一种用于细胞迁移研究的方法及装置

技术领域

本发明属于细胞迁移研究技术领域，尤其涉及一种用于细胞迁移研究的方法及装置。

背景技术

细胞迁移是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的浓度梯度后而产生的移动，在迁移过程中细胞不断重复着向前方伸出伪足，然后牵拉胞体移动的过程。

为了分析出细胞的迁移能力，通常采用划痕实验来验证，划痕实验的原理为通过在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为划痕或者划口，边缘的细胞会逐渐进入空白区域使得划痕或者划口愈合。

现有的细胞划痕实验过程为，在体外培养皿或者平板培养的单层贴壁细胞上，首先用marker笔进行横线标记，随后在细胞培养板的孔内接种约5-10*10

因此，现有的细胞划痕实验，对进行划痕的工具的操作要求较高，比如灭菌枪头或者牙签等，在划痕过程中要保持垂直，不能倾斜，同时划痕的力度要保持一致，不然会造成划痕之间的距离有误差，影响实验观察结果。

发明内容

本发明所解决的技术问题在于提供一种用于细胞迁移研究的方法及装置，以解决现有的细胞迁移实验中划痕的方式存在操作要求高，实验数据容易出现误差的问题。

本发明提供的基础方案：一种用于细胞迁移研究的装置，包括盒体、盒盖以及吸合件，所述盒体内设有若干个细胞培养皿，所述盒盖包括内盖和外盖，所述内盖和外盖均盖合在盒体上；

所述吸合件包括吸盘、连接件以及压合部，所述吸盘吸合在内盖底部，所述连接件与吸盘连接，所述压合部与连接件连接且内盖盖合在盒体上时压合部与细胞培养皿挤压。

进一步，所述盒体包括腔体，所述腔体边缘设有L型凸缘，所述内盖放置在L型凸缘的平面段上，所述外盖盖合在L型凸缘的外周，所述内盖盖合时与细胞培养皿相对的一处开设有投料孔，所述投料孔在内盖上与吸盘吸合处错开设置。

进一步，所述L型凸缘相对的两侧开设有凹槽，所述凹槽深度与L型凸缘的平面段齐平。

进一步，所述内盖底部均设有若干个环形凸起，所述环形凸起与细胞培养皿对应。

进一步，所述压合部包括圆形、十字形、三角形、矩形以及多边形中的一种或多种。

进一步，所述吸盘、连接件以及压合部由硅胶、橡胶、聚氨酯材料和塑料中的一种制成。

进一步，所述盒体底部设有若干个与压合部对应的标记。

进一步，所述标记内设有刻度线。

一种使用上述的一种用于细胞迁移研究的装置进行细胞迁移研究的方法，包括：

S1：将所述外盖取下，使用灭菌枪头通过内盖上的所述投料孔向培养皿中加入目标细胞和细胞培养基，使得目标细胞和细胞培养基落入对应的细胞培养皿中；

S2：盖上外盖，轻轻摇晃盒体，使得细胞培养皿内的目标细胞和细胞培养基摇匀，并将其放置在细胞培养箱内进行培养；

S3：培养预设的一段时间后，待细胞培养皿的底板铺满一层细胞后，将盒体取出，打开外盖和内盖；所述内盖打开后位于内盖底部的吸合件同时被取出，所述吸合件被取出后其在所述细胞培养皿的底部形成与所述压合部形状相同的划痕；

S4：盖上外盖，将盒体放进细胞培养箱中进行培养，并每隔预设的时间段取出盒体，打开外盖，通过盒体底部的标记进行定位，对所述细胞的生长迁移现象进行拍照。

本发明的有益效果：本发明通过使用带有细胞培养皿的盒体进行目标细胞的培养，在盒体上设置内盖和外盖，内盖的底部设置吸合件，通过内盖盖合使得吸合件的压合部挤压细胞培养皿的底板，使得当细胞培养皿内细胞铺满一层时，取出内盖和吸合件，在细胞培养皿内能够形成与压合部形状相同的划痕，从而不需要实验人员手动进行划痕，减少操作要求，并且能够获得相应的细胞迁移图像，使得获取的图像准确度高，便于实验人员进行细胞迁移研究，因此，本申请的装置可重复使用性强，数据获取简单，数据准确。

