生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本公开提供了用于多核苷酸加工和分析物表征的组合物、方法、系统和装置。这种多核苷酸加工可用于包括通过多核苷酸测序的分析物表征在内的多种应用。本文公开的组合物、方法、系统和装置通常描述带条形码寡核苷酸，所述带条形码寡核苷酸可结合至珠粒如凝胶珠粒，可用于表征一种或多种包括例如蛋白质(例如，细胞表面或细胞内蛋白质)、基因组DNA和RNA(例如，mRNA或CRISPR引导RNA)在内的分析物。本文还描述了可用于标记分析物以进行表征的带条形码标记剂和寡核苷酸分子。

本发明提供了一种基因工程高产丰加霉素的淀粉酶产色链霉菌及其构建方法和应用。本发明通过基因工程方法构建重组质粒pIB139‑RelA，并转入淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes 1628)中构建得到，所述丰加霉素高产粉酶产色链霉菌过量表达天蓝色链霉菌ppGpp合成酶RelA基因，RelA基因过量表达产物可以正向调控丰加霉素生物合成，用于丰加霉素生产。本发明所获得的菌株发酵生产丰加霉素产量至少提高到1568mg/L，是原始菌株产量的10倍，为工业生产提高丰加霉素产量提供新的技术支持。

本发明公开了一种酱油酿造多菌种制曲的工艺方法，涉及酱油生产领域，针对背景技术提出的分泌酶系单一，生产游离氨基酸的能力较弱，使得产品风味不足的问题，现提出以下方案，包括以下步骤：原料处理：原料破碎至9mm网筛筛选，将豆粕和小麦按比例混合，进行干蒸、润水、蒸煮，将制得的种曲分成3份，得到种曲1、种曲2和种曲3，接种：向种曲1、种曲2和种曲3内分别加入米曲霉、黑曲霉和7801曲霉。本发明米曲霉、黑曲霉和7801曲霉分别进行制曲，按比例混合入池发酵制曲，使米曲霉分解蛋白能力、黑曲霉糖化力及7801曲霉分泌羟基多肽丰富鲜味独特的特点充分显示，对氨基酸态氮生产率，蛋白质的利用率有较大提高，酱油品质风味得到更大提升。

本申请涉及温度控制技术领域，公开一种用于培养箱温度调控的方法，包括：在培养箱门体被开启后重新关闭的情况下，获取培养箱的设定温度；根据设定温度所对应的加热功率或设定温度所在的温度区间，确定目标加热功率；控制加热丝在目标加热功率下运行，将培养箱的内部温度调节至设定温度。以此在培养箱开关门场景下，控制培养箱的加热丝在已确定的目标加热功率下运行，替代现有一套或多套PID控制算法对加热丝的控制，以通过强制干预的方式，调控培养箱的内部温度快速恢复至培养箱设定温度，降低开关门操作对培养箱培养效果的不良影响。本申请还公开一种用于培养箱温度调控的装置及培养箱。

本发明提供了一种产D‑阿洛酮糖的重组菌单细胞工厂及其构建与应用。本发明利用基因在大肠杆菌体内过表达，构建D‑果糖至D‑阿洛酮糖的代谢通路；再对大肠杆菌自身的、、三个基因进行敲除，有效缓解细胞对果糖的磷酸化作用，避免代谢底物的大量浪费；再过表达、、和四个基因，建立果糖向包内快速转运的新途径，保证代谢底物的供给；然后敲除和两个基因，利用Ni下调FbaA蛋白的功能性，加强对重组菌果糖代谢通量的控制，保证底物向D‑阿洛酮糖的最大转化效率。本发明所得的重组菌单细胞工厂可为D‑阿洛酮糖的工业化生产提供实际有效策略。

本发明属于食品生产加工技术领域，具体的说是一种酿酒设备及酿酒方法，包括酒甑、甑盖，甑盖设置在酒甑的顶部，酒甑包括加热机构与冷凝机构；加热机构位于酒甑的内部与壁体内，加热机构用于酒糟的加热蒸发；冷凝机构位于酒甑的壁体内，冷凝机构用于降温辅助处理；加热机构包括加热管，酒甑的壁体内开设有环绕腔，环绕腔的内部固定安装有均匀分布的加热管，酒甑的内部固定安装有加热管；冷凝机构包括冷凝管，冷凝管呈S形状且环绕于环绕腔内部的加热管的间隙间；本发明结构简单可实现酿酒设备在蒸馏时的均匀加热，提高酿酒的品质，同时可有效调节蒸馏时酒甑内的温度。

