生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明公开了一种橡胶树品种DNA指纹库的构建方法。本发明筛选的50个SNP分子标记特异性、灵敏度和分辨力高，该SNP分子标记不受环境条件影响，且检测结果准确、重复性和稳定性好，能够全面揭示橡胶树遗传多样性真实水平利用；利用该套SNP标记组合建立DNA指纹图谱库，可以对橡胶树品种进行聚类分析和品种鉴定，使得检测结果更精准、高效，为橡胶树资源保护利用提供理论依据，首次有效区分出橡胶树66个品种，本发明对育成品种的区分率可达100％。利用本发明的单核苷酸标记位点进行检测具有简单、快速、成本低的优点，能够实现生产中大规模的应用。

本发明公开了一种基于结构色水凝胶的心脏纤维化芯片及其制备方法和应用，制备具有微纳拓扑形貌的结构色水凝胶，结构色水凝胶一面为沟槽结构、另一面为纳米孔洞；将结构色水凝胶嵌入微流控芯片中，搭建微流控系统；所述的微流控芯片具有微腔以及其两端的进液通道、出液通道，结构色水凝胶嵌入微腔中，沟槽结构面向上；将心脏细胞分散液和培养基注入嵌入了结构色水凝胶的微流控芯片内，获得心脏芯片；在心脏芯片中注入诱导因子，刺激细胞纤维化，构建心脏纤维化芯片。本发明基于结构色水凝胶的心脏纤维化芯片可以感知和响应心脏细胞的收缩和舒张，直观展示纤维化模型的发展进度，该芯片可应用于纤维化药物的筛选和评估，具有直观性、高效性。

本发明涉及微生物菌剂及其应用的技术领域，具体涉及一株耐盐栓孔菌CGM001及其提高植物耐盐性的应用，所述耐盐栓孔菌保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，其保藏编号CGMCC NO：40585。该栓孔菌CGM001能促进紫花苜蓿耐盐碱胁迫生长，能有效提高紫花苜蓿在盐碱土壤中的功能性状及生物量，单株地上生物量增加119％、地下生物量增加82％。栓孔菌CGM001可用于农田、滨海等原生或次生盐碱土壤的紫花苜蓿促生、降低盐碱胁迫对植物的毒害作用，具有较高应用价值。

本发明公开了一株高地芽孢杆菌JH6及其应用，属于微生物防治技术领域，该高地芽孢杆菌分类命名为高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis)，株号JH6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2023909，分离于浙江省金华市潘安县尚湖镇上溪滩村的茄子地土壤样品，该菌株对烟草疫霉菌的抑制作用强，能够有效防治烟草疫霉菌在茄子叶片和果实上的扩展，在茄子绵疫病的防治等方面具有良好的应用前景。

本发明公开了一种浓香型白酒防水窖池及使用方法，包括窖池主体，在窖池主体内安装有发酵仓，发酵仓与窖池主体之间具有环形间隙；在窖池主体顶设置有支撑板，在发酵仓与支撑板的顶部上设置有盖板；在发酵仓内滑动安有支撑底板，在支撑板上安有提升组件；提升组件包括驱动电机、转轴、槽轮、牵引绳和定滑轮；支撑底板上设有若干渗水孔，在支撑底板上安有多根竖管；在发酵仓底部设置有积水槽，在积水槽底部设置有排水孔，排水孔贯穿窖池主体底部与排水管相连，排水管另一端连接在溢水池上。该方法包括发酵作业和酒糠清理。该窖池能够使得操作人员在窖池外就能够完成清理酒糠作业，提高了清理的便捷性，省时省力，还有较好的防水能力，实用性强。

本发明提供了一种QfBRC2基因在调控植物分枝发育中的应用，涉及生物技术领域。本发明提供了QfBRC2基因在调控植物分枝发育中的应用；QfBRC2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。经发明人研究，首次发现了白栎分枝发育相关的BRC基因QfBRC2，该基因能够直接抑制白栎或拟南芥的分枝发育，且能被MYC2和MYB111形成的复合体调控其表达，可在白栎分子育种和创制优良材性白栎新种质中进行应用。

