生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明提供一种使用声学截留装置灌流培养细胞生产抗体的工艺，属于生物工程技术领域，本发明细胞生长状态更优，BioSep工艺可维持更高的活细胞密度(VCD)和活率(VIA)，直至D30培养结束时，VCD约为50×106cells/mL，VIA约为90％，ATF工艺培养至D30时，VCD约为30×106cells/mL，VIA约为80％，消除了目标产物的截留问题；BioSep工艺反应器内抗体浓度与收获液抗体浓度始终保持一致(相差5％以内)，产物截留率几乎为0％，而ATF工艺抗体截留率不断升高，直至结束培养时收获液中抗体浓度仅为反应器内的50％，产物截留率达到50％，提高产量。

本发明涉及用于生物制药工艺生产线的智能罐、智能罐组合件、智能罐组装方法以及包括多个智能罐的系统。所述智能罐包括顶板元件、至少一个侧壁元件和底板元件，其中所述顶板元件、所述至少一个侧壁元件和所述底板元件被布置为形成用于接收至少一种生化介质的贮存器。所述智能罐进一步包括至少一个通道，用于引导所述至少一种生化介质和/或工作介质。所述至少一个通道在所述顶板元件以及所述至少一个侧壁元件和/或所述底板元件中的至少一个内延伸。

提供了一种生物组件、用于生物组件的套件以及使用它们的方法。所述生物组件包括基底和贴附到基底的生物支架。根据各种实施例，提供了具有分隔件或加载器的加载板和具有分隔件的板。根据各种实施例，加载板包括分隔件出口和分隔件入口，其中，分隔件出口和分隔件入口与凝胶流体连通。根据各种实施例，分隔件包括内部容积并成形为接收生物支架，并且所述加载器包括与凝胶流体连通的加载器入口和加载器出口。根据各种实施例，生物兼容的粘合剂设置在基底与加载板或板之间。根据各种实施例，流体混合物被注入生物支架。

本发明涉及白酒酿造技术领域，具体公开了一种葡萄牙棒孢酵母及其在白酒酿造中的应用。所述的葡萄牙棒孢酵母，其保藏编号为GDMCC No：61758，命名为Clavispora lusitaniae YJ18。该葡萄牙棒孢酵母具有非常优异的产乳酸乙酯和乙酸乙酯能力，将其应用于米香型白酒酿造中，可以有效地提高米香型白酒中乳酸乙酯和乙酸乙酯的含量。

本发明涉及微生物及其应用技术领域，具体涉及一株提升苜蓿品质的巨大芽孢杆菌、筛选方法及其应用；巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）TZ‑1，该菌保藏编号为CGMCC NO.22296；本发明还公开了其应用方法，本发明的菌株具有提升苜蓿蛋白品质，降低中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量的作用。

本发明公开了一种间接表面展示PETase蛋白的重组毕赤酵母，包括：(1)在毕赤酵母GS115中异源表达3×IM7‑SED1融合蛋白，构建IM7酵母。(2)在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达CL7‑PETase融合蛋白，构建CL7‑PETase蛋白。(3)将IM7酵母和CL7‑PETase蛋白进行结合，实现PETase蛋白在毕赤酵母上的表面展示。本发明采用的间接表面展示的构建方法，克服了直接表面展示系统的表达量不足的缺点，同时与游离酶相比具有稳定性高，分离回收容易，连续操作可控，工艺简便的特点，并且表面展示酶区别于传统的物理或化学的固定化方法，对于PET这种刚性底物，表面展示酶更能充分有效地与底物接触，最大限度催化底物，可作为全细胞催化剂应用于PET塑料降解中的应用。

提供了用于鉴定基因组DNA中与蛋白质结合的区域的方法、组合物、试剂盒和系统。该方法可包括使基因组DNA与腺嘌呤甲基转移酶(A‑MTase)接触，其中该A‑MTase使得该基因组DNA中不与蛋白质结合的区域中的腺嘌呤残基甲基化；以及对所接触的基因组DNA进行单分子长读测序，以检测该基因组DNA中缺少甲基化腺嘌呤残基的位置，进而鉴定该基因组DNA中与该蛋白质结合的区域。所结合的区域可能是核小体位置，并且该方法可以测定基因组DNA中的核小体位置。还提供了通过在使细胞与腺嘌呤甲基转移酶(A‑MTase)接触后可视化甲基化腺嘌呤的位置来使染色质区域可视化的方法，该染色质区域不与蛋白质结合，并且在空间上可作为该细胞内该A‑MTase的底物。

