生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明提供了一种与湖羊尾脂重性状相关的分子标记及其检测方法。所述分子标记根据TUSC5基因序列设计引物，从湖羊血液中提取DNA，通过PCR扩增、DNA测序和序列分析，发现在扩增片段的第191位存在一个C/T多态性位点，进一步使用KASPar引物对778只湖羊的多态性位点进行检测和建立最小二乘模型，对基因型与尾脂重性状进行关联分析，发现该位点与湖羊的尾脂重呈显著相关。本发明的分子标记可用于选留TT基因型的个体进入核心群，以减少尾脂沉积，有助于提高经济效益。

本发明公开了一种用于生产脂肪酶的里氏木霉工程菌及其构建方法和应用，属于分子生物学和生物技术领域。所述里氏木霉工程菌异源表达氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的脂肪酶；所述里氏木霉工程菌中，将里氏木霉中原始的纤维素酶cbh1和cbh2以及木聚糖酶xyn1和xyn2的基因依次替换为编码所述脂肪酶的基因；编码所述脂肪酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明成功构建了分泌表达脂肪酶的里氏木霉工程菌株。该工程菌株可用于食品级的脂肪酶的生产，生产的脂肪酶符合食品安全规范，并且可以显著提高烘焙食品(如面包)的比容和白度，将更适合实际的食品行业需求。

本发明公开了一种硫化零价铁的生物制备方法及其应用，本发明的有益效果是：本发明中的制备方法采用硫还原地杆菌制备硫化零价铁，硫还原地杆菌一方面可以将零价铁表面的氧化物还原去除，另一方面可以加速单质硫和零价铁的反应，从而使本发明中的制备方法具备反应速度快、反应效率高、反应条件温和、无需能耗的优点；此外，本发明中的制备方法采用单质硫和零价铁作为反应原料，原料来源丰富、廉价易得、成本低，对环境无污染且无需消耗大量能源，适用于大批量的工业化生产。另外，采用本发明中的制备方法制得的硫化零价铁表面包覆的硫的含量高，对Cr(VI)的去除率高，去除速度快。

本发明涉及公共卫生预防技术领域，尤其涉及一种公共卫生医学集菌检测装置，包括检测箱、盖板、安装组件、控制器、加热板和取放机构，取放机构包括驱动件、凸轮、两块滑块、抵持框、存放板、支块和第一弹簧，检测箱设置有两个滑槽，两块滑块分别与对应的滑槽滑动连接，抵持框均与两块滑块固定连接，存放板与抵持框固定连接，存放板上设置有放置槽，抵持框设置有抵持槽，抵持槽呈矩形，驱动件与检测箱固定连接，驱动件的输出端与凸轮固定连接，凸轮与抵持槽适配，支块与存放板固定连接，第一弹簧的一端与支块固定连接，第一弹簧的另一端与检测箱固定连接，以此方式能够更方便的进行取放器皿，降低了工作人员的劳动强度。

本发明公开了滇鸡血藤ITS单倍型数据库、SNP标记及应用。通过建立滇鸡血藤ITS单倍型数据库，得到滇鸡血藤ITS条形码所有单倍型，其种内差异位点分别ITS序列的第137bp、146bp、163bp、277bp、474bp、488bp、611bp、637bp、647bp，共构成19种单倍型，包含19种单倍型的单倍型数据库覆盖了滇鸡血藤全部的单倍型。只要根据测定的ITS序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.19任一个所示，就可以确定其是滇鸡血藤，因此可用于快速鉴定滇鸡血藤。同时，发现19种滇鸡血藤单倍型与其混伪品南五味子、异形南五味子、黑老虎的主要差异位点为212bp、223bp、224bp。利用本发明所提供的SNP标记，可准确、快速的将滇鸡血藤及常见混伪品区分开来，具有重要的应用价值。

本发明公开一株能够用于发酵桔梗的戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)，所述戊糖片球菌的名称为：ZY23，分类名称为：戊糖片球菌，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2023年11月17日，保藏号：CGMCC NO：29047。本发明戊糖片球菌ZY23菌株分离于植物发酵物，具有很强的生长活性。本发明方法可以显著提高桔梗发酵液中多酚、黄酮、多糖、还原糖等活性成分，提高其抗氧化及抗炎能力。