附图说明

图1为本发明实施例中装置的结构示意图；

图2为本发明实施例中装置的盒体结构示意图；

图3为本发明实施例中装置的内盖结构示意图；

图4为本发明实施例中装置的内盖底部结构示意图；

图5为本发明实施例的流程框图；

图6为本发明实施例中的实验图像。

具体实施方式

下面通过具体实施方式进一步详细说明：

说明书附图中的标记包括：盒体1、L型凸缘101、外盖2、内盖3、投料孔301、把手302、环形凸起303、细胞培养皿4、吸合件5、吸盘501、连接件502、压合部503、标记6、刻度线7。

实施例基本如图1、图2、图3和图4所示：一种用于细胞迁移研究的装置，包括盒体1、盒盖以及吸合件5，其中，盒体1设置有腔体，在腔体内设置多个细胞培养皿4；在本实施例中，细胞培养皿4设置有六个，组成六孔板，在本实施例的其他实施例中，细胞培养皿4的数量还可以包括24个、96个等等。

盒盖包括有内盖3和外盖2，在本实施例中，内盖3呈平板状，外盖2在平板状的基础上设置有凸起的边缘，为了实现内盖3和外盖2对盒体1的盖合，盒体1开口处设置有一圈L型凸缘101，内盖3放置在L型凸缘101的平面段上，外盖2上凸起的边缘与L型凸缘101的竖直段贴合，从而能够满足内盖3和外盖2对盒体1的盖合效果。

在内盖3放置在L型凸缘101的平面段时，在内盖3顶部设置把手302，当外盖2与内盖3同时盖合时，把手302位于内盖3和外盖2之间，即把手302的高度限制在外盖2和内盖3同时盖合时的高度空间内，当实验人员要将内盖3取出时，均匀用力提拔把手302即可，避免影响实验结果。

吸合件5包括吸盘501、连接件502以及压合部503，在本实施例中，连接件502为连接杆，连接件502两端分别连接吸盘501和压合部503，本申请中吸盘501、连接件502以及压合部503一体成型；

吸盘501吸合固定在内盖3的底部，同时在内盖3底部设置多个环形凸起303，具体的，环形凸起303的数量与细胞培养皿4的数量一致；环形凸起303的尺寸与细胞培养皿4的开口对应，例如，细胞培养皿4为圆柱状，则环形凸起303的直径尺寸与细胞培养皿4的开口直径尺寸大小一致，吸盘501在本实施例中位于环形凸起303内，同时在环形凸起303位于的内盖3位置设置投料孔301，投料孔301与吸盘501所在的位置错开，但也位于环形凸起303内，贯穿内盖3和环形凸起303，本实施例中，投料孔301的大小为环形凸起303的一半大小，即根据环形凸起303的直径进行平分，投料孔301占据一半的面积，吸盘501则设置在另一半面积上，投料孔301的作用在于，实验人员可直接通过投料孔301向对应的细胞培养皿4内投放细胞或者培养基等，而不需要将内盖3打开来投放，减少实验操作步骤；在本实施例的另一实施例中，若实验过程需要密闭环境，则可取消投料孔301的设置，也就能够实现密闭的细胞培养环境。

吸盘501吸合固定在内盖3底部，吸盘501通过连接件502连接压合部503，在内盖3盖合在盒体1上时，压合部503挤压细胞培养皿4的底面，具体的，为实现良好的挤压贴合效果，满足细胞划痕实验的现象，吸盘501、连接件502和压合部503均采用硅胶、橡胶、聚氨酯材料和塑料中的一种制成；在本实施例中采用橡胶制作，且采用的是无毒橡胶材料制作。

而在细胞划痕实验中，实验人员为了获得更多的实验数据，划痕的形状往往有好几种，为满足该需求，本申请中压合部503的形状设置为圆形、十字形、三角形、矩形以及多边形中的一种或多种，在本实施例中，压合部503的形状包括了圆形、十字形、三角形、矩形以及多边形，例如六边形，而吸盘501是通过吸合来固定在内盖3的底部，因此可通过直接将吸合件5从内盖3上拔下，然后更换为所需的压合部503形状的吸合件5，操作便捷，使用范围更广。