本发明公开了一种基于衍射光学元件结构的PCR光路系统，包括激光模组、达曼光栅、分光模组、聚焦镜、96孔板、荧光相机。激光模组发出的激光，通过达曼光栅被分成96束强度一致的光斑，96束光斑通过分光模组，被反射到聚焦镜的镜面，再通过聚焦镜，将分光模组出射的激发光准直射入96孔板，使96孔板中的荧光样本被激发出荧光，荧光最终被荧光相机采集。本发明使用激光模组作为光源，不需要激发滤光片，使用达曼光栅直接产生96束强度均匀的激光，而且光斑位置和96孔板的位置相对应，激发光强度高，没有边缘效应，不需要扫描，检测迅速快捷。

本发明涉及一种可形成三聚体的源自于流感病毒表面蛋白的重组血球凝集素(hemagglutinin，HA)蛋白及其用途，具体来讲，涉及一种用于生产可形成三聚体的源自于流感病毒表面蛋白的HA蛋白的重组载体、利用所述重组载体进行转基因的转基因体、利用所述重组载体的可形成三聚体的源自于流感病毒表面蛋白的HA蛋白的生产方法、利用所述方法生产的可形成三聚体的源自于流感病毒表面蛋白的HA蛋白以及所述流感病毒感染疾病的预防、改善或治疗用途。

本发明公开了一种PCR‑free建库和测序方法。本发明提供了一种PCR‑free高通量测序方法，包括如下步骤：将待测序核酸根据大小进行或不进行片段化处理，得到目的大小DNA片段；末端修复和加A反应；连接含有标签序列的接头；进行单链环化和滚环复制，形成DNA纳米球；上机测序。

本发明提供了一种生物质合成基钻井液用主乳化剂的制备方法，包括：脂肪胺和多元脂肪酸酯在催化剂和溶剂存在下反应，得到主乳化剂；所述催化剂为脂肪酶。本发明由脂肪胺和多元脂肪酸酯制备的主乳化剂为一种梳型结构，同时采用生物催化的方法，可提高转化率，减少副产物，该方法制备条件温和，绿色，环保。本发明制备的乳化剂抗温能力可达235℃，适用密度为1.2g/cm3～2.5g/cm3的矿物油基钻井液、合成基钻井液。

本发明公开了一种用于辅助诊断癌症的分子标志物及试剂盒。本发明提供了甲基化FOLR3基因作为标志物在制备产品中的应用；所述产品的用途为如下至少一种：辅助诊断癌症或预测癌症患病风险；辅助区分良性结节和癌症；辅助区分癌症不同亚型；辅助区分癌症不同分期；辅助区分不同癌症；确定待测物对癌症的发生是否存在阻碍或促进作用；所述癌症可为肺癌或乳腺癌。本发明研究发现了肺癌和乳腺癌患者血液中FOLR3基因的低甲基化现象，本发明对提高肺癌和乳腺癌早期诊疗效果和降低死亡率均有重要的科学意义和临床应用价值。

一种精子分选装置，适用于从精液检体分选出多只活动精子，并包含底座及定位于所述底座的第一分选器。所述底座包括由底壁与围绕壁相配合界定出的容置空间，所述第一分选器包括第一套件及第一通透膜，所述第一套件具有用于置入所述容置空间内的第一套筒，所述第一套筒具有第一内筒面及第一外筒面，所述第一通透膜固定于所述第一套筒，所述第一通透膜与所述底壁及所述围绕壁的内壁面相配合界定出用于容置所述精液检体的第一检体容室。借此，使所述活动精子能自然向上游离穿过所述第一通透膜，可以提升精子分选质量。

本发明提供了一种高效引入赖氨酸衍生物的突变型氨酰基‑tRNA合成酶，其具有SEQ ID NO.3所示氨基酸序列。相比野生型赖氨酰‑tRNA合成酶，本发明突变型赖氨酰‑tRNA合成酶活性高、可溶性好，可显著提高非天然氨基酸的插入量和含有非天然氨基酸的目的蛋白的表达量，可以降低不含非天然氨基酸的断链蛋白的表达量，易于分离纯化。本发明还提供了包含该突变型赖氨酰‑tRNA合成酶的制剂和相关应用。

