一种自体脂肪干细胞制剂制备工艺

技术领域

本发明涉及脂肪干细胞制剂制备领域，更具体地说，涉及一种自体脂肪干细胞制剂制备工艺。

背景技术

细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”,区别于功能固定的成体细胞，可以神奇地变为人体的每一种细胞，补充其所需，干细胞是各种组织细胞更新换代的种子细胞，是人体细胞的生产厂。脂肪干细胞具有原材料丰富，取材方便，细胞增殖性好、可自体移植、免疫原性低等优点。

现有技术的脂肪干细胞制剂在制备好后，保存效果不佳，冷气易发生外泄，不能有效的使冷冻时间更久，容易使脂肪干细胞制剂发生损坏，影响其使用，为此，我们提出一种自体脂肪干细胞制剂制备工艺。

发明内容

1.要解决的技术问题

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种自体脂肪干细胞制剂制备工艺，它可以实现在储藏箱内放置固定好后装有试剂的试剂管后，通过吸风扇将制冷器产生的冷气进行吸取，使其导入到送风筒内，并经送风筒进入到送风孔在导冷套的传导下进入到储藏箱内，而在送风过程中，冷气从大端口面处进入到小端口面，被压缩，温度进一步被降低，使储藏箱内温度降低，使试剂处于冷冻的环境下进行保存，且挤压球挤压T形杆带动撑动球将绝磁套撑开，使两个磁石之间的磁性不被绝磁粉末隔绝，产生相斥，推动活塞运动，挤压直筒内的空气带动伸缩气囊鼓起，使密封垫与盖板和冷存箱体的连接处紧密接触，防止冷气外泄，增强保存效果。

2.技术方案

为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。

一种自体脂肪干细胞制剂制备工艺，包括以下步骤：

S1、采集人脂肪组织，保持温度在37℃下，将其放置到混合胶原酶中均匀震荡消化30分钟，随后加入消化液均匀震荡消化12分钟左右，结束后加入胰蛋白酶抑制剂混合均匀终止消化，并用生理盐水进行清洗；

S2、接着，通过离心法使其离心转动10分钟左右后，吸弃上层混合液，用PBS清洗底层细胞，并进行过滤，随后将滤液离心转动10分钟左右，吸弃上清液，得到脂肪干细胞；

S3、然后将白蛋白、透明质酸与生理盐水混合后，重悬脂肪干细胞，获得脂肪干细胞制剂，并通过冷存装置对其进行保存。

进一步的，所述S3中的冷存装置包括冷存箱体，所述冷存箱体的上端转动连接有盖板，所述冷存箱体内固定连接有储藏箱，所述储藏箱内固定连接有放置座，所述放置座内开凿有多个均匀分布的放置槽，所述放置槽内放置有试剂管，所述放置槽与试剂管之间填充有保温棉，所述试剂管的上端设置有密封塞，所述冷存箱体的左右两端内壁均安装有制冷器，所述储藏箱的左右两端均固定连接有送风筒，所述储藏箱的左右两端均开凿有送风孔，所述送风筒与送风孔相连通，所述送风孔内安装有导冷套，所述导冷套内填充有导冷粒子，所述送风筒内安装有吸风扇，可以实现打开盖板，将装有试剂的试剂管放置到放置槽内，并盖上盖板，接着启动制冷器，制造冷气，使其内部温度降低，而吸风扇将冷气吸入到送风筒，再经过送风筒进入到送风孔内，而冷气从送风筒进入到送风孔内，是从大端口面进入到小端口面内，使其被压缩，流通速度变快，并通过导冷套内的导冷粒子传导下快速流出，流出后迅速膨胀，使热能转换成动能，进一步降低温度，冷气流入到储藏箱内，使其内部的温度降低，使脂肪干细胞试剂处于冷冻的环境下，且保温棉可有效的防止试剂管上的冷气流走，起到隔温的效果。