本发明公开了一种嗜盐嗜碱菌（Alkalibacterium sp.）Bachu 49菌株及其应用。所述Bachu 49菌株的保藏号为CGMCC NO.26951。Bachu 49菌株分离自新疆盐碱地，该菌株能在宽泛的温度内和盐碱条件下良好生长。该菌株具有耐盐碱、降盐碱、固氮、解有机磷、产IAA、产挥发性酸性物质、产过氧化氢酶等多种功能，并能显著提高植物的耐盐碱胁迫能力，促进植物生长。本发明提供的新菌株或者菌剂能改善土壤理化性质和供肥能力、提高植物的耐盐碱胁迫能力、促进植物在盐碱胁迫下的生长，对于解决目前土壤盐渍化问题具有重要的实用价值。

本发明提供了对包括单链DNA片段和双链DNA片段的样品构建测序文库的方法，包括步骤：1)使用双链接头在所述样品中进行接头连接反应，其中所述双链接头包括分子标签序列；以及2)对步骤1)中获得的产物进行单链建库。本发明还提供了对所制备的测序文库进行测序和数据分析的方法。本发明方法通过在制备测序文库的过程同时进行双链和单链建库，既保留样本中双链DNA的互补状态信息，又能将不完整的DNA也制备成文库，将会最大限度地保留样本中的序列信息。

本发明涉及绵羊基因分型技术领域，具体涉及用于绵羊FecB基因分型的crRNA、试剂盒及方法。所述crRNA为SEQ ID NO.1所示的crRNA‑a和SEQ ID NO.2所示的crRNA‑g。所述试剂盒包括RPA引物、crRNA、Cas12a核酸酶和ssDNA荧光探针，所述RPA引物为针对绵羊FecB基因的扩增引物。本发明的crRNA、试剂盒，基于CRISPR/Cas12a系统与RPA扩增技术鉴别绵羊FecB外显子第746位的基因型，在检测过程中不需要大型昂贵的仪器，且检测时间缩至约40min，极大地拓展了适用场景，更适用于现场检测。

本发明提供了一种用于AD诊断的标志物组合和试剂盒，标志物组合，包括：hsa‑let‑7i‑5p、hsa‑miR‑181c‑5p、hsa‑miR‑21‑5p、hsa‑miR‑29c‑3p、hsa‑miR‑92a‑3p、hsa‑let‑7f‑5p、hsa‑miR‑1285‑5p、hsa‑miR‑193b‑3p、hsa‑miR‑143‑3p。本发明使用血清或血浆样本将AD患者和健康人相关miRNA表达量差异来进行区分，从而快速、准确、无创且低廉地诊断AD。

本发明提供了一种植物乳杆菌的分离鉴定及其在棉籽蛋白发酵中的应用，该植物乳杆菌为植物乳杆菌R6‑1(Lactobacillus plantarum R6‑1)，已于2023年08月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.28111。植物乳杆菌R6‑1产酸速率高、耐酸性好。该植物乳杆菌结合酸性蛋白酶，菌酶协同发酵棉籽蛋白，发酵后的棉籽蛋白具有特殊的芳香气味、质地得到改善、产酸性能显著提高，益生菌的定植与有机酸的调节可抑制有害菌的生长，延长饲料保存时间，改善了棉籽蛋白的饲料品质。

本发明公开了一种与大豆维生素E含量显著相关的分子标记、KASP引物组合及应用，属于分子遗传育种领域。所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，在第21位碱基处存在A/T突变。检测所述分子标记的KASP引物组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的上游引物F1、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的上游引物F2和核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的下游引物R。本发明开发的KASP引物组合能准确区分维生素E含量高和低的大豆，具有良好的应用价值，对于加快高维生素E含量大豆育种的遗传改良进程，提高育种选择效率具有重要的理论和实践指导意义。

本发明涉及胚胎细胞转移技术领域，具体为一种全自动胚胎细胞转移设备，包括机壳，所述机壳的底端安装有触摸屏，所述机壳的顶端固定有触摸屏，所述机壳内部的一侧安装有细胞供液机构，所述细胞供液机构的一侧设置有芯片输送机构，所述机壳的表面固定有移液机构，所述机壳远离细胞供液机构的一侧设置有三轴载杆机构，所述三轴载杆机构的上方还安装有视觉检测机构，所述机壳表面且三轴载杆机构的一侧设置有载杆输送机构，该载杆输送机构用于接料后的夹取并将载杆进行送至透明窗口的取料口。本发明不仅提高了转移设备的自动化程度降低了转移设备在对细胞转移时的劳动强度，提高了转移设备对细胞转移时的工作效率，不会发生损伤现象。

