生物化学、啤酒、烈性酒、果汁酒、醋、微生物学、酶学、突变或遗传工程

本发明中一种用于抑制人巨细胞病毒感染的小核酸及其制剂与应用。本发明提供一种用于抑制人巨细胞病毒感染的小核酸，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～3所示。本发明中主要通过小核酸作为治疗药物，针对于HCMV相关的基因，阻止其相关蛋白的进一步表达，同时，针对HCMV感染的细胞，为了提高小核酸被作用部位的吞噬效率，针对病毒感染的细胞表面特征，设计能与之结合的靶向分子，以提高其病变作用部位的治疗浓度，增强治疗效果，同时降低非靶组织的摄取率，进而减小潜在的毒性，为HCMV感染的体内治疗提供一种有效的解决方案。

本发明提供一种广藿香醇生产酵母菌株及其构建方法和应用。所述构建方法包括以酿酒酵母菌株为出发菌，在出发菌中多拷贝整合ERG20和PTs的融合酶FPTs，即可获得一种广藿香醇生产酵母菌株，该融合酶FPTs的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。特别是，当广藿香醇生产酵母菌株是一种同时多拷贝整合基因ERG20和PTs的融合酶FPTs，缺失基因ROX1，YJL064w和YPL062w，以及强化基因ERG11及CTT1的酿酒酵母时，其生产广藿香醇的能力得到大幅提高。本发明通过构建一种酿酒酵母基因工程菌，将其用于制备广藿香醇，提高广藿香醇的生产效率及生产产量，降低其生产成本，具有良好的工业应用价值。

一种高效的细胞毒性T淋巴细胞激活增殖制备方法，属于免疫治疗技术领域。包括:1）采集健康单个核细胞；2）调整细胞浓度,孵育,收集未贴壁细胞；3）调整细胞浓度,加入A磁珠和B磁珠与悬浮细胞混合；4）将混合悬液的上清液过滤，为CTL细胞激活液；5）取患者单个核细胞，用AIM‑V培养液调整浓度，孵育；6）孵育后，收集洗涤细胞，分离得到CTL细胞；7）将CTL细胞调整浓度,孵育；8）孵育结束后离心收集所有CTL细胞。上述一种高效的细胞毒性T淋巴细胞激活增殖制备方法，培养出的CTL细胞纯度可达99%以上，14天内的增殖倍率在1200倍以上。

本发明首次公开了6‑磷酸葡萄糖酸内酯酶CsPmR1在抗瓜类疫病中的应用。特别是CsPmR1对侵染瓜类的瓜类疫霉(Phytophthora melonis)具有抗病功能。过量表达CsPmR1基因能够使黄瓜、南瓜子叶对疫病的抗性较对照明显增强，而在黄瓜子叶中瞬时沉默CsPmR1基因则使黄瓜子叶对疫病的抗性较对照明显减弱。CsPmR1基因对黄瓜、南瓜等瓜类抗疫病起着非常重要的作用，具有广泛的应用前景。

本发明首次公开了黄瓜捕光叶绿素a/b结合蛋白CsPS1在抗瓜类疫病中的应用。特别是CsPS1对侵染瓜类的瓜类疫霉(Phytophthora melonis)具有抗病功能。过量表达CsPS1基因能够使黄瓜、南瓜子叶对疫病的抗性较对照明显增强，而在黄瓜子叶中瞬时沉默CsPS1基因则使黄瓜子叶对疫病的抗性较对照明显减弱。CsPS1基因对黄瓜、南瓜等瓜类抗疫病起着非常重要的作用，具有广泛的应用前景。

本发明涉及一种DNA适配体修饰的水溶性氮杂氟硼二吡咯荧光分子探针及其制备方法和应用，所述荧光分子探针包括结构式1、结构式2、结构式1对应的可用盐、结构式2对应的可用盐中的一种或多种的组合物，其中结构式1、结构式2如下：其中R为适配体，n＝22或44。与现有技术相比，本发明将水溶性的荧光探针修饰到适当的适配体上，荧光小分子探针修饰的适配体可作为诊疗一体化的分子探针，实现肿瘤的早期诊断和治疗。