本发明公开了一种辣椒杂交种纯度鉴定的SSR核心引物组及其筛选方法，属于分子标记技术领域，该引物组选自如下所述中的一种或两种：a.核心引物组中的一种或几种：Hpms1‑214、Es395和Hpms1‑5；b.备选核心引物组中的一种或几种：Es330、Es363、Epms923、Es120和Es64。本发明通过对100个国内辣椒杂交种的DNA指纹分析，确定适于纯度鉴定的核心引物的评估指标，进而确定一套辣椒杂交种纯度鉴定核心引物，确定特定品种的纯度鉴定的特异引物，为构建辣椒杂交种纯度鉴定标准DNA指纹图谱奠定了基础。

本发明涉及细胞免疫治疗领域，特别涉及一种NK细胞体外增殖的方法以及适用于该方法的培养基，本发明的方案向细胞培养基中添加第一有效成分以及第二有效成分，所述第一有效成分具有促进NK细胞增殖的活性，所述第二有效成分为丝蛋白水凝胶。

本发明公开了一株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)Pm A‑HG，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 2021805。本发明还公开了该菌株在制备牛多杀性巴氏杆菌疫苗中的应用，属于疫苗微生物领域。本发明从多杀性巴氏杆菌A型临床分离株中筛选出一株毒力很强的制苗菌株，接着将其分别与多种佐剂配合，筛选出一种能大幅提高血清抗体水平和免疫保护力的佐剂，最后制成灭活疫苗，通过免疫小鼠探明了该疫苗在A型和F型之间存在交叉保护，从而为多杀性巴氏杆菌所致疾病的临床防控提供了更好的依据。

本发明公开了一种酶发酵设备，包括发酵箱，所述发酵箱内部中间设有隔板和位于隔板下方的抽屉盒，所述箱门表面下部安装有电子温湿度计，所述隔板上表面中部设有电机，所述电机的输出端表面设有主动齿轮和位于主动齿轮上方的轴承，所述主动齿轮与从动齿轮啮合，所述轴承外圈表面设有搅拌仓，所述搅拌仓下表面设有环形齿条，所述环形齿条与从动齿轮上表面的环形齿牙啮合，本发明通过保温层和加热板能有效保证发酵箱内的温度平稳，加湿器维持发酵箱内水分含量，与加热板配合维持发酵箱内温湿度恒定，缩短发酵时间，电机驱动搅拌棍和搅拌仓以不同方向转动，使得搅拌仓内的物料充分接触。

本发明提供了一种Indel/SNP分子标记在鲜食大豆香味性状检测中的应用，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，第40bp处发生11个碱基的缺失，以及36bp处AGA突变为GAG，52bp处GT突变为TC，56bp处CCG突变为AAT，62bp处TC突变为CT。本发明还提供了用于检测该Indel/SNP位点的引物序列及基于高分辨率溶解曲线(HRM)的鉴定方法，根据目标DNA序列片段溶解曲线峰的不同，可区分位点的基因型，进而判断样本香味相关功能基因GmBADH2的纯合与杂合。利用本发明所提供的Indel/SNP标记和检测方法，在鲜食大豆幼苗阶段就可以判断个体基因型，做到香味性状的早选择早淘汰，这对于提高鲜食大豆香味品质的选种效率、节约育种成本，具有重要的实用价值。

本发明公开了一种高效表达具有高活性及稳定性的重组TEV酶及其制备、测定方法和应用，包括编码TEV蛋白酶的氨基酸序列或其突变序列，所述编码TEV蛋白酶的氨基酸序列或其突变序列的N端融合有CL7标签，所述编码TEV蛋白酶的氨基酸序列或其突变序列的C端融合有多聚精氨酸标签。与现有重组TEV蛋白酶相比，本发明所提供的重组TEV蛋白酶不仅能够克服野生型TEV蛋白酶在表达过程中对自身特异位点进行剪切而导致的蛋白稳定性及活性降低的缺陷，还具备更高的蛋白产量，更好的蛋白稳定性以及更高的活性，更加适合大规模生产及工业使用。

本发明涉及白酒萃取技术领域，具体的说是一种高纯度白酒萃取系统，包括搅拌机构、破碎机构、萃取机构和降温机构，所述搅拌机构内固定连接有破碎机构，所述破碎机构中的载料板固定连接在所述搅拌机构中的破碎室内，所述搅拌机构下方固定连接有萃取机构，所述萃取机构内固定连接有降温机构，所述降温机构中的导液管延伸至所述搅拌机构上方；搅拌机构可以将药材在破碎室内反复翻转，使一些较大的药材接触到刀头，破碎机构可以将较大的药材破碎，增大药材和白酒的接触面积，使药材和白酒之间的萃取效果更好，萃取机构是白酒和药材之间萃取的反应池，萃取机构可以过滤药材的残渣，降温机构可以抽取酒液给破碎机构中的的刀头降温。

