生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明公开了一种快速实现甘薯转基因的方法。将含有目的基因表达载体的根癌农杆菌菌液注射进4至6叶期甘薯的第1、2或3个节点中，然后栽培，检测获得含有目的基因的甘薯转基因植株或组织。本发明提供了一种快速高效地实现甘薯转基因的方法，与传统的杂交育种和组织培养相比，此方法不仅克服了种间杂交不亲和、再生频率低、品种间再生能力差别较大等问题，更是大大缩短了甘薯遗传转化和育种周期。利用本发明可将目的基因或特定DNA片段导入甘薯组织，快速高效地获得转化甘薯苗，提高现有甘薯品种不具备的特征和抗性,实现甘薯品种重大改良。

本发明公开了一种检测水稻耐盐性基因SKC1的KASP分子标记及其方法，所述分子标记是根据SKC1基因SNP2处发生由G→A的突变而设计的，命名为SKC1‑KASP。所述KASP标记引物包括两条正向特异性引物和一条反向通用引物。根据本发明提供的KASP标记进行基因分型，在PCR扩增后不用酶切和电泳，可以高通量检测多个样品，快速检测SKC1等位基因在水稻分离群体中的分布情况，结果准确性好，与常规分子标记相比具有快捷、简便和成本较低等优点。本发明对水稻耐盐性基因SKC1的分子标记辅助选择育种具有重要意义。

本发明涉及β‑甘露聚糖酶耐热突变体M23、重组菌及其应用，属于基因工程和酶工程领域，本发明采用蛋白质表面电荷优化策略，理性设计并筛选突变位点，将白曲霉来源的β‑甘露聚糖酶ManAK进行改良，再通过高通量筛选方法挑选正向突变，最终获得热稳定性提高的23株β‑甘露聚糖酶突变体。本发明获得的β‑甘露聚糖酶突变体耐热性是原始基因的1.2～3.5倍，耐热性均有显著提高，有利于实现其在商业中的应用，从而降低生产成本。

本发明涉及β‑甘露聚糖酶耐热突变体M17、重组菌及其应用，属于基因工程和酶工程领域，本发明采用蛋白质表面电荷优化策略，理性设计并筛选突变位点，将白曲霉来源的β‑甘露聚糖酶ManAK进行改良，再通过高通量筛选方法挑选正向突变，最终获得热稳定性提高的23株β‑甘露聚糖酶突变体。本发明获得的β‑甘露聚糖酶突变体耐热性是原始基因的1.2～3.5倍，耐热性均有显著提高，有利于实现其在商业中的应用，从而降低生产成本。

本发明涉及β‑甘露聚糖酶耐热突变体M19、重组菌及其应用，属于基因工程和酶工程领域，本发明采用蛋白质表面电荷优化策略，理性设计并筛选突变位点，将白曲霉来源的β‑甘露聚糖酶ManAK进行改良，再通过高通量筛选方法挑选正向突变，最终获得热稳定性提高的23株β‑甘露聚糖酶突变体。本发明获得的β‑甘露聚糖酶突变体耐热性是原始基因的1.2～3.5倍，耐热性均有显著提高，有利于实现其在商业中的应用，从而降低生产成本。

本发明涉及β‑甘露聚糖酶耐热突变体M13、重组菌及其应用，属于基因工程和酶工程领域，本发明采用蛋白质表面电荷优化策略，理性设计并筛选突变位点，将白曲霉来源的β‑甘露聚糖酶ManAK进行改良，再通过高通量筛选方法挑选正向突变，最终获得热稳定性提高的23株β‑甘露聚糖酶突变体。本发明获得的β‑甘露聚糖酶突变体耐热性是原始基因的1.2～3.5倍，耐热性均有显著提高，有利于实现其在商业中的应用，从而降低生产成本。

本发明公开了一种间充质干细胞的分离和培养方法及制剂，属于生物技术领域。该间充质干细胞的分离方法包括以下步骤：将滑膜组织剪碎，并置于完全培养基中后，再添加胶原酶溶液进行消化、震荡分散，得到沉降组织和第一上清液；将沉降组织置于完全培养基中进行震荡分散，重复两遍，所得上清液均与第一上清液进行混合，再对上清液进行过滤，得到滤液；将滤液进行离心处理，弃上清，分离得到原代间充质干细胞。将原代间充质干细胞通过2D纯化培养后进行3D扩增培养，获得大量纯度高、分化能力强的滑膜间充质干细胞。本发明提供的间充质干细胞的分离和培养方法，采用的试剂较少，避免了多种酶混合消化对细胞造成的多次损伤。