本发明提供高效引入2‑羟基庚酸的氨酰tRNA合成酶及其应用，所述氨酰tRNA合成酶突变体由如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第346、348、384、401、417位点突变所得。本发明的氨酰tRNA合成酶突变体在MmPylRS活性位点的对应位置进行突变，改变其底物特异性，使其能够识别2‑羟基庚酸，将2‑羟基庚酸与配对的tRNA相连，经核糖体转录翻译，插入目标蛋白基因的特定位点，从而达到对2‑羟基庚酸遗传编码的目的，这对基础研究以及工业生产都至关重要；并且氨酰tRNA合成酶突变体将对2‑羟基庚酸的引入效率提高了15.88~30.92倍。

本发明涉及基因育种技术领域，尤其涉及一种番茄隐性核雄性不育基因及InDel分子标记和应用。利用本发明提供的分子标记检测slfac突变体，碱基突变的番茄品系表现出隐性雄性核不育性状。可将本发明的分子标记用于鉴定或选育雄性不育番茄种质资源，还可用于番茄基因SlFAC分型以及番茄分子标记辅助育种。

本发明公开了一种高效基因编辑方法及其应用，涉及生物技术领域。具体的，高效基因编辑方法包括：(1)将G1期的动物受精卵在含有氧化还原剂的溶液中进行处理；(2)将处理后的动物受精卵与Cas9蛋白、核酸分子混合，并进行电转染处理；其中，所述氧化还原剂选用L‑半胱氨酸，其浓度为10～15nmol/L；所述电转染处理的电压≥180V，电击次数≥1次。本发明的方法大幅提升了胚胎基因组的编辑效率，且无需使用大型复杂仪器，降低了动物胚胎的使用量，降低了实验难度。

本发明公开了一种用于快速检测罗氏沼虾传染性早熟病毒的试剂盒以及使用该试剂盒检测罗氏沼虾传染性早熟病毒的方法，属于病毒检测技术领域。所述试剂盒包括PCR Mix、酶Mix、阴性质控品、阳性质控品，其中所述PCR Mix包括上、下游引物和荧光探针，具体核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.9所示。本发明的试剂盒不仅能快速准确地检测罗氏沼虾传染性早熟病毒，还具有特异性强、检测限低、灵敏度高，操作简单的优点，适合大规模应用。

本发明公开一种与玉米白斑病相关的抗性QTN片段、分子标记及其应用，所述抗性QTN片段为MWS1‑1，其位于玉米的第1染色体上的27552867‑27552938区间，所述抗性QTN片段的Chr1_S_27552867位点等位变异为G/A，Chr1_S_27552938位点为等位变异C/G，所述Chr1_S_27552867位点为G等位变异，同时Chr1_S_27552938位点为C等位变异时，玉米的抗白斑病能力强。因此，本发明为抗白斑病的玉米单株的选择提供了一种有效的分子辅助选择手段，可应用于玉米白斑病遗传改良及其育种中，提高选择效率，加快抗白斑病育种进程，降低育种成本；通过对携带抗白斑病的等位变异的玉米单株有进行授粉保种，用于选育抗白斑病杂交种，具有广阔的前景。

本发明公开了一种大肠杆菌乙酰化突变菌株，是通过以合适的质粒为载体，构建含有外源dtsR1、accBC、以及mcr基因的生产质粒，然后转入大肠杆菌生产菌株而得到；并且还使用不同的启动子来替换生产质粒上原有的启动子，以调控所述三个基因mcr、dtsR1和accBC的转录水平。还公开了所述突变菌株的应用。本发明通过在已构建的外源表达3‑羟基丙酸途径的基础上，从去乙酰化方向入手，利用基因工程手段对大肠杆菌进行了改造，获得的菌株在以乙酸或其盐为碳源的培养基中生产3‑羟基丙酸，其中最优菌株的产量为3.15g/L，产率可达0.46g/g，乙酸或其盐的利用速率为0.214g/L/h，为通过大肠杆菌基因工程菌使用乙酸或其盐作为碳源合成3‑羟基丙酸开辟了一条新的途径。

