生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明提供基于单域抗体基因修饰的干细胞对于多种的疾病的制药用途，属于干细胞技术领域。所述的干细胞包含、表达或分泌第一抗体和第二抗体，所述的第一抗体包含序列如SEQ ID NO:1‑3所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3；所述的第二抗体包含序列如SEQ ID NO:4‑6所示的HCDR4、HCDR5、HCDR6。本发明所述单域抗体基因修饰的干细胞，相对于阳性抗体和未修饰的间充质干细胞具有更好的治疗疾病效果，有很好的临床应用前景。

本发明公开了油菜花叶病毒的RT‑LAMP检测引物组，其引物组包括一对外引物YoMV‑F3、YoMV‑B3，一对内引物YoMV‑FIP、YoMV‑BIP，一条环引物YoMV‑LB，成功建立了YoMV的环介导恒温快速扩增的可视化检测体系，该检测体系反应速度快，灵敏度高，特异性强，操作简单，可以直接观察到检测结果。为YoMV的田间检测提供了一种方便，快速可靠的方法。

本发明属于生物合成技术领域，具体涉及一种以固定化底物的途径制备茶黄素的方法。本发明固定化底物进行催化聚合，将天然植物单体儿茶素类分子底物，以非共价键的方式富集在惰性吸附载体上，实现非键合方式固定化形成多分子聚集态，加以纯化，再通过高选择性的游离外源酶催化，催化载体上的富集底物儿茶素聚合成二聚体类物质茶黄素，开创性地将底物儿茶素的纯化及酶促氧化缩合集中在同一载体上完成，极大地简化了工艺的操作难度。本发明开创性地以固定化底物的途径催化合成茶黄素，可以用该富集茶黄素的载体为基础模板，进行分子功能团接枝改性，为低浓度的功能性小分子物质的富集、纯化及后续的固定化再靶向催化合成功能性大分子提供了新思路。

本发明提供了一种基于双管双重PCR鉴定8种动物源性乳及乳制品的引物和探针组合及其应用，属于乳制品检测技术领域。本发明的引物和探针组合包括内参上游引物、内参下游引物、马源上游引物、马源下游引物、驴源上游引物、驴源下游引物、通用上游引物、通用下游引物、内参探针、水牛特异性探针、山羊特异性探针、绵羊特异性探针、马特异性探针、骆驼特异性探针、牦牛特异性探针、驴特异性探针、奶牛特异性探针。本发明使用1对通用引物和2对特异性引物，以及多个物种特异性探针，组合成双管双重PCR体系，实现了2管PCR反应对8个物种的高通量检测，降低了多重PCR体系引物间的交叉反应和优化难度，提高了检测效率。

本发明涉及一种基于VIGS的高效高特异性基因沉默本氏烟草方法，目的基因与线性化载体连接方案使用同源重组一步法克隆试剂盒的快速方案进行，采用此方案的前提是PCR产物和线性化载体酶切产物电泳条带均单一，采用此方案进行连接不需要经过胶回收步骤，可以最大程度的保证浓度，提高连接成功率；具体连接体系为：线性化载体体积3μL，目标片段体积1μL，Exnase II体积2μL，5x CE II Buffer体积4μL，ddH2O体积10μL；37℃孵育30分钟；使用SGN VIGS Tool在线软件对插入序列片段进行最优化选择，降低基因沉默‘脱靶’效率。

本发明涉及白僵菌培养技术领域，尤其涉及一种白僵菌接种系统及接种方法。白僵菌接种系统包括接种模块、搅拌模块、气体供入管、排气模块、无菌发生模块、蒸汽供入模块，接种模块设置有接种腔以及与所述接种腔连通的固料进料口、液料进料口、进气口和出料口；在进行白僵菌的接种工作时，供料系统向接种腔通入固态物料，搅拌模块对供入固态物料进行搅拌，无菌发生模块向气体供入管供入无菌空气，蒸汽供入模块向气体供入管供入高温蒸汽，对接种腔以及接种腔内部的固态物料进行灭菌，接种腔保温一段时间后，将接种腔内高压气体排出，然后液体发酵罐向接种腔通入白僵菌液，实现白僵菌与固态物料的无菌接种，有效提升白僵菌的接种质量。