本发明公开了鉴定或辅助鉴定小麦白粉病抗性的方法、检测与小麦白粉病抗性相关的SNP分子标记的物质的应用、产品。该方法包括：检测待测小麦的基因型，根据待测小麦的基因型鉴定或辅助鉴定小麦白粉病抗性；基因型为CC基因型、AA基因型或CA基因型；CC基因型表示小麦基因组中KASP_7015位点的核苷酸种类为C的纯合型；AA基因型表示小麦基因组中KASP_7015位点的核苷酸种类为A的纯合型；CA基因型表示小麦基因组中KASP_7015位点的核苷酸种类为C和A的杂合型；KASP_7015位点是小麦基因组中的一个SNP位点，位于小麦第5A号染色体上SEQ ID No.4的第101位核苷酸。实验证明，该KASP_7015位点AA基因型的小麦品种的白粉病抗性低于KASP_7015位点CC基因型的小麦品种，说明KASP_7015位点是与小麦白粉病抗性相关的SNP分子标记。

本发明是一种以色素突变作为标记的紫菜杂交育种方法，该方法以母本株叶状体作为材料诱变获得色素突变体株；从母本突变株叶状体上部取一小片与父本株野生型叶状体上部取下的数片小片共同培养；两种小片性别分化各种产生雌雄配子，雌配子位于叶片上与雄配子受精，已形成的果孢子囊的色素突变体小片单独培养，收集释放的果孢子培养让其萌发形成丝状体藻落；挑选呈野生型颜色藻落单独培养释放壳孢子；选择颜色嵌合叶片培养至1cm大小，将颜色为野生型的部分切下单独培养至性成熟发生自交，将获得的果孢子培养成丝状体，从而获得杂交的孢子体。该方法以色素突变体作为标记，简单易行，结果便于观察，可快速获得杂交株，提高紫菜育种效率。

本发明公开了蛋白质UGT236及其编码基因与应用。蛋白质UGT236为氨基酸序列是SEQ ID NO:2所示的蛋白质。实验证明，蛋白质UGT236具有糖基转移酶的活性，可高效的将根皮素催化生成根皮苷，即蛋白质UGT236可用于以根皮素为底物制备根皮苷。本发明具有重要的应用价值。

本发明涉及生化分析检测领域，具体涉及一种探针组、传感器、检测方法及用途，本发明提供的一种探针组，包括发夹探针HP1，发夹探针HP2，发夹探针HP3；上述发夹探针在T7核酸外切酶的辅助下可以实现三重循环扩增策略检测靶标黄曲霉毒素B1，检测灵敏度高，无需荧光标记，成本低，在最佳条件下，检测限低至0.19pg/mL，检测线性范围宽，特异性高，能够区分黄曲霉毒素B1和其他黄曲霉毒素。本发明应用于中药材和食品样品中黄曲霉毒素B1的微量检测，效果良好，在食品药品安全领域具有较好的应用前景。

本发明提供了一种离子液体快速采收微藻的方法，包括：用BG‑11液体培养基培养微藻；待微藻培养至稳定期后，加入2‑吡咯烷铜四氟硼酸盐离子液体促进微藻细胞絮凝；该离子液体添加的浓度分别为20mg/L，50mg/L，100mg/L；测定藻液OD值，计算絮凝效率。本发明环境污染较小，且培养基可重复利用，节能环保，采收成本较低，可以大规模应用。

本发明公开了天麻杜仲酒，包括以下步骤：A、精选原料：玉米、高粱、小麦、天麻、杜仲、枸杞和大枣；B、原料处理：将玉米、高粱、小麦清洗干净后用铁锅分类煮至十成熟，出锅冷却至35℃，加入酒曲搅拌均匀进行发酵；天麻、杜仲以干药材进行清洗干净后高压蒸1小时候冷却至常温，晾干水分；枸杞、大枣清洗干净后高温1小时后冷却至常温；C、配方：每500g成品固态酒、天麻5g、杜仲5g、枸杞7g、大枣6g。本发明与现有技术相比的优点在于：将天麻和杜仲在枸杞和大枣的搭配下融入酒中，药借酒力、酒助药势而充分发挥其效力，增强滋补作用，调节中枢神经系统，降低疲惫感。