此外，在细胞划痕实验的拍照过程中，为了让实验人员更好的定位到划痕处，将盒体1和盒盖设置为透明，盒体1的背面，根据对应的压合部503位置设置标记6，标记6的数量与细胞培养皿4的数量一致，从而方便实验人员定位拍照，此外，本实施例中在标记6内还设置有刻度线7，便于实验人员作为观察和拍照的参照。

如图5所示，在本申请中，提供了一种使用上述用于细胞迁移研究装置进行细胞迁移研究的方法，包括：

S1：将所述外盖2取下，使用灭菌枪头通过内盖3上的所述投料孔301向培养皿中加入目标细胞和细胞培养基，使得目标细胞和细胞培养基落入对应的细胞培养皿4中；

S2：盖上外盖2，轻轻摇晃盒体1，使得细胞培养皿4内的目标细胞和细胞培养基摇匀，并将其放置在细胞培养箱内进行培养；

S3：培养预设的一段时间后，待细胞培养皿4的底板铺满一层细胞后，将盒体1取出，打开外盖2和内盖3；所述内盖3打开后位于内盖3底部的吸合件5同时被取出，所述吸合件5被取出后其在所述细胞培养皿4的底部形成与所述压合部503形状相同的划痕；

S4：盖上外盖2，将盒体1放进细胞培养箱中进行培养，并每隔预设的时间段取出盒体1，打开外盖2，通过盒体1底部的标记6进行定位，对所述细胞的生长迁移现象进行拍照。

作为更具体的实施例，采用上述用于细胞迁移研究装置进行细胞迁移研究包括以下步骤：

在进行细胞迁移研究前，获取上述装置，具体的，上述装置在出厂前经过消毒灭菌处理，并通过密封袋封装，使用前，对外包装进行消毒处理，使用时，拆开外包装，因为盒体1、盒盖和吸合件5均经过出厂前的消毒灭菌处理，因此拆开即可使用。

使用时，根据S1的描述，打开外盖2，压紧内盖3，使得吸合件5的压合部503紧贴细胞培养皿4的底部，随后通过投料孔301向六孔板内一次性加入所需的细胞悬液，其中，所使用的盒体1类型优选为六孔板，即盒体1内的细胞培养皿4的数量设置为六个，投料孔301的大小如图3所示，投放细胞悬液的工具采用灭菌枪头。

具体的，细胞悬液的添加量为2毫升，细胞的浓度为1×105个细胞/ml，温度为37℃；细胞悬液添加完成后将外盖2盖合在盒体1上，将其放入5％

内盖3和吸合件5取出后，将外盖2盖合，将盒体1放置在细胞培养箱中继续进行培养，培养过程中，按照预设的时间段分别取出进行显微镜图像采集，具体的，本申请中根据0h、24h、48h的时间段将盒体1取出进行显微镜图像采集，显微镜图像采集过程中，在盒体1底部设置有标记6，盒体1底部的标记6对应的即为压合部503所挤压细胞培养皿4底板的位置，加上盒体1设置为透明状，因此实验人员不需要查找划痕位置，根据标记6即可进行快速定位，相应的，在本实施例中，在内盖3的上表面设置内盖3盖合时与盒体1底部标记6对应的相同标记6，如此，实验人员在进行更换吸合件5时，吸合件5的吸附位置也有了相应的定位。

具体的，本申请通过具体的实验数据来验证，如下表1所示：

表1

根据上表1中所述的细胞材料和培养方法、测定方法等进行实验，采用的显微镜为倒置显微镜，型号为IX73，操作的环境为无菌环境，具体为在生物安全柜中进行，实验结果如图6所示，为装置在六孔板底部形成的划痕区域，因此，能够得到装置在孔板中有培养基存在的情况下能够保持36小时的吸附，且不从孔板上脱落，同时在六孔板的底部能够形成清晰的划痕边界，以此能够作为细胞迁移研究的起点图像。

以上的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述，所属领域普通技术人员知晓申请日或者优先权日之前发明所属技术领域所有的普通技术知识，能够获知该领域中所有的现有技术，并且具有应用该日期之前常规实验手段的能力，所属领域普通技术人员可以在本申请给出的启示下，结合自身能力完善并实施本方案，一些典型的公知结构或者公知方法不应当成为所属领域普通技术人员实施本申请的障碍。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。