本发明公开了一种海雀稗根系富集镉含量性状的SNP分子标记及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其中SNP位点为：在SEQ ID NO.1所示序列的第401bp处存在G/A突变。本发明通过对86份海雀稗种质进行重测序，结合镉胁迫处理后海雀稗根系富集镉含量的表型数据进行全基因组关联分析，定位筛选出与其根系富集镉含量多少性状相关的分子标记，研究发现其中位于第02号染色体的第30702908bp位置处的SNP分子标记Pv.chr02:p30702908对海雀稗根系富集镉含量性状的贡献率高，可用作图位克隆和分子标记辅助选择，快速预测或鉴定其根系可富集镉含量的高低，有效筛选得到可高效富集镉的海雀稗品种，不仅加速了海雀稗育种进程，并且对土壤镉污染防治具有重要意义，适于大规模推广应用。

本发明提供路易波士茶酒及其制备方法和用途，涉及天然植物在食品领域中的应用。路易波士茶酒的制备方法的原料包括路易波士茶和糖类，所述路易波士茶为豆科灌木植物的叶子和/或细茎；所述制备方法为：将路易波士茶和糖类进行酵母菌发酵。本发明路易波士茶酒的制备方法工艺简单，本发明的路易波士茶酒的酒液显橙红且清澈透明，口感兼有茶香和果香，缠绵不失清爽，且路易波士茶酒富含多种天然活性成分，并且活性化学成分富集度更高，具有更好的抗氧化、抗菌、抗病毒活性，具有明显的健康功能，可以用于制备抗氧化、抗氧化相关的抗衰老保健品。

本发明公开了一种实时监测细胞生长状态的细胞培养装置，包括底座、微培养箱箱体、光源机构、紫外灯、环境监测模块、加热模块、制冷模块、小孔连通器、图像传感器、数据采集器、数据处理模块和微培养箱控制器，底座上设置有蒸发池、微流控芯片，本发明结合无透镜成像技术与微流控技术，在细胞培养过程中实现实时监测。本发明还公开了一种细胞的培养监测方法，具体包括将微流控芯片放置在底座，对微培养箱箱体内部、微流控芯片进行UV光照灭菌，设置微培养箱箱体内部环境参数并运行，维持微培养箱箱体内部环境稳定至设定值，定时采集细胞图像并分析处理，实现细胞的实时培养监测。

本发明公开了一种改良的星形胶质细胞培养方法，涉及细胞培养技术领域，解决由于星形胶质细胞生长缓慢，提取原代消耗大量样本，耗费人力物力，成本高的问题，包括如下步骤：将细胞培养板用L‑多聚赖氨酸包被过夜，细胞培养板在包被之前每个孔内均放入爬片；将星形胶质细胞悬液种植于细胞培养板中，后置于培养箱培养；培养3‑6天后将爬片取出放入新的细胞培养板中，然后加入胶质细胞培养基，将取出爬片的细胞培养板和放入爬片的新的细胞培养板同时置于培养箱继续培养。本发明获得的细胞数量是之前的一倍，大大缩短了培养细胞所需要的时间，降低了神经细胞培养所需的费用，降低了成本。

本发明公开了一种利用核卫星结构多联检测miRNA的方法，包括如下步骤：(1)取出磁珠，用12.5mM Mg加入Biotin DNA并在旋转仪上旋转后，取下用12.5mM Mg洗涤，并定容；(2)已修饰DNA的金球与三种烷基硫醇，按照浓度比1：3000的比例混合并在摇床上以20℃反应，然后通过在离心机中离心1小时后吸取上清液来去除过量未连接的烷基硫醇分子；(3)加入已修饰烷基硫醇分子mass tag的金球于磁珠中并反应一段时间后，进行MALDI检测；(4)链置换反应。本发明通过MALDI质谱测试，可以检测出样品中含有的miRNA的种类，并且可以同时独立的检测3种miRNA的种类与含量多少。

本发明属于发酵法生产核黄素技术领域，特别是一种纯天然核黄素的制备方法，采用的阿氏假囊酵母菌且未经过任何基因重组、诱变、构建或改造，所得核黄素成品完全满足国家非转基因产品法律法规要求，并且所得核黄素产品能满足EP10.0、中国药典CP2020的标准规定，且核黄素产品呈球状晶型具有良好的加工性能。