本发明涉及分子生物学和免疫学技术领域，具体涉及一种可以逃逸体内存在的既有抗痘苗病毒中和抗体的重组痘苗病毒载体；重组痘苗病毒载体带有A27L同源重组臂序列，重组病毒载体为可用来构建在痘苗病毒A27L基因区域内插入外源基因的痘苗病毒载体；本发明提供了一种可以逃逸体内存在的既有抗痘苗病毒中和抗体的重组痘苗病毒载体，重组痘苗载体的A27L编码基因被敲除或破坏，不能正常表达A27L基因，该痘苗病毒载体可以作为肿瘤疫苗或基因治疗载体，可以用于预防或治疗多种肿瘤。

本发明公开了一种辅助选择ptc1普通核不育系和繁殖系的分子标记及应用，分子标记为用于鉴别ptc1基因型的特异性长度多态性分子标记PT6，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用缺失的26bp碱基序列设计一种ptc1普通核不育系和繁殖系的特异性长度多态性分子标记，用于快速鉴定ptc1繁殖系，减少繁殖系筛选工作量并缩短新型繁殖系和ptc1普通核不育系的培育周期，为简便、快速、高通量地第三代杂交水稻分子标记辅助育种技术体系的建立提供了技术支撑。

本发明提供了一种快速鉴定植物基因的方法，该方法包括以下步骤：S1、将待测植物样本置于容器中，加入磁珠和/或钢珠；S2、向所述容器中加入提取液，所述提取液为0.2～0.3mol/L的氢氧化钾或氢氧化钠溶液；S3、将容器放入打碎仪器中进行物理破碎，取上层液体，得到含有核酸的溶液；S4、使用2xTaq Mix、引物、超纯水以及提取模板进行PCR扩增，扩增产物在琼脂糖凝胶电泳中检测。通过本发明的方法，可以快速有效地进行植物基因鉴定，而且操作简单省时、成本低、安全无毒，并且使用范围广泛。

本发明提供一种应用于二代感染宏基因组检测的临床样本处理方法，所述方法采用Lysing Matrix E管和溶菌酶、GB裂解液等配合使用用于样本处理，该方法对样本需求量低、流程便捷、节省时间，同时具有高检出率和客观性，利于辅助临床诊断。

本发明涉及分子生物学和免疫学技术领域，具体涉及一种敲除D8L基因的重组痘苗病毒载体；重组痘苗病毒载体带有D8L同源重组臂序列，重组病毒载体为用来构建在痘苗病毒D8L基因区域内插入外源基因的痘苗病毒载体；本发明提供了一种可以逃逸体内存在的既有抗痘苗病毒中和抗体的重组痘苗病毒载体，D8L编码基因被敲除或破坏，不能正常表达D8L基因，该痘苗病毒载体可以作为肿瘤疫苗或基因治疗载体，可以用于预防或治疗多种肿瘤。

本发明提供了一种表达趋化因子受体的具有实体肿瘤定向趋化能力的单核细胞和巨噬细胞、及其制备和应用，涉及生物技术领域。本发明提供了一种巨噬细胞，该巨噬细胞过表达趋化因子受体，具有向实体肿瘤趋化迁移的能力以及显著的向肿瘤趋化迁移和浸润的效果，能够提高过继移植巨噬细胞的特异性杀伤效率和利用率，降低对正常组织的非特异性免疫攻击。本发明提供了一种巨噬细胞的制备方法，包括构建含有趋化因子受体基因的慢病毒表达体系，利用慢病毒表达体系将趋化因子受体基因整合到多能干细胞或者单核巨噬细胞中，经诱导分化后制备得到巨噬细胞，该巨噬细胞能够长期稳定的过表达趋化因子受体。

本发明涉及微生物发酵领域，具体涉及一种氨基酸生产方法。经本发明方法预处理后的玉米浆应用于微生物发酵时，发酵效果更好。通过本发明的生产方法可以进一步提升糖酸转化率，有利于在谷氨酸生产中进行推广应用。

本发明属于一种特色健康养生干红葡萄酒及其生产工艺，包括消毒装置、干燥装置、导管、破碎装置、挤压出汁装置和过滤装置，所述方法包括如下步骤：采摘赤霞珠、万寿果、五味子和黑枸杞果实原料；挑拣赤霞珠、万寿果、五味子和黑枸杞果实原料，将破碎和腐烂的原料剔除；按照赤霞珠：万寿果：五味子：黑枸杞＝6:2:1:1的比例进行二次挑拣并混合，具体涉及葡萄酒及其生产工艺技术领域。该特色健康养生干红葡萄酒及其生产工艺，通过将普通干红型葡萄酒生产工艺和方法进行改良，采用赤霞珠：万寿果：五味子：黑枸杞＝6:2:1:1的原料比例进行生产，使得生产出的干红型葡萄酒具备香型浓郁、口感甚佳和有益身体健康的特点。