本发明首次公开了黄瓜韧皮部凝集素CsPL1在抗瓜类疫病中的应用。特别是CsPS1对侵染瓜类的瓜类疫霉(Phytophthora melonis)具有抗病功能。过量表达CsPS1基因能够使黄瓜、南瓜子叶对疫病的抗性较对照明显增强，而在黄瓜子叶中瞬时沉默CsPS1基因则使黄瓜子叶对疫病的抗性较对照明显减弱。CsPL1基因对黄瓜、南瓜等瓜类抗疫病起着非常重要的作用，具有广泛的应用前景。

本发明涉及一种用于去除高盐废水中含氮污染物的复合菌剂的制备方法和应用，所述复合菌剂由深红红球菌C1、莱比托游动球菌、菌铜绿假单胞菌、粪产碱杆菌和不动杆菌复合而成。本发明所述复合菌剂具有耐高盐、耐高氮的特性，通过五种微生物协同作用，可在高盐条件下的好氧环境中实现高氮废水高效脱氮。

本发明涉及基因工程领域，公开了突变除草剂靶标蛋白中的至少一个氨基酸位点以提高豆科植物除草剂抗性的方法在制备具有除草剂抗性的豆科植物中的用途。该方法能够有效解决现有技术中对豆科植物难以采用CRISPR/Cas9介导的单碱基编辑技术进行抗除草剂育种的问题。通过该方法制备获得的豆科植物植株具有明显抗除草剂的特性，将其应用于豆科植物尤其是大豆的育种和种植中可以很好地解决杂草防治中除草剂对作物生长具有负面影响的问题，有效避免了除草剂使用不当对作物生产的不利影响。

本发明公开了一种VSX2绿色荧光报告基因载体系统及其构建方法。本发明的VSX2绿色荧光报告基因载体系统，其包含PX459‑VSX2_sgRNA敲除质粒和pBluescript‑LA‑P2A‑eGFP‑RA供体质粒；利用该载体系统转化构建的VSX2绿色荧光报告基因hiPSC系报告荧光表达亮丽，特异性强，能够长期稳定表达，并且在组织固定及冰冻切片进行末端检测时仍然能检测到强荧光信号。该VSX2绿色荧光报告基因载体系统、VSX2绿色荧光报告基因hiPSC系可为视网膜相关疾病建模、发展机制和防治研究提供有用的工具，用于视网膜细胞命运转归的追踪以及分化系统的优化、眼杯的分选纯化甚至药物筛选和细胞移植等下游研究。

本发明公开了一株VSX2绿色荧光报告基因人诱导多能干细胞系及其构建方法。本发明所构建的VSX2绿色荧光报告基因hiPSC系报告荧光表达亮丽，特异性强，能够长期稳定表达，并且在组织固定及冰冻切片进行末端检测时仍然能检测到强荧光信号。该VSX2绿色荧光报告基因hiPSC系及其构建方法，可为视网膜相关疾病建模、发展机制和防治研究提供有用的工具，用于视网膜细胞命运转归的追踪以及分化系统的优化、眼杯的分选纯化甚至药物筛选和细胞移植等下游研究。

本发明公开了一种L‑氨基酸连接酶突变体、重组载体、重组菌及其应用。所述L‑氨基酸连接酶突变体是将如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第110位进行突变获得；或者将如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第108位、第110位同时进行突变获得。所述的L‑氨基酸连接酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.4和SEQ ID NO.5所示。一种采用所述的L‑氨基酸连接酶突变体编码基因构建的重组载体，含有该重组载体的基因工程菌表达的L‑氨基酸连接酶突变体在催化合成Ala‑Gln过程中其酶活比野生型BacD提高1.87倍，为232.45±17.4U·(mg·h)；反应26h后，该突变体可以使释放的产物磷浓度达到694.47μM，相比于野生型BacD积累量571.95μM，提高了21.4％。通过计算，单位质量的双突变体NFLY的催化产物Ala‑Gln的产量可达2.59mM·L·mg。