本发明提供一种高通量功能物质筛选双报告基因模型及其构建方法与应用，其是将萤火虫荧光素酶报告基因表达盒和海肾荧光素酶报告基因表达盒通过慢病毒转导至猪胚胎滋养层细胞中，经G418和Puro筛选后得到高通量功能物质筛选双报告基因模型；其中，萤火虫荧光素酶报告基因表达盒中萤火虫荧光素酶报告基因与猪Cdx2基因启动子可操作地连接，海肾荧光素酶报告基因表达盒中海肾荧光素酶报告基因与猪TEAD4基因启动子可操作地连接。本发明构建的双荧光素酶报告基因细胞系可用于高通量筛选调节母猪早期胚胎发育的功能物质，对于快速、高效地鉴定可促进母猪早期胚胎发育的功能物质具有重要意义。

本发明公开了一种牛结核分枝杆菌重组减毒沙门菌疫苗的方法。通过选择牛结核病特异性抗原基因Ag85B、MPT63和HSP65，并利用生物在线软件分析其B细胞和T细胞表位，将筛选出的表位肽段连接成新的表位基因AMH。对AMH进行免疫原性、理化性质和结构分析后，将其与特异性抗原基因连接至真核表达载体pEGFP。经过转染和表达验证后，将重组质粒转入减毒沙门菌中，并进行体外和体内试验。结果显示，该重组减毒沙门菌具有较高的安全性和免疫效果，为牛结核病基因疫苗研究提供了基础和理论支持。

本发明提供了一种检测呼吸道合胞病毒的靶基因、引物探针组合以及试剂盒和应用，标志物的序列具有SEQ ID NO.1所示序列或特异性片段。本发明所提供的呼吸道合胞病毒检测方法，检测用时短、仪器设备简单、实验成本低、无需变温条件，具有良好的特异性和灵敏性，分析灵敏度达到1拷贝/μL，适用于大量样本检测。

本发明公开了检测HIV‑1p24抗原的杂交瘤细胞及单抗和应用，杂交瘤细胞保藏编号为GDMCC No：63838，保藏日期为2023年09月26日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心，该杂交瘤细胞能够分泌单克隆抗体GC4，用于HIV‑1p24抗原的检测，具有特异性好和灵敏度高的优点，因此可作为检测HIV‑1p24抗原的检测试剂。

本发明公开了一种新型核酸提取检测装置及其检测方法，装置包括箱体、芯片控制模块、样品检测模块，数据处理模块、人机交互模块、消杀净化模块和电源模块；通过设置箱体，并通过箱体对各个模块进行规范化组装，能够便于装置的携带，同时，通过设置芯片控制模块和样品检测模块，能够有效提高检测的效率和准确性，从而提高检测效果，此外，通过设置消杀净化模块，能够有效将病原体微生物消杀在装置内部，有效防止了对外界进行污染。

本发明提供一种摇瓶装置，涉及医药实验器材技术领域，包括装置本体，装置本体的前端面预留有前仓；所述装置本体的中间预留有的前后贯穿的第二通孔，第二通孔内部活动安装有摇杆；其中，所述连杆机构包括转盘，所述转盘的后端设置有把手，所述转盘的前端通过第一转轴转动安装在所述装置本体上；所述齿轮换向机构包括齿轮，所述齿轮固定套接在所述摇杆上，且齿轮位于所述前仓内部；所述第一啮合齿和所述第二啮合齿均与所述齿轮啮合，且第一啮合齿和所述第二啮合齿在竖直方向上交错布置。本发明提供一种摇瓶装置，利用手摇转盘的方式代替直接用手振荡摇瓶，能有效节省人力，同时也具备摇瓶机的摇瓶效率。

