磷脂酸在制备防治农作物病害制剂中的应用

技术领域

本发明涉及生物农药技术领域，具体涉及磷脂酸在制备防治农作物病害制剂中的应用。

背景技术

长期以来农民防治病害的主要方法是通过喷施化学农药以病原菌为直接靶标快速直接地将病原菌杀死，以达到控制病害的目的。但对病毒而言，由于其没有细胞结构，农药并不能有效杀伤病毒。病毒病发生时农民往往盲目使用化学农药进行防治，既增加了农民人力及财力投入，还造成食品安全及环境污染问题。因此寻找无毒无害、高效环保的新的防治病害方法十分迫切。

与动物类似，植物也存在免疫系统。例如，病原物产生的病程相关分子(PAMP)可以触发植物免疫反应(PTI)。这种免疫方式具有系统性、广谱性、稳定性的特点，可以抵抗多种病原物，包括病毒、细菌和真菌的侵染。利用植物免疫诱抗剂激活植物PTI，是植物病害防治的新思路和新途径。现有的植物免疫诱抗剂包括糖类、糖肽类、脂类、蛋白质类、次级代谢物和核苷酸类。但磷脂酸类物质在激活植物免疫反应方面的应用未见报道。为此，本发明提供磷脂酸在制备防治农作物病害制剂中的应用。

发明内容

本发明提供了磷脂酸在制备防治农作物病害制剂中的应用，提高了植物免疫相关基因表达，从而产生对病毒、真菌和细菌的广谱抗性，有效防止病害大面积发生。

本发明提供了磷脂酸在制备防治农作病害制剂中的应用。

优选的，所述磷脂酸在制备提高抗病基因WRKY8表达量的制剂中的应用。

优选的，所述磷脂酸在制备提高抗病基因HMGR2表达量的制剂中的应用。

优选的，所述农作物病害包括马铃薯Y病毒、核桃黄极毛杆菌或假禾谷镰刀菌。

优选的，所述应用为：将磷脂酸喷施于培养5周的烟草叶片，取带有马铃薯Y病毒的新鲜烟草植株的发病叶片，研磨至匀浆，加水制成病毒悬液，先采用石英砂均匀喷洒至所述烟草叶片表面，再将所述病毒悬液涂抹于烟草叶片上。

优选的，所述磷脂酸为浓度的1～100μmol/L的水溶液，所述磷脂酸的喷施量为0.5mL/10cm

优选的，所述应用为：将磷脂酸喷施于新鲜采摘的核桃，取新鲜培养的核桃黄极毛杆菌，稀释成10

优选的，所述磷脂酸为浓度的1～100μmol/L的水溶液，所述磷脂酸的喷施量为0.5mL/个核桃。

优选的，所述应用为：将磷脂酸喷施于培养10天的小麦苗胚芽鞘，取新鲜菌饼置于小麦苗胚芽鞘，1天后移除菌饼。

优选的，所述磷脂酸为浓度的1～100μmol/L的水溶液，所述磷脂酸的喷施量为0.5mL/10株小麦苗胚芽鞘。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

本发明首次将磷脂酸作为植物免疫诱抗剂，有效提高了农作物抗病基因WRKY8和HMGR2的表达量；将磷脂酸水溶液喷施于烟草叶片上，随后接种马铃薯Y病毒，10天后喷施磷脂酸水溶液组所述马铃薯Y病毒的含量大大减少；将磷脂酸水溶液喷施于新鲜采摘的核桃上，随后接种核桃黄极毛杆菌，5天后喷施磷脂酸水溶液组核桃黑斑病的病斑面积大大减少；将磷脂酸水溶液喷施于小麦苗胚芽鞘上，随后接种假禾谷镰刀菌，5天后喷施磷脂酸水溶液组小麦茎基腐病病斑长度大大减少。磷脂酸是植物内源性物质，具有无毒无害、高效环保的特点，本发明为植物免疫诱抗剂的研究提供重要的理论基础，为实际生产提供了指导，具有广阔的市场前景。

附图说明

图1是本发明实施例1～3与对比例1抗病基因WRKY8及HMGR2的表达量对比图；

图2是本发明实施例1～3与对比例1马铃薯Y病毒病症状对比图；其中，A图为对比例1；B图为实施例1；C图为实施例2；D图为实施例3；

图3是本发明实施例1～3与对比例1烟草叶片中马铃薯Y病毒含量对比图；

图4是本发明实施例4～6与对比例2核桃黑斑病症状对比图；其中，A图为对比例2；B图为实施例4；C图为实施例5；D图为实施例6；

图5是本发明实施例4～6与对比例2核桃黑斑病病斑面积对比图；

图6是本发明实施例7～9与对比例3小麦茎基腐病症状对比图；其中，A图为对比例3；B图为实施例7；C图为实施例8；D图为实施例9；

图7是本发明实施例7～9与对比例3小麦茎基腐病病斑长度对比图。

具体实施方式

为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。下述试验方法和检测方法，如没有特殊说明，均为常规方法；所述试剂和原料，如没有特殊说明，均为市售。

