色素的含量及分布影响了皮肤颜色，当皮肤受到紫外线强烈照射时，紫外线诱导可产生氧自由基，促进酪氨酸酶表达，刺激局部皮肤生成黑色素，从而导致皮肤色素沉着。

酪氨酸酶是一种氧化还原酶，广泛存在于植物和动物体中，是生物体合成黑色素的关键酶。黑色素的生物合成是由酪氨酸酶催化体内L-酪氨酸(L-Tyr)生成多巴，多巴经过进一步氧化生成多巴醌，多巴醌再经过一系列的化学反应，最后生成黑色素的过程，研究表明，酪氨酸酶的活性与黑色素合成量相关，控制其活力即可控制黑色素生成量，抑制酪氨酸酶活性可以减少皮肤黑色素的生成，具有良好的美白功效。

随着社会经济的飞速发展，人们对于美的追求也愈演愈烈，而且越来越多的消费者倾向于购买含有天然产物活性成分的化妆品，认为对皮肤友好、安全、无刺激。

厚朴在我国具有两千多年的药用历史，最早文字记载出自《神农本草经》，具有消除腹胀、散湿退热、治疗气逆喘咳、活血化瘀等功效。研究表明，厚朴中主要活性成分为厚朴酚与和厚朴酚。既往研究表明厚朴中的厚朴酚与和厚朴酚具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗龋齿、抗皮肤光老化、抗过敏等功效。

厚朴酚(magnolol)与和厚朴酚(honokiol)为一对同分异构体，化学结构如下。虽然二者化学结构仅仅是取代基位置的变化，但是二者在美白活性上却是天壤之别。

田玉花在硕士学位论文(筛选的天然植物中酪氨酸酶抑制、肝保护有效成分的研究，2005)中详细比较了magnolol与honokiol对酪氨酸酶的抑制效果，结果发现honokiol具有一定的酪氨酸酶抑制活性(IC50＝67.9μM)，而magnolol没有酪氨酸酶抑制活性(IC50＞300μM)。

刘冬等在发表的期刊论文(厚朴在化妆品领域的应用研究进展，广州化工，2023)中记载“有研究表明，0.01％的厚朴酚对酪氨酸酶抑制率为64.2％，因此和厚朴酚具有一定的美白作用。田玉花也有类似的发现。”我们通过三点可以确定刘冬的表述“0.01％的厚朴酚对酪氨酸酶抑制率为64.2％”存在错误：第一，其针对该数据引用的文献(曾鸣等，皮类药用植物美容护肤功效的研究进展，中国美容医学，2016)通篇没有记载类似结论；第二，“因此和厚朴酚具有一定的美白作用”证明其前面实际想表述的是“0.01％的和厚朴酚对酪氨酸酶抑制率为64.2％”；第三，“田玉花也有类似的发现”进一步证明刘冬想表述的是“0.01％的和厚朴酚对酪氨酸酶抑制率为64.2％”，因为田玉花的硕士学位论文研究发现的是和厚朴酚有酪氨酸酶抑制活性而厚朴酚没有酪氨酸酶抑制活性。

综合现有技术，厚朴酚不同于其同分异构体和厚朴酚，厚朴酚对酪氨酸酶没有抑制活性。但是，厚朴酚的自然资源很丰富，开发利用价值很高。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的不足，提供一种天然产物厚朴酚的衍生物、酪氨酸酶抑制活性和在美白方面的应用。

为了实现上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

本发明提供一种天然产物衍生物，为厚朴酚衍生物，化学结构如下：

本发明提供一种上述厚朴酚衍生物用于制备酪氨酸酶抑制剂的用途。

本发明提供一种上述厚朴酚衍生物用于制备抑制酪氨酸酶活性而实现美白的化妆品的用途，所述化妆品包括面膜、面霜、精华液和眼霜。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、本发明提供了一种结构新颖的天然产物衍生物，为一种厚朴酚衍生物；

2、本发明提供的厚朴酚衍生物对酪氨酸酶具有非常明显的抑制活性，这种活性是其先导化合物厚朴酚所不具有的；

3、酪氨酸酶的活性与黑色素合成量相关，控制其活力即可控制黑色素生成量，抑制酪氨酸酶活性可以减少皮肤黑色素的生成，具有良好的美白功效；基于本发明厚朴酚衍生物对酪氨酸酶的优异抑制活性，其具有开发制备美白化妆品的应用的前景。

附图说明

图1为厚朴酚衍生物A的合成路线及碳原子编号。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

以下通过参考示范性实施例，本发明的目的和功能以及用于实现这些目的和功能的方法将得以阐明。然而，本发明并不受限于以下所公开的示范性实施例，可以通过不同形式来对其加以实现。以下实施例的实质仅是帮助相关领域技术人员综合理解本发明的具体细节。

实施例1：厚朴酚衍生物A的合成

合成路线如下：

先称取厚朴酚2.66g用二氯甲烷(DCM)50mL溶解，然后加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)1g、N,N’-二环已基碳二亚胺(DCC)2.5g于室温反应20分钟，再加入4-氯苯甲酸1.56g于室温反应5h，加入DCM稀释终止反应，用5％盐酸萃取3次，用饱和碳酸氢钠萃取3次，有机层用无水Na

HRMS(ESI):m/z[M-H]

实施例2：酪氨酸酶抑制活性

一、实验材料

厚朴酚购自MCE，目录号：HY-N0163，纯度99.92％。

厚朴酚衍生物A按照实施例1方法制备。

其它试剂均为市售途径购买的常规试剂，按照说明书规定的条件和方法储存和使用。

二、实验方法

1、测定方法

参考Ladawan等方法(Preparationofsquidskincollagenhydrolysateasanantihyaluronidase,antityrosinase,andantioxidantagent[J].Preparativebiochemistry&biotechnology,2016)测定厚朴酚及其衍生物对酪氨酸酶的抑制活性。具体步骤为：配制50mmol/LpH＝6.8的磷酸盐缓冲液作为反应体系的溶剂；在96孔板中将10μL不同浓度的待测样品用40μL50mmol/LpH＝6.8的磷酸盐缓冲液和70μL100U/mL的酪氨酸酶稀释，37℃条件孵育10min，加入80μLL-Dopa(2mmol/L)，37℃下继续反应30min，测定λ＝490nm处吸光值。根据公式计算酪氨酸酶抑制率：抑制率(％)＝抑制率＝[1－(A

2、统计学分析

统计分析采用SPSS17.0软件，结果用均数±标准差表示，两组间比较采用t检验，P<0.05为差异有显著性。

三、实验结果

测试浓度下厚朴酚、厚朴酚衍生物A对酪氨酸酶的抑制率如表1所示。

表1酪氨酸酶抑制率(％)

从表1结果可以看出，测试浓度范围内厚朴酚无明显的酪氨酸酶抑制活性，而厚朴酚衍生物A则表现出明显的酪氨酸酶抑制活性。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。