本发明公开了一种提取外泌体的捕获探针和方法，属于外泌体提取技术领域，该捕获探针以金属有机骨架为基底，表面修饰外泌体膜表面蛋白CD63抗体；该金属有机骨架为UIO‑66‑NH2。本发明制备了CD63包被修饰MOFs材料的捕获探针UIO‑66‑NH2‑antiCD63，通过捕获探针表面修饰的CD63抗体与外泌体膜表面蛋白CD63特异识别，在5‑10min内即可提取约75％外泌体，远高于传统高速离心法的20％提取率。同时，本发明的提取方法操作简便，在常温下即可完成，无需特殊仪器以及操作处理，且对外泌体结构损伤小，有利于下游分析和表面特殊结构检测，更具推广应用价值。

本发明公开了一种可调节下料量的白酒酿造撒曲装置，具体包括：机座，所述机座顶部四角处固定安装有支撑柱，所述机座上表面内腔处活动安装有甩动装置，所述支撑柱顶端活动连接有调节装置，所述调节装置右侧固定安装有横条，所述横条顶端活动安装有顶盖装置，所述甩动装置内腔处活动安装有中筒腔，本发明涉及白酒酿造技术领域。该可调节下料量的白酒酿造撒曲装置，通过中座挤压伸杆运动，伸杆往下联动联条而运动，联条与中筒腔侧边处相接触，酿酒料水逐渐沿着中座局部限制的范围而流入下方，从而使设备具有快速下料的功能，间接的减少了水分的往上飞溅，减少多余操作的步骤，防止酿酒料水沿着中筒腔底部沿口处而往下渗入过多水分的状况。

本发明提供一种能够根据实验数据评价细胞的特性的制作细胞数理模型的方法、程序、及制作装置。另外，提供一种所制作的细胞数理模型的判定方法、程序、及判定装置。在制作数理模型的方法中，输入细胞的培养数据，从培养数据提取细胞活动的特征量，根据特征量制作细胞数理模型，并输出细胞数理模型。另外，在制作的细胞数理模型的判定方法中，对使用细胞数理模型计算出的估计培养数据反映培养数据的情况进行判定。

本发明公开了一种低菌胶团形成能力的细菌的构建方法及其应用，所述低菌胶团形成能力的细菌的构建方法，将鞘氨醇单胞菌基因组中的LuxI基因敲除，得到低菌胶团形成能力的细菌。本发明的有益效果在于，提供一种低菌胶团形成能力的细菌，能够有效的降低在污水处理过程中功能菌株对膜的堵塞。

本发明公开了具有防病效果的油茶叶际合成菌群的构建方法和构建的菌群及应用，其包括：(1)采集油茶叶片，分析油茶叶际细菌群落结构，得到细菌群落相对丰度排名；(2)分析油茶叶际细菌群落的互作网络，获得微生物物种中心性排名；(3)从油茶叶际微生物中筛选具有抑菌和产铁载体能力的细菌，结合群落相对丰度以及中心性排名，选择同时具有拮抗及产铁载体能力的油茶叶际细菌构建群落；(4)测定合成菌群的叶面定殖时间以及炭疽病防效，选择最优合成菌群。最优合成菌群的定殖时间、防治效果均明显优于单菌，同时可诱导油茶系统抗性。本发明方法可获得油茶叶际具有长效定殖的合成菌群，并具有防病及诱导抗性的效果。

本申请公开了一种植物促根基因LTP2、其启动子、表达产物、表达载体及应用，旨在从分子生物学方面解决利用栽培措施改良植物根系发育效果有效且不稳定的技术问题。本申请鉴定出一个可调控根系发育的基因LTP2，构建了LTP2基因的过表达载体，并分别转化获得过表达株系；经表型鉴定和检测表明，LTP2能够调控植物根系发育；还鉴定出一个根系特异表达的LTP2启动子；设计了一种用于植物遗传转化的真核表达载体，可以驱动目标基因在根系特异表达。本申请关于LTP2基因及其启动子的功能研究有利于调控植物根系发育，以及植物根系发育机制的深度研究及利用。

本发明公开了一种白酒发酵过程高品温大曲总DNA的提取方法，属于生物工程技术领域。本发明研究了一种发酵过程高品温大曲总DNA高效提取方法，通过创新的DNA前处理提取法结合低温预冷研磨法，最后经过沉淀洗涤收集，即得发酵过程高品温大曲微生物的总DNA。本发明提供的总DNA的高效提取方法可应用于发酵过程高品温大曲样品，从发酵过程高品温大曲中分离得到浓度高、纯度高的总DNA，可直接用于宏基因组分析，可有效解决现有白酒大曲DNA的提取方法不能满足发酵过程高品温大曲宏基因组测序需求的问题。