本发明涉及通过施加电刺激来制备的用于治疗软骨相关疾病的药物组合物及其制备方法，具体地，本发明的组合物可以在不导入来源于外部的生长因子的情况下仅通过向干细胞聚集体施加电刺激的方式来制备，可以在不使用昂贵的生长因子的情况下制备，因此可以划时代地降低医疗成本。并且，与现有的为治疗软骨相关疾病而制备的细胞相比，本发明的用于治疗软骨相关疾病的组合物不表达作为成熟的软骨细胞的标记物的COL2，因此具有免疫相关副作用比成熟的细胞低的优点。

本发明公开了一种稳定可遗传的Caco‑2单层细胞屏障模型的构建方法，通过将Caco‑2细胞中TBC1D7基因敲除，并用G418抗体筛选，获得的细胞系为稳定可遗传的Caco‑2单层细胞屏障模型，该细胞屏障功能受阻，可用于体外肠道炎症研究。

本文提供了通过去除CpG基序来产生具有转基因稳定表达的细胞系的方法。在进一步的方法中，提供了通过由新启动子驱动表达或通过标记内源性基因来获得具有稳定表达转基因的细胞系的方法。

本发明公开了一种克服土壤连作障碍的专用微生物菌剂及其应用，属于土壤修复技术领域，所述专用微生物菌剂包括土壤改良剂和微生物菌剂，微生物菌剂与土壤改良剂的质量配比为1：5，土壤改良剂与微生物菌剂配合使用，所述微生物菌剂由以下重量份的成分组成：菌剂基液10‑20份、复合枯草芽孢杆菌菌液8‑11份、酵母菌‑乳酸菌复合菌液10‑13份、放线菌菌液1‑3份、发酵液4‑8份，所述改良剂由以下重量份的成分组成：生物质炭20‑40份、发酵物10‑12份、土壤消毒剂1‑3份、复合肥料2‑4份、土壤pH调节剂0.5‑1份，将上述专用微生物菌剂用于土壤连作障碍中能够有效避免因土壤障碍引起的农作物减产问题。

本发明公开了一种生物芯片加载装置，包括：检测台，设有检测装置和加载机构，加载机构用于装载生物芯片；驱动电机，与加载机构连接并能驱动加载机构靠近或远离检测装置移动；手动驱动组件，设有第一啮合轮、第二啮合轮和手动部，第一啮合轮连接加载机构，第二啮合轮固定连接手动部，第一啮合轮能与第二啮合轮啮合或分离，手动部被配置为当第一啮合轮与第二啮合轮啮合时接受操作以驱动第一啮合轮带动加载机构靠近检测装置移动。本发明在驱动电机的基础上增加了手动驱动组件，通过手动加载辅助自动加载，可在检测因生产、组装引起尺寸差异的各生物芯片时均能保证生物芯片移动至与检测装置稳定接触的状态。

本发明公开了一种胡柚原浆果酒及其制备方法，包括如下方法步骤：步骤一：将胡柚清洗后去皮，果肉打浆，果皮用盐水清洗后压榨收集汁液，将打浆后的果肉和果皮汁液混合得胡柚浆液，添加焦亚硫酸钾后搅拌均匀加入果胶酶，进行酶解；步骤二：向酶解后的浆液中加入酿酒酵母开始发酵；步骤三：糯米浸泡后蒸熟，用水淋冷，补水后添加α‑淀粉酶和糖化酶进行酶解，酶解完成后接种非酿酒酵母进行培养得到糯米醪液；步骤四：步骤二发酵3～4d后，添加步骤三制备的糯米醪液，继续发酵。本发明通过盐清洗胡柚皮从根本上降低胡柚果酒酿造后产生的苦涩味，并且增加胡柚果酒的色，提高了胡柚果酒的综合饮用体验。

本发明公开了用于检测幽门螺杆菌及其耐药性基因的引物组及试剂盒，引物组包括第一引物组和第二引物组；所述第一引物组包括：正向引物序列SEQ ID NO.4、反向引物序列SEQ ID NO.5和探针序列SEQ ID NO.6；所述第一引物组包括：正向引物序列SEQ ID NO.7、反向引物序列SEQ ID NO.8和探针序列SEQ ID NO.9；本发明提供了用于检测幽门螺杆菌及其耐药性基因的高效引物组、试剂盒及方法，通过临床样本验证了本发明提供的引物组扩增效率为116.5％和104.5％，对于优化幽门螺杆菌及其耐药性基因的临床筛查或科学研究，具有重要的意义和应用价值。

