生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明涉及一种人源III型胶原蛋白低聚肽大规模工业制备方法，属于微生物发酵技术领域。该重组胶原蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，本发明利用所述重组胶原蛋白制得了低聚肽粉，其分子量特征分布为：小于1000道尔顿的低聚肽占比大于75％；小于2000道尔顿的多肽占比大于85％；小于3000道尔顿的多肽占比大于90％。

本发明提供了一种用于小麦赤霉病抗性候选基因TaRAR1的KASP标记引物组，包括正向引物FAM、反向引物VIC和共用反向引物，核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑3所示。还提供了鉴定小麦赤霉病抗性候选基因的方法，用KASP标记引物组对待测基因组DNA进行PCR扩增，用Bio‑rad CFX‑96instrumentreal‑timePCR仪器对PCR产物进行KASP标记的基因型鉴定。本发明所涉标记与小麦赤霉病抗性主效QTL—QFhb‑2DL紧密连锁，可作为该抗性QTL位点的诊断性标记用于赤霉病抗性辅助选择育种。

本发明公开了一种利用SNaPshot技术检测猫血型的方法，对猫CMAH基因上的4个单核苷酸突变位点进行检测。其特征在于：检测猫血型的单核苷酸突变位点包括：CMAH 179G>T，CMAH 268T>A，CMAH 364C>T，CMAH1322delT。本发明采用SNaPshot技术进行SNP分型检测，一次性可以检测多个位点，取样量少，且准确度高，结果容易判读。通过对猫血型检测，可有效避免新生儿溶血和输血不良反应。

本发明涉及基因工程技术领域，具体讲，涉及一种赖氨酰特异性内切酶突变体及其制备方法和应用。本发明的赖氨酰特异性内切酶突变体是将野生型赖氨酰特异性内切酶中第51位和/或第137位的氨基酸进行如下突变得到的：Y51D突变、R137K突变。相比其野生型赖氨酰特异性内切酶，本发明的突变体具备显著提高的酶活和酶活稳定性。

本发明涉及环保技术领域，具体涉及垃圾厌氧发酵制氢的方法及其制氢发酵罐。所述方法包括以下步骤：S1：有机质分离，在垃圾中提炼出含有有机质的发酵原料；S2：发酵原料加工，对分离出的含有有机质的发酵原料进行干燥，干燥完毕后使用破碎设备将其制成粉末；S3：发酵液制备，营养液中依次加入不同质量比的发酵细菌群。本发明通过将发酵原料粉末和发酵液分层交错的投入进制氢发酵罐中进行发酵，使得发酵原料粉末能够发酵的更加完全，从而厌氧发酵制氢速率提升，提高了对垃圾的处理速率。其中，在发酵过程中，巴士梭菌菌落比最高，因为巴士梭菌的固氮作用强，从而能够更好的在所述发酵过程中起到重要作用。

本发明涉及发酵设备技术领域，尤其涉及一种山药酒曲用搅拌式堆积发酵装置。本发明提供一种能够保证将酒曲接触打散的山药酒曲用搅拌式堆积发酵装置。一种山药酒曲用搅拌式堆积发酵装置，包括有箱体、输料管、双向搅动机构和注水机构，箱体的上部前侧设有左右两个出风口，箱体的上侧连接有输料管，输料管的下部内侧设有用于对酒曲接触打散的双向搅动机构，输料管的上部内侧设有用于自动加水的注水机构。本发明在注入山药和酒曲的过程中便会分别被上搅动轮和下搅动轮搅动打散，最后落入箱体内，从而能够保证将酒曲接触打散，并保证酒曲山药能均匀接触混合。

本发明公开了一种控制枯草芽孢杆菌基因组同源重组概率的方法，属于基因工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌为出发菌株，敲除了编码RecA蛋白的基因recA或诱导表达基因recA，通过诱导物质的添加调控微生物的同源重组，使得到的工程菌株产量稳定性大大提高。

本发明公开一种微生物发酵制备小分子肽的方法，所述方法包括制备发酵底物、发酵。本发明发酵制备小分子肽的方法，得到的总肽含量高，小分子肽含量高，总肽含量为85.2‑85.7%，3000Da以上肽含量为1.1‑1.3%，2000‑3000Da肽含量为4.8‑5.5%，1000‑2000Da肽含量为15.6‑17.2%，500‑1000Da肽含量为71.5‑74.1%,500Da以下肽含量为4.0‑5.2%。