本发明公开了一种智能化细胞制备工作站，包括细胞离心加工站，抓取转运机构，细胞培养工作站，空瓶料库，以及细胞复苏机构，抓取转运机构可接收细胞液板架组件，细胞复苏机构可接收抓取转运机构上的细胞液板架组件，并对细胞液板架组件内冻存管进行细胞复苏，细胞离心加工站可接收复苏后的细胞液板架组件，并提取细胞液板架组件上的冻存管内的细胞液进行移液离心操作；且细胞离心加工站可接收供料瓶进行补充上料，细胞培养工作站可接收细胞离心加工站的细胞液进行细胞培养。本发明的有益效果为本装置完全实现了自动化，无需人工进行操作，节省了大量人工操作时间，并且避免了人员操作不准确的弊端，从而提高了细胞培养的质量和效率。

本发明涉及分子生物技术领域，具体涉及小麦籽粒长度调控基因及其检测引物和应用。小麦籽粒长度调控基因TaGL1‑B1的核苷酸序列如SEQIDNO:1或SEQIDNO:2所示。鉴定小麦籽粒长度调控基因TaGL1‑B1等位基因类型的特异性引物，包括：核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示的下游引物。本发明发现具有TaGL1‑B1b基因的小麦品种/系，通常其粒长显著大于具有TaGL1‑B1a基因的小麦品种/系粒长。因此，TaGL1‑B1等位基因功能的发现将对利用基因工程技术进一步改良和培育高产小麦新品种起到十分重要作用。

使用可编程DNA结合蛋白来增加靶向基因组修饰的效率和/或特异性或促进真核细胞中特定基因组位点的检测的组合物和方法。

本发明属于有机废物资源化处理技术领域，具体涉及一种剥削NADH提高厌氧消化系统产甲烷效率的方法。本发明将HCO3‑/CO2和微生物代谢过程产生的NADH作为底物，在NADH脱氢酶表达菌的作用下产生大量甲酸，再进一步通过嗜甲酸产甲烷古菌转化为甲烷(CH4)，使厌氧消化产甲烷系统中有机碳最大程度转化为CH4，从而提高最终发酵产气中CH4的纯度并减少CO2排放。利用本发明所述方法可以提高厌氧消化系统中CH4产量、发酵气中CH4的纯度和产量，减少CO2排放；并且，本发明方法简单，易于掌握，适用于大面积推广。

本发明公开了一种检测IGH基因重排及超突变的引物组、方法和系统，所述引物组包括序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.7所示的正向引物、和序列如SEQ ID NO.8所示的反向引物。本发明可以实现对IGH基因目标区域的高质量和高效率的扩增，测序读长降低，准确率得以提高，大大缩短IGH基因重排及超突变的检测周期，使医生能够在最早的时间内拿到检测结果，更加及时地辅助病况诊断、制定合理治疗方案，具有广泛的市场前景和巨大的社会价值。

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种单细胞多组学文库构建方法及其应用。本发明提供REACT‑seq可以实现对结构复杂的样本的低成本、超高通量的大规模组织单细胞测序，本发明采用多次添加barcode短DNA接头连接的方式实现超高通量单细胞唯一标签的添加，使用链霉亲和素磁珠实现cDNA及DNA的分离，从而分别进行单细胞转录组及染色质开放性基因组学的文库构建。多步质量控制步骤将被用于对组织样本建库效果的评估，以保证癌症高异质性组织建库效果的均一性。单细胞测序将对肿瘤组织样本涵盖的所有细胞类型进行揭示，以超高分辨率最大程度的反应癌症个体不同阶段细胞类型比例的变化。

