一种作为EGFR激酶抑制剂的氘代芳基磷氧化合物及其应用

技术领域

本申请涉及一种化合物及其医药应用，具体涉及一种作为EGFR激酶抑制剂的氘代芳基磷氧化合物及其应用。

背景技术

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，全球每年新发肺癌病例数约160万，因肺癌导致的死亡患者每年140万。

EGFR(表皮生长因子受体，epidermal growth factor receptor)-TKI(酪氨酸激酶抑制剂，tyrosine kinaseinhibitor)作为一种小分子抑制剂，调控了细胞的增殖，存活，粘连，迁移与分化。大约62％的非小细胞肺癌患者存在EGFR过量表达，对EGFR的抑制能显著提高部分患者的生存期。利用内源性配体去竞争结合EGFR从而抑制酶的活化。

Osimertinib(奥希替尼，AZD9291)是第三代EGFR-TKI靶向药，虽然其针对T790M突变导致的耐药具有较高的响应率，但患者也会出现耐药性(Clin CancerRes；21(17)，2015)。2015年《Nature Medicine，21，560-562，2015》首次报道了15例患者AZD9291的耐药分析，其中获得第三种突变，即EGFR C797S突变是导致药物Osimertinib耐药的主要机制之一，约占40％。同时各会议中也报道了AZD9291的耐药情况，其中2015WCLC，Oxnard GR报道了67例患者耐药分析，其中C797S占～22％；2017ASCO，Piotrowska也报道了23例，C797S同样约占22％；2017ASCO，周彩存等报道了99例患者耐药机制分析，其中C797S占～22％。因此，针对C797S突变克服AZD9291耐药，为患者提供更加安全有效的第四代EGFRC797S/T790M抑制剂具有重要的研究意义。

在2016年《Nature，534，129-132，2016》的文章中，报道了一种能够克服化合物Osimertinib针对C797S耐药的化合物EAI045。EAI045属于一种变构抑制剂，在联合EGFR单抗药物如西妥昔单抗后，在针对L858R/T790M/C797S突变的小鼠体内药效模型中显示了较好的肿瘤抑制效果；但该化合物未能进入临床研究。2017年《Nature Communications，8∶14768，2017》文章报道，Brigatinib(AP26113)和EGFR单抗(如西妥昔单抗)联用，能克服C797S这个突变导致的第三代靶向药物Osimertinib的耐药，在PC9(EGFR-C797S/T790M/del19)小鼠药效模型结果显示，Brigatinib和帕尼单抗或西妥昔单抗联合使用均显示了良好的抗肿瘤药效。目前临床尚缺乏针对新突变(C797S)单独用药有效的EGFR抑制剂。因此，迫切需要新类型，高选择性的EGFR抑制剂来解决(EGFR)C797S点突变导致的药物耐药性等问题。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种作为EGFR激酶抑制剂的氘代芳基磷氧化合物。本发明另外一个目的是在于提供所述化合物在治疗肺癌中的应用。

技术方案：式(I)或(II)所示化合物：

R

R

R

R

所述化合物，R

所述化合物，R

所述化合物，选自：

药物组合物，包含权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。

所述的化合物或所述的药物组合物在制备EGFR激酶抑制剂中的应用。

所述的化合物或所述的药物组合物在制备治疗癌症药物中的应用。

所述的应用，所述癌症为肺癌。

所述的化合物或所述的药物组合物与EGFR单抗联用在制备治疗癌症药物中的应用。

所述的化合物或所述的药物组合物与EGFR单抗联用在制备治疗肺癌药物中的应用。

有益效果：本发明与现有技术相比，具有如下优点：本发明制备的氘代化合物，可以更好的靶向肿瘤部位，更有效的抑制肿瘤细胞的增殖、转移并促进肿瘤细胞发生凋亡，在肺癌药物中有良好的应用前景。