胆盐是来源于肝脏中胆固醇的类固醇酸，被释放到胃肠道中以帮助消化，并被肠道微生物群彻底改造。胆汁酸作为多功能信号分子，具有多种内分泌功能，并与多种疾病有关。特别是，血清和尿胆盐是肝功能障碍早期诊断的生物标志物，但它们目前的检测方法不切实际且难以推广。在这里，发明人使用TcpP作为连接到大肠杆菌CadC系统的传感结构域，设计了工程化的合成胆盐受体，该系统在二聚化时激活转录。针对不同启动子的选择对系统的性能进行了测试，它们表明通过改变胆盐受体的表达水平可以达到精细可调谐反应。通过对TcpP传感器进行多轮定向进化，发明人获得了具有较低检测极限和较高灵敏度的变体集合。最后，他们展示了他们的细菌传感器可以检测肝功能障碍患者样本中的病理性胆盐浓度。因此，本发明涉及胆盐细菌传感器及其在诊断和治疗目的中的用途。

本发明公开了用于辅助诊断癌症的分子标志物及试剂盒。本发明提供了用于检测BRD4基因甲基化水平的物质在制备产品中的应用；所述产品的用途为如下至少一种：辅助诊断癌症或预测癌症患病风险；辅助区分良性结节和癌症；辅助区分癌症不同亚型；辅助区分癌症不同分期；辅助区分不同癌症；确定待测物对癌症的发生是否存在阻碍或促进作用；所述癌症可为肺癌或乳腺癌。本发明研究发现了肺癌和乳腺癌患者血液中BRD4基因的低甲基化现象，本发明对提高肺癌和乳腺癌早期诊疗效果和降低死亡率均有重要的科学意义和临床应用价值。

本发明公开了一种神经元细胞与小胶质细胞/巨噬细胞、T细胞共培养体系及其构建方法与应用；共培养体系包括神经元细胞、小胶质细胞/巨噬细胞和T细胞，神经元细胞、小胶质细胞/巨噬细胞和T细胞来源于基因敲除小鼠和野生型小鼠，体系为体外培养体系；构建方法包括：磁珠分选T细胞，原代培养小胶质细胞/巨噬细胞，原代培养神经元细胞，神经元细胞与小胶质细胞/巨噬细胞、T细胞共培养；应用：用于体外实验研究TIM‑4调控小胶质细胞/巨噬细胞参与CIRI的作用机制。本发明的共培养体系及其构建方法，有助于研究TIM‑4对脑缺血再灌注损伤的作用，有望为CIRI脑损伤保护提供新的思路和靶点。

本发明涉及食品工程技术领域，尤其涉及一种基于提高蛋白质吸收率的植物基饮品生产装置，本发明设置发酵培养仓以及中控处理器，中控处理器根据仓体内颗粒度检测单元检测的颗粒度检测值判定杏仁原液所处的发酵阶段，并实时根据仓体内清液厚度检测单元检测的清液厚度调整加热单元的加热温度以及搅拌棒的搅拌速率，在杏仁原液处于第一发酵阶段时，根据仓体内凝乳速率检测单元检测的凝乳速率控制PH调整单元调整杏仁原液的PH，在杏仁原液处于第二发酵阶段时，根据杏仁原液表面的泡沫面积以及氧气含量对风机的功率进行调整，根据杏仁原液粘度判定发酵是否完成，实现自动化饮品制备，提高发酵效率，提高凝乳效果，提升饮品蛋白含量。

阿胶醋是纯粮发酵酿造而成，在经过了多次循环浇淋，高温蒸煮，常年吃醋，可以软化血管，促进血液循环，现在又加入了阿胶，二者相结合后，又具备了补气补血的功效，长期食用可以通过气血滋润肌肤，面色红润，富有弹性，可有效减少各类疾病的侵入，是人们走亲串友，孝顺老人，不可多得的佳品。