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种多功能Stella重组基因报告小鼠的构建方法及其应用。本发明根据同源重组原理在Stella基因终止密码子之前插入“HA tag‑P2A‑EGFP”融合基因表达序列。经验证，该报告基因小鼠的原始生殖细胞表达功能正常的STELLA‑HA tag融合蛋白以及EGFP报告蛋白，通过检测HA标签或EGFP可准确定位和识别STELLA表达阳性的原始生殖细胞，从而实现原始生殖细胞的快速定位及高效分选收集，对于早期生殖细胞发育研究具有良好的实际应用之价值。

用于鉴定绣球菌新菌株JSJ‑Spar16‑1的引物对及其鉴定方法，属于食用菌分子标记技术领域。所述绣球菌新菌株JSJ‑Spar16‑1保藏编号为CGMCC No.40892，ITS序列如SEQ ID NO:1所示；所述引物对为JSp16‑F/R，其上游引物如SEQ ID NO:2所示，下游引物如如SEQ ID NO:3所示。所述引物对JSp16‑F/R是基于哥伦比亚大学100条ISSR通用引物中U885引物于JSJ‑Spar16‑1菌株扩增筛选到的差异性序列所设计，利用JSp16‑F/R引物对对JSJ‑Spar16‑1菌株的DNA进行PCR扩增，于琼脂糖凝胶中电泳，扩增结果中有206bp片段。本发明可利用此引物对快速鉴定JSJ‑Spar16‑1菌株，不需要其他技术手段的辅助，操作方便、耗时短且准确度较高。

本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种基于链置换反应的生物传感器及其在围绝经期惊恐障碍早期诊断中的应用，该生物传感器包括发夹H1、发夹H2和单链RNA报告分子；发夹H1和发夹H2均具有茎环结构，发夹H1包被着10‑23DNAzyme，发夹H1的DNA序列如SEQ ID NO.1所示，发夹H2的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建了一种基于Toehold介导DNA链置换反应的核酸检测技术，在恒温条件下可实现检测样品中核酸的检测，可用于检测围绝经期不同生理病理状态患者所采集的血样中的特定micRNA分子，方法简便、条件宽松、检测结果灵敏度高、速度快，对于疾病的早期诊断及临床干预机制研究具有重要意义。

本发明为一种短小芽孢杆菌及其培养基、高密度培养方法、应用。一种短小芽孢杆菌，菌株编号：6‑2‑13，已于2023年7月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC 28012。本发明所述的一种短小芽孢杆菌及其培养基、高密度培养方法、应用，筛选出的生防菌能有效防止灰霉病、立枯病和枯萎病，并具有良好溶磷能力，从而开发出一款新型高效、广谱、绿色、环保的菌剂。

本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的人源化ATXN3基因敲入小鼠模型的构建方法及应用。本发明通过gRNA和Cas9核酸酶直接对小鼠受精卵进行定点基因编辑，引导更高效率的同源重组，在小鼠Atxn3基因1号外显子处定点敲入了合成的ATXN3‑96Q‑CDS序列(含96次CAG三核苷酸重复的人源ATXN3基因CDS序列)，构建了一种致病基因完全人源化的SCA3小鼠模型，并从分子水平、行为学、神经病理和神经影像等方面对该模型进行了表型验证。相较于既往模型，本发明的小鼠模型能更好模拟SCA3患者的遗传背景和发病过程，将为后续发病机制及治疗研究提供有效工具。

本发明公开了一种RT‑qPCR表征猪关节软骨细胞胞外基质分泌能力的方法，以猪后腿膝关节软骨提取的总RNA反转录得到的cDNA为模板，利用实时荧光定量PCR引物组合进行实时荧光定量PCR扩增，获得II型胶原蛋白基因、I型胶原蛋白基因和内参基因的Ct值和溶解曲线，获得mRNA的相对表达值，根据相对表达值的大小定量检测细胞外基质的分泌能力，为研究软骨细胞体外分泌能力的研究提供技术支持，本发明检测成本低、特异性强，能够对多样本快速筛选，为后期构建组织工程支架提供筛选标准。