本发明公开了一种微生物恒温培养装置，包括箱体和培养板，所述箱体内部设置有保温层，所述箱体内部底端设置有加热器，所述箱体内部底端中央位于加热器一侧设置有温度传感器，所述箱体内部中央设置有加热板，所述箱体内部两侧设置有滑轨，所述培养板与滑轨滑动连接，所述培养板通过滑轨活动安装在箱体内部，所述培养板中部为中空结构，所述培养板位于中空结构中部嵌入有网格板。本发明在箱体装置内部增设了加热器和加热板，并通过控制面板对加热器和加热板进行温度调节，使箱内温度保持一定的恒温，可针对不同微生物进行相应的温度调整以达到最适合的培养温度，本发明结构简单，设计合理，降低了研究成本。

本发明公开了一种用大米酿造出碱性威士忌酒的工艺，包括以下步骤：S1：大米的选择及清洗；S2：上甑蒸熟：将清洗后的大米进行蒸熟；S3：冷却并干拌酵母：将蒸熟的大米冷却后，再加入酵母并搅拌均匀；S4：糖化保温发酵；S5：酒基观察及测试；S6：一次蒸馏；S7：二次蒸馏；S8：过滤、杀菌并装桶。本发明，用大米进行酿造，利用甲醇的温度沸点65度与乙醇沸点78.3度的差别，去掉有害健康的甲醇，掐头去尾，萃取酒心，保留有益健康的脂类物质呈现出负离子碱性酒。

本申请涉及微藻分离技术领域，提供了一种微藻分离的方法，包括：提供培养有微藻的培养液，在微藻的表面复合铁纳米颗粒，获得微藻/铁纳米颗粒复合物；将微藻/铁纳米颗粒复合物进行磁性分离，去除上清液。本申请方法采用铁纳米颗粒作为磁性介质来分离微藻，不需要复杂的合成过程，与微藻的粘附性好，且无需调节培养液的pH值，克服了现有技术使用FeO磁珠作为磁性介质来分离微藻所存在的问题，操作简单，成本低廉、反应条件温和、分离效率高，且适用于多种微藻的磁性分离回收。

本发明属于分子检测技术领域，公开了一种离心式微流控芯片结合环介导等温扩增技术用于猪细小病毒检测的试剂盒，本发明通过设计并筛选特异性引物，通过结合微流控芯片技术，建立了一种快速、灵敏、准确性高、重复性强的PPV核酸检测方法；本发明提供的微流控芯片检测方法特异性高，不与猪其他病原交叉反应，且最低检测限可达到10copies/μL。该微流控芯片试剂盒，小巧便携，可以弥补针对PPV检测耗时、费力、高成本的缺陷，使得检测灵敏度和特异性提高，降低人工和器材成本，缩短检测周期，满足现场检测的需求；本方法提供的快检技术可推广应用于猪细小病毒的流行病学调查和疫情监控，具有良好的实践意义和广阔的市场前景。

本发明属于分子检测技术领域，公开了一种离心式微流控芯片结合环介导等温扩增技术用于猪伪狂犬病毒检测的试剂盒，本发明通过结合微流控芯片技术，建立了一种快速、灵敏、准确性高、重复性强的PRV核酸检测方法；本发明提供的微流控芯片检测方法特异性高，且最低检测限可达到10copies/μL。本发明提供的检测猪伪狂犬病毒的微流控芯片试剂盒，芯片分析装置小巧便携，可以弥补针对PRV检测耗时、费力、高成本的缺陷，使得检测灵敏度和特异性提高，降低人工和器材成本，缩短检测周期，满足现场检测的需求；本方法提供的快检技术可推广应用于猪伪狂犬病毒的流行病学调查和疫情监控，具有良好的实践意义和广阔的市场前景。

本发明涉及一种靶向外泌体PKM2改善非小细胞肺癌顺铂耐药性的应用。肿瘤乏氧区域常伴随着耐药性的发生，基于丙酮酸激酶M2型(PKM2)在顺铂耐药的非小细胞肺癌细胞中的表达高于敏感细胞，本发明通过在耐药细胞中干扰PKM2基因，增加顺铂耐药细胞内活性氧的水平并诱导细胞凋亡，实现对耐药细胞治疗的增敏作用，具有重要的临床应用价值。