描述了基于间充质干细胞(MSC)的基于细胞的治疗。

本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种玉米抗旱基因Zm00001d030678在提高玉米抗旱性能中的应用。本发明通过将具有所述的基因Zm00001d030678玉米植株与具有其突变体Zmmyb56玉米植株进行对照实验，证明了基因Zm00001d030678具有抗旱的功能。本发明对Zm00001d030678基因功能的深入研究和分析，对于探索玉米气孔关闭及干旱胁迫反应的分子机制，改良玉米水分利用效率、培育高产耐逆玉米新品种等，具有重要的理论意义和实际应用价值，为后续抗旱玉米新品系的培育和种质资源创新提供了新的技术。

本文公开了与对象中患病组织的诊断相关的组合。所公开的组合和相关方法用于在考虑对象年龄的情况下预测或评估对象是否患有神经变性病症。该方法的一些实施方案包括基于对象的年龄应用基因过滤器，并产生基因表达数据的输出，该基因表达数据考虑了组织中观察到的基因谱随年龄的差异。

本发明公开了一种黑水虻人参营养酒的配方，配方的原料组分包括黑水虻、人参、鹿茸片、灵芝、枸杞及白酒；在配方中各原料组分的重量份数为：黑水虻的重量份数为80‑150份，人参的重量份数为20‑80份，鹿茸片的重量份数为2‑20份，灵芝的重量份数为2‑20份，枸杞的重量份数为2‑50份，白酒的重量份数为1500‑3500份。本发明各原料组方科学合理，制备方法方便高效，使黑水虻人参营养酒具备壮阳补肾、缓解疲劳、益气养血、通络祛瘀的功能，有助于提高人的免疫力，提高耐力，延缓衰老，补充男性活性物质，增强性功能，具有良好的市场推广价值。

本发明公开了一种回收利用餐厨垃圾处理后污水的方法及应用，所述方法首先采用种子培养基培养解淀粉芽孢杆菌、小球藻和酵母发酵种子，然后将解淀粉芽孢杆菌和小球藻加入餐厨垃圾处理后污水进行一阶发酵2‑3天后再接入酵母进行二阶发酵。该工艺种子培养过程中，解淀粉芽孢杆菌、小球藻和酵母生长迅速且最终细胞浓度较高，能够有效降低污水BOD。该工艺发酵过程中发酵培养基主要成分为餐厨垃圾处理后污水，无需添加碳源、蛋白质、维生素、脂类、无机盐等营养元素，工艺控制简单，菌株发酵性能稳定，污水经处理及沉淀后可直接用于灌溉农田。

本发明涉及水稻OsRGE3基因及其编码蛋白与应用。本发明通过构建CRISPR/Cas9‑OsRGE3敲除载体，利用农杆菌介导法转化水稻，获得OsRGE3敲除突变体；并经过试验证明，OsRGE3基因功能缺失突变体Cas9‑N1和Cas9‑N2的根长较野生型Nipponbare显著变长(P＜0.01)，表明降低OsRGE3基因的表达可显著促进水稻萌发期幼根的伸长，进而提高植物的耐旱性。此外，水稻根长增长有助于植株增强养分吸收，进而影响水稻产量和品质。本发明中的OsRGE3基因为水稻分子育种提供了新的优异基因资源，具有良好的应用前景。

本发明公开一种利用毒三素链霉菌发酵生产尼泊司他汀的培养基和培养方法，由于采用本发明的培养基和培养方法，降低了发酵生产成本，尼泊司他汀发酵单位高于13g/L，处于国内先进水平。

本发明提供了一种鼠李糖高度专一的糖基转移酶及其应用。本发明首次揭示一种专一性糖基转移酶，其可催化底物特定位置发生鼠李糖基化，以及提高催化活性。具体地，本发明的专一性糖基转移酶能特异和高效地催化四环三萜化合物底物的C‑6位在第一个糖基上发生糖基化，以延伸鼠李糖基团。本发明的专一性糖基转移酶具有良好的特异性和高效性，可应用于构建人工合成人参皂苷及多种新人参皂苷及其衍生物，在药学等领域具有良好的应用价值。

本发明涉及标志物在预测结直肠癌的复发和/或转移风险中的用途。本发明公开了试剂在制备用于在个体中预测结直肠癌的复发和/或转移风险的试剂盒或微阵列中的用途。本发明还公开了一种用于在个体中预测结直肠癌的复发和/或转移风险的试剂盒或微阵列。

本发明涉及标志物在预测结直肠癌的复发和/或转移风险中的用途。本发明公开了试剂在制备用于在个体中预测结直肠癌的复发和/或转移风险的试剂盒或微阵列中的用途。本发明还公开了一种用于在个体中预测结直肠癌的复发和/或转移风险的试剂盒或微阵列。