本发明提供一种降低qPCR非特异性扩增的方法，属于生物技术领域。本发明通过向qPCR全预混体系中加入吐温‑20，有利于降低引物二聚体的形成，减少引物消耗和非特异性扩增，进而缓解qPCR全预混试剂长期保存时功能的损失。

本公开属于听力障碍领域，具体涉及遗传性耳聋检测系统、标志物或探针、药物及应用。公开了Taperin在毛细胞静纤毛根部锥形区域形成环状结构；确定了在静纤毛根部Taperin‑Clic5‑Ptprq形成环状复合物结构；Taperin‑Clic5‑Ptprq形成环状复合物结构对于维持听力至关重要，受到破坏会造成严重的听力损失；Taperin的表达量对环状结构的维持与稳定至关重要；因环状结构的破坏引起的听力损失可以通过基因递送的方式进行治疗。

本发明属于生物技术领域，具体公开了一种1‑脱氧野尻霉素的生物合成方法，该方法包括以下步骤：将牛类芽孢杆菌(Paenibacillus bovis)CGMCCNo.8333接种于脱脂乳淀粉培养基中进行发酵，得到含有1‑脱氧野尻霉素的发酵液。上述技术方案中的制备方法，首次采用牛类芽孢杆菌CGMCCNo.8333发酵脱脂乳淀粉培养基的方法完成1‑脱氧野尻霉素的生物合成，披露了牛类芽孢杆菌CGMCC No.8333具有发酵脱脂乳淀粉培养基合成1‑脱氧野尻霉素的新用途，拓宽了1‑脱氧野尻霉素的来源。同时，组成简单、来源天然的培养基，令合成的1‑脱氧野尻霉素具有更高的使用安全性。

本发明公开了一种复合微生物菌剂及其在处理肝素钠废水中的应用。该复合微生物菌剂是由芽孢杆菌属、拟杆菌属、乳酸杆菌属、假单胞属菌、不动杆菌属、辅助菌属和营养剂按照一定重量比制得的，该菌剂总活菌数不低于1×109cfu/mL。本发明还提供了利用该复合微生物菌剂处理肝素钠废水的方法，该方法包括以下步骤：将复合微生物菌剂进行复苏培养；然后将复苏后的复合微生物菌剂上清液加入肝素钠废水中进行处理。实验结果表明：利用该复合微生物菌剂治理肝素钠废水1周后，COD去除率接近90％，氨氮去除率达60％左右，有效解决了肝素钠废水的高COD、高氨氮的问题，为肝素钠废水的处理提供了一种可行的方法，具有良好的应用前景。

本发明涉及一种提取小鼠主动脉成纤维细胞的方法，通过使用猪胰蛋白酶造模后提取整根小鼠主动脉血管，采用特制的消化液和终止液进行消化培养，可以快速有效地提取小鼠主动脉成纤维细胞，提取的技术难度低，提取时无需剥离小鼠主动脉外膜，消耗时间短，全程仅需3‑4小时即可获得小鼠成纤维细胞，对血管组织消化彻底，对细胞活性影响小，提取的小鼠主动脉成纤维细胞纯度高。

本发明公开了一种生物信息用培养箱，涉及培养箱技术领域。一种生物信息用培养箱，包括箱体、密封门和窗口，箱体的观察端面上设置有密封门，密封门上开设有窗口，箱体的一侧设置有侧箱，侧箱的一侧端面上设置有排气扇，侧箱与箱体的连接处转动设置有中门，中门上设有密封条，侧箱内设置有推板，推板的下方设置有移动座，移动座螺纹连接着螺杆，螺杆通过轴承转动连接在侧箱上。本发明通过侧箱的设置就可输送后期放置的试验品，通过侧箱的设置就可不需单独开启箱体上的密封门，从而保护了箱体内原有的生长环境，从而保护了原有培养品的生长。

