竹液及其粒子复合物在促进抗体分泌和增加免疫因子的药物或日化品中的应用

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及竹液及其粒子复合物在促进抗体分泌和增加免疫因子的药物或日化品中的应用。

背景技术

流感等病毒每年都会改变其抗原性，作为变异病毒流行。如果疫苗制造所使用的病毒株和流行病毒株的抗原性一致的话，则可以期待疫苗诱导的IgG抗体对病毒的防御效果，但如果疫苗制造所使用的病毒株和流行病毒株的抗原性不一致，则无法期待其疫苗诱导的IgG抗体对病毒的防御效果。疫苗激活IgG抗体通常存在于血液中，其可以预防病毒所引起的重症。由于呼吸道黏膜是病毒侵入的第一个关口，如果以预防病毒感染、预防病毒传播为目标的话，则需要加强呼吸道黏膜的自然免疫。

黏膜分泌型免疫球蛋白A(分泌型IgA)是黏膜免疫的主要效应因子，早期预防病毒入侵的主要抗体，其可以凝集病原体、干扰病原体运动、中和病原体毒素、抑制病原体对呼吸道黏膜的黏附，从而防止病原体进一步传播到循环系统。更重要的是，分泌型IgA抗体具有对病毒变异株有效的交叉防御能力。

比起由疫苗激活的获得免疫系统，人体的自然免疫系统在第一时间抵制病毒、细菌侵入，最为有效。自然免疫系统的免疫功能由嗜酸细胞、嗜中性粒细胞及嗜碱性粒细胞等颗粒细胞，巨噬细胞和树突状细胞等单细胞，以及Natural killer细胞(NK细胞)和ILC等淋巴细胞等大量细胞承担。

发明内容

为了促进黏膜IgA抗体分泌及增加血液中免疫相关因子，本发明提供竹液及其粒子复合物在促进抗体分泌和增加免疫因子的药物或日化品中的应用。

本发明的上述发明目的是通过以下技术方案得以实现的：

第一方面，本发明提供竹液在促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中的应用。

优选地，竹液为含竹子提取物的水溶液。

优选地，药物或日化品为液体或者固体。

进一步优选地，药物或日化品为涂液制剂、喷雾制剂、混悬剂、膏体制剂、泡沫制剂中的任一种。

第二方面，本发明提供竹液粒子复合物在促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中的应用。

优选地，竹液粒子复合物为竹液和碳酸磷灰石粒子形成的粒子复合物。

进一步优选地，竹液粒子复合物以液态或固态形式应用于促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中；药物或日化品为液体或者固体。

进一步优选地，竹液粒子复合物以溶液或者混悬剂形式应用于促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中。

进一步优选地，药物或日化品为涂液制剂、喷雾制剂、混悬剂、膏体制剂、泡沫制剂中的任一种。

本发明的有益技术效果在于：

将本申请的竹液及竹液粒子复合物应用于药物或日化品中，能够有效促进口腔黏膜和呼吸道黏膜中的IgA抗体分泌，增加血液中和自然免疫相关细胞因子。

附图说明

图1为本发明实验例中的小鼠黏膜分泌型IgA实验过程图；

图2为本发明实验例中的Day10口腔黏膜和呼吸道黏膜分泌型IgA含量评估统计图；

图3为本发明实际应用例中的5％竹液对人体口腔、鼻腔进行喷雾后激活血液中细胞因子统计图；

图4为本发明实际应用例中的竹液粒子复合物对人体口腔、鼻腔进行喷雾后激活血液中细胞因子统计图。

具体实施方式

下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。

实施例

第一方面，本发明提供竹液在促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中的应用。

优选地，竹液为含竹子提取物的水溶液。

进一步优选地，竹子提取物含量以质量百分比计，至少为5％。

其中，随着竹子提取物含量的逐渐上升，竹液促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的效果越好。

优选地，药物或日化品为液体或者固体。

进一步优选地，药物或日化品为涂液制剂、喷雾制剂、混悬剂、膏体制剂、泡沫制剂中的任一种。

第二方面，本发明提供竹液粒子复合物在促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中的应用。

优选地，竹液粒子复合物为竹液和碳酸磷灰石粒子形成的粒子复合物。

进一步优选地，竹液粒子复合物以液态或固态形式应用于促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中；药物或日化品为液体或者固体。

进一步优选地，竹液粒子复合物以溶液或者混悬剂形式应用于促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中。

进一步优选地，药物或日化品为涂液制剂、喷雾制剂、混悬剂、膏体制剂、泡沫制剂中的任一种。

其中，IgA抗体为黏膜分泌型免疫球蛋白A，分泌型IgA是黏膜免疫的主要效应因子，早期预防病毒入侵的主要抗体，其可以凝集病原体、干扰病原体运动、中和病原体毒素、抑制病原体对呼吸道黏膜的黏附，从而防止病原体进一步传播到循环系统。更重要的是，分泌型IgA抗体具有对病毒变异株有效的交叉防御能力。