本发明提供了一种拟轮枝镰孢菌相关的ZmXYXT2基因的应用，ZmXYXT2基因在玉米植株中过表达，提高所述玉米植株对拟轮枝镰孢菌Fusarium verticillioides造成的苗枯病和茎腐病的抵抗能力；所述ZmXYXT2基因的全长编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述ZmXYXT2基因的全长编码区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明鉴定到一个玉米抗拟轮枝镰孢菌苗枯病和茎腐病相关的基因ZmXYXT2，通过在玉米品系B104中过量表达ZmXYXT2可以显著提高B104对拟轮枝镰孢菌造成的苗枯病和茎腐病的抵抗能力。

本发明公开了一种基于RAA‑CRISPR‑Cas12a体系检测两种利什曼原虫的方法，属于医学检测技术领域。该方法设计针对利什曼原虫HGPRT基因的特异性RAA引物，对目标片段进行扩增，特异性的crRNA和Cas12a识别目标片段并激活Cas12a的反式切割活性，从而对被FAM和Biotin修饰的单链DNA探针进行切割。通过侧流层析试纸条T线的有无指示样品中是否含有利什曼原虫。该方法快速、可视，且特异性好，灵敏度高，对设备要求较低，尤其适合在野外环境进行快速、准确的检测，为基层监控和诊断利什曼原虫感染提供了良好的技术手段。

本申请公开一种空气自动采样及检测装置，包括：采集单元，设置于装置主体上部，底部设置有储液腔；第一转移单元，设置于所述储液腔下方，排液单元与第二转移单元均设置于所述第一转移单元下方，检测单元，设置于所述第二转移单元下方；驱动单元工作时，所述第一转移单元内所述磁棒配合所述第一凹槽可携磁珠转动，当所述第一凹槽转动到所述排液单元，所述排液单元可将所述第一凹槽中液体排出，所述第二转移单元可与第一转移单元同步转动至所述第二凹槽与所述第一凹槽靠近对齐；此外，所述驱动单元还可带动所述磁棒，使得所述磁珠被间断性吸附。本申请的有益效果是，不用水平放置就可以完成裂解液磁珠分离，自动转移并洗脱磁珠，使得操作简便。

本发明提供新冠病毒SARS‑CoV‑2特异性T细胞及其应用。具体提供了一种靶向新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)的特异性T细胞，其由新冠病毒限制性表位多肽或其致敏的树突状细胞诱导获得。还提供了包含所述特异性T细胞的制品和产品，其能够用于新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的治疗及预防产生特异性免疫效应。

本发明公开了一种衍生MSCs来源外泌体制备方法及制备的外泌体和应用，涉及细胞外泌体制备技术领域，本发明通过构建携带ARRDC1‑TRAIL融合基因的rDNA区打靶载体mini‑pHrn‑ARRDC1‑TRAIL，将融合基因定点整合至人iPSCs的rDNA区，随后将经基因编辑的iPS Cs向iMSCs诱导分化，最终发现能够以AT‑iMSCs为细胞基础，大量获取AT‑iMSCs来源Exo，大大提高了外泌体的产量；探究Exo体外抗肿瘤作用发现AT‑iMSCs来源的Exo不仅保留了MSCs来源Exo的特性，还能表达TRAIL蛋白，使其具有广谱抗肿瘤作用。

本发明公开了陆地棉GhANN4基因在陆地棉抗旱和耐盐性中的应用，属于基因工程技术领域。GhANN4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还公开了GhANN4基因在提高陆地棉抗旱性和耐盐性中的应用。本发明发现GhANN4基因在盐和干旱胁迫中显著表达，在陆地棉中沉默GhANN4基因，经干旱和盐胁迫处理后，发现GhANN4基因沉默引起陆地棉叶片萎蔫、抗氧化酶活性降低、MDA含量增加和逆境胁迫相关基因表达下降，即沉默GhANN4基因减弱棉花的抗旱性和耐盐性，证明GhANN4基因正向调控陆地棉响应干旱和盐胁迫。本发明为陆地棉应对非生物胁迫提供重要基因资源。