本发明公开了一种利用微生物食品发酵筛选装置，包括：罐体、搅拌机构以及筛选机构；所述搅拌机构安装于所述罐体的内部，所述搅拌机构用于对物料以及药剂进行混合搅拌的操作，加速物料混合；本方案提供的发酵筛选装置在使用时，通过启动第一电机带动搅拌叶在箱体内部转动，搅拌叶每转动搅拌一周，则会通过固定杆推动活动板一次，活动板通过弹簧并在固定杆的推动下在箱体内部进行摆动，从而加速箱体内部物料与药剂的混合效率，提高发酵效率，在混合发酵并排放后，转杆的转动能够带动套筒以及搅拌板在第一筛网与第二筛网上进行转动，通过搅拌板的转动推动物料进行过滤筛选，可加速物料的排放效率，提高排放速度。

本发明提供了一种VAV2基因缺失的肿瘤细胞系及其在筛选和/或评价/制备肿瘤治疗药物，开发肿瘤药物靶点，制备肿瘤诊断试剂，开发肿瘤治疗新技术，开发检测肿瘤相关生物工程产品中的应用。所述VAV2基因缺失是通过Crispr/cas9敲除技术实现的，本发明的细胞系具有良好的细胞特性，并且其特性优于市售的细胞系。

本发明公开了一种抗氧化油橄榄叶啤酒及其制备方法，配方由下述重量份数的原料制成：麦芽150‑300份，油橄榄叶超临界萃取物3‑10份，葡萄籽提取物5‑50份，青梅汁10‑50份，啤酒花0.01‑3份，啤酒酵母0.5‑1份，饮用水1200‑2000份。本发明制备的抗氧化油橄榄叶啤酒，含有油橄榄叶超临界萃取物成份，多种抗氧化物质和橄榄特有的抗氧化物质，同时搭配葡萄籽提取物，葡萄籽提取物与油橄榄叶超临界萃取物协同作用，能保持啤酒的新鲜度，并能为人体提供有益的多酚类物质的同时获得独特油橄榄叶口感的啤酒，同时加入了青梅汁进行调味，口感更加丰富，清爽。

本发明属于微流控芯片技术领域，具体为一种模拟输卵管微环境的仿生微流控芯片及其制备方法。本仿生微流控芯片设有进样池、进样通道、化学浓度梯度筛选通道、收集池、收集通道；进样池和收集池各有两个；进样池用于精子样本进样；收集池用于最终收集响应化学浓度梯度的精子；进样通道用于过滤精液中的杂质，初步筛选不活动的精子；收集通道用于最终响应化学浓度梯度并最终到达最高化学浓度区域的精子；筛选通道有多条，等间距、平行地布置于进样通道和收集通道之间，形成化学浓度梯度筛选通道，用于模拟输卵管中趋化物质的浓度梯度，筛选出具有趋化性的精子。本发明结构简单、成本低廉；可用于精子优选、辅助生殖等方面。

本发明提供了一株不产毒的黄曲霉HuBXY33及其应用，特别涉及微生物技术领域。本发明提供了一株不产毒的黄曲霉HuBXY33，所述黄曲霉HuBXY33的保藏编号为CCTCC NO:M 2020519。本发明所述黄曲霉HuBXY33不产黄曲霉毒素、黄曲霉震颤素和杂色曲霉毒素，是一株安全性高、繁殖能力强的生防菌株，具有高效的竞争抑制产毒黄曲霉菌生长、繁殖和产毒能力，能够显著降低花生等农产品中黄曲霉毒素、黄曲霉震颤素和杂色曲霉毒素的含量。

本发明公开了一种饮料发酵装置，包括发酵罐，发酵罐的罐壁上固定安装有取样机构，取样机构包括固定筒、抽液筒、活塞、活塞杆和出液嘴；本发明一种饮料发酵装置，取样时旋转操控盘，操控盘通过活塞杆和活塞带动抽液筒旋转，使得抽液筒上的内进液口与固定筒上的外进液口相连通，然后拉动操控盘，操控盘通过活塞杆拉动活塞移动，使得发酵罐内的液体通过外进液口和内进液口流入抽液筒内，然后旋转抽液筒，使得内进液口与出液通道相连通，再推动活塞，将抽液筒内的液体通过出液通道和出液嘴挤出，通过抽液筒间接取样的方式进行取样，避免了外界的杂菌进入发酵罐内，可以有效的避免发酵罐内的液体被污染。