本发明涉及标志物在预测结直肠癌的复发和/或转移风险中的用途。本发明公开了试剂在制备用于在个体中预测结直肠癌的复发和/或转移风险的试剂盒或微阵列中的用途。本发明还公开了一种用于在个体中预测结直肠癌的复发和/或转移风险的试剂盒或微阵列。

本发明涉及宫颈癌检测技术领域，具体公开一种引物对及其应用和试剂盒、样本检测系统及检测方法。所述引物对包括引物对1、引物对2、引物对3和引物对4；所述引物对1包括上游引物1和下游引物1，编码核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～2所示；所述引物对2包括上游引物2和下游引物2，编码核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3～4所示；所述引物对3包括上游引物3和下游引物3，编码核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5～6所示；所述引物对4包括上游引物4和下游引物4，编码核苷酸序列分别如SEQ IDNO.7～8所示。本发明的引物对对人乳头瘤病毒具有高特异性和高敏感性，可提高人乳头瘤病毒检测的准确性。

本发明涉及了一种用于口腔癌类器官培养的培养基，包括MST1/2激酶抑制剂、选自N2和B27的至少一种细胞培养添加剂、成纤维细胞生长因子、CHIR99021、表皮细胞生长因子、胰岛素、ITS细胞培养添加剂、SB202190、Y27632、地塞米松、GlutaMAX、和非必需氨基酸。本发明还涉及口腔癌类器官的培养方法及其用途。通过使用本发明的口腔癌类器官培养基，能够实现口腔癌类器官的有效快速扩增，这样扩增得到的类器官保持了患者的病理特性，提高了口腔癌类器官的培养成功率和扩增速率，可以为患者的个性化治疗提供研究基础。

本发明公开了一种蔗糖合成酶及其应用。其中，所述蔗糖合成酶的氨基酸序列与SEQID NO:11相比包含选自以下一个或多个的残基位置处的氨基酸残基差异：第36位氨基酸为V；第43位氨基酸为E；第179位氨基酸为A；第395位氨基酸为R；第447位氨基酸为P：第455位氨基酸为L；第654位氨基酸为R；并具有不低于如SEQ ID NO:11的氨基酸序列所示的蔗糖合成酶活性。本发明联合使用葡萄糖基转移酶与蔗糖合酶催化合成莱鲍迪苷A、莱鲍迪苷D或莱鲍迪苷M，实现级联反应；解决了糖基供体UDPG、ADPG价格昂贵的问题，也提供原料选择的多种可能性，为进一步实现大规模工业化生产提供更多工艺条件优化的选择，更利于实现大规模工业化。

本发明发现了一种在表皮角质细胞增殖促进作用、丝聚蛋白mRNA表达促进作用、SPT mRNA表达促进作用或外皮蛋白mRNA表达促进作用方面具有优异作用的物质，提供一种以所述物质为有效成分的表皮角质细胞增殖促进剂、丝聚蛋白mRNA表达促进剂、丝氨酸棕榈酰转移酶mRNA表达促进剂或外皮蛋白mRNA表达促进剂。本发明在表皮角质细胞增殖促进剂、丝聚蛋白mRNA表达促进剂、丝氨酸棕榈酰转移酶mRNA表达促进剂及外皮蛋白mRNA表达促进剂的制备中使用2‑酮戊二酸。

本发明提供一种链霉菌菌株GZUIRF‑Y1、制备纤维素酶发酵液的方法、及应用，其中，链霉菌菌株GZUIRF‑Y1分类命名为Streptomyces sp.保藏单位：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日：2020.11.18，保藏编号：CCTCC M 2020758GZUIRF‑Y1，所述链霉菌属于细菌界Bacteria，放线菌门Actinobacteria，放线菌纲Actinomycetia，链霉菌目Streptomycetales，链霉菌科Streptomycetaceae，链霉菌属Streptomyces。根据本发明提供的链霉菌菌株GZUIRF‑Y1，具有很强的纤维素降解活力，可以用于烟草处理、生活垃圾降解、堆肥发酵等。