本发明属于生物技术领域，具体涉及类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒ZYr01株感染性克隆的构建与应用。经实施例验证，本发明提供的类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒ZYr01株感染性克隆滴度较高，且在细胞中连续传20代仍具有良好的感染性，为猪繁殖与呼吸综合征基因功能等研究奠定了基础。

本发明公开了一株植物乳杆菌YM‑4‑3，已于2023年03月06日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2023253。本发明的优点在于：植物乳杆菌YM‑4‑3能够有效改善便秘，且具有良好的耐酸、耐胆盐和胃肠道黏附能力，在胃肠道环境中具有很高的生存率，能显著抑制胃肠道致病菌的繁殖，尤其是金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌沙门氏菌，可用于制备预防或改善便秘的产品。

本发明涉及一种用于细胞培养的微流控芯片，包括由PDMS制成的芯片本体(1)，所述芯片本体(1)内设有培养腔室(10)和气液交换流道(20)；所述培养腔室(10)分别连通有进样流道(11)和出样流道(12)，所述进样流道(11)具有进样口(11a)，所述出样流道(12)具有出样口(12a)；所述气液交换流道(20)设置在所述培养腔室(10)的外侧，且互不连通；所述气液交换流道(20)与所述培养腔室(10)共面，并与所述培养腔室(10)之间可进行气体和水分交换。本发明所述的用于细胞培养的微流控芯片其可稳定细胞培养环境，有利于细胞的生长。

本申请公开了一种环保型农业废弃物处理系统及方法，属于农业废弃物处理技术领域。该处理系统包括预处理模块、厌氧发酵模块、沼气利用模块、沼渣利用模块和监测控制模块，预处理模块用于对农业废弃物进行预处理；厌氧发酵模块用于对预处理的有机废弃物进行厌氧发酵；沼气利用模块用于对厌氧发酵产生的沼气进行收集、净化、储存和综合利用；沼渣利用模块用于对厌氧发酵产生的沼渣进行进一步处理和利用；监测控制模块用于对各模块的数据进行收集与分析，并根据预设的智能控制模型与算法向各模块发送控制指令，实现过程监控和优化控制。本申请实现了农业废弃物的高效处理和资源化利用，不仅减少了农业废弃物对环境的污染，还能够转化废弃物为资源。

本发明尤其提供了一种缀合至NLS序列的引导RNA(NLS‑gRNA)及其制备和使用方法。例如，在一些实施例中，所述gRNA的3'端经由包含化学部分和肽间隔子的接头缀合至核定位序列(NLS)的N末端。

本发明涉及医疗器械技术领域，特别涉及一种卵泡液收集装置，包括：培养皿；加热装置，设置在所述培养皿的下方；密封罩，罩设在所述加热装置外侧，所述培养皿被罩设于所述密封罩内；取卵管，一端连接于取卵针，另一端连接于所述密封罩，且所述取卵管的出口端位于所述培养皿的上方；真空泵，通过负压管连接于所述取卵管；热管机构，连接于所述加热装置与取卵管之间，在所述真空泵运行前后向所述取卵管内通入热空气。本发明通过设置热管机构，在真空泵运行前后向取卵管内通入热空气，使得取卵管内保持适当的温度，防止卵泡液在收集过程中因温度变化而影响卵子质量。

本发明提供一种实时荧光定量PCR同时检测鹦鹉喙羽病病毒和禽多瘤病毒的引物探针组合、试剂盒及方法。所述引物探针组合包括鹦鹉喙羽病病毒引物探针组合和禽多瘤病毒引物探针组合，所述鹦鹉喙羽病病毒引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑3所示，所述禽多瘤病毒引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO:4‑6所示，本发明提供的试剂盒及检测方法，能够同时检测待测样本中的鹦鹉喙羽病病毒和禽多瘤病毒，灵敏度高、特异性好，对鹦鹉喙羽病和禽多瘤病的预防和控制以及相关疫苗及药物的研发均能产生积极的影响，有利于鹦鹉养殖业的发展，本申请提供的试剂盒还可以制备成冻干试剂，冻干试剂可常温运输和储存，降低了运输和保存要求。