本发明涉及一种发酵设备，尤其涉及一种葡萄酒酿造用的智能化压帽设备。本发明的技术问题：提供一种能够使酿造容器内的皮渣大面积接触到葡萄酒液、不会携带外界杂质进入酿造容器内、自动化程度高效率高的葡萄酒酿造用的智能化压帽设备。一种葡萄酒酿造用的智能化压帽设备，包括有固定架，固定架设于横移轨道的移动件上，固定架另一侧设有第一电动滑轨，第一电动滑轨的移动件上设有移动架，移动架一侧设有防护盖。本发明通过采用横移轨道带动该设备在众多酿造罐上方移动的方式，能够使酿造罐内的葡萄酒酿造压帽过程不需要人工携带工具，避免了人工携带工具带来了杂质到酿造罐内，影响葡萄酒酿造的质量。

本发明公开了一种红霉素降解菌IURM F58及其应用，属于生物技术领域，本发明提供的红霉素降解菌及其应用，是通过微生物修复技术，即根据红霉素的特性，从特定环境条件中或者通过改造，得到能够降解红霉素的微生物，将红霉素结构进行破坏，得到无污染的代谢产物，实验证明，本发明的红霉素降解菌IURM F58可以在红霉素为唯一碳源的环境中存活，具有很高的红霉素降解活性，红霉素降解率可达到46％～76％，本发明所提供的红霉素降解菌IURM F58可以应用于污染环境中的红霉素降解，在水处理和土壤修复方面具有很好的应用价值。

本发明属于病毒分子检测技术领域，提供了一种检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯褪绿矮化病毒的RPA试剂盒，包括核苷酸序列如SEQID NO:1‑4所示的检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯褪绿矮化病毒的RPA引物和TwistAmpDNA amplification Basic Kits。发明提供的试剂盒对甘薯病毒2、甘薯轻斑驳病毒等其他侵染甘薯的病毒无特异性条带片段，检测准确、高效灵敏，为可对种薯种苗组培苗以及大田中薯苗甘薯羽状斑驳病毒和甘薯褪绿矮化病毒的快速检测、早期预警等提供服务。

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及一种微杆菌XL1及其在产Levan果聚糖中的应用。本发明提供了保藏编号为CCTCC NO：M2021423的菌种，并公开了该菌种产Levan果聚糖的应用，本发明还提供了菌株的筛选和培养产Levan果聚糖应用的具体方法。且经过多次试验，提供了该菌种产Levan果聚糖的最优培养条件，从而使得产Levan果聚糖的碳源利用率超过64％。

本发明公开了37种蓝莓品种特异性分子标记位点及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，筛选，验证，获得准确鉴定37种蓝莓品种的1412个SNP标记位点；（4）基于这些位点标记开发出一种简便、快速、准确鉴定37种蓝莓品种的方法，为从源头准确控制蓝莓品种奠定技术基础。

本发明提供了一种细胞裂解装置及基于细胞裂解装置的细胞纯化和/或细胞裂解的方法，属于细胞裂解纯化技术领域；所述细胞裂解装置包括脉冲电源(1)和与脉冲电源(1)电连接的微细管电极(12)，所述微细管电极(12)包括电极管(1‑1)；所述电极管(1‑1)的内壁附着有液态金属薄膜。本发明通过控制脉冲电源(1)释放电压通过电极管(1‑1)在杂质细胞的上方形成非均匀的电场。杂质细胞因为周围电压远高于自身跨膜电位，因此快速裂解，达到裂解杂质细胞的目的。

本发明提供一种贝莱斯芽孢杆菌()SUNO‑18S‑36株的发酵方法，涉及微生物领域。该发酵方法，采用如下培养基：葡萄糖4～10g/L、玉米浆5～20g/L、酵母粉5～25g/L、蚕蛹粉5～10g/L、碳酸钙0～10g/L、葡萄糖酸钙0～30g/L、七水硫酸镁0.1～1g/L、硫酸锰0～0.1g/L、磷酸钙0～10g/L，pH7.0～7.5。本发明发酵方法中涉及的微生物具有解磷、降解农药残留的功能，对病原菌具有拮抗作用，采用本发明发酵方法，可以在较短的时间内，得到高活菌含量、高芽孢率、高抑菌活性物质的发酵液。