本发明公开了一种地热蒸汽发酵室，具体包括：发酵室，该发酵室顶部设置有导热装置，所述导热装置设置有多组并均匀分布在发酵室顶部；分流导管，该分流导管一端与导热装置连通，所述分流导管远离导热装置的一端于地热蒸汽处理装置连通；所述导热装置包括驱动壳，所述驱动壳内壁底部通过轴承转动连接有转动喷气装置，所述转动喷气装置顶部设置有驱动装置，所述驱动装置远离转动喷气装置的一端延伸至驱动壳内部，所述驱动壳侧面开设有进风口，所述进风口外侧与分流导管连通，本发明涉及地热能利用技术领域。该一种地热蒸汽发酵室，可直接利用地热蒸汽的热能，无需转化，能源利用效率较高，发酵室空间内部受热均匀。

本发明属于动物疫病检测技术领域，具体涉及一种可快速、灵敏地检测猪塞内卡病毒A(Senecavirus A，SVA)的rRT‑RAA引物对和探针、试剂盒。本发明所述检测猪塞内卡病毒A的rRT‑RAA引物对和探针，针对于猪塞内卡病毒A的rRT‑RAA检测，筛选出适宜于快速鉴定猪塞内卡病毒AVP2基因的正向引物SVA‑VP2‑F、反向引物SVA‑VP2‑R和探针SVA‑VP2‑P，可实现对SVA进行快速、特异、灵敏、简便地检测，从而弥补现有检测技术的不足，具有广阔的应用前景。

本发明公开了分泌欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(European type Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,EU‑type PRRSV)特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系及其应用，还公开了由该杂交瘤细胞系分泌的抗欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的特异性单克隆抗体及竞争ELISA方法的建立。该杂交瘤细胞系命名为EU1，其微生物保藏号是：CGMCC NO.23019。本发明的杂交瘤细胞系能够稳定分泌特异性识别EU‑type PRRSV的单克隆抗体，可用于特异性针对EU‑type PRRSV的竞争ELISA方法的建立。本发明的EU1杂交瘤细胞系及其分泌的单克隆抗体可以用于制备竞争法抗体诊断试剂盒，基于EU1建立的抗体鉴别诊断试剂盒可以区分EU‑type PRRSV和其它类型PRRSV的感染。

本发明提供了一种超级增强子基因序列在促进人B2M基因表达中的用途，通过ChIP‑Seq技术，比较了IFN‑γ刺激前后增强子标志物H3K27ac修饰区域信号变化情况，首次在人B2M基因上发现一段增强子序列，该增强子在IFN‑γ刺激后具有超级增强子的特点，并且显著地提高了人B2M基因的表达。通过敲低或沉默所述增强子序列，则可显著降低人B2M基因和膜HLA‑I类蛋白的表达，为构建低免疫原性的人源细胞提供新的靶点。

本发明涉及微生物检测技术领域，公开了用于检测引起李细菌性穿孔病的成团泛菌的引物组及应用，包括内引物、环引物和外引物，所述外引物包括外引物F3和外引物B3，所述内引物包括内引物FIP和内引物BIP，所述环引物包括环引物LF和环引物LB；还公开了应用。本发明可应用于LAMP可视化快速检测，特异性强，灵敏度高，灵敏度验证LAMP体系最低检测限成团泛菌DNA浓度为5fg/μL，比常规PCR高1000倍，同时可于发病早期检测出成团泛菌，未来可在生产上为成团泛菌早期快速诊断提供技术支撑。

本发明公开一种提高小鼠体外受精效率的操作液及其使用方法，属于小鼠体外受精技术领域；操作液配方包括HTF混合液和胎牛血清；HTF混合液的配方包括NaCl 0.6mg/ml、KCl 0.35mg/ml、KHPO0.05mg/ml、MgSO.7HO 0.05mg/ml、葡萄糖0.5mg/ml、NaHCO2.1mg/ml、CaCl.2HO 0.6mg/ml、丙酮酸钠0.037mg/ml、60％乳酸钠水乳液3.42μl/ml、牛血清蛋白5‑8mg/ml。本发明还提供了利用上述操作液进行小鼠体外受精操作的具体使用方法，采用该操作液和方法，能够显著提升小鼠体外受精的受精效率和2‑细胞胚率。