本发明公开了一种基于无水乙醇或十二烷基磺酸钠刺激的哈维弧菌定点基因敲除的方法。它是将哈维弧菌作为受体菌，与供体菌进行接合转移，经同源重组实行哈维弧菌的基因敲除，所述的哈维弧菌是经过无水乙醇或十二烷基磺酸钠刺激处理的哈维弧菌。本发明基于有机物无水乙醇或十二烷基磺酸钠刺激的哈维弧菌定点基因敲除的方法，该方法在传统的接合转移法的技术基础上，通过对接合受体菌哈维弧菌进行有机物无水乙醇或者十二烷基磺酸钠的刺激处理，使得哈维弧菌的接合转化效率从无到有，成功对哈维弧菌进行基因敲除。

本发明公开了一株聚丙烯高效降解菌株LICME 200610 WZH‑4及其生产的菌剂和应用，该菌株经鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.)，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2020年8月13日，保藏编号为CGMCC No.20526。本发明经分离筛选获得聚丙烯降解菌株，可以有效用于生物降解聚丙烯，如聚丙烯塑料膜片、颗粒、粉末，采用本发明的菌株进行聚丙烯塑料降解，处理30天后聚丙烯膜片表面有明显的生物侵蚀凹坑，膜片亲水性显著提升，表面破损严重，该降解绿色环保，成本低，操作方便，适合治理自然环境中很难被降解的聚丙烯废弃物，对于保护生态环境、人体的身体健康具有重要意义。

本发明提供爪蛙嵌合体及其制备方法。该爪蛙嵌合体的制备方法包括以下步骤：将荧光蛋白编码序列导入热带爪蛙受精卵，构建荧光蛋白标记的转基因热带爪蛙；将转基因热带爪蛙传代，得到荧光蛋白标记的热带爪蛙胚胎；将热带爪蛙胚胎的细胞转入非洲爪蛙囊胚腔，形成嵌合胚胎。本发明实施例所提供的制备方法将转基因技术与异种移植技术相结合，将荧光蛋白的编码序列转入热带爪蛙受精卵，得到转基因热带爪蛙，传代后获得的荧光蛋白标记的转基因热带爪蛙胚胎的细胞移植进非洲爪蛙胚胎的囊胚腔中，可以借助荧光显微镜观察热带爪蛙细胞在非洲爪蛙胚胎里的发育情况。转基因方式得到的嵌合胚胎的单细胞内的荧光强度较为稳定，可以进行长期的追踪观察。

本发明涉及微生物发酵技术领域，具体涉及一种产唾液酸的重组微生物及其应用。本发明提供一种重组微生物，其与能够合成唾液酸的出发菌株相比，具有提高的6‑磷酸葡萄糖胺合成酶或其突变体的表达，以及提高的果糖‑1,6‑双磷酸酯酶和/或谷氨酰胺合成酶的表达。本发明通过对微生物进行改造获得了能够以葡萄糖、甘油等廉价碳源为原料发酵生产唾液酸的重组微生物，该重组微生物的唾液酸产量得到了显著提高，实现了从葡萄糖、甘油等廉价碳源到唾液酸的高效转化，显著降低了唾液酸的生产成本，具有重要的工业应用价值。

本发明属于蛋白质检测技术领域，具体涉及一种茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽及其抗体、检测试剂盒和应用。所述的茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽为茶树花青素还原酶1抗原多肽和花青素还原酶2蛋白抗原多肽中的至少一种，其中，茶树花青素还原酶1抗原多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，茶树花青素还原酶2抗原多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还提供了茶树花青素还原酶蛋白的免疫抗原和检测抗原以及抗茶树花青素还原酶蛋白抗原的抗体。该抗体不仅可以为该蛋白的功能研究奠定基础，同时对茶树体内后续开展类黄酮等物质代谢相关研究具有积极的参考意义。

本发明公开了一种多肽强化型豆豉的生产设备及技术，涉及豆豉加工技术领域。生产设备包括发酵罐和放置盘，发酵罐顶端一侧开设有抽气口，所述抽气口与外部抽气泵相连通，上端的多个放置盘中央设置有通孔，转动轴下端穿过多个通孔向最下端的放置盘延伸，转动轴上端与第一电机相连接，输出轴两侧设置连接杆，连接杆下端连接有刮板；所述豆豉的生产技术包括原料处理、大豆处理、大豆蒸煮、大豆初次发酵、二次发酵等步骤。本发明克服了现有技术的不足，设计合理，使用方便能够有效对豆豉进行均匀发酵，同时本发明制备方法能够有效提升豆豉的风味，并且增加豆豉中营养物质的含量。