本发明公开了一种基于明胶水凝胶的己丁二糖脱乙酰酶固定化方法，包括如下步骤：向含有己丁二糖脱乙酰酶的酶液中加入明胶，并加热使明胶溶解；加入京尼平，并按体积比1:0.8～1.2加入含有表面活性剂的氟化液，振荡混匀后冷却，并摇晃培养0.5～2天；按体积比，加入5～15％的1H,1H,2H,2H‑全氟辛醇，并加入缓冲液，水油分层后取水相，静置后获得第一水凝胶；第一水凝胶经清洗后，加入缓冲液，并加入京尼平，摇晃培养1～5天，得到第二水凝胶，即为固定化己丁二糖脱乙酰酶。本发明采用两步成胶的方式，制备得到的固定化己丁二糖脱乙酰酶，具有较好的耐高温性能，可以耐受80℃高温处理，对提升酶的催化活性具有显著帮助，并且稳定性较好，重复使用8次后，水凝胶催化活性无明显变化。

本发明公开了一种基于同源重组原理对耳道念珠菌进行基因敲除的方法，包括以下步骤：1）引物设计：2）提取耳道念珠菌的基因组DNA；3）扩增目的基因上、下游同源臂和敲除抗性基因片段；4）空载体酶切及重组质粒构建；5）重组质粒进行转化；6）阳性转化子筛选；7）敲除插入DNA片段扩增；8）耳道念珠菌电转化；9）筛选阳性转化子，获得耳道念珠菌敲除株。本发明还提供了一种对耳道念珠菌敲除株进行敲除基因回补的方法。本发明提供的基于同源重组原理对耳道念珠菌进行基因敲除以及对敲除株进行敲除基因回补的方法能成功实现对特定基因的敲除和敲除株的回补操作，对研究耳道念珠菌这种新兴的耐药超级真菌的研究提供了有力的技术支持。

本发明涉及防疫检测领域，尤其涉及一种三重数字微滴PCR检测猪圆环病毒的方法、引物、探针和试剂盒。检测靶点在检测猪圆环病毒中的应用，所述的检测为非疾病的检测与诊断方法，检测靶点包括以下检测靶点中的一种或多种：猪圆环病毒1型（PCV1）检测靶点的序列如SEQ ID NO:1所示；猪圆环病毒2型（PCV2）检测靶点的序列如SEQ ID NO:2所示；猪圆环病毒3型（PCV3）检测靶点的序列如SEQ ID NO:3所示。本发明基于ddPCR的优势，建立猪圆环病毒不同基因型的高灵敏、精确鉴别检测方法，可应用于常规动物检疫以及饲料、肉制品、疫苗等病毒含量低、基质复杂的动物源产制品的检疫监测和载量滴定。

本发明涉及细胞培养设备技术领域，且公开了一种细胞培养用激流式生物反应器，包括振动器，罐体和控制器，所述罐体安装在振动器的上方，所述振动器与控制器电性连接，所述罐体的内腔装有培养液，所述罐体的顶部安装有密封盖，所述振动器的外壁上设有用于混合培养液的竖向混合组件，所述密封盖的底面设有收集器。本发明通过在罐体内的培养液中放置流动液珠，并利用上下错位设置的下电磁体和上电磁体对流动液珠的吸引力而促使流动液珠在培养液内上下移动，使得流动液珠在重力、向心力以及磁作用力的下在呈圆滑的曲线型流动，配合流动液珠质软的特性，达到在避免增大对培养液剪切力的前提下提高对培养液上下混合的效果。

本发明公开了一种提高浓香型原酒品质的功能菌液及其应用，属于酿造微生物技术领域。本发明方法中制备功能菌液的过程中，发酵过程稳定，可通过半连续补料操作实现规模化的连续生产运行，生产效能显著优于分批次的发酵方式。利用本发明方法所制备的功能菌液，己酸产量较高，丁酸产量较低，并且发酵过程中不产生4‑甲基苯酚和苯酚等异嗅组分。本发明方法中功能菌液在酿造生产中，无需改变浓香型白酒酿造工序，仅通过浓香型白酒发酵菌群调控装置或简易式不锈钢管道工具，在窖池酒醅主发酵结束后，向窖池内上层酒醅加入所制备的功能菌液可提升浓香型原酒己酸乙酯的含量以及其他有益风味物质含量，对浓香型原酒品质提升和优级品率提升具有重要意义。