本发明公开了一种具有缓解痛经生理期紊乱多酚黄酮饮的酿造方法，该方法为取重量份数分别为5%黄姜、5%枸杞、10%红枣，加入80%重量份的益生元中，80度摄氏度浸泡12小时后自然放凉得到浸泡原浆，取10%重量份的浸泡原浆与90%份的益生元混合均匀，过滤后灌装，得到多酚黄酮饮，本发明以广东梅州蕉岭县产的黑糙糯米、白糙糯米、红糙糯米为主要原料酿造而成的益生元为主要原料，加入了黄姜、枸杞和红枣，具有一定的缓解女性生理期痛与紊乱的作用。

本发明属于生物学诊断技术领域，公开了一种结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒及其制备方法，其特征在于，该试剂盒具体包括：(1)DNA提取试剂盒；(2)PCR扩增反应液；(3)基因芯片；(4)各种引物。本发明在试剂盒中使用了标记有生物素点的DNA序列和扩增结核分枝杆菌复合群的IS6110DNA序列，分别用于监控杂交和PCR体系以及检测是否为结核分枝杆菌复合群，便于操作人员在检测过程出错时，快速区分是在PCR时出错还是在杂交时出错，以便迅速找出发生错误的原因，缩短检测时间。

本发明提出了一种防治水产动物弧菌病害的霍乱弧菌噬菌体及其应用，所述噬菌体于2021年11月05日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 20211375。所述噬菌体是有尾噬菌体纲、Schitoviridae科的噬菌体新种，其全基因组在NCBI官网GeneBank登录号为OP313112.1。该噬菌体噬菌谱广，能同时裂解6种不同种属的弧菌，能同时裂解44株霍乱弧菌，23株哈维氏弧菌，16株副溶血弧菌，15株溶藻弧菌，10株坎氏弧菌，8株创伤弧菌，能更有效的解决水产养殖中出现的多种细菌病害感染问题，可作为用于防治水产动物霍乱弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌等弧菌病害的微生态制剂。

本发明公开了一种去除质粒内毒素的试剂，所述试剂包括质量分数为8‑12%的TritonX‑114和TE缓冲液，其中，所述TE缓冲液包含有体积分数为10‑15%的有机溶剂。本发明的去内毒素试剂配方简单，成本低，且安全性较高；去内毒素方法方便快捷，且不影响质粒浓度；可用于直接去除质粒中内毒素，也可以在质粒抽提过程中去除内毒素，且得到的质粒能满足酶切，测序，转染和病毒包装等分子生物学实验和细胞实验。

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种基于LAMP的流感病毒H10N3快速检测试剂、试剂盒及使用方法，所述试剂包括用于检测H10N3病毒引物组，所述引物组包括双基因扩增引物和环引物，所述双基因包括基因NA和基因HA，每条基因均包括多个位点的扩增引物，相对于现有的荧光定量PCR检测法具有准确率高、检测速度快的优势。本发明具有准确率高、检测速度快的特点，能够特异性的对流感病毒H10N3检测。

本发明属于基因工程领域，提供了一种对生物样品内的核酸分子进行原位检测的方法，以及在检测过程中采用的识别探针、编码探针和荧光探针。本发明利用高准确性和高灵敏度的核酸探针技术准确结合目标核酸分子并大量扩增，构建了高通量单分子原位杂交文库。在此基础上，利用单分子荧光原位杂交技术和荧光显微成像技术实现了高度多重的核酸分子原位检测，拥有极高的信号强度、信噪比、更大的编码自由度，可以在更短的时间内以较低的成本检测更多的目标核酸分子。

本发明公开了一种可对内部培养细胞保护的液体培养结构，包括培养罐，所述培养罐下端面固定有倾斜结构的支脚，且培养罐前端面通过合页连接有箱门，并且培养罐前端面上侧固定有控制面板，同时培养罐左侧下端固定有接电盒；还包括：进气管，固定在所述培养罐右侧下端，且进气管上连接有净化盒，并且进气管左端贯穿培养罐连接有风机，同时风机固定在培养罐内。该可对内部培养细胞保护的液体培养结构，采用可调节的限位夹持机构，可以实现对培养基盒的夹持固定，从而保证培养基盒的稳定性，避免培养基盒因外力作用而导致液体洒落，配合具有清理结构的净化机构，可以对空气实现除尘净化作用，保证空气的纯净，避免培养基因空气中杂质而被污染。