本发明公开了一种重组大肠杆菌高效表达漆酶的方法，包括以下步骤：S1、按照现有方法提取大肠杆菌SDB2基因组，设计PCR引物，以大肠杆菌SDB2基因组为模板进行PCR扩增；S2、将目标PCR产物与原核表达载体pET28a连接构建出重组质粒pET28a‑Lac；S3、将重组质粒pET28a‑Lac转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中培养，筛选出重组菌株BL21/pET28a‑Lac；S4、将重组菌株BL21/pET28a‑Lac接种培养，得到的菌液再接种至诱导培养基中诱导漆酶基因表达。本发明通过经发明人筛选得到的野生大肠杆菌SDB2来获得漆酶基因，结合独创的诱导培养方法，能够使该漆酶基因在重组菌中精准化、高效表达，为应用于饲料领域的功能重组漆酶商业化生产奠定了基础。

本发明涉及一种不含蛋白酶的快速磁珠法核酸提取试剂盒及核酸的提取及纯化方法，包括三组分；第一组分裂解液由3M‑5M盐酸胍、0.2M‑0.4M氯化锂、质量体积比1‑2%的吐温20、质量体积比0.5‑1%的Triton X‑100、质量体积比40‑60%的异丙醇和浓度1‑2mg/mL的磁珠组成；第二组分洗涤液由3mM‑5mM柠檬酸三钠和质量体积比0.01%‑0.3%的吐温20组成；第三组分为无菌纯化水。本发明将适当浓度的盐酸胍、氯化锂、吐温20、Triton X‑100、异丙醇联用以强化裂解，不需蛋白酶K辅助，仅使用一种不含醇的洗涤液洗涤1次，清除扩增抑制物残留，保证提取纯化效果并缩短耗时。

本发明提供了一种在胃镜下检测幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)球形体和螺旋体的检验试剂及其应用，属于生物医学技术领域。一种检测幽门螺杆菌球形体的检验试剂，以花青素作为pH值指示剂，还包括过氧化氢。利用幽门螺杆菌球形体具有过氧化氢酶活性通过作用底物过氧化氢使pH值升高，再根据花青素颜色的变化显示出幽门螺杆菌球形体在胃黏膜上的分布情况。本发明基于所述检测试剂进行检测的方法属于无创性幽门螺杆菌的检测方法，能在胃镜下直接检测有无幽门螺杆菌球形体的存在，检测经抗幽门螺杆菌治疗后有无球形体残留，具有极高临床推广应用价值。

本发明涉及脱氧核糖核酸制备技术领域，具体的说是一种利用动物组织制备脱氧核糖核酸的设备，其中漏斗和配重金属片固定连接在漏斗的下端外壁，多个侧支杆固定连接在漏斗的外壁，气缸的伸缩端与侧支杆远离漏斗外壁的一端转动连接，支架腿置于漏斗的下方，支架腿的外壁固定连接有突出板，气缸的下端转动连接在突出板的上表面，多个支架腿的中部固定连接有调节组件，调节组件包括固定支环，固定支环的内壁转动连接有转动环，转动环的内壁固定连接有弧形电磁铁。通过滤纸将带有脱氧核糖核蛋白成分的沉淀与液体进行过滤分开，同时在过滤的过程中滤纸呈倾斜状，增加滤纸与混合液的接触面积，使得过滤的更加快速。

一种酿酒润粮方法，包括以下步骤：称取重量为A的粮食；将重量为A的粮食置于密封容器中，加入水；将粮食与水在真空环境中混合均匀，混合时间为5‑10min，其中，粮食与水的混合包括搅拌、摇匀和翻转之一；将S3中得到的混合物置于地面，堆放成锥形，并重复上述步骤1‑3次，且在上述加入水的总水量为粮食总重量的40%‑60%，S4与S5时间间隔为30min‑1h。本发明的一种酿酒润粮方法，使粮食在真空环境下且至少二次润粮，并控制总加入的水量以及分别加入的水量，使得水分得到充分吸收，且不会出现跑水的情况，避免水分流失，提高了润粮效果；同时，使用冷水亦可润粮，有效节约了成本。

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种重组猫血清淀粉样蛋白A的表达载体、宿主菌及其制备方法。所述表达载体包括用于编码重组猫血清淀粉样蛋白A的基因序列，所述重组猫血清淀粉样蛋白A包括从N端到C端依次连接的谷胱甘肽巯基转移酶标签、凝血酶酶切位点、组氨酸标签和成熟猫血清淀粉样蛋白A。本发明以猫SAA前体蛋白第19至219位氨基酸作为表达位点，通过GST标签增强重组蛋白的可溶性及表达量，通过添加酶切位点去除GST标签以还原SAA蛋白在基体内的折叠结构，并利用组氨酸标签实现分离纯化，可以大量有效获取高活性、高纯度的猫SAA蛋白，为开发特异性抗体提供了保证。