本发明公开了一种基于重组大肠杆菌PET‑podoRha‑DE3高产α‑鼠李糖苷酶或异槲皮素的方法，涉微生物工程技术领域。本发明公开的一种基于重组大肠杆菌PET‑podoRha‑DE3高产α‑鼠李糖苷酶或异槲皮素的方法，为在TB培养基中添加激活剂甜菜碱或在专用培养基TB‑Ba中加入异丙醇，促进重组大肠杆菌PET‑podoRha‑DE3高产α‑鼠李糖苷酶或异槲皮素。相比于对照组，在TB培养基中添加激活剂甜菜碱，重组α‑鼠李糖苷酶podoRha的产量提高了53.9％；当促进剂浓度为10g/L时，全细胞转化效率提高倍数达到2.5，异槲皮素摩尔转化率达97.4％，异槲皮素产率308.687mg/L/h。

本发明公开了艾叶AaYABBY1基因cDNA，所述艾叶AaYABBY1基因cDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了引物、载体、宿主菌及应用，为提升植物黄酮含量提供基础。

本发明公开了一种加速烟叶醇化及提升烟叶品质的复合微生物菌剂及其应用。所述复合微生物菌剂包括高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis)、特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)中的两种或两种以上微生物菌种的混合物。本发明复合微生物菌剂适用于复烤后待陈化的片烟品质提升，有利于促进烟叶陈化进程，增加烟叶致香成分含量，提升烟叶内在质量。

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株环状尼尔菌及其应用。具体技术方案包括：一株环状尼尔菌(Niallia circulans)HS‑1，于2023年11月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心；保藏编号为：GDMCC NO：64010，其16S rDNA序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提供了一株新的可以高效利用氨氮同时不产生脲酶或脲酶活性低的环状尼尔菌。所述环状尼尔菌可单独或与其它辅料或其它微生物联合制成除臭菌剂，降解环境(污水、臭气环境等)中的氨氮，同时抑制或降低氨气的产生。所述环状尼尔菌或利用环状尼尔菌制备的除臭菌剂进入待除臭环境中后，不仅可以除臭，还可以与环境中原有的产脲酶微生物竞争生态位，减少产脲酶微生物的作用，进一步减少氨气的产生，降低臭气浓度。

本发明提供一株保加利亚乳杆菌在豆乳发酵中的应用，所述保加利亚乳杆菌M‑58，其保藏编号为CGMCC No.23965。本发明的保加利亚乳杆菌M‑58能够有效发酵豆乳，为发酵豆乳带来了各种水果、花香和奶香等特征风味，有效地掩盖了豆腥味。

本发明公开了与白羽乌喙青脚表型性状相关的分子标记及其在选育肉鸭中的应用。本发明提供了一种鸭育种方法，包括如下步骤：(1)连城白鸭与其它品种的鸭杂交，获得F1代群体；(2)F1代群体群内自由交配，获得F2代群体；(3)从F2代群体中筛选基于SNP1的基因型为GG的个体；(4)从步骤(3)筛选的个体中筛选基于SNP2的基因型为AA的个体。所述育种的目的为获得白羽‑乌喙‑青脚的鸭。本发明的有益效果：可以实现对白羽‑乌喙‑青脚表型性状进行早期选择，能够节省生产成本,改善肉鸭的包装性状并加快遗传进展，更好地服务于鸭的育种。