本发明公开了一种特色纳豆的制备设备及方法，涉及纳豆加工技术领域。纳豆的制备设备包括装置箱、发酵罐和存液箱，发酵罐上下两端分别与装置箱顶部和底板上端转动连接，第二电机输出轴与发酵罐内部的搅拌轴相连接，搅拌轴下半部设置有螺旋搅拌叶，发酵罐上半部侧壁上开设有透气窗，装置箱一侧壁上端开设有蒸汽入口，蒸汽入口通过蒸汽管与存液箱相连通；纳豆的制备主要包括原料处理、煮制液制备、黄豆处理、黄豆初次发酵处理、黄豆二次发酵、特色纳豆制备等步骤，本发明克服了现有技术的不足，纳豆制备设备能够有效均匀的对黄豆进行搅拌，同时便于对黄豆进行蒸汽处理，提升所得纳豆的风味和口感。

本发明公开了一种共表达L‑苏氨酸醛缩酶与PLP合酶的工程菌及应用。一种共表达L‑苏氨酸醛缩酶与PLP合酶的工程菌，在表达菌株中转入L‑苏氨酸醛缩酶基因和PLP合酶基因而得。本发明工程菌中外源导入L‑苏氨酸醛缩酶基因与PLP合酶基因，两个酶共表达，PLP合酶过表达能够提高菌株内源性辅酶PLP的合成量，将共表达后的工程菌破碎制备粗酶液，然后将L‑苏氨酸醛缩酶和辅酶PLP共固定化制备的共固定化酶能够显著降低L‑syn‑对甲砜基苯丝氨酸生产过程中外源PLP的使用量，提高了L‑苏氨酸醛缩酶和PLP的使用效率，降低生产成本。本方法反应条件温和、绿色环保、生产工艺简单、重复利用效率高、成本低廉，在L‑syn‑对甲砜基苯丝氨酸生产中具有广阔的应用前景。

本发明提供一种稳定高表达蛋白的单拷贝细胞株的构建方法及其应用，所述方法基于293T细胞的可以快速精确插入且能稳定高水平表达目的基因。所述方法通过随机插入结合高通量筛选策略建立了一个稳定、高效表达且可替换目的基因的293T细胞株。基于此细胞株，我们成功表达了属于GPCR家族之一的腺苷A2A受体蛋白(ADORA2A)。利用这种方法可以进行反复的盒式重组替换，可将欲被表达或优化的抗体或别的蛋白质基因快速准确地插入到该细胞基因盒中，且不会破坏基因框的完整性。

本发明公开一种靶向抑制SOS1基因表达的siRNA及其应用。所述siRNA的序列为：正义链：5′‑GCAGAATCTTCACCATCTA‑3′；反义链：5′‑TAGATGGTGAAGATTCTGC‑3′。本发明通过检测SOS1的mRNA水平及蛋白水平的表达量变化，筛选出SOS1有效siRNA序列，SOS1‑siRNA#3，可以有效抑制CML细胞的增殖能力、克隆形成能力，并且在动物体内有效抑制移植瘤的生长，同时增加了CML细胞对imatinib的药物敏感性。因此，SOS1是慢性粒细胞白血病治疗的一个潜在的新靶点，而SOS1‑siRNA具有潜在的克服imatinib耐药性的价值。

本发明涉及一种用于从多能干细胞中生产生物工程化心肌(BHM)的方法，所述方法通常包括，通过定向组织形成，诱导中胚层分化、心肌分化和心肌成熟的步骤。该方法是一种稳健的、无血清的且可再生的生产用于多种应用的BHM的途径，并且可应用于多种多能干细胞系。本发明还涉及通过本文公开的方法生产的BHM，以及所述BHM在药物和毒性筛选中的用途，和其在医药中的用途。