本发明公开了一种将离体肾脏组织解离成单细胞悬液的方法，主要是通过酶I和酶II两次消化处理后，结合过滤、离心清洗以及红细胞裂解等操作获得纯化后的单细胞悬液。所述酶I为含0.25％胰蛋白酶的HBSS培养基；所述酶II为含中性蛋白酶0.2mg/mL、II型胶原酶1～3mg/mL、IV型胶原酶1～3mg/mL、DNase I 0.1mg/mL和CaCl20.04～0.06mg/L的HBSS培养基。本发明优点包括：操作简便，无需特殊仪器设备即可实现，可于短时间内获得高活性的肾脏单细胞悬液，经细胞活性检测发现，经最适酶浓度所分离得到的肾脏单细胞产量高达1.6×106/mL，活率高达89.3％。

一种从DHA鸡蛋中提取磷脂型DHA及副产物的深加工方法，包括下述步骤：（1）提取磷脂型DHA：将DHA鸡蛋的蛋黄、蛋清分离；然后将蛋黄加入到乙醇中搅匀；提取蛋黄中的磷脂型DHA；（2）提取蛋黄油；（3）制取蛋黄蛋白肽液；（4）制取卵黄高磷蛋白磷酸肽液；（5）制取白蛋白肽液。采用这种方法能够从DHA鸡蛋中提取磷脂型DHA并充分利用DHA鸡蛋中的其他营养成分。

本发明公开了细菌分离技术领域的一种植物干标本中分离病原细菌的装置，包括盛放桶，所述盛放桶下方设置有支架，所述盛放桶内部设置有旋转叶片，驱动组件工作时通过不同的过滤筒和限流筒能够对培养液之中不同大小的细菌进行重复不断地筛分，使得每一个过滤筒只能对细菌大小接近相同的进行过滤，实现细菌的逐级分离，在过滤之后通过收集组和密封组将收集完成的细菌排放到收集盒之中，而后在排放到培养皿之中，不需要人工参与即可进行自动地收集和分离，简化了细菌分离的步骤，并且通过此方式分离能够提高细菌分离的标准化，培养液在快速转动的途中与过滤筒接触能够提高细菌分离的效率。

本发明涉及微生物培养，更具体的说是一种冻土微生物培养设备，包括支撑环，支撑环上固定连接有连接板，支撑环上固定连接有支撑板，支撑环上固定连接有闭合底环，闭合底环上设置有多个插入凸起，每个插入凸起上均设置有插槽，连接板上固定连接有支撑架，支撑架上固定连接有支撑底板；支撑架上转动连接有驱动轮，支撑架上转动连接有从动轮，驱动轮和从动轮之间通过驱动带传动连接，驱动带上固定连接有多个限位凸起，支撑架上固定连接有驱动驱动轮进行转动的动力机构Ⅰ，可以有序的将微生物培养皿收纳到培养箱内，并且可以根据不同的使用需求，可以将任意一个位置的微生物培养皿取出。

本发明公开了一种重组酪氨酸酶突变体及其应用，属于生物工程领域。本发明通过分子生物学手段从巨大芽孢杆菌基因组中获得酪氨酸酶BM Tyr，将重组酪氨酸酶BM Tyr的第218位、第215位、第209位的氨基酸中的一个或多个进行突变得到重组酪氨酸酶突变体。本发明重组酪氨酸酶BM Tyr突变体氧化表儿茶素没食子酸酯活性，相对于重组酪氨酸酶BM Tyr提高了1.14～6.26倍，且重组酪氨酸酶BM Tyr突变体表现出较高的表儿茶素没食子酸酯活性。采用本发明的方法，提高了单位催化剂的生产能力和催化剂的反应效率，降低了反应的成本，加快了酶转化法生产茶黄素‑3,3’‑双没食子酸的工业化进程。

本发明涉及一株牛病毒性腹泻病毒BVDV‑SDJN01及其应用，属于牛病毒性腹泻病毒疫苗试剂领域。所述的病毒为牛腹泻病毒BVDV‑SDJN01，于2022年6月30日送至中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为：CCTCC NO:V202255。以该病毒为抗原制备出BVDV1c灭活疫苗，免疫原性较好，可刺激机体产生较高水平的中和抗体，该病毒株为我国牛病毒性腹泻病的有效防治提供一种有效的疫苗候选株。