本公开涉及用于测序和鉴定T细胞受体(TCR)的方法。方法包括模板转换寡核苷酸(TSO)的使用并且使得与标准方法相比改善产率和减少复杂性。

本发明涉及生物监测技术领域，且公开了一种食源性蜡样芽孢杆菌致病性和危害的评估方法，包括以下步骤：(a)从婴幼儿辅食中分离培养蜡样芽孢杆菌；(b)测定细菌浓度，稀释菌液获得所需浓度的菌悬液；(c)将小鼠分为若干组，分别灌胃不同浓度的菌悬液，(d)每日喂食成品小鼠饲料和水，喂食7天，记录每日饮食、饮水量与体重变化；(e)摘除眼球，眼眶取血，用于血液生理生化指标测定；(f)脱颈处死小鼠，酒精消毒后迅速解剖。该食源性蜡样芽孢杆菌致病性和危害的评估方法，通过动物实验拟对检出的蜡样芽孢杆菌可能导致疾病发生的风险和危害进行评估，探索其致病机制，为诊断、预防和控制食源性疾病的暴发提供参考。

本发明属于生物制品领域，具体涉及一种表达HSV‑1gD‑IL‑2‑Fc融合基因重组乳酸菌及其用途。该重组乳酸菌是将HSV‑1gD基因、IL‑2基因及IgGFc片段基因插入到乳酸菌表达载体中并转化乳酸菌获得。本发明将HSV‑1包膜蛋白gD与IgGFc片段融合，借助FcRn模仿IgG跨黏膜屏障的运输途径，解决了跨黏膜传输的关键问题。

本发明涉及一种用于食品辐照消杀的指示病毒的筛选方法，包括如下步骤：通过病毒结构学分析，根据病毒理化性质，筛选出一系列RNA有囊膜的病毒作为样本；对病毒样本进行不同剂量的辐照处理，获得辐照处理后的不同病毒的病毒滴度与未处理病毒的病毒滴度并比较两者差异，筛选两者差值>4Log10的病毒作为对食品辐照消杀敏感的指示病毒。本发明筛选出的指示病毒可为实际生产过程RNA有囊膜类病毒的去除/灭活的有效性作出定量评估，并可用于冷链食品辐照过程中的生物辐照指示剂。

本发明涉及植物生物技术育种领域，尤其涉及利用CRISPR创制水稻HSMS1雄性不育系及其应用。本发明提供湿度相关的雄性不育基因HSMS1及其突变体hsms1在创制水稻雄性不育系中的应用。湿度相关的雄性不育基因HSMS1具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白质具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，野生型水稻中定点突变HSMS1基因所获得的突变体hsms1(序列如SEQ ID NO.4所示)花药可以正常形成，但花粉前期完全败育，经过环境影响后花粉育性得到恢复，并能正常结实。本发明首次发现HSMS1基因对水稻雄性生殖发育的调控功能，对研究水稻雄性生殖发育具有重要意义。

本发明提供了一种酿造资源综合利用装置及方法，涉及白酒酿造技术领域，包括第一模块、第二模块、第三模块及第四模块，第四模块用于尾酒的膜定向分离，第一模块用于釜底液的切向流膜处理，第二模块用于黄水的蒸馏及饲料的加工，及第三模块用于黄水的发酵、浓缩、混料及定向分离。本发明的酿造资源综合利用装置及酿造资源综合利用方法能够将白酒酿造过程中的黄水、酒糟渗透液、尾酒等副产物和废弃物全面综合利用，有利于解决传统白酒厂排污问题，不再建设生产污水处理厂，能够同时生产具有高附加值的优级调味酒及饲料，排出的水仅为冷凝水，有利于大幅降低排放污水的COD值。

本申请公开了调节CdLAC15表达水平的物质在调节木质素聚合度中的应用。本申请实施例的第一方面提供调节CdLAC15表达水平和/或活性的物质在调节目的植物的木质素聚合度中的应用。本申请实施例中发现高州油茶CdLAC15基因的表达能够调控木质素的聚合程度。当在作为模式植物的野生型拟南芥中过表达该基因时，能够使拟南芥的果皮、叶片、茎等组织中的木质素聚合度明显升高。因此，可以通过调节CdLAC15基因的表达水平的试剂来调节植物的果皮等部位的木质素聚合度，在育种等方面具有重要的应用价值。

本发明提供了一种犬乳头瘤病毒的检测试剂、试剂盒、引物对、引物组合及应用；具体地，本发明设计了鉴别CPV1亚型和CPV2亚型的引物组合，以及定量检测CPV1亚型的引物对和定量检测CPV2亚型的引物对；以此，本发明为CPV1亚型和CPV2亚型的系统、便捷、快速检测，以及相应试剂盒研发奠定了基础。