本发明公开了一种改性猪粪基生物炭固定化耐热微生物菌剂的制备方法，使用柠檬酸钠和糊精作为菌剂的保护剂，以改性猪粪基生物炭作为菌剂的固定化载体，将Serratia sp.AXJ‑M和Bacillus halotolerans ACY这两种功能性耐热微生物包埋在其中，然后添加生物促生剂与制备好的固定化菌剂同时用于含苯酚造纸废水的处理。本方法能为微生物提供优良的定殖场所并保持较高的微生物活性，对含苯酚造纸废水具有优异的处理效果，并且操作稳定性好，极大地降低用于废水处理的实际成本。同时，为畜禽粪便的资源化利用提供了新的方向，具有良好的应用前景。

本申请涉及新型超氧化物歧化酶1变体和使用其生产谷胱甘肽或其衍生物的方法。

本发明提供了一种快速检测动物流产衣原体的引物探针组、试剂盒及其应用，属于分子生物学领域。本发明采用RAA技术，以流产衣原体基因组上的保守序列作为检测目的基因片段，设计引物、检测探针，通过收集荧光信号来实现快速检测。本发明流产衣原体核酸的最低检出限为1.13copies/μL，灵敏度高、特异性强、操作简便，检测时间短，20分钟内完成检测；无需像PCR一样需通过琼脂糖凝胶电泳鉴定，可根据阈值自动判定结果。

本发明涉及一种纤维素酶和半纤维素酶的转录抑制因子及其基因与应用，属于基因技术领域。一种纤维素酶和半纤维素酶的转录抑制因子的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；纤维素酶和半纤维素酶的转录抑制因子，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明提供了上述转录抑制因子的基因敲除或沉默后在提高篮状菌属丝状真菌对纤维素酶和半纤维素酶的生产能力中的应用。

本发明公开了一种靶核酸检测用引物探针组、试剂、应用和试剂盒，靶核酸含有二级结构，引物探针组包括探针、第一引物和第二引物，第一引物包括靶标序列结合区和第一靶序列结合区，第二引物包括第二靶序列结合区，探针上修饰有检测基团；其中，第一靶序列结合区和第二靶序列结合区能够与靶核酸序列特异性结合；靶标序列结合区用于造成扩增子二级结构的改变；探针用于与其中一条引物扩增得到的扩增子互补配对。本发明在其中一条引物上引入一段能够在正向引物与反向引物分别与靶标序列特异性结合并延伸产生双链预扩增产物的过程中，造成扩增子区域二级结构的改变的靶标序列结合区，从而改善探针与扩增子的杂交效率，大大提高检测灵敏度。

根据本公开，提供由患者的血液试样鉴定新抗原、或用于鉴定的试样。根据本公开，提供用于不进行核酸扩增和/或基于培养的增殖而进行分析的制备包含受试者来源的血中循环肿瘤细胞的试样的方法，其包括：从使用血液成分单采术由该受试者采集的外周血单个核细胞中分离单核细胞的步骤，其中，进行前述血液成分单采术的血液成分单采术条件包括血中循环肿瘤细胞浓缩条件；从分离了单核细胞的该外周血单个核细胞中分离血中循环肿瘤细胞的步骤；根据需要，确认该分析所需要的血中循环肿瘤细胞的纯度的步骤；和，根据需要，对该血中循环肿瘤细胞进行用于该分析的前处理的步骤。

本发明公开了一种多酶共展示重组假单胞菌的构建方法和应用，以假单胞菌Pseudomonas sp.JY‑Q作为底盘细胞，使用假单胞菌JY‑Q的内源外膜蛋白OmpA(外膜蛋白A)及其变体作为锚定基序，将带有信号肽、靶蛋白、锚定肽的基因序列的重组表达质粒导入上述底盘细胞后得到工程菌株。该工程菌可以使fastpetase和mhetase基因在假单胞菌Pseudomonas sp.JY‑Q中表达，并将这两个酶展示于细胞表面，表面展示的FASTPETase以及MHETase能有效地与底物接触，可作为全细胞催化剂应用于PET塑料降解中。