本发明公开了一种核酸检测仪及其光学检测装置。该光学检测装置包括支架、设于支架上的发射光路和激发光路，光学检测装置具有用于面向核酸检测仪的芯片槽的下端部的发射光出射部和激发光接收部；发射光路包括沿第一光轴顺序设置的光源和第一导光件，第一导光件具有第一端部和第二端部，第一端部邻近光源，发射光出射部形成于第二端部上；激发光路包括沿第二光轴顺序设置透镜和荧光传感器，激发光路还包括具有第一端部和第二端部的第二导光件，激发光接收部形成于第二导光件的第一端部上，第二导光件的第二端部邻近透镜；第一光轴和第二光轴之间构成大于0且小于180度的夹角。本发明有利于使核酸检测仪结构紧凑而体积较小。

本发明提供了一种含有肉牛DKK3基因3’UTR序列和双荧光素酶报告基因的质粒及其应用，所述质粒包含bta‑miR‑25与牛DKK3结合的靶点，其构建包括设计DKK3基因3’UTR区扩增引物并加入酶切位点Pme I和Xho I，以牛肾细胞(MDBK)cDNA为模板进行扩增，将PCR产物及pmirGLO Vector分别用限制性内切酶Pme I和Xho I进行双酶切，将酶切后纯化的载体pmirGLO Vector和DKK3基因3’UTR片段连接，转化，培养，PCR检测，测序，将测序正确的菌液重新扩大培养，质粒提取等步骤，本发明为筛选调控DKK3表达的miRNAs、评估miRNAs对DKK3表达的调控作用提供了简单易行的工具，具有灵敏度高、速度快和费用低等优点；本发明还为DKK3的表达调控带来了更深层次的认知，能运用于家畜肉质遗传改良分子调控机制的研究，具有较好的应用前景。

本发明提出了一种CAR‑CXCL12T淋巴细胞及其制备方法，属于基因工程技术领域，所述T细胞的表达靶向CXCR4的嵌合抗原受体为CAR‑CXCL12，其基因序列见SEQ ID NO.1。本发明通过基因芯片筛选靶点CXCR4，针对靶点CXCR4制备了其嵌合抗原受体CXCL12，感染制备T淋巴细胞，通过体外杀伤实验、荷瘤大鼠动物实验后显示了优越的抗肿瘤治疗的疗效且未发现明显的不良反应。同时，这是一种广谱的肿瘤细胞治疗方法。

一种用于核酸检测的微流控芯片及核酸检测设备，该微流控芯片包括样本提纯腔、扩增液准备腔、扩增液停留腔、混合流道、反应液收集腔、分液结构、扩增反应腔和废液腔，在第一离心运动下，扩增液准备腔内的扩增液可流入扩增液停留腔，而在样本提纯腔内的样本液由于毛细力的作用留在样本提纯腔；在第二离心运动下，扩增液和样本液可突破毛细力的约束进入混合流道，充分混合后汇聚于反应液收集腔；在第三离心运动下，反应液收集腔内的反应液经过分液结构均匀分配到多个扩增反应腔，以便在扩增反应腔室内进行恒温扩增反应和实时荧光检测。该微流控芯片可实现快速、简单、稳定的离心分液操作，便捷、高效、可靠地完成恒温扩增反应及荧光检测。

本发明属于生物医药领域技术领域，具体涉及一种乳腺癌基因检测试剂盒及其应用方法。本发明公开了联合检测miR‑2053和LncRNA RP11‑624L4.1的表达水平在制备诊断乳腺癌的产品中的应用以及相关的检测试剂盒。另外，本发明还提供了miR‑2053和LncRNA RP11‑624L4.1在制备治疗乳腺癌的药物组合物的应用以及相关的药物组合物。本发明的试剂盒能够作为乳腺癌诊断的手段之一，具有检测快速方便、检测灵敏度高、特异度好、成本低，可以满足绝大多数肿瘤病人的检测需求，应用范围广。本发明的药物组合物对乳腺癌有较好的抑制作用，在乳腺癌治疗中具有重要的参考意义和现实意义。