本发明提供的乳杆菌属(Lactobacillus)的细菌，包括：副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)J3703，已经保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.26348；和/或戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)K0802，已经保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.26349；本发明研究发现，上述的乳杆菌属的细菌，能够高效降解偶氮类人工色素，脱色率可达90％以上，可以用于降低人体胃肠道中偶氮类人工色素含量，可以作为或制备食品或食品添加剂或是生物制剂，在处理食用偶氮类人工色素中具有良好的应用前景。

本发明公开了一种有机垃圾处理装置，包括发酵罐、搅拌轴和储液罐，所述发酵罐设有发酵腔，所述搅拌轴设于所述发酵罐并伸至所述发酵腔内，所述搅拌轴设有沿所述搅拌轴的轴向延伸的输送通道，所述搅拌轴设有多个搅拌结构，所述搅拌结构设有连通所述输送通道的排液通道，所述排液通道设有多个排液孔，所述储液罐用于存储发酵菌液，所述储液罐设有输液管，所述输液管的另一端与所述输送通道连通，所述输液管设有泵机。本发明的有机垃圾处理装置，使发酵菌与有机垃圾混合更加均匀，进而能提高有机垃圾的发酵效率和效果，使得有机垃圾处理效率和效果更好。

本发明公开了一种基于细菌群体感应调控策略构建核黄素高产菌株的遗传改良方法，以Shewanella oneidensis MR‑1为底盘微生物，通过异源重构，在S.oneidensis MR‑1中异源表达了黄素合成基因簇和群体感应调控元件。具体地，将Esa群体感应模块和和核黄素合成模块ribABCDE基因簇进行整合，成功构建Esa群体感应动态调控系统，实现了核黄素的过量合成。本发明公开的遗传方法操作简单，所构建的菌株不仅能显著提升核黄素产量，且发酵过程中无需额外添加诱导剂，有效节约成本，具有较好的生产应用价值。

本发明涉及一种提升重组解脂耶氏酵母天麻素产量的方法，属于生物技术领域。本发明挖掘解脂耶氏酵母中天麻素降解相关基因，对解脂耶氏酵母中的20种葡萄糖苷酶进行了表征，探究敲除不同的葡萄糖苷酶基因对天麻素产量的影响，发现敲除葡萄糖苷酶基因YALI0A19074g和YALI0B14289g后天麻素降解解除。本发明还构建了一株天麻素降解解除的重组解脂耶氏酵母菌株YliGT6，对解脂耶氏酵母出发菌株进行构建天麻素代谢通路，增强UDP‑葡萄糖供给等操作，最后敲除葡萄糖苷酶基因YALI0A19074g和YALI0B14289g，所得重组菌株YliGT6天麻素滴度达到6.0g/L。

本发明提供一种用于检测膀胱癌的试剂组合，所述试剂组合包括用于以下甲基化位点的检测试剂：cg13314394。与此同时，本发明还提供了该试剂组合的用途，以及包括该试剂组合的试剂盒。本发明的试剂组合在组织样本中，均能以至少0.9524的特异性和0.8305的灵敏度以及0.9396的曲线下面积对膀胱癌进行预测。而在尿液游离DNA样本中，所有试剂组合均能以至少0.9048的特异性和0.8389的灵敏度以及0.9478的曲线下面积对膀胱癌进行预测，本发明试剂组合以较少的标志物就能够在临床上以高灵敏度和好特异性对膀胱癌进行检测，成本和时间均得到节约；在临床上，在膀胱癌恶变的早期阶段就能灵敏和特异性地检出。

本发明公开了一种玉屏风多糖合生元及其制备方法和应用，将从健康大口黑鲈鱼肠道中分离获得的枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和副干酪乳杆菌分别经过驯化、扩大培养后，得到枯草芽孢杆菌液、植物乳杆菌液和副干酪乳杆菌液，取枯草芽孢杆菌液、植物乳杆菌液和副干酪乳杆菌液分别加入到50mL离心管中得到每种益生菌含量均为1×1010CFU的混合菌液，混合菌液离心后去上清；按质量体积比为0.2g：20mL取玉屏风多糖粉和灭菌蒸馏水加入上述离心管中拧紧盖子涡旋混匀，得到未发酵玉屏风多糖合生元；将离心管盖拧紧后置于恒温摇床中28℃，150r/min发酵36h，发酵完成后即得发酵玉屏风多糖合生元。本发明的能够作为大口黑鲈的饲料添加剂，能提高大口黑鲈免疫能力。