本发明公开了一种光合固氮工程菌及其构建方法与应用。本发明公开的光合固氮工程菌，其制备方法包括：对受体菌进行包括1)与2)的改造，得到重组菌：1)使受体菌中NifA蛋白质具有活性；2)包括2A)或2B)：2A)将受体菌基因组中铁固氮酶anfH启动子替换为钼固氮酶nifH启动子；2B)将受体菌基因组中AnfA基因和铁固氮酶anfH启动子替换为钼固氮酶nifH启动子。本发明得到的光合固氮工程菌突破了铵抑制等调控限制，实现了铁固氮酶的组成型表达，大大缩短了培养铁固氮酶表达菌的生长周期，显著提高了铁固氮酶的产量，具有很好的应用前景。

本发明公开了一种乳腺癌肝转移循环标志物，其特征在于，所述乳腺癌肝转移循环标志物为血浆中肿瘤细胞来源的lncRNAs，包括LINC01579、LINC00861、HOST2及LINC02353。该乳腺癌肝转移循环标志物的敏感性及特异性较高，可以补充目前临床乳腺癌肝转移液体活检的相对空白。

本发明公开了一株产木糖的禾谷镰刀菌及其培养方法和应用，属于功能菌开发技术领域。本发明所述禾谷镰刀菌JCQA13的保藏编号为CGMCC No.40151。所述菌株是一种能够产生木糖的菌种，通过发酵产生的木糖含量为530 mg/L。本发明为木糖的生产提供了新方法。

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种乳腺癌预后标志物和治疗靶点及其应用。本发明首次发现hsa_circ_0067842可作为乳腺癌预后生物标志物和治疗靶点，为乳腺癌的预后和治疗提供新思路；本发明研究显示与正常组织相比，hsa_circ_0067842在乳腺癌患者肿瘤组织中显著上调，将其作为分子标志物具有较好的临床应用价值；本发明的结果表明hsa_circ_0067842在乳腺癌细胞的细胞核和细胞质中均存在。干扰hsa_circ_0067842可以抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力，表明hsa_circ_0067842在乳腺癌的发生发展中发挥促进癌基因的作用，为临床治疗乳腺癌提供了新的思路，有望成为乳腺癌新的治疗靶点。

本发明公开了一种降低沙门氏菌VBNC状态形成的方法，具体涉及沙门氏菌ompA基因功能表达的抑制，属于生物技术及食品微生物领域。本发明方法的应用能够有效抑制沙门氏菌在食品加工等环境中应对逆境胁迫条件时进入VBNC状态，而更多发生死亡。相比于野生型，在不利环境条件下，沙门氏菌ompA基因缺失菌株进入VBNC状态的数量显著降低，在本发明某些实验条件下可达5.6倍，进一步VBNC态的形成比例降低至70％以下，这为沙门氏菌的防治提供理论基础和新思路。此外，本发明方法的成功应用能够增强灭菌效果，因此可在保证食品安全性的前提下降低对食品的杀菌处理强度，有利于节约能耗和食品品质的保证。

本发明属于林木基因工程技术领域，公开了一种农杆菌介导浸花的沙棘遗传转化方法。包括花枝选择、农杆菌的活化和培养、农杆菌转化液的制备、侵染沙棘植株、mCherry荧光检测、mCherry表达量检测。利用含mCherry报告基因的农杆菌LBA4404菌液浸染沙棘授粉后雌花花序，获得转基因果实，不仅可以大大缩短转化周期，实验结果通过荧光观察也比较直观，且能够长期稳定表达，为沙棘基因功能验证提供了一种快速可靠的方法，同时可以为培养转基因沙棘新品种奠定基础。