本发明提供了一种快速鉴定二倍体T代基因编辑作物双等位基因纯合突变的方法，涉及基因型鉴定技术领域；通过T7E1内切酶处理待测T代基因编辑植株的PCR产物来去除嵌合体、杂合体和双等位基因杂合突变植株，得到双等位基因纯合突变或野生型植株，然后将待测的双等位基因纯合突变或野生型植株的PCR产物和已知野生植株的PCR产物进行等量混合后用T7E1内切酶处理，从而快速鉴定出双等位基因纯合突变植株。对得到的双等位基因纯合突变植株的PCR产物进行sanger测序，证实本发明所述方法可行。

本发明公开了一种基于炙甘草制备甘草次酸及其衍生物的方法和用途，涉及药物化学技术领域。基于灸甘草制备甘草酸的具体为：微波法提取甘草酸，接着酶法分解甘草酸制备甘草次酸，产物得率高。然后利用上述甘草次酸与芪苷化合物复合制得甘草次酸衍生物，两者协同作用，使其具有更高的生物利用度和细胞吸收效率，对癌细胞具有明显的抑制作用；且具有更低的甘草次酸衍生物的药物用量以及不良反应率。整个反应过程，反应条件温和，在室温下均可反应，产物收率较高。

一种用于生产倍半萜醇的方法和组合物，该方法包括使倍半萜与具有单加氧酶活性的P450多肽接触。

本发明提供一种微生物取样储存一体式容器，主要涉及微生物容器技术领域。微生物取样‑储存一体式容器，包括容器主体、活塞、顶盖、底盖，所述容器主体内设置隔板，所述隔板中部开设有螺纹孔，所述隔板上一侧开设有出液口、排液口，所述容器主体外壁上设置排出管，所述活塞中部开设有T形通孔，所述活塞底部开设有储液槽若干，所述活塞外壁上设置转柄，所述顶盖底部设置T形螺栓，所述活塞滑动连接在容器主体内，所述底盖通过螺纹连接在容器主体底部。本发明的有益效果在于：通过本发明的结构设计，不仅方便微生物的储存，还能够保证在密封的基础上精准控制样本取样量，同时将本装置拆解后非常便于清理容器。

本发明提供一种兼氧‑好氧微生物共存发酵罐，主要涉及微生物培养容器领域。兼氧‑好氧微生物共存发酵罐，包括罐体，所述罐体内中部设置隔板，所述隔板上部滑动设置密封板，所述密封板顶部中间固定连接丝杠，所述罐体一侧设置进气管，所述罐体内进气管底部固定连接鱼骨型出气装置，所述罐体底部设置排出管，所述罐体顶部设置罐盖，所述罐盖上设置进料斗，所述罐盖上安装贯通式直线电机，所述罐盖上设置压力表、泄压阀。本发明的有益效果在于：通过本发明的罐体结构实现了在保证好氧微生物侧腔体氧气供给充足的基础上大幅调节兼氧微生物腔体内的空气流量，以满足兼氧微生物发酵所需的不同氧气浓度，实现兼氧、好氧微生物的同时培养。

本发明公开了一种提高基于PNA的PCR抑制效率的方法，其特征在于：核酸扩增引物采用单碱基错配引物，错配位点位于PNA探针和扩增引物重叠序列的中间。本发明使用单碱基错配引物，可大大提高基于PNA的PCR抑制的效率。通过选择性扩增短DNA片段，结合采用单碱基错配引物抑制大背景DNA的PCR扩增，使得PNA可有效检测特异性DNA片段，比如可应用于监测循环肿瘤DNA和循环胎儿DNA。

提供了使用如纳米孔和酶等检测器来表征分析物的方法。一方面的特征在于使用检测器来表征双链多核苷酸的方法，例如，不使用连接所述双链多核苷酸的模板和补体的发夹。另一方面的特征在于使用标签修饰的纳米孔以增加的灵敏度和/或更高的通量表征分析物的方法。还提供了可以在所述方法中使用的组合物和系统，所述组合物和系统包含例如用于连接到双链多核苷酸和标签修饰的纳米孔的衔接子。