本申请涉及动物模型领域，公开了一种构建颞下颌关节骨关节炎动物模型的方法，包括以下步骤：S1、选择一组与颞下颌关节骨关节炎相关的候选基因；S2、设计针对所述候选基因的特异性单向导向RNA；S3、构建包含所述单向导向RNA及CRI SPR/Cas9系统的表达载体；S4、通过显微注射将所述表达载体引入动物受精卵；S5、将处理过的受精卵植入至代理动物母体中；S6、识别并选择具有所述候选基因编辑的后代动物。本发明通过精确的基因编辑，我们能够特异性地敲除或过表达特定基因，创建可重复的TMJ OA模型，这为研究OA的分子机制提供了一个可靠的工具，可以帮助更好地理解了软骨退行性变化、炎症反应、骨重塑等在TMJ OA发展中的作用，揭示了疾病的分子基础。

本发明公开了氧化鲨烯环化基因NiOSC2在生物合成中的应用，属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜（Neoalsomitra integrifoliola）出发，克隆并功能鉴定了一个合成羽扇豆醇，β‑香树脂醇和α‑香树脂醇的三萜合酶NiOSC2编码基因，其核苷酸序列如Seq ID No.2所示，对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接，构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒，再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程细胞，实现了酿酒酵母异源高效合成化合物羽扇豆醇，β‑香树脂醇和α‑香树脂醇，本发明构建的该基因工程细胞安全稳定，生产周期短，显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的NiOSC2产物能用于制备保护心脑血管、提高免疫能力、降血糖、抗炎、抗氧化、抗疲劳、抗艾滋、抗癌的药物。

本发明公开了一种嗜黏蛋白阿克曼氏菌培养基及其制备方法，培养基中包括0.5～10g/L的动物蛋白肽、40g/L的脑心浸液培养基、0.5mg/L的刃天青和1g/L的L‑半胱氨酸盐酸盐。本发明提供的培养基通过加入动物蛋白肽，极大的优化了培养基成分，简化了培养基的制备过程，将阿克曼菌的生长速度缩短至原来的三分之一倍，极大地促进了阿克曼氏菌的生长。本发明进一步通过筛选益生元、降低培养基中含有动物源危险因子的成分的添加量，提高了阿克曼菌培养基的安全性。

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种沙门菌和停乳链球菌双重荧光定量PCR检测的引物、探针及方法。本发明选取沙门菌invA基因和停乳链球菌gapC基因为靶标进行引物的设计并标记探针，沙门菌和停乳链球菌的引物相互之间不会产生干扰，可以满足多重PCR的要求，能够在同一PCR体系中，同时完成沙门菌和停乳链球菌的检测，较单重的荧光定量PCR更加高效，省时省力。该检测方法具有特异性强，灵敏度高的特点，其中，沙门菌与停乳链球菌的灵敏度分别为1.56×103copies/μL、1.5×102copies/μL，为临床生鲜乳的检测提供了一种新的方法。

本发明公开了一种基于脱氧核酶联合CRISPR/Cas12a生物传感系统及其应用，属于分析检测技术领域。本发明首次提出通过结合基于脱氧核酶和CRISPR/Cas12a的生物传感系统，所述生物传感系统包括Cas12a蛋白、环状crRNA、RNA裂解的脱氧核酶的底部部分FS1、RNA裂解的脱氧核酶的脱氧核酶部分5’short、靶标、FQ‑ssDNA探针。本发明构建的基于脱氧核酶联合CRISPR/Cas12a生物传感系统具有高特异性，能够区分多种菌属的CIM，并在60分钟内获得实验结果，具有快速响应的特点。此外，本发明构建的基于脱氧核酶联合CRISPR/Cas12a生物传感系统具有高通量检测的优势，利用酶标仪96孔板，可同时检测多个样本，有望用于临床样本快速检测的潜力。