本发明涉及SWEET糖转运蛋白磷酸化增强植物光合产物的转运和抗逆性，具体地，本发明提供一种磷酸化的SWEET蛋白或其促进剂的用途，用于增强植物光合产物的转运和抗逆性。本发明首次发现，同时促进植物中SWEET蛋白的237和248位点的磷酸化水平，可显著提高植物光合产物的转运和抗逆性。

本发明采用GelMA、PEGDA混合Exo作为材料，通过微流控芯片技术制作PEGDA/GelMA/Exo(简称PGExo)微球。本发明公开了MC3T3细胞过表达Rab27a基因，有效提高了细胞分泌具有成骨分化作用的外泌体水平。通过共聚焦和BCA蛋白浓度测定法测定微球释放外泌体浓度，确定微球搭载的最佳外泌体浓度以及有效缓释时间。通过ALP和茜素红染色证实微球促进BMSCs细胞成骨分化。本发明为具有促成骨分化作用的外泌体微球在骨修复中的应用。

本发明公开了一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)及其应用，该植物乳杆菌菌株已在2021年3月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC 21895。本发明的植物乳杆菌菌株相比模式菌株，与肠道表皮细胞有更好的亲和力，有效缓解胰岛素抵抗，能够起到降低血糖作用，服用本发明菌株发酵液具有优良的降血糖效果，具有非常广泛的应用前景。

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种用于头颈部鳞状细胞癌化疗敏感性和/或化疗预后评估的环状RNA标志物及试剂盒。本发明提供的标志物为环状RNA分子circTPST2(circ‑103188)，其表达含量与化疗药物的IC50具有正相关的关系。这表明，通过检测circTPST2相对表达量，能够对化疗敏感性和/或化疗预后进行评估。本发明进一步提供了用于检测circTPST2的试剂盒。本发明能够帮助临床医生合理选择头颈部鳞状细胞癌的治疗方案，提高患者生存率，具有很高的应用价值。

本发明公开了一种糖基转移酶、基因、载体、宿主细胞和糖基化方法。该糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，或者该序列经替换、缺失或添加1～20个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。本发明的糖基转移酶具有催化位点特异性和催化底物和糖基供体的杂泛性。

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及弱化鸟苷酸激酶在提高菌株生产核苷或其衍生物的能力中的应用。本发明发现弱化菌株中鸟苷酸激酶的表达后，可以有效提高菌种合成核苷的效率，并据此构建了用于生产核苷的重组微生物，在鸟苷酸激酶的表达受到抑制后，重组微生物生产核苷的水平显著上升。另本发明提供了ylzA蛋白的多个突变位点，这些突变会使得菌株的核苷合成水平显著升高，这在提高微生物的核苷合成效率的领域具有重要意义。

本发明提出了一种重组微生物，该重组微生物pflB、ahdE、PPS基因被沉默。pflB、ahdE、PPS基因被沉默后，重组微生物生成甲酸、乙醇、甘油途径被抑制，重组微生物(R)‑乙偶姻合成显著增加。

本发明公开了一种碱蓬冰酒，涉及碱蓬冰酒加工技术领域；为了提升加工效果；该设备包括罐体和罐盖，所述罐盖内壁设置有密封环，罐盖通过密封环可拆卸的密封于罐体顶部，所述罐体一侧外壁通过螺纹连接有密封盖，密封盖内壁转动连接有转动杆，且密封盖与转动杆之间设置有密封圈；该碱蓬冰酒按重量份计，其成分包括：主料35～45份、辅料30～45份、甜味剂0.5～1份、发酵料0.1～0.5份。本发明通过设置转筒、不锈钢冰块等结构，能够根据实际需求和液面高度，以转动转筒的方式，调节连接绳卷绕于转筒上的长度，从而调整不锈钢冰块的高度，达到冰镇的效果，该结构能够灵活控制冰镇时间，且能适配不同高度的液面。

本发明公开了一种碱蓬冰酒及其加工设备，涉及碱蓬冰酒加工技术领域；为了提升加工效果；该设备包括罐体和罐盖，所述罐盖内壁设置有密封环，罐盖通过密封环可拆卸的密封于罐体顶部，所述罐体一侧外壁通过螺纹连接有密封盖，密封盖内壁转动连接有转动杆，且密封盖与转动杆之间设置有密封圈；该碱蓬冰酒按重量份计，其成分包括：主料120～150份、辅料30～45份、甜味剂1～5份、发酵料0.5～1.2份。本发明通过设置转筒、不锈钢冰块等结构，能够根据实际需求和液面高度，以转动转筒的方式，调节连接绳卷绕于转筒上的长度，从而调整不锈钢冰块的高度，达到冰镇的效果，该结构能够灵活控制冰镇时间，且能适配不同高度的液面。