进一步的，所述盖板的下端固定连接有多个均匀分布的压杆，所述压杆的下端为弧形设置，所述储藏箱的上端开凿有多个均匀分布的通口，所述压杆的下端穿过通口，并延伸至其内部，所述压杆的下端固定连接有多个均匀分布的缓冲球，所述缓冲球内填充有气体，且气体的填充度为100％，所述压杆的下侧设置有弧形板，所述弧形板与多个缓冲球固定连接，所述弧形板的下端与密封塞的上端紧密接触，通过压杆和弧形板对密封塞的压持固定，可以有效的固定住试剂管，使其不易发生偏移，且缓冲球利用气体吸震减压的作用，起到缓冲的作用，避免试剂管发生损坏。

进一步的，所述盖板的外端固定连接有连接板，且连接板的下端固定连接有粗管，所述粗管内固定连接有直筒，所述直筒内滑动连接有活塞，所述粗管上嵌设有伸缩气囊，所述伸缩气囊与直筒固定连接，且伸缩气囊与直筒的内部相连通，所述伸缩气囊远离粗管的一端固定连接有密封垫，且密封垫与盖板和冷存箱体的连接处紧密接触，所述粗管的内侧壁和活塞远离伸缩气囊的一端均固定连接有磁石，两个所述磁石的之间设置有绝磁套，所述绝磁套内填充有绝磁粉末，所述绝磁粉末的填充度为100％，所述绝磁套与直筒的内侧壁固定连接，所述绝磁套的上端和下端均为圆形设置，所述绝磁套内设置有撑动球，所述粗管的下侧设置有T形杆，所述直筒和绝磁套的下端均开凿有与其相匹配的开孔，所述T形杆的上端穿过开孔与撑动球下端固定连接，所述冷存箱体的外端固定连接有横杆，且横杆远离冷存箱体的一端固定连接有挤压球，当盖上盖板时，T形杆与挤压球相接触并受到挤压，挤动T形杆向上运动，带动撑动球向上运动，将绝磁套撑开，而绝磁套内绝磁粉末初始状态为100％，可以有效隔绝两个磁石之间的磁性影响，随着绝磁套被撑开，绝磁粉末已经不能有效的隔绝两个磁石之间的磁性，通过两个磁石的相斥影响，推动活塞向直筒内运动，使伸缩气囊鼓起，挤压密封垫与盖板和冷存箱体的连接处紧密接触，防止冷气外泄。

进一步的，所述盖板的上端固定连接有把手，所述把手上套设有防滑套，所述防滑套上开凿有防滑纹，通过把手的设置，方便制备人员手提冷存箱体进行移动，防滑套配合防滑纹的设置，起到防滑的作用，使冷存箱体不易脱落，发生损坏。

进一步的，所述储藏箱的外端套接有隔温圈，所述隔温圈内设置有岩棉纤维，通过隔温圈包裹住储藏箱，配合岩棉纤维起到隔温的作用，使冷气不易外泄。

进一步的，所述开孔的内壁固定连接有密封圈，所述密封圈的内壁与T形杆的外端紧密接触，密封圈的设置，可以有效的防止绝磁粉末经过开孔处漏出。

进一步的，两个所述磁石均为S极设置，两个磁石同性设置，可以产生相互排斥的力，推动活塞进行运动。

进一步的，所述绝磁粉末采用Fe-Ni合金粉末材质制成，且Ni的含量为80％，通过使用Fe-Ni合金粉末制成的绝磁粉末可以有效的隔绝两个磁石之间的磁性影响。

3.有益效果

相比于现有技术，本发明的优点在于：

本方案可以实现在储藏箱内放置固定好后装有试剂的试剂管后，通过吸风扇将制冷器产生的冷气进行吸取，使其导入到送风筒内，并经送风筒进入到送风孔在导冷套的传导下进入到储藏箱内，而在送风过程中，冷气从大端口面处进入到小端口面，被压缩，温度进一步被降低，使储藏箱内温度降低，使试剂处于冷冻的环境下进行保存，且挤压球挤压T形杆带动撑动球将绝磁套撑开，使两个磁石之间的磁性不被绝磁粉末隔绝，产生相斥，推动活塞运动，挤压直筒内的空气带动伸缩气囊鼓起，使密封垫与盖板和冷存箱体的连接处紧密接触，防止冷气外泄，增强保存效果。