本发明涉及植物病害生物防治技术领域，尤其涉及一株具有广谱抑菌活性的德干链霉菌(Streptomyces deccanensis)F‑04及其应用，该菌株于2024年01月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.29519；德干链霉菌F‑04对核桃腐烂病有显著的防治效果；德干链霉菌F‑04抑菌谱广，抑菌率高，对植株幼苗有一定的促生作用；该菌活性成分的热稳定性和紫外辐射稳定性高，适应性广，可应用于多种果树的促生防病实践中。

本发明提供了一种同时检测多种蝴蝶兰病毒的引物组、试剂盒及其应用。属于基因检测技术领域。本发明针对ORSV、CyMV、WCMV、YaVX和PoVX五种病毒的小RNA测序的核苷酸序列，分别设计了五对相应的特异性引物，并利用该五对特异性引物同时对蝴蝶兰叶片中的ORSV、CyMV、WCMV、YaVX和PoVX进行检测，且待检测WCMV、YaVX和PoVX与现有病毒的序列同源性低至52‑76％，与现有技术序列差异很大，在这种情况下，本发明引物组仍然可以实现一次反应就能同时检测出5种蝴蝶兰病毒的目标，快速便捷，检测效率高，且本发明所用试剂为分子生物学常用试剂，成本低，即使样本中蝴蝶兰病毒的RNA含量很低，仍然可以检测出来，具有很高的检测灵敏度。

本发明公开了一种用于半固体样品中致病菌双富集方式采样的装置及检测方法，涉及食品检测技术领域，检测方法主要包括：1)采用膜富集方法进行膜过滤富集，完成第一重半固体(发酵乳)样品中食源性致病菌富集；2)再采用磁珠对致病菌进行快速菌体富集、微波破壁和提取纯化DNA，建立第二重磁珠DNA富集，双富集装置包括可分体的第一盖体、过滤瓶身、弹性腔、第二盖体和第三盖体，第三盖体的内部贯穿安装有破碎装置；3)通过SEA技术对致病菌进行快速鉴别检测，以实现对半固体(发酵乳)样品中致病菌菌株水平的快速鉴别；利用双重富集模式替代食源性致病菌快检和现行国标中必不可少的菌株富集培养步骤，可进行半固体样品中致病菌的快速精准检测。

本发明涉及生物毒性检测领域，公开了一种利用斑马鱼PCR芯片检测生物毒性效应的方法，包括：(1)S1：将4‑128细胞期斑马鱼胚胎进行培养，并记录培养数据，收集存活的胚胎，提取存活的胚胎的mRNA，并且反转录得到cDNA；或S2：将4‑128细胞期斑马鱼胚胎进行培养，然后进行孵化，并记录培养数据和孵化数据，收集存活的胚胎和仔鱼；提取存活的胚胎和仔鱼的mRNA，并且反转录得到cDNA；(2)以cDNA为模板，使用斑马鱼PCR芯片进行RT‑qPCR反应，得到CT值；(3)根据CT值计算目的基因相对于内参基因的相对表达倍数，分析得到毒性通路和毒性终点；(4)根据相对表达倍数绘制基因表达热图，判断实验组的毒性组分以及毒性来源。本发明的方法可以对污染物生态毒性进行综合评价。

本发明提供了一种检测伤寒疫苗免疫血清的体外杀菌功能的方法，包括采用调理吞噬杀菌试验检测所述伤寒疫苗免疫血清对伤寒杆菌的体外杀菌功能，其中在完成所述调理吞噬杀菌试验的吞噬杀菌步骤后，在7.5至9.5的pH下培养经过所述吞噬杀菌步骤的伤寒杆菌。本发明首次将调理吞噬杀菌试验应用于革兰氏阴性菌伤寒杆菌，并有效且准确地评估了伤寒疫苗免疫血清的体外杀菌水平，填补了全球领域内仅使用酶联免疫吸附测定评估伤寒疫苗效果的空缺，提供了伤寒疫苗血清学评价领域内的新的体外杀菌功能检测方法。