本发明属微生物技术领域，提供一株产乙偶姻的贝莱斯芽孢杆菌（）SAU‑1及其在四川麸醋发酵中的应用。从四川麸醋醋曲中筛选出1株产乙偶姻、产香能力较强的贝莱斯芽孢杆菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地点为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏号为CGMCC No.21137，保藏日期为2020年11月09日。接种贝莱斯芽孢杆菌（）SAU‑1的醋醅中有35种挥发性组分，乙偶姻和游离氨基酸含量分别为20.1 g/L、1390 mg/100mL，结果表明该菌株不仅提高了醋醅中挥发性组分物质和游离氨基酸总量，而且丰富了醋醅中挥发性香气谱图。

本发明公开了一种鼠伤寒沙门氏菌噬菌体T102及其在富集分离沙门氏菌中的应用，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2021170。所述偶联物PhageT102‑MBs为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体T102与羧基磁珠偶联得到的复合物。本发明以噬菌体T102作为特异性识别沙门氏菌的元件，与羧基化磁珠偶联形成具有特异性捕获沙门氏菌与磁响应的双功能性分离探针，能够作为病原菌检测中前处理富集分离的有效手段，并且进一步扩展噬菌体在食品安全检测中的应用范围。

本发明提出一种固定化溶藻细菌技术及其在处理含铜绿微囊藻污染水中的应用，所得到的微生物菌剂能够显著抑制铜绿微囊藻的生长并显著高于自由细菌，同时对铜绿微囊藻的抗氧化系统产生重大影响，实现微生物控藻的实际运用。原理是利用包埋技术对溶藻细菌进行固定化，采用的手段是海藻酸钠包埋溶藻细菌，并利用乙基纤维素来强化胶囊的悬浮性能。综合来看，作为本发明所述的一种固定化溶藻细菌技术的一种优选方案，其中：所述海藻酸钠溶液浓度为2％(w:v)；所述固化剂的浓度为3％(w:v)；所述乙基纤维素溶液浓度为3％(w:v)。

本发明公开了一种复方蛹虫草抗癌降脂降压醋的生产方法，属于调味品生产技术领域，涉及食品醋。步骤为：1）称取蒲公英、山楂、大枣、核桃仁、益母草、大蓟、车前草、夏枯草、蒲黄、大青叶、黄芪、泽泻、甘草、银杏叶，晒干，粉碎为段片，以总重量3.5‑5倍量的水煎煮两次，收集滤液；2）蛹虫草子实体低温干燥至含水量≦12%，粉碎后用稀乙醇浸泡于密闭容器中，15‑23℃浸泡12‑24小时，超声波提取0.5小时，收集提取液；3）将提取液和滤液混合，减压浓缩至与原材料等量，得到原料液；4）将原料液与陈醋混合，搅拌均匀，发酵12个月以上，即得。本发明产品成本低，制备方法简单。

本发明涉及一种香菇菌种培养基及其制备方法，一种香菇菌种培养基，包括以下重量份的原料：马铃薯200克，琼脂20克，葡萄糖20克，蛋白陈4克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二钾0.5克，硫酸镁0.5克，桃树锯末30克。本发明具有如下优点：在香菇菌种培养基中加入了桃树锯末和蛋白陈，提高了香菇菌种的产量，添加适量的硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾，提高了香菇菌种的微量元素含量，对香菇菌种培养基采用高温持续0.5‑1小时灭菌，有效地杀灭率杂菌和病毒，保证了香菇菌种健康。

本发明涉及一组稳定高效表达活性融合蛋白的Gateway真核表达系统，其中包括了12xHis‑GFP‑GW(A载体)和12xHis‑GW‑GFP(B载体)两个通用目的载体(Destination vector)，使用者可根据需要选择它们跟入门载体(ENTR vector)进行LR反应，即可得到最终表达目的载体。这两个通用载体的制作分别以pK7WGF2或pK7FWG2载体为起始骨架，利用限制性内切酶SpeI和重组酶MultiS，将12xHis的编码序列分别进行了融合插入。本发明作为对前面申请专利(专利申请号202110472170.X)的必要补充，提供了一种方便快捷的分子克隆系统，用于少数不能在原核系统中表达的真核蛋白的高效准确表达，使蛋白表达纯化系统更全面和完善，功能更强大，可有力促进活性蛋白的纯化工作，为蛋白的功能学研究建立基础。