本发明提供了一种具有新型蛋白酶的自动盘碟洗涤清洁组合物。

本发明提供一种结膜上皮细胞、结膜杯状细胞以及结膜上皮干/祖细胞的诱导方法，其特征在于，使用含有EGF(表皮生长因子)信号转导活化因子的培养基培养多能干细胞的集落，并诱导分化。通过本发明，能够由包括iPS细胞的多能干细胞诱导为结膜上皮细胞、结膜杯状细胞、结膜上皮干/祖细胞，因此对结膜上皮细胞、结膜杯状细胞的基础研究、难治性眼表疾病的再生医疗或所述疾病相关的研究等方面极为有用。

本文描述了一种用于将一批植物材料分类为受污染或未受污染的方法，包括：(i)由所述一批植物材料提供多核苷酸样品；(ii)使所述多核苷酸样品与一种或多种扩增引物接触，以扩增与不育性相关联的靶多核苷酸序列；(iii)对所述样品执行体外多核苷酸扩增反应，以生成一种或多种扩增产物；(iv)确定所述一种或多种扩增产物的大小或序列；以及(v)基于在步骤(iv)中确定的所述一种或多种扩增产物的大小或序列，将所述一种或多种扩增产物的大小或序列与来自已知不育性遗传来源的已知的一种或多种扩增产物的大小或序列进行比较；其中如果步骤(v)中确定的所述不育性遗传来源与所述一批植物材料的预期的不育性遗传来源相对应，则认为所述一批植物材料是未受污染的；或者其中如果步骤(v)中确定的所述不育性遗传来源与所述一批植物材料的所述预期的不育性遗传来源不对应，则认为所述一批植物材料是受污染的。

本文在一些实施方案中提供了分子认证方法、系统和组合物。

本申请涉及一种分离的嵌合分子，其包含有包含E3泛素连接酶(E3)基序的降解结构域和能够特异性地将所述降解结构域引导至底物的靶向结构域，其中所述靶向结构域与所述降解结构域异源。接头将所述降解结构域与所述靶向结构域偶联。还公开了组合物，以及治疗疾病、沉默底物、筛选对疾病具有治疗功效的试剂的方法，和筛选疾病生物标志物的方法。

本申请公开了一种用于从细胞生产组织的装置。该装置包括细长体，该细长体具有至少一个周缘凹部并且可操作成通过紧密配合关系居中延伸穿过至少一个槽。该槽以闭合路径延伸，使得周缘凹部中的至少一个周缘凹部通向槽的内边缘。本申请还公开了一种经由过渡中间体从细胞生产组织的方法，该过渡中间体从细胞过渡为组织。

提供了用于减少细胞或动物中ATXN3 RNA的量或活性，并且在某些实施方案中减少细胞或动物中ATXN3蛋白的量的化合物、方法和药物组合物。此类化合物、方法和药物组合物可用于改善神经退行性疾病的至少一种症状或标志。此类症状和标志包括运动功能障碍、聚集形成和神经元死亡。此类神经退行性疾病包括脊髓小脑共济失调3型(SCA3)。

本发明公开了一种与猪肌内脂肪性状相关的UCP3基因、分子标记及其应用，该SNP分子标记为位于如SEQ ID NO：6所示序列的2159bp处的G/T突变，其基因组位置位于猪11.1版本第9号染色体从5’端起的8387309位点。本发明首先在279头试验猪群中利用FastTarget目标区域测序技术在该基因中鉴定了一个影响猪肌内脂肪含量的变异位点，并建立了针对该位点的PCR‑RsaI‑RFLP基因快速分型方法；在此基础上，本发明在500头试验猪群中对该位点提高肌内脂肪的应用效果进行了验证，结果表明通过该位点有利基因型的选择可显著提高猪群肌内脂肪含量，所鉴定的变异位点可用于种猪肌内脂肪的早期、活体、快速的标记辅助选育。

本发明公开了一种生物酶加工用粉碎筛选装置及其筛选方法，涉及生物酶加工装置结构技术领域，为解决现有的一种生物酶加工用粉碎筛选装置对生物酶的加工提取比较麻烦，不能快速的对生物酶进行提取的问题。所述提取装置的外壁四周设置有加热夹套，所述加热夹套的外壁一侧安装有安装架，所述提取装置的上方安装有搅拌电机，所述搅拌电机的前端设置有加液口，所述搅拌电机的一侧安装有提取口，所述搅拌电机的另一侧设置有进料口，所述安装架的上方安装有固定支撑架，所述固定支撑架的上方安装有粉碎装置，所述提取装置上端的一侧设置有抽真空口，所述固定支撑架的一侧安装有操控箱，所述操控箱的一端安装有电线，所述电线的一端安装有水加热装置。