本发明属于磁泳分离技术领域，具体涉及一种用于鉴定和分离趋磁细菌的磁泳分离仪，所述磁泳分离仪包括对称设置的第一壳体及第二壳体，所述第一壳体与第二壳体之间设有细菌后培养机构，所述细菌后培养机构的输出端通过第一连接主体连接有磁泳分离主体，所述第一壳体与第二壳体之间设有分离鉴定机构，且分离鉴定机构与磁泳分离主体之间通过第二连接主体连接，所述分离鉴定机构远离第二连接主体的一端设有输出管。该发明通过使用磁性颗粒实现了细菌目标物的高效分离，保证了其纯度和准确性，使用特异性结合避免了非特异性结合的干扰，洗涤溶解器去除杂质，得到纯净的细菌目标物，辅助鉴定阀管方便采样与初步鉴定，为后续实验提供便利条件。

本发明涉及分子检测领域，具体涉及香菇H31单核菌丝菌株交配型的特异性引物对及检测方法。利用本发明基于香菇的交配型鉴定引物，可特异性检测A1或A2、B1或B2，可以清晰区分判断交配型的类型，具有较强的特异性；通过对23个H31单核菌丝菌株进行交配型鉴定，确定该鉴定方法简单、经济、高效、检测准确性高。

本发明公开了检测ERBB2基因表达水平的引物组合、试剂盒和方法，包括合包括ERBB2基因特异性引物对和ERBB2基因检测探针。本发明可快速准确检测ERBB2基因表达量，可与正常水平进行比较，判定表达量的高低。本发明方法特异性好、灵敏度高、可检测到拷贝数低于10/μl的样本，检测限相比现有技术显著降低，且具有操作简便、自动化程度高、防污染、有较大的线性范围等优点,可检测出ERBB2‑low BC，为新的BC治疗方法提供有力支持。

本发明提供了一种L‑高脯氨酸生产菌株及其构建方法与应用，所述生产菌株是利用代谢工程手段在出发菌株E.coliW3110的基础上进行进一步改造获得的，以大肠杆菌E.coliW3110为底盘，通过引入外源L‑赖氨酸6‑氨基转移酶将L‑赖氨酸转氨为α‑氨基己二酸半醛，然后自发反应生产D‑1‑哌啶‑6‑羧酸，经△1‑吡咯啉‑5‑羧酸还原酶还原为L‑高脯氨酸，利用发酵法生产L‑高脯氨酸，以葡萄糖作为底物，发酵罐中从葡萄糖直接合成L‑高脯氨酸，具有生产成本低，无有毒代谢副产物生成，遗传稳定，具有转化率高，发酵周期短等优点，发酵50h L‑高脯氨酸产量可高达40.5 g/L，具有非常好的工业应用价值。

本发明涉及一种生物饲料生产设备及工艺，包括回形座；U形架，其安装在回形座端部；移动模块，其滑动设置在回形座与U形架之间；进料架，其安装在U形架上端面上，进料架上端设置有进料槽，进料槽呈向内倾斜设置；柔性绞龙，其安装在进料架与移动模块之间，柔性绞龙上端与进料槽相连通，柔性绞龙用于对进料槽中的青贮饲料进行输送；混合模块，其安装在移动模块下端，混合模块上端与柔性绞龙相连通，混合模块用于将青贮饲料与发酵剂混合均匀；压紧模块，其安装在混合模块下端，压紧模块用于将混合后的青贮饲料输送到窖内并进行压紧。

本发明提供了一株草酸青霉D5及其在干法成熟牛臀肉加工中的应用，涉及食品加工技术领域。本发明所述草酸青霉(Penicillium oxalicum)D5，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.40953。本发明将草酸青霉D5接种于牛臀肉进行干法成熟的方法，可改善牛臀肉的食用品质，提高牛肉氨基酸及风味物质含量。与未接种草酸青霉D5的比较例1相比，本发明成熟牛臀肉的游离氨基酸含量呈现上升趋势，滋味属性丰富度提升，有较高的鲜味，且挥发性风味化合物中醛类、酮类的相对含量较高，具有较好保水性能。本发明方法能够抑制杂菌有害菌生长，有利于提高牛肉消费嗜好度和附加值。