其中，自然免疫相关因子为血液中和自然免疫相关的细胞因子，自然免疫系统的免疫功能由嗜酸细胞、嗜中性粒细胞及嗜碱性粒细胞等颗粒细胞，巨噬细胞和树突状细胞等单细胞，以及Natural killer细胞(NK细胞)和ILC等淋巴细胞等大量细胞承担。

应用实施例

竹液在促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中的应用，竹液为含竹子提取物的水溶液，竹子提取物含量以质量百分比计，为5％。其中，竹子提取物制作方法任选其中一种：

一、将竹子粉碎并根据需要干燥，然后在减压条件下对竹子进行干馏，收集馏出物，减压条件采用100mmHg以下，优选为10～60mmHg；更优选为15～45mmHg的条件；减压干馏时，干馏产物的蒸馏温度取决于减压度，减压度大时低，减压度小时高，例如在20mmHg减压干馏时，干馏产物的蒸馏温度为180～200℃。

二、将粉碎后的竹子供给真空干馏装置，在温度约200℃、压力约20mmHg的条件下进行真空干馏，用乙醇稀释馏出物。

三、粗制竹醋液的简易精制主要采用自然静置法，将粗制竹醋液放在容器中静置一段时间，使其自然分层，上层为浅色澄清竹醋液，下层为深褐色竹焦油。也可用有机溶剂苯、氯矾按不同比例分别与竹醋液混合搅拌，静置后分为两层，将两层分离后取出溶液，经蒸馏取出溶剂并回收。目前也有采用其他简易精制法，如炭、活性炭、其它物品吸附精制法，将木炭、竹炭、活性炭等按一定比例与粗制竹醋液混合搅拌，静置，过滤。

竹液粒子复合物在促进IgA抗体分泌和增加自然免疫相关因子的药物或日化品中的应用，其中，竹液粒子复合物包括竹液和碳酸磷灰石粒子，竹液和碳酸磷灰石粒子形成粒子复合物，以质量百分比计，竹液和碳酸磷灰石粒子的相对含量为3.25％和96.75％。

一种制备上述竹液粒子复合物的方法，包括以下步骤：

S1、调制含竹液和含无机离子的混合物的水溶液100mL，其中，竹液为前述质量百分比计5％的含竹子提取物的水溶液，加入440mM的NaHCO

S2、在20℃下搅拌3分钟后，4000rpm离心3分钟，得到的沉淀即为所述竹液粒子复合物。

其中，竹子提取物的选取可以为竹炭灰提取液、竹子乙醇浸泡液、竹醋液、竹叶水煮液中的任一种或几种的组合。

作为其中的一些实施例，竹子提取物制作方法任选其中一种：

一、将竹子粉碎并根据需要干燥，然后在减压条件下对竹子进行干馏，收集馏出物，减压条件采用100mmHg以下，优选为10～60mmHg；更优选为15～45mmHg的条件；减压干馏时，干馏产物的蒸馏温度取决于减压度，减压度大时低，减压度小时高，例如在20mmHg减压干馏时，干馏产物的蒸馏温度为180～200℃。

二、将粉碎后的竹子供给真空干馏装置，在温度约200℃、压力约20mmHg的条件下进行真空干馏，用乙醇稀释馏出物。

三、粗制竹醋液的简易精制主要采用自然静置法，将粗制竹醋液放在容器中静置一段时间，使其自然分层，上层为浅色澄清竹醋液，下层为深褐色竹焦油。也可用有机溶剂苯、氯矾按不同比例分别与竹醋液混合搅拌，静置后分为两层，将两层分离后取出溶液，经蒸馏取出溶剂并回收。目前也有采用其他简易精制法，如炭、活性炭、其它物品吸附精制法，将木炭、竹炭、活性炭等按一定比例与粗制竹醋液混合搅拌，静置，过滤。

上述药物或日化品以涂液制剂、喷雾制剂、混悬剂、膏体制剂、泡沫制剂的形式存在，将本申请的竹液粒子复合物加入药物或日化品中，能够有效促进黏膜IgA抗体分泌，增加血液中和自然免疫相关细胞因子。

实验例：

实验小鼠：C57BL/6小鼠雄性7周龄。

实验环境：温度20-26℃，湿度40％-70％。

实验分组：实验分4组，每组实验量为4只小鼠。

1)5％竹液组，含竹子提取物的水溶液，竹液含量以质量百分比计。

2)竹液粒子复合物组，上述应用实施例步骤S2得到的沉淀溶解于50mL蒸馏水后得到。

3)碳酸磷灰石组，将440mM的NaHCO3、9mM的NaH2PO4、58mM的CaCl2加入水中制成总量为100mL的溶液喷雾。

4)0.2％竹液组，含竹子提取物的水溶液，竹液含量以质量百分比计。

实验过程：

提前一周动物适应性饲养。

小鼠黏膜分泌型IgA实验过程图如图1所示：

Day0：给予方式为口腔和鼻腔给予喷剂药物，每日2次，每次给予口腔2喷，左鼻腔1喷，右鼻腔1喷。

Day10：处死各组小鼠，收集口腔鼻腔联合肺泡灌洗液，做ELISA检测IgA含量。

实验结果及分析：

Day10口腔黏膜和呼吸道黏膜分泌型IgA含量评估如图2所示。与0.2％竹液组和磷灰石组相比，5％竹液和竹液粒子复合物处理组有显著性的促进黏膜IgA抗体分泌效果。统计学数值以平均±标准误差表示。统计学评价使用One-way ANOVA Tukey′s multiplecomparisons test，如果P＜0.05，则判定为有显著性。