附图说明

图1为本发明的制备工艺流程图；

图2为本发明中冷存装置的整体结构示意图

图3为本发明中隔温圈的剖面结构示意图；

图4为本发明中绝磁套初始状态下的结构示意图；

图5为图2中A处放大的结构示意图；

图6为图2中B处放大的结构示意图；

图7为图2中C处放大的结构示意图。

图中标号说明：

1、冷存箱体；2、盖板；3、储藏箱；4、放置座；5、保温棉；6、试剂管；7、密封塞；8、制冷器；9、送风筒；10、吸风扇；11、送风孔；12、导冷套；13、压杆；14、缓冲球；15、弧形板；16、隔温圈；17、把手；18、连接板；19、粗管；20、直筒；21、活塞；22、伸缩气囊；23、磁石；24、绝磁套；25、撑动球；26、T形杆；27、挤压球；28、密封垫。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图；对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然；所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例；而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例；本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例；都属于本发明保护的范围。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”、“顶/底端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“套设/接”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

实施例：

请参阅图1，一种自体脂肪干细胞制剂制备工艺，包括以下步骤：

S1、采集人脂肪组织，保持温度在37℃下，将其放置到混合胶原酶中均匀震荡消化30分钟，随后加入消化液均匀震荡消化12分钟左右，结束后加入胰蛋白酶抑制剂混合均匀终止消化，并用生理盐水进行清洗；

S2、接着，通过离心法使其离心转动10分钟左右后，吸弃上层混合液，用PBS清洗底层细胞，并进行过滤，随后将滤液离心转动10分钟左右，吸弃上清液，得到脂肪干细胞；

S3、然后将白蛋白、透明质酸与生理盐水混合后，重悬脂肪干细胞，获得脂肪干细胞制剂，并通过冷存装置对其进行保存。

请参阅图2-5，S3中的冷存装置包括冷存箱体1，冷存箱体1的上端转动连接有盖板2，盖板2的上端固定连接有把手17，把手17上套设有防滑套，防滑套上开凿有防滑纹，冷存箱体1内固定连接有储藏箱3，储藏箱3内固定连接有放置座4，放置座4内开凿有多个均匀分布的放置槽，放置槽内放置有试剂管6，放置槽与试剂管6之间填充有保温棉5，试剂管6的上端设置有密封塞7，冷存箱体1的左右两端内壁均安装有制冷器8，储藏箱3的左右两端均固定连接有送风筒9，储藏箱3的左右两端均开凿有送风孔11，送风筒9与送风孔11相连通，送风孔11内安装有导冷套12，导冷套12内填充有导冷粒子，送风筒9内安装有吸风扇10，储藏箱3的外端套接有隔温圈16，隔温圈16内设置有岩棉纤维，可以实现打开盖板2，将装有试剂的试剂管6放置到放置槽内，并盖上盖板2，接着启动制冷器8，制造冷气，使其内部温度降低，而吸风扇10将冷气吸入到送风筒9，再经过送风筒9进入到送风孔11内，而冷气从送风筒9进入到送风孔11内，是从大端口面进入到小端口面内，使其被压缩，流通速度变快，并通过导冷套12内的导冷粒子传导下快速流出，流出后迅速膨胀，使热能转换成动能，进一步降低温度，冷气流入到储藏箱3内，使其内部的温度降低，使脂肪干细胞试剂处于冷冻的环境下，且保温棉5可有效的防止试剂管6上的冷气流走，且通过隔温圈16包裹住储藏箱3，配合岩棉纤维起到隔温的作用，使冷气不易外泄，通过把手17的设置，方便制备人员手提冷存箱体1进行移动，防滑套配合防滑纹的设置，起到防滑的作用，使冷存箱体1不易脱落，发生损坏。

请参阅图2和图6，盖板2的下端固定连接有多个均匀分布的压杆13，压杆13的下端为弧形设置，储藏箱3的上端开凿有多个均匀分布的通口，压杆13的下端穿过通口，并延伸至其内部，压杆13的下端固定连接有多个均匀分布的缓冲球14，缓冲球14内填充有气体，且气体的填充度为100％，压杆13的下侧设置有弧形板15，弧形板15与多个缓冲球14固定连接，弧形板15的下端与密封塞7的上端紧密接触，通过压杆13和弧形板15对密封塞7的压持固定，可以有效的固定住试剂管6，使其不易发生偏移，且缓冲球14利用气体吸震减压的作用，起到缓冲的作用，避免试剂管6发生损坏。