本发明公开了一种具有冷凝机构的白酒加工用蒸馏装置，包括外壳、壳体和箱体，外壳的底端安装有安装座，伺服电机安装在壳体内部的底端。本发明通过在壳体内部的底端安装有伺服电机，伺服电机工作就可以带动其顶端的第四齿轮旋转，第四齿轮旋转就可以带动其两侧和其啮合的第三齿轮旋转，第三齿轮旋转就可以通过连接杆带动第二齿轮旋转，第二齿轮旋转就可以带动其顶端和其相互啮合的第一齿轮旋转，第一齿轮旋转就可以带动其顶端的螺纹杆进行旋转，螺纹杆进行旋转就可以带动刮板进行升降，刮板升降就可以对箱体的内壁进行清洁，防止有液体吸附在箱体的内壁，以此来达成白酒加工用蒸馏装置便于对箱体的内壁进行清洁的目的。

本发明公开一种转ZmNF‑YA13和bar基因的养分高效利用且耐除草剂的转基因玉米的培育方法和应用，属于生物技术领域。通过农杆菌介导法将ZmNF‑YA13基因和耐除草剂草铵膦基因bar构建到表达载体pTF101上，转入到玉米基因组中，筛选得到养分高效利用且耐除草剂的转基因玉米。本发明可实现将外源基因特异性引入到玉米品系中，赋予受体玉米氮和钾营养高效利用以及耐除草剂草铵膦的能力，外源基因在受体玉米中能够稳定遗传，本发明为高效育种提供了一种新方法。

本发明涉及一种基于RT‑RPA方法的微量核酸释放剂，其包括TritonX‑100、Tween‑20、异硫氰酸胍、乙醇、异戊醇和水。本发明提供的微量核酸释放剂，所需的原料价钱便宜，易于获得，且对身体无害。该微量核酸释放剂可快速破坏病原体外壳蛋白结构，释放核酸，可大大缩短核酸提取纯化的时间，无需复杂的操作步骤，操作简便。本发明的微量核酸释放剂所需样本量少，可对微量珍贵样本进行检测。本发明的微量核酸释放剂可以直接对血清、全血、血浆、咽拭子、粪便等样本核酸进行提取，无需加热，离心等复杂步骤，只需要一步加样过程，30分钟内即可完成核酸的提取和释放过程。

本发明提供了一种小麦噻磋合成酶THI1基因及其在植物抗中国小麦花叶病毒中的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明提供的小麦噻磋合成酶THI1基因，核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。本发明通过将小麦噻磋合成酶THI1基因转入小麦植株中使小麦噻磋合成酶THI1基因在植株中过表达，从而提高转基因小麦植株对中国小麦花叶病毒的抗性。因此，本发明提供了小麦噻磋合成酶THI1基因及其重组载体和编码蛋白在植物抗中国小麦花叶病毒中的应用。

本发明属于医药领域，具体涉及一种基于诱导细胞炎性死亡的抗肿瘤药物筛选方法，以现有的临床药物和天然产物库中的单一组分化合物刺激肿瘤细胞，筛选出诱导肿瘤细胞炎性死亡且死亡细胞胀大的单一组分化合物；该方法可以从现有的临床药物以及天然产物库中，大规模快速筛选潜在的可诱导肿瘤细胞焦亡的化合物，从而加速抗肿瘤药物的开发进程。

本发明公开了一种基于金属有机框架材料包埋碳酸酐酶的Pickering微囊的制备方法，通过仿生矿化的方式将CA酶进行原位包埋，调控Zn和有机配体的比例制备得到CA@ZIF‑L颗粒；引入具有丰富羧酸基团的PLGA和磷酸基团的DNA用作调节剂，利用静电引力对固体CA的表面进行修饰，得到PLGA‑CA@ZIF‑8颗粒和DNA‑CA@ZIF‑8颗粒；以Tris‑HCl缓冲液为水相，以十六烷为油相，将上述每种颗粒分别各自加入到水油相溶液中，反应静置后所得微囊即为W/O型Pickering微囊。由于CO分子在水相中的低溶解性阻碍了气相与液相之间的接触，因此构建Pickering界面酶催化有效的提高气液相的接触，提高CO的转化效率。

本发明公开了一种L‑苏氨酸醛缩酶突变体及其应用。所述L‑苏氨酸醛缩酶突变体由野生型L‑苏氨酸醛缩酶突变所得，能够以甘氨酸和对甲砜基苯甲醛为底物，以磷酸吡哆醛为辅酶，催化缩合反应生成L‑syn‑对甲砜基苯丝氨酸。使用本发明L‑苏氨酸醛缩酶突变体生产L‑syn‑对甲砜基苯丝氨酸具有以下优点：1、生产工艺简单，反应条件温和；2、L‑苏氨酸醛缩酶的选择性高，产品光学纯度高，无需拆分；3、原子利用率高，理论可达100％；4、生产过程环保，污染较小，符合绿色化学理念；5、产品分离纯化简单。