本发明提供CH I 3L1在椎间盘退变性疾病中的应用，涉及医学生物检测技术领域。该CH I 3L1在椎间盘退变性疾病中的应用，包括检测CH I 3L1基因表达的产品在制备诊断椎间盘退行性病变的工具中的应用。本发明可早期筛查椎间盘退变的患者，以期及早进行干预或预防，最大限度的延缓患者病情进展，降低致残率，本发明首次发现了对椎间盘退变具有较高诊断和治疗价值的分子标记物CH I 3L1；通过标志物CH I 3L1诊断试剂盒和相关药物的研制和应用，可以使椎间盘退变的早期诊疗更加方便易行，为临床医生快速并准确掌握患者病情，为提高临床治疗效果奠定基础。

本发明提供一种制备后纵韧带骨化患者永生化后纵韧带细胞方法，涉及基因工程技术领域。该制备后纵韧带骨化患者永生化后纵韧带细胞方法，包括以下步骤：S1、永生化后纵韧带细胞的构建；1)SV40Tant i gen基因及Hygromyc i nB抗性基因的确定；2)克隆过表达SV40Tant i ge慢病毒质粒，并携带Hygromyc i nB抗性；3)慢病毒的包装。本发明，永生化后纵韧带细胞系建立可简化研究过程，为研究提供足量而性状稳定的研究细胞，并被广泛用于人类疾病的研究，通过SV40Tant i gen基因及Hygromyc i nB抗性基因一同构建过表达慢病毒质粒成功高效的建立了永生化后纵韧带细胞，用于后纵韧带骨化疾病发病机制的研究。

本发明涉及一种MOF‑Ni/纳米二氧化钛微生物促进剂及其制备方法，具体包括MOF‑Ni/纳米二氧化钛分散液、菌液和培养基。制备方法为将MOF‑Ni/纳米二氧化钛分散液加入到灭菌的培养基中，获得混合液B；向混合液B中加入菌液，即得微生物促进剂。本发明MOF‑Ni/纳米二氧化钛微生物促进剂不仅能够提高脲酶的活性使碳酸钙的产量得到提高，还能在微生物诱导碳酸钙的实验中作为载体增加成核位点，并且由于纳米二氧化钛本身具有吸附功能，它还能够在诱导碳酸钙沉淀时加速碳酸钙的沉淀，促进微生物的矿化作用。

本发明提供了一种单细胞空间转录组分析方法。具体地，本发明提供了一种可以检测非解离状态的单细胞空间转录组。本发明的方法可以在保有组织中细胞空间位置信息的基础上，高通量地收集单细胞，通过二代高通量测序，获得高灵敏度、高重复性和可定量化的细胞转录组数据，并基于每个目标细胞的三维坐标值，将每个目标细胞的单细胞空间转录组测序数据映射于组织样品的对应空间上，从而获得组织样品的单细胞空间转录组测序数据集。本发明的方法可广泛应用于正常和疾病组织的单细胞基因表达定量研究，为组织中细胞状态和功能研究提供更高效和准确的工具。

本发明属于基因工程技术领域，具体公开了大豆GmALS3基因在培育耐低磷和抗铝毒植物中的应用。根据本发明研究结果，大豆GmALS3基因能够响应植物磷饥饿和铝毒胁迫，转化于拟南芥能有效减少铝胁迫，或减少低磷胁迫对根系生长的抑制作用。因此，GmALS3基因具有抗低磷和抗铝胁迫的双重功能，在构建耐低磷、耐铝的植株上具有很好的应用价值。

本发明公开了一种基于金纳米团簇/MnO纳米花的电化学发光传感器的制备及对前列腺抗原(PSA)和Let‑7a miRNA的检测应用。本发明的技术方案是利用电化学发光共振能量转移(ECL‑RET)技术，制备了电化学发光免疫传感器，通过“off‑on”检测模式，实现了对前列腺抗原和Let‑7a miRNA的灵敏分析。首先采用金纳米团簇(Met‑Au NCs)修饰电极，构建了Met‑AuNCs ECL供体与Au‑MnO纳米花受体之间的高效ECL‑RET系统，制备了一种信号“off”的ECL免疫传感器检测PSA。然后，Let‑7a miRNA(目标二)触发滚环放大(RCA)反应产生长DNA纳米线，该纳米线可以连接大量生物素‑链霉亲和素结构，标记大量碱性磷酸酶(ALP)，ALP催化L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠(AAP)原位产生大量抗坏血酸(AA)。AA将MnO还原为Mn，抑制了MnO对Met‑AuNCs ECL的猝灭，并获得明显的ECL信号“ON”状态，用于Let‑7a检测。