实际应用例

如图3所示，利用5％竹液对人体口腔、鼻腔进行喷雾，激活了血液细胞因子IL-2，IL-8，IL-17A，IL-1b，IL-12p70，IL-6。

如图4所示，利用竹液粒子复合物对人体、口腔鼻腔进行喷雾，激活了血液细胞因子IL-2，IL-8，IL-17A，IL-1b，IL-12p70，IL-6。

其中：

IL-2是在临床医学上是指白细胞介素-2，为免疫调节剂。由其生物学作用是以刺激T细胞增生为主，可使细胞毒性T细胞、自然杀伤细胞和淋巴因子活化的杀伤细胞增殖，并使其杀伤活性增强，还可以促进淋巴细胞分泌抗体和干扰素，具有抗病毒、抗肿瘤和增强机体免疫功能等作用。

临床常用于：1、肾细胞癌、黑色素瘤、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、直肠癌、淋巴癌、肺癌等恶性肿瘤的治疗，用于癌性胸腹水的控制，也可以用于淋巴因子激活的杀伤细胞的培养，还可用于带状疱疹后遗症疼痛的治疗。2、还可用于手术、放疗及化疗后的肿瘤患者的治疗，可增强机体免疫功能。3、用于先天或后天免疫缺陷症的治疗，提高病人细胞免疫功能和抗感染能力；平衡免疫防御功能和治疗由于超敏反应引起的过敏性疾病，如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮肤病等。4、治疗各种自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征等。5、对某些病毒性、杆菌性疾病、胞内寄生菌感染性疾病，如乙型肝炎、HPV感染、肺结核、白色念珠菌感染等具有较好的治疗作用。

L-8是趋化性细胞因子，主要生物学作用是趋化并激活中性粒细胞，促进中性粒细胞的溶酶体酶活性和吞噬作用，对嗜碱性粒细胞和T细胞也有一定的趋化作用，中性粒细胞与IL-8接触后发生形态变化，定向游走到反应部位并释放一系列活性产物，这些作用可导致机体局部炎症反应，达到杀菌和损伤细胞的目的。

IL-17细胞因子可通过增加组织中趋化因子的产量来有效招募单核细胞和中性粒细胞到炎症部位。当细胞外的病原体入侵到免疫系统时，作为促炎性细胞因子的IL-17就会发生应答反应，破坏病原体。

IL-1在免疫细胞的激活中也发挥着重要作用，它可以作用于巨噬细胞和单核细胞，诱导其产生对细菌病毒的毒活性。

IL-6的主要生物学效应包括：

1、促进B细胞增殖与抗体产生：IL-6能直接作用于B细胞，促进其增殖与分化，并刺激抗体的产生，特别是IgA和IgG的生成。

2、激活T细胞：IL-6能提高T细胞的活性状态，促进其增殖与活化，尤其是Th2和Th17细胞。

3、其他：IL-6还能激活肥大细胞、NK细胞，等。

IL-6在感染性疾病和肿瘤中发挥重要作用。

IL-12p70是细胞介导免疫中非常重要的细胞因子。其主要免疫调节作用是诱导早期辅助性T母细胞分化为Th1细胞，并促进Th1细胞的发育和增殖。辅助性T细胞是细胞介导免疫应答和B淋巴细胞产生抗体所必需的，可分为Th1和Th2两个亚群。前者产生IL-2、IL-3、IFN-γ和淋巴毒素及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子等，参与细胞免疫；而后者则产生IL-4、IL-5、IL-10和IL-13等细胞因子，辅助B细胞产生抗体，参与体液免疫。某些病原菌只能被Th1或Th2有效地抑制。

促进T细胞和NK细胞的增殖及杀伤作用IL-12P70能促进T细胞和NK细胞的增殖。IL-12P70的上述性质提示其作为一种免疫调节因子治疗恶性肿瘤的潜在价值。

由上述可知，本申请竹液及竹液粒子复合物能够有效促进口腔黏膜和呼吸道黏膜中的IgA抗体分泌，增加血液中和自然免疫相关细胞因子，将其应用于药物或日化品中，同样能够有效促进口腔黏膜和呼吸道黏膜中的IgA抗体分泌，增加血液中和自然免疫相关细胞因子。

本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，且上述实施例之间能够相互组合进行使用，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。