本发明提供基于柔性水凝胶基底细胞筛药芯片高通量可视化筛药方法，包括：S1，类组织细胞力学刚度的柔性水凝胶基底的建立；S2，所述柔性水凝胶基底上微阵列高通量微图案化印记的复刻；S3，利用所述微图案上转印细胞外基质微环境需要的胶原蛋白，建立贴壁细胞的矩阵细胞芯片；基于所述矩阵细胞芯片建立细胞感染芯片模型，然后加入待检测抗菌药物，测定所述待检测抗菌药物的药效。本发明方法有助于提供一系列高效精准的抗菌药物种类和抗菌治疗策略，同时也促进了中草药复方抗菌药物的研发和抗菌靶点的研究。

本发明公开了一种淡紫拟青霉菌、菌剂及其制备方法，所述的淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)PM0327‑3保藏编号为GDMCC No：62375。所述淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)PM0327‑3具有耐代谢物拮抗、耐高温和耐酸耐碱能力，具有良好的应用前景。

本发明公开了一种病理学实验用细胞病变记录装置，包括收纳盒、培养盒和盖板，所述收纳盒和盖板分别设置在培养盒的顶部和底部，所述培养盒顶部外侧开设有扣合槽，且盖板通过扣合槽扣合在培养盒外侧；所述培养盒顶部开设有圆形柱槽，且圆形柱槽的顶部外侧设有环形槽，所述圆形柱槽内侧轴心处设有与培养盒一体设置的柱形圆盘体。本发明通过多个培养部按顺序与标签处的顺序和信息对应，使培养部进入放置槽中后不易脱离，配合多重套接结构以及密封部件提高细胞样品的保存密闭性，减少细菌的影响，实验中使培养部绕柱形圆盘体轴心周转并自转，多个培养部内的实验细胞样品各处都能够受到相同环境的影响，减少实验误差，提高实验监测的精准度。

本发明公开鞘氨醇杆菌HY‑100C及其应用，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，430072，保藏日期：2022年09月20日，保藏编号CCTCC No:20221449；鞘氨醇杆菌HY‑100C能够利用邻二氯苯等有机污染物作为唯一碳源和能源生长繁殖，并将污染物矿化成CO2和H2O；在纯培养条件下，该菌在温度25～30℃，pH为7.0～8.0时，30小时对邻二氯苯的降解效率可达90％以上；此外，该菌株能不同程度的利用氯苯、甲苯、乙苯为唯一碳源和能源进行生长并降解该类底物，为处理包含邻二氯苯的VOCs废气提供技术支持。

本发明公开了一种无接触式生物细胞测试盒检测器，包括传导检测结构和纵向无接触传输结构，传导检测结构的中心位置固定连接有纵向无接触传输结构，传导检测结构包括定位杆、第一传导检测部件和第二传导检测部件，第一传导检测部件设在传导检测结构的内端一侧，第一传导检测部件、第二传导检测部件对称设置，第一传导检测部件、第二传导检测部件之间固定连接有定位杆，第一传导检测部件包括检测机构和传导连接机构，检测机构的侧端位置与传导连接机构相固定连接，纵向无接触传输结构包括纵向连接部件和驱动传导部件。本发明为无接触式生物细胞测试盒检测器，通过传导检测结构和纵向无接触传输结构的设置，实现内端无接触检测的目的。

本发明提供了一种利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法，属于纳米生物界面与组织工程技术领域，包括以下步骤：(1)将PLLA与明胶溶于六氟异丙醇，通过静电纺丝技术制备得到PLLA/明胶纳米纤维基体；(2)通过液相/气相诱导结晶方法，在步骤(1)所述的PLLA/明胶纳米纤维基体的表面包裹PLLA晶体得到分型纳米纤维；(3)将细胞培养于步骤(2)所述的分型纳米纤维上得到三维细胞球体。本发明基于静电纺丝技术和液相/气相界面诱导结晶方法，制备了一种分型纳米纤维，此纳米纤维支架为细胞球体的形成及培养提供了一个新的生物平台。