本发明提供了基因GADD45B在作为肺衰老早期预警和干预的分子标志物中的应用，本发明通过研究发现，抑制GADD45B表达可以延缓人肺泡上皮细胞A549的衰老水平。本发明的提出为肺衰老和肺纤维化预警及干预提供了新的分子靶标和研究及治疗方向，本发明的提出为GADD45B在诊断及干预肺衰老及肺纤维化的药物制备中的应用提供了新方向和依据，GADD45B表达抑制剂可以开发成新的诊断及干预肺衰老及肺纤维化的药物，具有广阔的应用前景。

本发明涉及一种防治石榴干腐病的微生物菌剂及其制备方法，所述微生物菌剂为固体菌剂，由卡伍尔氏链霉菌(Streptomyces cavourensis)QT227菌体及一定比例的甘油、活性炭和高岭土混合物组成。本发明制备的微生物菌剂含有卡伍尔氏链霉菌(Streptomyces cavourensis)QT227的活菌数等于或大于1.0×109CFU/g。本发明所制备的微生物菌剂对石榴干腐病的防治效果可达70％以上，且具有生产工艺简便、成本低、不易产生抗药性、环境友好等优点，是一种高效、经济且绿色环保的微生物农药新技术产品。

本发明属于微生物和生物防治领域，具体涉及抗菌谱广的贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）及其应用。所述菌株是从多年连作重茬的烟草地分离到的内生拮抗细菌，其保藏编号GDMCC NO.64125。该菌株抗菌谱较广，对烟草青枯病、烟草黑茎病、烟草赤星病等病原菌都有显著抑制效果，该菌能产生铁载体、吲哚‑3‑乙酸（IAA），还具有溶解有机磷的能力，对烟草青枯病防治效果51.29%，显示了很好的抗病促生长潜力。

本发明属于基因工程技术领域，公开了一种载体、生产低分子量透明质酸菌株及其构建方法与应用，通过构建六磷酸葡萄糖异构酶hasE敲除载体，并将该载体转入兽疫链球菌ATCC 39920中得到hasE基因敲除菌株。随后构建六磷酸果糖激酶基因scrK的过表达载体，并将该载体转入兽疫链球菌ATCC 39920的hasE敲除菌株中，获得scrK过表达菌株。本发明基因工程菌株应用于低分子量透明质酸的生产，通过发酵法可以获得稳定的小分子量透明质酸。该基因工程菌株具有很好的工业化应用前景。通过发酵能够得到分子量为1.43MDa的HA，与野生型兽疫链球菌相比，透明质酸分子量降低了42％左右。

本发明公开了一种维生素MK‑4的生物酶法制备工艺，包括以下步骤：（1）二甲基烯丙基二磷酸的合成，（2）异戊烯基二磷酸的合成，（3）香叶酰香叶酰二磷酸的合成，（4）MK‑4的合成。本发明大大缩短了合成路线，同时采用廉价原料作为出发底物，大大降低了MK‑4的生产成本，且兼具生物法的相关优势比如污染少、操作简便等。相比于化学合成法和传统的微生物发酵法，本发明在产率和生产成本方面具有极大优势，另外本发明的新生物合成路线所得MK‑4产品并不掺杂有MK‑6，产品纯度高，减少了后续分离纯化的难度。

一种基于芯片化培养的细胞电磁力学刺激方法，将承载有细胞的培养芯片与培养液循环模块连接，培养液循环模块使培养液循环进入所述培养芯片，在需要力学刺激时将所述培养芯片放置于电磁场发生模块中，电磁场发生模块产生的电磁场垂直贯穿于所述培养芯片中用于承载细胞的弹性载片，使所述弹性载片受到垂直电磁力的作用。本发明的有益效果是：(1)在培养芯片内部磁性件体积较小情况下仍能产生较大的生物力学刺激；(2)实现细胞的芯片化培养；(3)电磁场发生模块与培养芯片完全分离，降低了染菌概率；(4)电磁场发生模块能产生瞬时变化的拉伸或压缩负荷，更符合仿生学要求。