本发明公开了一种基于生物传感器的啶虫脒检测方法、检测试剂盒及应用，属于农残检测技术领域。本发明基于生物传感器的啶虫脒检测试剂盒，包含如下组分：DNA1/Aptamer双链，DNA环探针，LIG传感电极。本发明利用适配体特异性识别啶虫脒农药，释放引物链结合DNA环探针进行滚环扩增，并进一步集成在柔性LIG电极表面，亚甲基蓝(MB)通过静电吸附和嵌插与DNA双链结合，进而固定在电极表面。本发明方法实现了高效灵敏检测啶虫脒农药；而且，简单、便捷，不需要专业的人员和设备。

本公开涉及一种用于制备Olig1/Olig2分型预测模型的方法，该方法包括如下步骤：S1、分别检测n个样本特定基因的表达量；S2、取步骤S1获得的所有样本的特定基因表达量的数据，通过一致性聚类算法将每个少突胶质细胞瘤样本分为Olig1型或Olig2型；S3、取步骤S1获得的样本的特定基因表达量的数据和步骤S2获得的所有样本的分型结果，通过最邻近收缩中心算法构建以特定基因表达量为输入以分型归属为输出的模型，所述模型Olig1/Olig2分型预测模型。

本公开提供一种细胞化学破碎反应保持装置，包括：一次性使用的反应保持管，供物料通过并为物料提供完成细胞化学破碎反应所需的空间；主框架，承载所述一次性使用反应保持管；所述主框架上设置有固定装置，所述一次性使用反应保持管通过所述固定装置可分离的固定于主框架上；支撑装置，设置于所述主框架底部，使所述细胞化学破碎反应保持装置稳定的立于所处平面上。本公开通过设置可切换的一次性使用反应保持管，灵活应用于多种不同类型的细胞化学破碎装置中，反应保持管为一次性使用的，因此无需清洁与灭菌消毒。

本发明提供了一种活化培养基、高分泌IFN‑γ的NK细胞的培养方法及应用，本发明的活化培养基包括IL‑2、IL‑15、IL‑18、IL‑21、L‑抗坏血酸、氢化可的松、SCF、FMS样酪氨酸激酶3配体、5‑氨基乙酰丙酸、白藜芦醇、TLR‑7激动剂、TLR‑8激动剂、TLR‑9激动剂以及灭活自体血浆。基于本发明的活化培养基培养出来的NK细胞在体外培养16‑18天，能使NK细胞扩增500‑1000倍，NK细胞含量＞90％，表达靶向肺部标志性趋化因子CCR5和CXCR3的阳性NK细胞比例均＞90％，且较市售NK细胞培养基培养得到的NK细胞分泌更高水平的IFN‑γ，此外，加入的5‑氨基乙酰丙酸及中药单体白藜芦醇使NK细胞对A549肺癌细胞的体外杀伤率达95％以上。

本发明公开一种苦荞调味酒综合生产工艺，包括如下步骤：1)基础酒的制备；2)将苦荞麦与基础酒混合循环加热保温；3)苦荞麦回收利用；4)将浸提液进行蒸馏浓缩；5)馏出分经冷凝塔冷凝回收得到荞香调味酒；6)收集浓缩膏水洗后使用优质原酒制备得到苦荞营养调味酒。本发明解决了行业内苦荞酒生产过程中，苦荞麦香味成分损失多，能耗高、效率低及原材料利用率不高的问题，进一步降低生产成本的同时生产出荞麦香浓郁和高营养成分的调味酒，方便后续产品标准化的生产出香气和营养成分稳定的荞香白酒。

本发明属于功能酶改造技术领域，具体涉及一种葡萄糖脱氢酶突变体及其用途。本发明提供的葡萄糖脱氢酶突变体来源于油橄榄芽孢杆菌(Bacillusoleivorans)，其可与酮还原酶构建辅酶循环再生催化系统，用于催化制备(R)‑4‑氯‑3‑羟基‑丁酸乙酯。