本发明公开了一种食品中大肠菌群的检测方法和装置，涉及大肠菌群检测技术领域；改善操作较为麻烦，检测效率较低的问题，而本发明包括装置箱和设置在装置箱内部的放置板，所述放置板的顶部设置有检测滤纸，所述装置箱内表面的背面转动连接有翻转轴，所述翻转花键轴的一端固定连接有翻转花键轴，所述放置板的底部固定连接有安装块；本发明通过往复机构的设置，使灭菌灯可以往复运动，从而对检测滤纸灭菌更加均匀，同时使电加热板可以往复运动，从而使烘干更加均匀，均匀的灭菌和烘干，增加装置的检测效果，同时使联动密封方管往复运动，方便清理喷水头对过滤网进行清理，一体化设计，操作简单方便，检测效率高。

本申请提供检测德国牧羊犬犬种的引物组、试剂盒、基因芯片和方法，其中所述检测德国牧羊犬犬种的方法包括：采集待检测犬的基因信息；对所述基因信息进行扩增，通过预设引物组对扩增后的基因信息进行检测，获得预设数量的待检测基因位点信息集合；将所述待检测基因位点信息集合与参考基因位点信息集合进行比对；根据比对结果确定所述待检测犬对应的德国牧羊犬犬种信息。通过本方法，利用少量高频基因突变位点鉴定德国牧羊犬的方法，直接获得鉴定结果，不用依赖相关鉴定人员的鉴定经验，检测准确性高、可重复性高，鉴定时间短。

本发明提供一种核酸提取组合试剂管，包括裂解液预装管、转移盖、洗涤液预装管、加样孔密封盖、磁珠液加样瓶及支撑底座；所述裂解液预装管上端开口，安装在所述支撑底座；所述转移盖包括转移盖主体及第一扣盖，所述转移盖主体的上下两端开口，其下端开口可与所述裂解液预装管的上端开口可拆卸地密封连接，其上端开口与所述第一扣盖可拆卸地扣合，所述第一扣盖通过连接肋连接在所述转移盖主体的外壁上；所述第一扣盖内包埋有永磁铁；所述洗涤液预装管的上下两端开口，其上端开口可与所述转移盖主体下端开口可拆卸地密封连接，其下端开口为加样孔，所述加样孔与所述加样孔密封盖可拆卸地密封连接。该试剂管操作便利，无需专门的纯化和提取设备。

大豆孢囊线虫基因Hg‑osm‑9、其编码蛋白及其dsRNA在线虫防治中的应用，涉及分子生物学领域，尤其涉及一种大豆孢囊线虫基因Hg‑osm‑9、其编码蛋白及其dsRNA在线虫防治中的应用。是要解决现有大豆孢囊线虫的化学防治方法存在环境污染及对人畜有害的问题。该基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：2所示，其dsRNA序列如序列表中SEQ ID NO：3所示。该基因在调控大豆孢囊线虫对酸碱化感物质的趋化性及在侵染寄主及发育过程中发挥关键作用，用于作为大豆孢囊线虫防治药物开发的靶标基因。本发明用于大豆孢囊线虫防治领域。

大豆孢囊线虫基因Hg‑ocr‑2、其编码蛋白及其dsRNA在线虫防治中的应用，涉及分子生物学领域，尤其涉及一种大豆孢囊线虫基因Hg‑ocr‑2、其编码蛋白及其dsRNA在线虫防治中的应用。是要解决现有大豆孢囊线虫的化学防治方法存在环境污染及对人畜有害的问题。该基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示，其氨基酸序列如序列表SEQ IDNO：2所示，其dsRNA序列如序列表中SEQ ID NO：3所示。该基因在调控大豆孢囊线虫对酸碱化感物质的趋化性及在侵染寄主及发育过程中发挥关键作用，用于作为大豆孢囊线虫防治药物开发的靶标基因。本发明用于大豆孢囊线虫防治领域。

本发明公开了一种生物炭基菌剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种能够降解多溴联苯醚的变形假单胞菌，其分类学命名为Pseudomonas plecoglossicida，于2022年08月25日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62739。本发明还提供了一种生物炭基菌剂，包括能够降解多溴联苯醚的变形假单胞菌和辅剂，所述辅剂包括生物炭；能够降解多溴联苯醚的变形假单胞菌的变形假单胞菌附着辅剂的表面或分散于辅剂中。本发明不仅提供一种革兰氏阴性菌株，而且制得含有生物炭的生物炭基菌剂具有有效修复多溴联苯醚和重金属复合污染的环境的优势。