本发明提供了一种单细胞计数检测抗生素对细菌抑制的方法，包括：在待检测的细菌中加入预定浓度的抗生素后设为细菌抗生素混合物，同时，不加入上述抗生素的待检测的细菌设为阳性对照；在与上述抗生素的加入时刻相隔到达第一预定时长时，获取上述细菌抗生素混合物的上述细菌的当前数量以及上述阳性对照的上述细菌的当前数量；确定上述抗生素对上述细菌的最小抑制浓度，确定上述抗生素针对上述细菌的抑制程度。通过单细胞计数进行药敏的实现的基础上解决了如何准确的确定单细胞计数值与药敏实验结果之间的联系的技术问题，结果可靠，转化为临床实用性强，成本低，易于自动化的有益效果。

本发明公开了一株贝莱斯芽孢杆菌，分类命名为贝莱斯芽孢杆菌LT‑2(Bacillus velezensis LT‑2)，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2019904，保藏日期为2019年11月7日。本发明还首次公开了贝莱斯芽孢杆菌在联产微生物多糖和γ‑聚谷氨酸中的应用。该菌株以菊芋粉和甘蔗汁中的一种或两种的混合物为碳源，胰蛋白胨为有机氮源，硫酸铵为无机氮源发酵合成微生物多糖和γ‑聚谷氨酸。在联产过程中培养基中积累的微生物多糖浓度最高可达29.16g/L，γ‑聚谷氨酸浓度最高可达6.96g/L。本发明所述操作方法简单，成本较低，极具工业化推广应用前景，同时为微生物多糖和γ‑聚谷氨酸的生物合成提供一种新工艺。

本发明公开了一株小菜蛾蒙氏肠球菌Enterococcus mundtii PxG1菌株及其应用，所述菌株于2020年06月29日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，菌种保藏号为GDMCC No：61067。本发明研究表明，饲喂Enterococcus mundtii PxG1菌株的小菜蛾，羽化率显著降低；同时表明Enterococcus mundtii PxG1菌株具有提高Bt毒素杀虫活性、增效Cry1Ac原毒素快速致死小菜蛾的作用，Enterococcus mundtii PxG1菌株可以作为新型生物防治的细菌，用于十字花科蔬菜害虫的防控，具有很好的生物防治潜力和应用前景。

本发明提供了一种蛋白水解靶向病毒，所述病毒在其一个或多个不同蛋白的位点包含一个或多个能被泛素‑蛋白酶体系统识别的蛋白水解靶向分子；并且所述病毒蛋白和蛋白水解靶向分子之间通过一个或多个连接链连接；其中，所述连接链能够被选择性切割。本发明还提供了所述蛋白水解靶向病毒的制备方法。具体地，本发明提供了一种蛋白水解靶向流感病毒及其制备方法。本发明提供的蛋白水解靶向病毒及其制备方法可以被广泛应用于活疫苗、减毒疫苗、灭活疫苗、强毒的安全模型等。与现有技术相比，本发明提供的蛋白水解靶向病毒及其制备方法用于设计成具有不同失活程度的疫苗，具有安全的可控性，并且这类疫苗具有很好的免疫原性。

本发明公开了一种靶向Trypsin‑9基因的miR‑283‑3p及其应用，所述miR‑283‑3p序列如SEQ ID NO:1所示，Trypsin‑9基因序列如SEQ ID NO:2所示。并验证了miR‑283‑3p负调控Trypsin‑9的表达，进一步利用SDS‑PAGE电泳检测了高表达和抑制miR‑283‑3p的表达后，中肠液对原毒素Cry1Ac的活化作用，明确了miR‑283‑3p靶向Trypsin‑9可介导原毒素Cry1Ac的活化作用，可应用miR‑283‑3p作为分子靶标来防控小菜蛾等十字花科蔬菜害虫。