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种重组微生物及其制备方法和在苏氨酸生产中的应用。所述重组微生物中tpx基因和/或yodD基因的表达被抑制。本发明研究发现抑制菌株中tpx基因或yodD基因可以有效提高菌株生产氨基酸等能力，同时敲除了tpx基因和yodD基因的大肠杆菌，其产苏氨酸的能力可达到27.35g/L，糖酸转化率可达到27.94％，这在苏氨酸生产领域具有重要意义。

本发明涉及生物发酵技术领域，公开了一种连续发酵生产长链二元酸的方法以及长链二元酸的生产方法，该方法包括：在发酵80‑150h后，向发酵液中连续流加底物以及含营养盐的溶液，所述底物的流加速度、所述含营养盐的溶液的流加速度与所述发酵液的体积满足以下关系：0.005h‑1*V(发酵液)≤Q(含营养盐的溶液)≤0.3h‑1*V(发酵液)；0.001h‑1*V(发酵液)≤Q(底物)≤0.006h‑1*V(发酵液)。本发明通过使底物的流加速度、含营养盐的溶液的流加速度与发酵液的体积满足特定的计量关系，能够在较高稀释率的条件下保持菌体的代谢活性，从而保证长链二元酸的持续生产，显著提高长链二元酸的产率和得率。

本发明公开了一种碱蓬冰酒的加工设备，涉及碱蓬冰酒加工技术领域；为了提升加工效果；该设备包括罐体和罐盖，所述罐盖内壁设置有密封环，罐盖通过密封环可拆卸的密封于罐体顶部，所述罐体一侧外壁通过螺纹连接有密封盖，密封盖内壁转动连接有转动杆，且密封盖与转动杆之间设置有密封圈；该碱蓬冰酒按重量份计，其成分包括：主料120～150份、辅料30～45份、甜味剂1～5份、发酵料0.5～1.2份。本发明通过设置转筒、不锈钢冰块等结构，能够根据实际需求和液面高度，以转动转筒的方式，调节连接绳卷绕于转筒上的长度，从而调整不锈钢冰块的高度，达到冰镇的效果，该结构能够灵活控制冰镇时间，且能适配不同高度的液面。

本发明公开了发酵生产β‑呋喃果糖苷酶的方法及其制备的β‑呋喃果糖苷酶。本发明的发酵生产β‑呋喃果糖苷酶的方法包括在微生物培养基中培养甲醇芽孢杆菌(Bacillus methanolicus)，收集培养物，得到β‑呋喃果糖苷酶。本发明方法的β‑呋喃果糖苷酶的产量可为423.73U/L，较基础培养基提高了29.6％。本发明方法得到的β‑呋喃果糖苷酶的分子量为45kDa。本发明还公开了该β‑呋喃果糖苷酶在低聚乳果糖合成中的应用。

本发明属于重组微生物技术领域，具体涉及一株重组菌株及其生产氨基酸的方法。本发明提供了一种waaA突变，所述waaA突变为waaA编码的蛋白的催化区域发生氨基酸的改变，具体为waaA编码的蛋白序列的第48位的脯氨酸突变为含羟基的氨基酸，或所述waaA突变为waaA的核苷酸序列的第142位核苷酸由胞嘧啶替换为胸腺嘧啶或腺嘌呤。本发明提供的包含所述waaA突变的重组菌株具有高产苏氨酸或异亮氨酸的能力。

本公开属于生物技术和基因编辑技术领域，具体涉及一种gRNA突变体的构建方法、gRNA突变体、缩小碱基编辑器的编辑窗口的方法、碱基编辑器、分离的多核苷酸、重组表达载体、重组宿主细胞、碱基编辑器、组合物及用途，以及在细胞或受试者中进行基因编辑的方法、治疗或预防疾病的方法。gRNA突变体应用于碱基编辑器中，能够通用性地缩小碱基编辑窗口，提高了基因编辑的特异性，实现对1个碱基的特异性编辑，在基因治疗、药物筛选、动植物模型构建等方面具有广阔的应用前景。