本发明提出一种用于分离外泌体的纳米材料及其制备方法、应用，属于外泌体分离技术领域。本发明的制备方法包括下述步骤：获取纤维素纳米材料；将链霉亲和素通过共价键偶联的方式固载到纤维素纳米材料上；在固载有链霉亲和素的纤维素纳米材料中加入用于捕获外泌体的抗体，经反应后将抗体固载到纳米材料上，以得到用于分离外泌体的纳米材料。本发明利用纤维素纳米材料具有高比表面积和多修饰位点的优点，将外泌体特异性捕获抗体固载到纤维素纳米材料上，能够明显提高外泌体与捕获抗体接触的机会，在保证特异性的同时具有高的捕获效率，兼顾了特异性和产率，制备过程简单，对外泌体的分离效率较高，无需大型分离设备，操作简便，成本较低。

本发明公开一种在酵母基因中定点敲入外源基因的方法，属于基因工程技术领域。本发明所述的在酵母基因中定点敲入外源基因的方法，其步骤如下：将携带有Cas9基因和sgRNA转录基因的载体，与外源基因片段，共同转化至酵母体内，转录后的sgRNA引导Cas9蛋白至酵母靶向基因的靶点处，切割靶点，并在靶点处引入DNA双链断裂，然后利用同源重组，将外源基因敲入靶点中，从而实现外源基因在酵母基因中的定点敲入。本发明实现了以更短的同源臂序列完成同源重组，从而在酿酒酵母ADE2基因第640～641位碱基之间敲入外源基因，这在现有技术的基础上具有突出的进步。

本发明属于分子生物学检测技术领域，具体涉及一种检测高山美利奴羊INPP5E基因CNV标记的方法及应用，本发明提供了一种与高山美利奴羊羊毛性状相关的CNV标记，位于高山美利奴羊INPP5E基因外显子区域chr3：2926901‑2927900。并提供了检测CNV标记的方法：以高山美利奴羊基因组DNA为模板，以引物对P1和P2分别通过qPCR扩增INPP5E基因的CNV区域以及内参基因，定量高山美利奴羊INPP5E基因的拷贝数变异，所述方法操作简单，准确可靠。最后，本发明可以检测高山美利奴羊羊毛性状密切相关的CNV标记，用于高山美利奴羊早期选择，提高选种准确性，缩短培育周期，加快培育进程。

本发明公开了一种外泌体的提取方法，所述外泌体的提取方法包括如下步骤：将血液样品制得富血小板血浆；将富血小板血浆进行梯度离心；采用超速离心法提取梯度离心后的富血小板血浆中的外泌体；本发明提取方法通过对富血小板血浆进行梯度离心，能够促进血小板中外泌体的释放，达到充分提取血小板中的外泌体的目的，显著提高了外泌体提取率。此外，本发明超高速离心法参数的控制，能够更好的去除杂质，提高制备外泌体的纯度。

本发明公开了一种NK细胞培养基及体外扩增NK细胞的方法，所述培养基含有：10‑20%FBS、40‑60μg/mL青霉素‑链霉素溶液的1640培养基；10‑200 mg/mL人血浆转铁蛋白；40‑90μM 1,3‑二咖啡酰奎宁酸；20‑70μM乙酰谷酰胺；500‑1500 IU/mL人重组IL‑2；10‑200 IU/mL人重组IL‑15；10‑200 IU/mL人重组IL‑18；10‑200 IU/mL人重组IL‑21。本发明首次公开了以特定的比例加入1,3‑二咖啡酰奎宁酸和乙酰谷酰胺的组合刺激条件下，能够显著增强NK细胞的Perforin、Granzyme B、CD107a的表达水平，能够显著增强NK细胞对K562的杀伤活性。

