具有抗凝血活性的三唑衍生物

技术领域

本发明涉及化学和医学领域，特别是药物化学和药理学领域，旨在能够合成预防血栓形成和血栓栓塞并发症的新药。

背景技术

在上一代抗凝血药物中，以下药物已被批准用于临床：L-半胱酰胺，N6-(氨基亚氨基甲基)-N2-(3-巯基-1-氧代丙基)-L-赖氨酰-L-α-天冬氨酰-L-色氨酸-L-脯氨酰-，环状(1-6)-二硫化物(依替巴肽,葛兰素史克运营英国有限公司,英国),N-(丁基磺酰基)-4-[4-(哌啶基)丁氧基]-L-苯丙氨酸盐酸盐一水合物(替罗非班,AgrastatCorrevio,英国),和抗血小板纤维蛋白原受体糖蛋白(GP)的小鼠单克隆蛋白IIb-IIIa的F(ab‘)2个片段(

尽管临床试验表明这些化合物在介入心脏病学中可能是最有效的，但由于其成本高和引发自身免疫反应的风险，使其应用受到限制(C.Patrono,F.Andreotti,H.Arnesen.Antiplatelet agents for the treatment and prevention ofatherothrombosis.European Heart Journal.2011.Vol.32.Pp.2922-2932.)。

与本发明最接近的类似物和参考药物是乙酰水杨酸(2-乙酰羟基苯甲酸或阿司匹林)，它已在实际医学中成功应用，并被证明能有效预防和治疗血栓和血栓栓塞并发症(2018Guidelines for the Early Management of Patients With Acute IschemicStroke:A Guideline for Healthcare Professionals From the American HeartAssociation/American Stroke Association.Stroke.2018；49:e138.)。

该原研药的缺点是阿司匹林耐药频率高和溃疡原性和出血性效应形式的不良临床现象。

发明内容

本发明的目的提供一种具有抗凝血活性的三唑衍生物，以扩大具有抗凝血活性的生物活性物质的范围。

本发明的技术方案如下：

一种抗凝血活性的三唑衍生物，其通式如下：

本发明还提供了一种所述的三唑衍生物在药物制备中的应用，所述的药物具有抗凝血活性。

同现有技术相比，本发明的有益效果在于：提供了一种具有抗凝血活性的三唑衍生物，扩大具有抗凝血活性的生物活性物质的范围，有望减小现有抗凝血药物的缺陷。

具体实施方式：

所合成的化合物的合成和毒性试验。

本文所要求的化合物的合成方法如下。

实施例1 1-[(4-正辛基苯基)甲基]-1H-苯并三唑(Ia)的合成。

将0.17g(0.88mmol)正辛基溴加入0.20g(0.88mmol)的4-[(1H-苯并三醇-1-基)甲基]苯酚在6ml甲基乙基酮中，在20℃的氩气中剧烈搅拌，然后加入0.58g(1.77mmol)碳酸铯。将反应混合物在惰性介质中回流煮沸6小时，然后从无机沉淀物中过滤。在真空下除去溶剂。所得到的白色残留物用热正己烷洗涤并风干。

产率：0.21g(70％)；熔化温度(Tm)：65℃-67℃；延迟因子(Rf)：0.69(乙醇：四氯化碳，1：3)。

元素分析：％:C 74.86；H 8.10.C

红外(IR)光谱,ν,cm

高分辨率核磁共振(

所述物质是一种可溶于DMSO、DMF、三氯甲烷和丙酮的白色固体。

实施例2.1-[(4-正十六烷氧基苯基)甲基]-1H-1,2,4-三唑(Ib)的合成。

我们将0.44g(1.42mmol)正十六烷基溴添加到0.25g(1.42mmol)的4-[(1H-1,2,4-三唑-1-基)甲基]苯酚溶液中，在20℃的氩气中，剧烈搅拌，然后加0.93g(2.86mmol)碳酸铯。反应混合物在惰性介质中回流沸腾5小时，然后从无机沉淀物中过滤。在真空下除去溶剂。所得白色残留物由正己烷重结晶并风干。