本发明属于生物医药领域，细胞治疗技术范畴，具体是体外高效扩增NK和转染NKG2D活化NK细胞的方法。包括具体方法为：NK细胞体外高效扩增技术优化及NK免疫生物学特性检测；应用RT‑PCR方法检测肿瘤细胞及肿瘤组织中NKG2D配体MICA，ULBP 1,2,3的mRNA表达；NKG2D克隆载体的构建；NKG2D真核表达载体的构建；真核表达载体在CHO细胞中的表达及鉴定；真核表达载体转染NK细胞及对NK细胞生物学功能影响。本发明提供一种利用基因工程技术构建pEGFP‑N1/NKG2D真核荧光表达载体，将构建好的pEGFP‑N1/NKG2D质粒转染NK细胞，应用MTT方法检测NKG2D转染前后NK细胞增殖情况和对肿瘤细胞系的杀伤效应，RT‑PCR方法检测相关杀伤分子IL‑2、TNF‑a、Perforin、TWEAK的mRNA表达水平，为肿瘤治疗提供新思路的体外高效扩增NK和转染NKG2D活化NK细胞的方法。

本发明公开了一种同时检测沙眼衣原体、淋病奈瑟氏球菌和解脲支原体的组合物和方法，使用筛选的三种病原体的引物，以及三种标记有不同染料和病原体特异性引物的PNA(肽核酸)荧光探针在同一反应管中同时进行多重实时PCR。本发明通过使用三种标记有不同染料和病原体特异性引物的PNA荧光探针，在单个PCR管中可同时实时检测出CT，UU和NG。PCR引物的Tm相似，没有明显的3'端重叠，可以增强多重扩增。在PCR反应过程中，通过PCR仪器的不同荧光通道检测并区分出不同的荧光信号，从而鉴定出不同的病原体。

本发明公开了一种筛选与目的化合物合成相关的基因的方法与应用。本发明通过将三代转录本作为参考转录本，然后将二代测序数据比对到转录本获得各转录本丰度；再使用RSEM软件对二代组装出来的转录本进行定量，进行基因间的差异表达分析，获得萜类物质合成过程中的关键基因。相较于单独的使用二代转录组测序技术和三代全长转录组测序技术，本发明既能充分利用三代转录组无需拼接即可得到全长转录本序列从而准确性高的优点，又能充分考虑二代转录组测序数据对基因定量表达检测的优点，大大提高了基因组注释的准确性，筛选得到目的化合物合成途径中的相关基因。通过该方法，本发明首次得到4条与阴香单萜类物质合成酶相关的基因。

本发明公开了一种日香桂快速脱分化相关ofbZIP基因及其应用，属于植物分子生物学领域。本发明提供的一种日香桂快速脱分化相关ofbZIP基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基于前期研究和生物信息学分析软件初步预测了该基因的功能。通过克隆得到基因序列的全长，在此基础上构建了超表达载体并进行大花烟草的遗传转化。结果发现，在筛选培养基上生长35d后，外植体可快速出芽，而且出芽率显著高于CK，表明ofbZIP在脱分化方面发挥了重要的调控作用。作为愈伤组织分化不定芽过程中重要转录因子ofbZIP基因，可以用于基因工程中一些难以脱分化的植物，具有实际应用价值。

本发明公开了一种日香桂快速脱分化相关ofWOX2基因及其应用，属于植物分子生物学领域。本发明提供的一种日香桂快速脱分化相关ofWOX2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基于前期研究和生物信息学分析软件初步预测了该基因的功能。通过克隆得到基因序列的全长，在此基础上构建了超表达载体并进行大花烟草的遗传转化。结果发现，在筛选培养基上生长35d后，外植体可快速出芽，而且出芽率显著高于CK，表明ofWOX2在脱分化方面发挥了重要的调控作用。作为愈伤组织分化不定芽过程中重要转录因子ofWOX2基因，可以用于基因工程中一些难以脱分化的植物，具有实际应用价值。

本申请提供了一种使用CHO细胞表达重组rhCG的补料培养发酵方法，包括在发酵混合培养基中加入氯化锰，或者在补料培养基中加入氢化可的松和焦磷酸钠。本申请还提供了所述方法用的相应培养基。