请参阅图4和图7，盖板2的外端固定连接有连接板18，且连接板18的下端固定连接有粗管19，粗管19内固定连接有直筒20，直筒20内滑动连接有活塞21，粗管19上嵌设有伸缩气囊22，伸缩气囊22与直筒20固定连接，且伸缩气囊22与直筒20的内部相连通，伸缩气囊22远离粗管19的一端固定连接有密封垫28，且密封垫28与盖板2和冷存箱体1的连接处紧密接触，粗管19的内侧壁和活塞21远离伸缩气囊22的一端均固定连接有磁石23，两个磁石23均为S极设置，两个磁石23的之间设置有绝磁套24，绝磁套24内填充有绝磁粉末，绝磁粉末的填充度为100％，绝磁粉末采用Fe-Ni合金粉末材质制成，且Ni的含量为80％，绝磁套24与直筒20的内侧壁固定连接，绝磁套24的上端和下端均为圆形设置，绝磁套24内设置有撑动球25，粗管19的下侧设置有T形杆26，直筒20和绝磁套24的下端均开凿有与其相匹配的开孔，T形杆26的上端穿过开孔与撑动球25下端固定连接，冷存箱体1的外端固定连接有横杆，且横杆远离冷存箱体1的一端固定连接有挤压球27，开孔的内壁固定连接有密封圈，密封圈的内壁与T形杆26的外端紧密接触，当盖上盖板2时，T形杆26与挤压球27相接触并受到挤压，挤动T形杆26向上运动，带动撑动球25向上运动，将绝磁套24撑开，而绝磁套24内Fe-Ni合金粉末制成的绝磁粉末初始状态为100％，可以有效隔绝两个磁石23之间的磁性影响，随着绝磁套24被撑开，绝磁粉末已经不能有效的隔绝两个磁石23之间的磁性，密封圈的设置，可以有效的防止绝磁粉末经过开孔处漏出，通过两个磁石23的同性相斥影响，推动活塞21向直筒20内运动，使伸缩气囊22鼓起，挤压密封垫28与盖板2和冷存箱体1的连接处紧密接触，防止冷气外泄。

在本发明中，相关的技术人员在使用该装置时，首先通过把手17打开盖板2，将装有试剂的试剂管6放置到放置槽内，并盖上盖板2，通过压杆13和弧形板15对密封塞7的压持固定，可以有效的固定住试剂管6，使其不易发生偏移，且缓冲球14利用气体吸震减压的作用，起到缓冲的作用，避免试剂管6发生损坏，接着启动制冷器8，制造冷气，使其内部温度降低，而吸风扇10将冷气吸入到送风筒9，再经过送风筒9进入到送风孔11内，而冷气从送风筒9进入到送风孔11内，是从大端口面进入到小端口面内，使其被压缩，流通速度变快，并通过导冷套12内的导冷粒子传导下快速流出，流出后迅速膨胀，使热能转换成动能，进一步降低温度，冷气流入到储藏箱3内，使其内部的温度降低，使脂肪干细胞试剂处于冷冻的环境下，且保温棉5可有效的防止试剂管6上的冷气流走，且通过隔温圈16包裹住储藏箱3，配合岩棉纤维起到隔温的作用，使冷气不易外泄，当盖上盖板2时，T形杆26与挤压球27相接触并受到挤压，挤动T形杆26向上运动，带动撑动球25向上运动，将绝磁套24撑开，而绝磁套24内Fe-Ni合金粉末制成的绝磁粉末初始状态为100％，可以有效隔绝两个磁石23之间的磁性影响，随着绝磁套24被撑开，绝磁粉末已经不能有效的隔绝两个磁石23之间的磁性，密封圈的设置，可以有效的防止绝磁粉末经过开孔处漏出，通过两个磁石23的同性相斥影响，推动活塞21向直筒20内运动，使伸缩气囊22鼓起，挤压密封垫28与盖板2和冷存箱体1的连接处紧密接触，防止冷气外泄。

以上所述；仅为本发明较佳的具体实施方式；但本发明的保护范围并不局限于此；任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内；根据本发明的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变；都应涵盖在本发明的保护范围内。