本发明公开了一种新型白酒，用楠竹制备而成。本发明的制备方法包括以下步骤：（一）酒曲的培养（1）将楠竹粉碎得竹粉；（2）将楠竹粉碎成竹粉，用热水浸泡、过滤，得竹粉液，冷却；（3）将新鲜未开花的辣蓼草粉碎，得辣蓼草浆；（4）取活竹蠹烤干，粉碎，得干竹蠹粉；（5）将所得辣蓼草浆、干竹蠹粉和竹粉，混合均匀制成培养基，接种竹粉液，在培养室培养菌群，然后干燥成粉末状态得酒曲；（二）酿酒将楠竹粉碎成竹粉，然后加入葡萄糖、食用柠檬和酒曲，混合均匀，再与山泉水为1:2的重量比浸泡发酵40天左右得竹子酒酿；（三）蒸馏将所得竹子酒酿蒸馏得新型白酒。本发明的新型白酒用竹子酿制，可节约大量粮食。

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及酿酒酵母及其应用。本发明提供了保藏编号为CCTCC NO:M 20221327的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)及其应用。实验表明，本发明提供的酿酒酵母能够促进细胞增殖、改善皮肤屏障，在皮肤保湿、舒敏镇痛、增强皮肤抗菌能力、更新老化角质、抗衰老和美白等方面具有优异效果，适用于制备改善皮肤相关功能的食品、药品和化妆品等。

本发明适用于真菌培养装置领域，提供了一种真菌培养基用防污染装置，包括基体，还包括：活塞组件，所述机构室中设置有活塞腔，所述活塞组件滑动连接在活塞腔中，所述活塞组件能够在活塞腔中往复滑动；所述基体设置有进气管，所述进气管滑动连接有过滤机构，所述过滤机构能够对空气进行过滤，在活塞组件的带动下，所述进气管中产生气压变化，在气压力的作用下，所述过滤机构沿进气管往复振动，同时过滤机构间歇开闭；所述活塞腔一侧设置有槽腔，所述活塞腔与槽腔之间设置有管道，所述管道设置有单向气阀，所述管道在槽腔中的一段设置有多个出气孔，所述槽腔中设置有滤板机构，所述滤板机构能够持续转动，且所述滤板机构能够对空气进行过滤。

本发明属于固体废弃物处理处置技术领域，也属于生物强化技术的范畴，具体涉及一种厌氧发酵过程稳定剂及其在餐厨垃圾厌氧发酵中的应用。本发明稳定剂中含有解芳烃互营杆菌(Syntrophorhabdus aromaticivorans)、硫酸盐还原互营杆菌(Syntrophobacter sulfatireducens)、布雷斯甲烷袋状菌(Methanoculleus bourgensis)、运动甲烷微球菌(Methanomicrobium mobile 1)和微量元素钴(Co)和硒(Se)。此稳定剂按照重量比例加入餐厨垃圾厌氧发酵过程，保证厌氧发酵系统的连续稳定运行；与市售的厌氧稳定剂相比，本发明可以明显提高厌氧过程对环境的抗逆性，如碳氮比失调，氨氮浓度过高，盐分过高等。使用本发明提供的稳定剂，使用方式简便易行，对厌氧发酵产沼气过程不增加额外的工序，用量低且无二次环境污染的隐患。

本发明公开了一株热带假丝酵母及其应用，涉及微生物技术领域。本发明公开的热带假丝酵母(Candida tropicalis)为热带假丝酵母LABOFMIC‑308，已于2022年9月9日保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO:M 20221391。实验表明，LABOFMIC‑308具有促进细胞增殖、修护皮肤屏障、保湿、提高皮肤抗菌能力、抗衰老的功能，可用于制备食品、药品、化妆品等。

本发明属于生物工程领域，提供了一株三氯乙烯降解菌及其应用。所述三氯乙烯降解菌属于革兰氏阳性菌，经分子水平鉴定为枯草芽孢杆菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏号为CGMCC 24319，该菌可以利用三氯乙烯为唯一的碳源进行生长，不需要依赖于共代谢基质进行降解，该菌株或其菌剂投入到含有三氯乙烯的污水处理系统中，能够对其直接进行降解，进而阻断其进入到土壤或者地下水环境引起长期污染，该菌株的应用可以避免采用物理化学法处理成本高、造成二次污染等缺点，对操作人员无副作用，为生物好氧条件下直接处理三氯乙烯的研究提供新的种质资源，在实际生产中具有良好的应用价值。