具体实施方式

为了更好的理解本申请的内容，下面结合具体实施例来做进一步的说明，但具体的实施方式并不是对本申请的内容所做的限制。

实施例1

化合物9a、9b和9c的合成路线如下：

取化合物1a(100mg)、化合物2a(120mg)，23mg K

取化合物1(96mg)溶解于75ml的DCM溶液中室温反应8h得化合物2。取30mg化合物2，加入TsOD

取化合物4(10mg)于THF中溶解，降温至0℃，加入NaH(12mg)室温搅拌1h，滴加TsOCD

取化合物3(29mg)和化合物7(40mg)溶解于DCM中，85℃反应9h，通过改变化合物3和化合物7的投料比可分别得到化合物8a、8b和8c。分别取化合物8a、8b和8c(20mg)于溴代或氯代的化合物3a，甲磺酸(90mg)，丁醇作为溶剂，反应8h，将反应液降至室温。将反应液倒入水中，有大量固体析出，过滤，滤饼用乙醇，乙酸乙酯洗涤，真空干燥箱50℃干燥至恒重，得到化合物9a-1、9a-2、9b-1、9b-2和9c-1、9c-2(-1为溴代，-2为氯代)。

9a-1

9a-2

9b-1

9b-2

9c-1

9c-2

实施例2

化合物10a、10b和10c的合成路线如下：

化合物8a、8b和8c的合成路线与实施案例1相同，取化合物1b(100mg)、化合物2a(120mg)，23mgK

10a-1

10a-2

10b-1

10b-2

10c-1

10c-2

实施例3

化合物11a、11b和11c的合成路线如下：

化合物8a、8b和8c的合成路线与实施案例1相同，取化合物1c(100mg)、化合物2a(120mg)，23mg K

11a-1

11a-2

11b-1

11b-2

11c-1

11c-2

实施例4

化合物12a、12b和12c的合成路线如下：

化合物8a、8b和8c的合成路线与实施案例1相同，取化合物1d(100mg)、化合物2a(120mg)，23mg K

12a-1

12a-2

12b-1

12b-2

12c-1

12c-2

实施例5

化合物13a、13b和13c的合成路线如下：

化合物8a、8b和8c的合成路线与实施案例1相同，取化合物1e(100mg)、化合物2a(120mg)，23mg K

13a-1

13a-2

13b-1

13b-2

13c-1

13c-2

实施例6

化合物14a、14b和14c的合成路线如下：

化合物8a、8b和8c的合成路线与实施案例1相同，取化合物4f(100mg)、化合物2a(120mg)，23mgK

14a-1

14a-2

14b-1

14b-2

14c-1

14c-2

实施例7

化合物15a、15b和15c的合成路线如下：

化合物8a、8b和8c的合成路线与实施案例1相同，取化合物1g(100mg)、化合物2a(120mg)，23mg K

15a-1

15a-2

15b-1

15b-2

15c-1

15c-2

实施例8

化合物3的合成路线与实施案例1相同，化合物3g的合成路线于实施案例7相同。取化合物3(29mg)和化合物16(40mg)溶解于DCM中，85℃反应9hh，通过改变化合物3和化合物16的投料比可分别得到化合物18a、18b、18c、18d、18e。分别取化合物18a、18b、18c、18d、18e(20mg)于溴代或氯代的化合物3g，甲磺酸(90mg)，丁醇作为溶剂，反应8h，将反应液降至室温。将反应液倒入水中，有大量固体析出，过滤，滤饼用乙醇，乙酸乙酯洗涤，真空干燥箱50℃干燥至恒重，得到化合物19a-1、19a-219b-1、19b-2和19c-1、19c-2、19d-1、19d-2、19e-1、19e-2。

19a-1

19a-2

19b-1

19b-2

1H)，8.18(s，1H)，8.01(d，J＝7.3Hz，1H)，7.50(d，J＝7.5Hz，1H)，7.06(s，1H)，6.40(s，1H)，3.84(s，2H)，3.54-3.40(m，4H)，2.84(p，J＝6.9Hz，1H)，2.24(s，3H)，2.14(d，J＝13.0Hz，5H)，1.92(qd，J＝7.1，1.4Hz，4H).