产率：0.40g(71％)；Tm：68℃-70℃(正己烷)；Rf：0.44(乙醇：四氯化碳，1：7)。

元素分析.：已发现,％:C 75.28％；H 10.50％.C

红外光谱(KBr),ν,cm

高分辨率核磁共振光谱(CDCl

所述物质是一种可溶于DMSO、DMF、三氯甲烷和四氯化碳的白色结晶物质。

实施例3化合物I a,b的抗凝血活性。

对从18-24岁的健康男性献血者(n＝22)采集的血液样本进行体外实验。为了研究这些化合物对止血的作用，使用BD

对200只平均体重为20-21g的雄性白鼠(2个月年龄)进行急性毒性研究，腹腔注射合成的化合物和阿司匹林。在实验之前，这些动物被隔离在BSMU生物化学系活体内的一个单独的笼子里14天。体外温度保持在18℃–22℃，其照明结合自然光和人工。每周使用固定的壁挂式杀菌辐照器进行杀菌处理，持续20分钟。能保证24小时饮水，并喂食天然产品(蔬菜、谷物)和实验动物(小鼠、大鼠、大鼠、仓鼠)的标准饮食，这些饮食符合合格声明的标准(No.ROSS RU.PR 98,D 00497，2016年2月7日发布)，含有小麦、大麦、豆粕、鱼粉、酵母和麸皮，以及维生素和矿物质复合物、植物脂肪和抗氧化剂。

该研究是根据良好实验室实践和2010年4月12日第61-FZ号联邦法律第11条“药品流通”和“新药物实验(临床前)研究指南”(M.，2012)进行的。

在对小鼠进行毒性研究时，以100–500mg/kg，并逐步增加50mg/kg的剂量进行研究。根据小鼠的体重计算出注射物质的量，并考虑到可以注射的最大允许液体量。实验中包括一组对照(未经处理)动物，以对比评估对照组和实验组中个体的状态和行为。这组动物在第一天观察结束时被排除在实验之外。实验各组共观察14天。

采用统计学t10.0统计软件包(StatSoft Inc，USA)对研究结果进行统计分析。采用Shapiro–Wilk检验检验数据是否符合正态分布。方差分析采用Kruskal-Wallis检验。统计学检验的临界显著性水平(p值)设为0.05。采用BioStat5.9软件(AnalystSoftInc.)进行探针分析，计算出致死剂量为50％(LD50)值。

将所研究的化合物添加到聚集计的比色皿(表1)中，Ia和Ib的血小板释放反应(滞后期)分别延长15.7％(p<0.05)和10.3％(p<0.05)；Ia组血小板聚集幅度降低29.4％(p<0.05)，Ib组血小板聚集幅度降低23.5％(p<0.05)；与对照组相比，Ia组和Ib组的血小板聚集率分别降低13.6％(p<0.05)和7.4％(p<0.05)，达到最大聚集所需的时间分别增加25.7％(p<0.05)和18.3％(p<0.05)。同时，发现阿司匹林对血小板释放没有影响，表明其对血小板聚集水平的影响比化合物Ia差2.2倍以上(p<0.05)，血小板聚集率指标比化合物Ia差28.6％(p<0.05)，达到最大聚集所需的时间比化合物Ia差2.4倍以上(p<0.05)。此外，阿司匹林对血小板聚集水平的影响比化合物Ib低1.7倍以上(p<0.05)，血小板聚集率指标比化合物Ib低59.4％(p<0.05)，达到最大聚集所需的时间比化合物Ib低1.7倍以上(p<0.05)。

表1化合物Ia、b和乙酰水杨酸的抗凝血活性指标，n＝10

注意:胶原蛋白诱导的血小板聚集的潜伏期；其他参数是ADP诱导的血小板聚集.。*р≤0.05,**р≤0.001–与对照组相比；；#р≤0.05,##р≤0.001–与乙酰水杨酸相比。

实施例4.化合物Ia和b对小鼠的急性毒性研究。

根据别列佐夫斯卡娅的化学急性毒性体系和静脉注射的化学化合物毒性标准，所述化合物属于“低毒”类。(表2)。

表2所述化合物和乙酰水杨酸的急性毒性指标,M±SD

因此，所述化合物毒性较低，并且与阿司匹林相比，它更有效地抑制血小板的活化和聚集。