本申请涉及一种恒温检测机构、检测装置以及检测方法,包括检测管，包括容纳腔以及至少两个检测腔，所述容纳腔用于存储待测样品；所述检测腔连通所述容纳腔；以及检测装置，包括壳体单元、温控单元、至少两组检测单元以及隔离单元；所述壳体单元内形成有用于容纳所述检测管的容纳空间；当所述检测管置于所述容纳空间中，所述隔离单元能够阻断所述容纳腔与所述检测腔的连接，以使得所述检测腔为独立的腔体；所述温控单元能够控制所述检测腔中的待测样品的温度；检测单元与检测腔一一对应，所述检测单元能够检测对应的所述检测腔中的待测样品。本申请实施例的一种恒温检测机构、检测装置以及检测方法，具有检测精度较高的优点。

本发明提供一种用于高危型人乳头瘤病毒基因分型检测的阳性质控品及其制备方法和用途。本申请中高危型HPV基因分型检测阳性质控品是通过将含有高危型HPV全基因组序列的分型质粒转染至SKOV3人卵巢癌细胞系中，随后药物筛选得到的稳转细胞系单细胞克隆筛选及鉴定，获得含有高危型HPV全基因组序列的SKOV3单克隆稳转细胞系，即高危型HPV基因分型检测阳性质控品。所得阳性质控品遗传背景稳定，接近临床样本，性能稳定，可以长时间保存，并且生产成本低，可大规模生产，无生物传染性。

本发明公开了一种经突变改造的腺苷蛋氨酸合成酶，属于生物技术领域。经突变改造后的腺苷蛋氨酸合成酶在配合氨基型酶载体使用时，能够使固定化时的酶取向性与结合区域分布更优，使酶分子与载体成键密度更好，结合更加牢度。因此，具有更高的酶活保留率、更好的底物转化率以及更长的使用寿命。重组酶于大肠杆菌工程菌中的表达量也可达30％以上的高水平。极大程度地提升了重组腺苷蛋氨酸合成酶的利用效率，大幅降低了酶促制备腺苷蛋氨酸的成本，提高了生产过程控制的稳定性、升级了其工业化生产水平。具有显著的实用性与经济价值。

本发明提供了一种野生芽孢杆菌催化芳香醛合成芳香醇的方法及其应用，属于生物工程技术领域，所述还原的野生芽孢杆菌是芽孢杆菌Bacillus sp.CCZU11‑1，其保藏编号为CGMCC No.9297。该菌能够有效还原高底物浓度的芳香醛，分别得到对应的芳香醇。该方法工艺简洁、经济环保，且进一步减少了副产物生成，提高了生产效率和收率。

本发明涉及微生物领域，具体涉及一种产碱杆菌及其用途。一种粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)GXZY02，保藏于中国典型培养物保藏管理中心，保藏编号为CCTCC No：M 20231347。所述粪产碱杆菌GXZY02通过活化、选择性诱导培养以及继续培养能够诱导产生降解木质素的生物酶制剂或降解果胶的生物酶制剂，将其应用于烟丝上，能够降低烟丝中的木质素和果胶含量，提高烟丝品质。

本发明公开了一种充分自裂解重组C1s蛋白的表达质粒组合。组合中含有两个质粒，分别含有C1s蛋白的表达基因以及C1r蛋白的表达基因，其中C1s蛋白的表达基因编码的C1s蛋白C末端携带纯化标签，其中C1r蛋白的表达基因编码的C1r蛋白不引入纯化标签。本发明还公开了其表达宿主细胞和表达方法。本发明借用C1s蛋白的级联机制，通过在表达C1s蛋白的同时共转表达其上游C1r蛋白，从而在宿主细胞中引入特异型激活C1s蛋白的机制，获得充分自裂解的重组C1s蛋白。使用该方法可以通过利用实验室常用哺乳动物细胞表达体系(比如HEK293)制备获得充分裂解的C1s蛋白。

本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种用于检测汉赛巴通体的引物组、试剂盒。该用于检测汉赛巴通体的引物组，所述引物组包括外引物F3、外引物B3、环引物LF、环引物LB、内引物FIP以及内引物BIP；所述外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述环引物LF的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。本发明采用环介导等温扩增，扩增温度为63℃，扩增时间为60min，扩增时间短、节约扩增时间，同时，检测时对仪器的性能要求低，降低了检测成本。