19c-1

19c-2

19d-1

19d-2

19e-1

19e-2

实施例9

本发明系列化合物在EGFR Ba/F3(Δ19del/T790M/C797S)三突变细胞的抗增殖活性和EGFR Ba/F3(Δ19del/T790M/C797S)三突变细胞模型磷酸化活性方面均表现优良。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

式(9a)化合物的体内药效研究(1)

实验方法：

在皮下植入Ba/F

在药效学实验分组给药后第14天，进行最后一次给药前及2h后，用颌下采血法分别收集小鼠的血浆，并分别于给药后1h、4h、8h和24h收集小鼠的血浆。每次采血约100ul左右，放置于抗凝管中，8000rpm，7min离心收集血浆，保存于-80℃。在给药后2h同时收集小鼠肺和肿瘤的组织，保存于-80℃。其中肿瘤分成两份(其中PD分析的肿瘤重量不超过100mg)，进行检测和数据分析。

实验结果：见表1和表2。

表1

表2

式(9a)化合物的体内药效研究(2)

实验方法：

1.细胞培养：肺癌PC-9细胞体外单层培养，培养条件为RPMIL-1640(细胞培养液)中加10％胎牛血清，100U/毫升青霉素和100ug/毫升链霉素，37C、5％CO

2.细胞接种：将0.2毫升(含5×10

3.给药：剂量为0-9天：50毫克/kg、10-21天：25毫克/kg；口服给药；给药频次：一天一次x3周。肿瘤测量和实验指标

每周两次用游标卡尺测量肿瘤直径。肿瘤体积的计算公式为：V＝0.5×b

化合物的抑瘤疗效用TGI(％)评价。

根据肿瘤测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)，计算公式为RT＝V

其中Vo是分组给药时(即D

TGI(％)，反映肿瘤生长抑制率。TGI(％)＝[(1-(某处理组给药结束时平均瘤体积-该处理组开始给药时平均瘤体积))/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积-溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)]×100T％

在实验结束后将检测肿瘤重量，并计算TGI(％)

实验结果：见表3。式(9a-1)化合物第23天TGI为100％。

表3

试验例3：EFGR抑制剂对野生型EGFR及突变性EGFR激酶的活性抑制实验

EGFR(WT)为野生型表皮生长因子受体，EGFR(T790M)为带有第790位氨基酸由苏氨酸突变成甲硫氨酸的表皮生长因子受体，EGFR(L858R)为带有第858位氨基酸由亮氨酸突变成精氨酸的表皮生长因子受体，EGFR(L861Q)为带有第861位氨基酸由亮氨酸突变成谷氨酰胺的表皮生长因子受体，EGFR(L858R/T790M)为带有第858位氨基酸由亮氨酸突变成谷氨酰胺，第790位氨基酸由苏氨酸突变成甲硫氨酸双突变的表皮生长因子受体。EGFR(L858R/T790M/C797S)为带有第858位氨基酸由亮氨酸突变成谷氨酰胺，第790位氨基酸由苏氨酸突变成甲硫氨酸，第797位由半胱氨酸突变为丝氨酸的三突变的表皮生长因子受体。

用酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay，ELISA)检测化合物对激酶活性的抑制作用。EGFR

表4中所列为化合物编号(与上述实施例中的化合物编号对应)以及氘代化合物对各激酶抑制活性的检测结果。

表4各类氘代化合物对激酶的抑制活性结果

从表4可知，本发明的氘代类化合物，对EGFR三突变蛋白酶产生抑制作用，从而可以抑制多种肿瘤细胞的生长。本发明的化合物尤其能够有效抑制EGFR蛋白激酶耐药突变体(如EGFR