实施例1

S1，配制浓度为1μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施培养五周的烟草叶片，喷施量为0.5mL/10cm

实施例2

S1，配制浓度为10μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施培养五周的烟草叶片，喷施量为0.5mL/10cm

实施例3

S1，配制浓度为100μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施培养五周的烟草叶片，喷施量为0.5mL/10cm

实施例4

S1，配制浓度为1μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施新鲜采摘的核桃，喷施量为0.5mL/个核桃，喷施2h后接种核桃黄极毛杆菌，接种方法为：核桃黄极毛杆菌保存于河南农业大学植物病理-80℃冰箱。取新鲜培养的核桃黄极毛杆菌，稀释成10

实施例5

S1，配制浓度为10μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施新鲜采摘的核桃，喷施量为0.5mL/个核桃，喷施2h后接种核桃黄极毛杆菌，接种方法为：核桃黄极毛杆菌保存于河南农业大学植物病理-80℃冰箱。取新鲜培养的核桃黄极毛杆菌，稀释成10

实施例6

S1，配制浓度为100μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施新鲜采摘的核桃，喷施量为0.5mL/个核桃，喷施2h后接种核桃黄极毛杆菌，接种方法为：核桃黄极毛杆菌保存于河南农业大学植物病理-80℃冰箱。取新鲜培养的核桃黄极毛杆菌，稀释成10

实施例7

S1，配制浓度为1μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施培养10天的小麦苗胚芽鞘，喷施量为0.5mL/10株小麦苗胚芽鞘，喷施2h后接种假禾谷镰刀菌。接种方法为：假禾谷镰刀菌菌株保存于河南农业大学植物病理4℃冰箱。取直径7mm的新鲜菌饼置于小麦胚芽鞘，1天后移除菌饼。5天后观察小麦茎基腐病发病情况，并统计病斑长度。

实施例8

S1，配制浓度为10μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施培养10天的小麦苗胚芽鞘，喷施量为0.5mL/10株小麦苗胚芽鞘，喷施2h后接种假禾谷镰刀菌。接种方法为：假禾谷镰刀菌菌株保存于河南农业大学植物病理4℃冰箱。取直径7mm的新鲜菌饼置于小麦胚芽鞘，1天后移除菌饼。5天后观察小麦茎基腐病发病情况，并统计病斑长度。

实施例9

S1，配制浓度为100μmol/L的磷脂酸水溶液；

S2，采用S1的磷脂酸水溶液喷施培养10天的小麦苗胚芽鞘，喷施量为0.5mL/10株小麦苗胚芽鞘，喷施2h后接种假禾谷镰刀菌。接种方法为：假禾谷镰刀菌菌株保存于河南农业大学植物病理4℃冰箱。取直径7mm的新鲜菌饼置于小麦胚芽鞘，1天后移除菌饼。5天后观察小麦茎基腐病发病情况，并统计病斑长度。

为了进一步说明本发明的效果，本发明还设置了对比例，如下：

对比例1

与实施例1相比，区别点在于，将磷脂酸水溶液更换为清水。

对比例2

与实施例4相比，区别点在于，将磷脂酸水溶液更换为清水。

对比例3

与实施例7相比，区别点在于，将磷脂酸水溶液更换为清水。

针对上述实施例1～9和对比例1～3处理的农作物的发病情况，其结果如图1～7所示。

由图1可知，将磷脂酸作为植物免疫诱抗剂，有效提高了农作物抗病基因WRKY8和HMGR2的表达量；由图2和图3可知，将浓度分别为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L的磷脂酸水溶液喷施于培养5周的烟草叶片上，随后接种马铃薯Y病毒，与对比例1喷施清水组相比，10天后实施例1～3喷施磷脂酸水溶液组所述马铃薯Y病毒的含量大大减少；由图4和图5可知，将浓度分别为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L的磷脂酸水溶液喷施于新鲜采摘的核桃上，随后接种核桃黄极毛杆菌，与喷施清水组相比，5天后喷施磷脂酸水溶液组核桃黑斑病的病斑面积大大减少；由图6和图7可知，将浓度分别为1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L的磷脂酸水溶液喷施于培养10天的小麦苗胚芽鞘上，随后接种假禾谷镰刀菌，与喷施清水组相比，5天后喷施磷脂酸水溶液组小麦茎基腐病病斑长度大大减少。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。