本发明涉及一种旋转式细胞复苏仪，包括机体、水浴锅及水浴执行装置，水浴执行装置包括升降机头及升降机头上的冻存管承载装置，冻存管承载装置包括带隔套的浸浴托盘、冻存管固定机构和旋转机构，旋转机构的空心转轴安装浸浴托盘，冻存管固定机构的盘形冻存管搁置架上盘座在空心转轴外可轴向滑动，空心转轴内有轴向滑动和周向联动的驱动头，驱动头上连接销穿过空心转轴上避让槽孔后连接盘座，驱动头连接驱动芯轴，盘形冻存管搁置架的冻存管定位盘沿U型开口可拆卸推插装配于盘座上，冻存管定位盘上冻存管搁置座孔与隔套一一对应且密封配合，盘座上有启闭冻存管搁置座孔上端口并弹性压紧冻存管的盘形盖板。具有细胞复苏效率高、污染少和操作方便的优点。

本发明属于葡苷寡糖制备领域，具体涉及一种葡苷寡糖及其制备方法和应用。制备方法包括下述步骤：水解：分别称量下述质量份组分：瓜尔豆胶1％，刺槐豆胶0.8％，魔芋粉1％放到不锈钢高速搅拌反应罐里，加入96.2％的水进行溶解；加入1％的葡甘低聚糖酶液，充分水解设置参数45℃，180r/min，4h；灭酶；脱色；过滤；浓缩；喷雾干燥；检验包装。通过对葡甘寡糖的工艺制备、生产线设计的系统性计算以及对SD实验鼠的营养干预结果可以看出，葡甘寡糖的降糖降脂效果很好，且其价格在众多的同类功效产品中属于中等偏下，比起相似效果的壳寡糖、果寡糖要便宜上百元；同时比起魔芋粉等原料的利用率和效果要好很多。

本发明提供了一种球毛壳菌及其应用，属于应用微生物学技术领域。本发明的球毛壳菌(Chaetomium cochliodes)HJF 13菌株，已于2021年4月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2021343。利用本发明菌株经液体发酵培养制备的抗枯草芽孢杆菌剂对枯草芽孢杆菌具有较好的抑制作用，可用于枯草芽孢杆菌的防治。本发明具有高效、低毒、原料成本低及生产工艺简单的优点，在日化产品、食品及工业产品等领域中具有潜在和实际的应用价值。

本发明公开了一种COL1A1与PDGFB融合基因检测方法，包括：合成COL1A1与PDGFB捕获探针；采用标准方法提取DNA和构建DNA测序文库；扩增DNA测序文库并进行质检；扩增的DNA文库探针杂交捕获；扩增捕获后的DNA测序文库并进行质检；高通量测序和生物信息分析。本发明前期根据COL1A1与PDGFB经常发生融合基因断裂的位置设计DNA探针，通过外显子捕获技术，捕获肿瘤组织样本中发生COL1A1与PDGFB融合的基因组DNA，再采用高通量测序技术对其中的融合基因DNA进行测序检测。

本发明公开了一种基于可控相分离液滴对细胞内源基因转录过程的高效控制方法，利用相分离技术原理设计模块化组合的转录因子，根据所靶基因序列的特征，通过CRISPR/dCas9技术使转录因子结合在靶基因启动子区域，借助模块化组合的转录因子中的IDR相分离过程形成凝聚体液滴，增强调节转录因子与转录复合物间的相互作用。通过筛选比较不同的IDR来优化凝聚体的状态，实现对活细胞内源基因转录的高效精准控制。本发明方法将在内源基因表达调控、诱导多能干细胞发育以及全基因组测序等方面有重要应用。

本发明公开了一株枯草芽孢杆菌SCUEC7菌株及其应用，所述枯草芽孢杆菌SCUEC7菌株已于2021年04月15日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M 2021377。本发明提供的SCUEC7菌株分离自牛胃液和农作物秸杆的混合发酵物中，其对灰霉病菌、腐霉病菌等多种植物病原菌具有抑制作用，可用于农作物病害防治，还对致病菌金黄色葡萄球菌具有抑制作用，可用于食品、饲料等生产中；同时，所述SCUEC7菌株还可促进产朊假丝酵母菌的生长，将其应用于饲料生产，可加速饲料发酵，并有效提高发酵饲料的单细胞蛋白的含量；并且本发明还首次发现了所述枯草芽孢杆菌SCUEC7菌株对小鼠乙酰胆碱预收缩气管环具有舒张作用，因此可制备成气管环舒张药物，用于哮喘等疾病的治疗。